PRACTICA N 11 DIFUSION-OSMOSIS Y PRINCIPIOS FISICO-QUIMICOS DE LAS MEMBRANAS BIOLOGICAS

INTRODUCCIN
Las membranas celulares son barreras selectivas que separan las clulas y forman

compartimientos intracelulares. Entre sus funciones estn: Regular el transporte de molculas que entran o salen de la clula o del orgnelo. Generar seales para modificar el metabolismo. Adherir clulas para formar tejidos. La membrana celular est formada por una capa doble de fosfolpidos, protenas y carbohidratos. (Fig; 1). Cada fosfolpido est compuesto por glicerol, cidos grasos y fosfato, que en conjunto crean una barrera hidrofbica entre los compartimientos acuosos de la clula. Las protenas

permiten el paso de molculas hidroflicas a travs de la membrana, determinan las funciones especficas de sta e incluyen bombas, canales, receptores, molculas de adhesin, transductores de energa y enzimas. Las protenas perifricas estn asociadas con las superficies, mientras que las integrales estn incrustadas en la membrana y pueden atravesar completamente la capa doble. La funcin de los carbohidratos adheridos a las protenas (glucoprotenas) o a los fosfolpidos (glucolpidos) es la de adhesin y comunicacin intercelular. El colesterol, que es un esteroide (lpido), determina la fluidez de la membrana. Protena perifrica Glicoprotena Canal de transporte

Figura 1. Estructura bsica de la membrana.

Protena integral

Fosfolpidos

Colesterol

OBJETIVOS
Reconocer algunos mecanismos de difusin y osmosis a travs de las membranas celulares. Diferenciar algunos factores indispensables en la seleccin de sustancias en las membranas celulares. Reconocer la importancia del movimiento Browniano en la difusin celular

MATERIALES
MATERIAL PROPORCIONADO POR EL LABORATORIO DE LA UFPS Tinta china Cajas de petri Estuches de diseccin (aguja recta) NaCl 20% y 60% Agua caliente fra y del grifo Sacabocados Gradilla Azul de metileno Rejilla para mediciones Tubos de ensayo Microscopio MATERIAL QUE DEBE TRAER EL ESTUDIANTE Papa de tamao grande Palillos Cronometro Pedacito de cartn grueso 30cm x 30cm MATERIALES BSICOS

Bata Portaobjetos y cubreobjetos Guantes Tapabocas Gorro Goteros Toalla para limpiar Papel para lentes Papel absorbente, servilletas Zapatos cerrados Ropa adecuada Lupa Juego de agujas de diferentes tamaos Bistur Block blanco de tamao carta Lpiz o portaminas Gua de la practica Material bibliogrfico o de consulta.

PROCEDIMIENTO

EXPERIMENTO N 1: Movimiento Browniano movimiento molecular como mecanismo de difusin.

Coloque una gota de agua sobre un portaobjeto, con un palillo agregue una pequea gota de tinta china, coloque el cubreobjeto y observe al microscopio. Grafique lo observado. Responda las siguientes preguntas: Cmo se denominan las fuerzas que causan dicha vibracin molecular? Reporte y grafique lo observado

EXPERIMENTO N 2. EI efecto de la temperatura en el proceso de la difusin"

En tres tubos de ensayo de igual tamao, adicione agua del grifo; en el segundo tubo de ensayo adicione agua caliente y en el tercer tubo de ensayo agregue agua fra. Agregue una gota de azul de metileno y registre el tiempo que se demora para homogenizar las sustancias. En cul de los tubos de ensayo la difusin es ms rpida? Explicar. Reporte y grafique lo observado

EXPERIMENTO N 3: "OSMOSIS" Definida como la difusin del agua a travs de una membrana selectiva- permeable.
Con el sacabocados obtenga 3 cilindros de papa de cinco centmetros de longitud cada uno. Coloque cada cilindro de papa en una caja de petri por 30 min. Luego squelos y colquelos en papel secante o servilletas; una vez secos mida la longitud de cada uno y registre los resultados en una tabla y compare. La longitud inicial y la longitud final. Anexe las conclusiones de la prctica desarrollada La tinta china es un colorante que contiene varios pigmentos y es de secado rpido este se utiliza en el laboratorio de biologa para las tinciones de las imgenes y as se observa mejor la muestra. La difusin en las clulas vegetales es un proceso que se produce a nivel celular. Es un mtodo de transferencia de molculas vitales para el medio ambiente y de una planta, el mantenimiento de la salud de ambos. Reporte y grafique lo observado

RESULTADOS EXPERIMENTO N 2. EI efecto de la temperatura en el proceso de la difusin"

Los cuatro tubos de ensayo con su respectiva agua

Agua del grifo

Agua caliente

Agua fra

Homogenizacin de las sustancias

EXPERIMENTO N 3: "OSMOSIS" Definida como la difusin del agua a travs de una membrana selectiva- permeable.

Fotografa tomada con cmara canon 12,1 Mpx por 4 Marly Paola y Aida luz.

DISCUSION
1. Cules son los factores que afectan la velocidad de difusin?

2. Explique brevemente la importancia de la difusin y la osmosis en el funcionamiento

celular? 3. Explique cundo se deja de percibir el movimiento molecular Browniano? 4. Explique brevemente el concepto de medio hipotnico y medio hipertnico?

CONCLUSIONES
Registre sus propias conclusiones del trabajo desarrollado en su informe.

BIBLIOGRAFIA
Consulte la propuesta del programa en las bases tericas y en pginas Web

TRANSPORTE CELULAR: DIFUSION Y OSMOSIS

Para que la clula funcione eficientemente, debe mantenerse en la misma un ambiente estable conocido como homeostasis. Para mantener este equilibrio existen mecanismos para el transporte selectivo de materiales hacia el interior o exterior de la clula. Las membranas de la clula son selectivamente permeables, permitiendo el paso de algunas sustancias o partculas (molculas, tomos, o iones), e impidiendo el paso de otras. Esta selectividad se debe a la capa doble de fosfolpidos de la membrana. La manera en que las molculas pasan por la membrana depende en parte de la polaridad de las mismas. Las molculas hidrofbicas, o no polares, pasan con relativa libertad a travs de la capa de lpidos, mientras que molculas hidroflicas, o polares, incluyendo el agua, y las molculas de mayor tamao, pasan a travs de canales formados por protenas transportadoras. La regulacin del transporte de las molculas, o la direccin en que se mueven depende de su gradiente de concentracin (diferencia en concentracin entre dos lugares). Las molculas se mueven constantemente debido a su energa cintica y se esparcen uniformemente en el espacio disponible. Este movimiento, llamado movimiento browniano, es la fuerza motriz de la difusin. Esta se define como el movimiento natural de las partculas de un rea de mayor concentracin a un rea de menor concentracin hasta alcanzar un equilibrio dinmico, en el cual el movimiento neto de partculas es cero. El componente principal de la clula es el agua, que acta como solvente (el agente que disuelve) de solutos orgnicos e inorgnicos. El movimiento de agua a travs de una membrana selectivamente permeable se llama osmosis (difusin de agua) y sucede siempre del rea de mayor concentracin de agua (con menor concentracin de soluto) al rea de menor concentracin de agua (con mayor concentracin de soluto) (Fig; 1.2). El agua se mover entonces, a favor de un gradiente de concentracin hacia el rea de mayor concentracin de soluto (donde hay una menor concentracin de molculas de agua libres).

Membrana selectivamente permeable

Figura 11.2. Osmosis: difusin de molculas de agua. Las molculas de agua pasan de un lugar de mayor concentracin a un lugar con menos concentracin de molculas hasta llegar a un equilibrio.

Cuando la clula contiene una concentracin de solutos mayor que su ambiente externo, se dice que la clula est en una solucin hipotnica, y como consecuencia, el agua entra a la clula causando que se expanda (Fig; 1.3a). Si la concentracin de solutos es mayor fuera de la clula, se dice que la clula est en una solucin hipertnica; la clula pierde agua y se encoge (Fig; 1.3c). Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la clula est en una solucin isotnica, donde el movimiento neto es cero (Fig; 1.3b). Las clulas animales funcionan ptimamente en ambientes isotnicos. En las clulas vegetales, sin embargo, cuando la vacuola se llena de agua, sta ejerce presin contra la pared celular hasta llegar a un punto donde se impida que entre ms agua (presin de turgencia) y la clula se encuentra trgida (firme), lo cual es el estado ideal de estas clulas. Por otra parte, si la clula vegetal pierde agua, la clula sufre plasmlisis al separarse la membrana celular de la pared celular, lo cual suele ser letal para la clula (Fig; 1.3c).

(a)

H2O Solucin hipotnica

(b)

H2O

(c)

H2O

Solucin isotnica

Solucin hipertnica

Figura 11.3Osmosis: transporte de agua a travs de una membrana permeable. La bolsa representa una clula y el agua en el envase representa su medio ambiente. El soluto es sal (NaCl: cloruro de sodio). (a) la concentracin de sal en el medio ambiente es ms baja que la concentracin de sal en la clula. (b) la concentracin de sal es igual en la clula y en el medio ambiente. (c) la concentracin de sal en el medio ambiente es ms alta que la concentracin de sal en la clula.

PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA
La permeabilidad selectiva de las membranas determina qu tipo de sustancias pueden entrar y salir de la clula. El ingreso de sustancias necesarias, el pasaje de agua y la salida de los productos de desecho, se vern posibilitados y regulados por medio de la membrana plasmtica.

PERMEABILIDAD DE MOLCULAS PEQUEAS

El pasaje de estas molculas va a depender de si las mismas se movilizan a favor o en contra de su gradiente de concentracin. Cuando lo hagan a favor del gradiente, pasarn en forma pasiva, es decir que no habr gasto de energa. Si, por el contrario, las molculas se movilizan en contra del gradiente de concentracin ser necesario el aporte de energa y el pasaje ser activo.

PASAJES PASIVO
Difusin simple Las pequeas molculas no polares tienen la capacidad de difundir fcilmente a travs de las membranas. En general, su pasaje se ve favorecido cuanto menor sea la molcula y mayor su liposolubilidad. Pasan por difusin simple a travs de la membrana los gases como el O2, el CO2, CO y otras molculas liposolubles y pequeas como el benceno. Difusin Facilitada Este tipo de pasaje, como sealramos en un principio, se realiza siempre a favor del gradiente electroqumico. A diferencia de la difusin simple, en la difusin facilitada intervendrn protenas de membrana que mediatizarn el pasaje. Estas protenas transportadoras pueden clasificarse en dos: los canales inicos y las permeasas. Difusin Facilitada a por medio de canales inicos Las protenas que se encuentran en este grupo recorren todo el espesor de la membrana plasmtica y en su interior poseen un canal o poro de caractersticas hidroflicas. Este poro permite, de manera selectiva, el pasaje de iones a travs de la membrana. La importancia de estos canales se ve aumentada mediante la capacidad de regulacin en los procesos de apertura y cierre de los mismos, existiendo canales que permanecen siempre abiertos, mientras que otros se abren y cierran dependiendo de seales qumicas, mecnicas o elctricas. Para brindar un ejemplo, el mecanismo de excitacin neuronal y la interconexin entre las distintas neuronas, se vera imposibilitada sin la capacidad de regular el accionar de ciertos canales inicos como el del Sodio o el del Potasio.

Difusin Facilitada por medio de Permeasas

Figura 1.4Representacin esquemtica del mecanismo de apertura y

cierre de los canales inicos regulados.

Lo constituyen las protenas denominadas permeasas o carriers. Son, al igual que los canales inicos, sumamente especficas. La molcula transportada debe de unirse a un sitio especfico de la permeasa, lo que provoca un cambio de conformacin en la misma que facilita el pasaje del soluto de un lado al otro de la membrana sin generar gasto energtico alguno.

Figura 1.5Esquema hipottico del cambio de conformacin del carriel que permite la translocacin de una molcula a favor de su gradiente de concentracin.

ACTIVIDAD PEDGOGICA
Estas actividades son propuestas para mejorar el aprendizaje de cada educando, en donde cada actividad pretende reforzar las prcticas de cada laboratorio visto. Estas actividades contienen la pedagoga dialogico.critica, constructivista y conductual ya que cada estudiante es autnomo de realizar las actividades individualmente o en grupo para optimizar sus conocimientos y estos sean aplicables a solucionar problemas mediante el criterio cientfico.

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1. Por qu es importante el proceso de difusin osmtica en el laboratorio de Biologa? _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________

2. Varan los resultados por el cambio de temperatura en el proceso de difusin? ______________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________

3.

Con sus propias palabras diga la diferencia entre difusin y osmosis.

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4. Explique por qu es importante el proceso Browniano? _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________

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5. Realizar el apareamiento de la columna (A) con la columna (B),segn corresponda. . COLUMNA A

Determinan qu tipo de sustancias pueden entrar y salir de la clula.

COLUMNA B DIFUSION FACILITADA

Las molculas de agua pasan de un lugar de mayor concentracin a un lugar con menos concentracin de molculas hasta llegar a un equilibrio.

PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA.

Las molculas hidroflicas pequeas pueden difundir de esta manera siempre y cuando no presenten carga. De esta manera pasan el metanol, el etanol y el glicerol.

OSMOSIS

Se realiza siempre a favor del gradiente electroqumico y se clasifica en canales inicos y las permeasas.

DIFUSION SIMPLE

Las molculas se mueven constantemente debido a su energa cintica y se esparcen uniformemente en el espacio disponible.

SOLUCION HIPOTONICA

La concentracin de sal es igual en la clula y en el medio ambiente. La concentracin de sal en el medio ambiente es ms baja que la concentracin de sal en la clula.

MOVIMIENTO BROWNIANO

SOLUCION ISOTNICA

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PAGINAS WEB
GOYANES, Marcelo. Membrana celular. (en lnea). http://www.korion.com.ar/archivos/membranacelular.pdf Disponible en internet en:

LAVENDA, Bernard. El movimiento browniano. (en lnea). Disponible en internet en: http://www.lanais.famaf.unc.edu.ar/QuantumSimposium2005/MB.pdf GARCA VILLALN, ngel Luis. Transporte de membrana. (en lnea). Disponible en internet en: http://www.uam.es/personal_pdi/medicina/algvilla/cyta/fisiologiacyta3.pdf ACADEMICA. La membrana y el transporte celular. (en lnea). Disponible en internet en: http://academic.uprm.edu/~jvelezg/lab7.pdf ZAMORA, Roberto. La membrana y el transporte celular. (en lnea). Disponible en internet en: http://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r28327.PDF TORRES, Carola; GONZALEZ, Ana. Mecanismos de transporte a travs de la membrana explicados por medio de animaciones. (en lnea). Disponible en internet en: http://www.unne.edu.ar/Web/cyt/com2004/6-Biologia/B-055.pdf

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