DETERMINACIN DE GRUPO SANGUNEO Objetivo Analizar la importancia que tienen los grupos sanguneos del sistema ABO y del

factor Rh en las transfusiones sanguneas de persona a persona. Utilizar correctamente los diferentes sueros para identificar en el laboratorio los grupos de sangre y el factor Rh. Identificar los mecanismos genticos que regulan la herencia de grupos de sangre y del Rh. Fundamento Este examen se hace para determinar el tipo de sangre de una persona. Los mdicos necesitarn conocer el tipo de sangre cuando vayan a hacer una transfusin de sangre o un trasplante, debido a que no todos los tipos de sangre son compatibles entre s. Por ejemplo:

Tipo A, nicamente puede recibir sangre tipo A y tipo O. Tipo B, nicamente puede recibir sangre tipo B y tipo O. Tipo AB, puede recibir sangre tipo A, B, AB y O. Tipo O, nicamente puede recibir sangre tipo O.

La sangre tipo O se le puede dar a alguien con cualquier tipo de sangre, razn por la cual las personas con este tipo de personas son llamadas donantes de sangre universales. La determinacin del grupo sanguneo es especialmente importante durante el embarazo. Si se detecta que la madre tiene sangre Rh negativa, entonces el padre tambin debe ser evaluado. Si el padre tiene sangre Rh positiva, entonces la madre necesita recibir un tratamiento para ayudar a prevenir el desarrollo de sustancias que le pueden hacer dao al feto. Si usted es Rh+, puede recibir sangre Rh+ o Rh-, pero si es Rh-, nicamente puede recibir sangre Rh-. Generalidades Un grupo sanguneo es una clasificacin de la sangre de acuerdo con las caractersticas presentes o no en la superficie de los glbulos rojos y en el suero de la sangre. Las dos clasificaciones ms importantes para describir grupos sanguneos en humanos son los antgenos (el sistema ABO) y el factor RH. El sistema ABO fue descubierto por Karl Landsteiner en 1901, convirtindolo en el primer grupo sanguneo conocido; su nombre proviene de los tres tipos de grupos que se identifican: los de antgeno A, de antgeno B, y "O". Las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden provocar una reaccin inmunolgica que puede desembocar en hemlisis, anemia, fallo renal, shock, o muerte.

El motivo exacto por el que las personas nacen con anticuerpos contra un antgeno al que nunca han sido expuestas es desconocido. Se piensa que algunos antgenos bacterianos son lo bastante similares a estos antgenos A y B que los anticuerpos creados contra la bacteria reaccionan con los glbulos rojos AB0incompatibles. La determinacin del grupo sanguneo es una prctica habitual e imprescindible para la transfusin de componente hemticos. La razn est en que el sistema inmune de algunos individuos rechaza los hemates de otros. Esta reaccin inmunolgica est mediada por anticuerpos y es fcilmente visualizable in vitro mediante reacciones de aglutinacin. Se conocen ms de 20 grupos de antgenos eritrocitarios codificados en otros tantos loci gnicos, para los cuales existen mltiples variantes allicas. El resultado son ms de 200 antgenos eritrocitarios identificables. Estos antgenos varan en su inmunogenicidad. Los ms importantes a efectos transfusionales son los antgenos del sistema H / ABO y los del sistema Rhesus (Rh).

Material Jeringa de 5 ml Torundas de alcohol Tubos de ensaye de 13 x 75 Tubos de ensaye de 13 x 100 Ligadura Centrifuga

Tcnica 1. Realizar una flebotoma a pacientes de los grupos sanguneos A,B y O, y obtener de 2 a 3 ml de sangre. 2. Se deposita la sangre en tubos con anticoagulante EDTA. 3. Se centrifugan los tres tubos para separar el suero sanguneo y el paquete globular. 4. Se realizan 3 lavados con solucin salina a los paquetes globulares, en el ultimo solo se utilizara 0.1 ml de glbulos rojos y 4.9 ml de solucin salina. 5. Una vez obtenida la suspensin eritrocitaria de los tres grupos sanguneos se toman 2 gotas y se les aade 1 del suero problema y se centrifugan. 6. Si no se presenta aglutinacin o hemolisis la prueba es negativa, por lo cual se puede realizar una transfusin dado que son compatibles los grupos sanguneos.

Resultados: Grupo O Nombre: Luis Omar Gudio Cobos Edad: 18 aos Sexo: Masculino Grupo B Nombre: Cristhian Mario Landa Rivera Edad:17 aos Sexo: Masculino

Grupo A Nombre: Araceli Hernndez Hernndez Edad:17 aos Sexo: Femenino Conclusin: Se determina que el grupo sanguneo del donante es A, puesto que la nica suspensin eritrocitaria compatible fue la aportada por la paciente Araceli Hernndez, cuyo grupo sanguneo tambin es A. Bibliografa: http://www.scribd.com/doc/16189622/Pruebas-Cruzadas-pruebas-decompatibilidad-sanguinea-sistema-ABO-banco-de-sangre http://www.unicartagena.edu.co/librose/LABORATORIO%20No%2012%20Grupos %20Sanguineos.pdf http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003345.htm http://es.wikipedia.org/wiki/Grupo_sangu%C3%ADneo http://html.rincondelvago.com/analisis-sanguineo.html

PRUEBA DE EMBARAZO Objetivo El alumno aprender la tcnica de PRUEBA INMUNOLOGICA DE EMBARAZO as como a tener conocimiento de su aplicacin, asi como obtener criterios en falsos positivos. Fundamento Las pruebas de embarazo que usan reacciones inmunolgicas se basan en la inhibicin de la coagulacin de glbulos rojos o hemaglutinacin. Para esta prueba se utiliza suero de sangre de conejo que contiene anticuerpos contra la gonadotropina corinica (HCG) y eritrocitos recubiertos con HCG, a los que se agrega la sangre o la orina de la mujer a la que hay que diagnosticar. Si est embarazada, la HCG en su sangre o su orina, reaccionar con los anticuerpos de conejo y evitar que se aglutinen los eritrocitos recubiertos. La prueba resultar entonces positiva. Generalidades Una prueba de embarazo, sea por la presencia de la hormona gonadotropina corinica humana (hCG) en el plasma materno o por su excrecin en la orina, es uno de los signos presumptivos para comprobar la existencia de un embarazo porque aporta un alto nivel de probabilidad al diagnstico. La primera prueba "moderna" para el embarazo detecta la inhibicin del factor de preez temprana (EPF, por sus siglas en ingls). El EPF se puede detectar en la sangre en las 48 horas siguientes a la fertilizacin. Sin embargo, las pruebas del EPF son caras y toman mucho tiempo. La mayor parte de las pruebas qumicas buscan la presencia de la subunidad beta de la gonadotropina corinica humana (hCG) en la sangre o en la orina. El hCG se puede detectar en la orina o la sangre despus de la implantacin del producto en la matriz, que ocurre de seis a doce das despus de la fertilizacin Los mtodos cuantitativos (suero beta) pueden detectar niveles de hCG tan pequeos como 1 mIU/mL, mientras que las puebas de orina requieren de 20 a 100 mIU/mL, dependiendo de la marca. Las pruebas cualitativas de sangre generalmente tienen un umbral de 25 mIU/mL, as que tienen menor sensibilidad que algunas pruebas de orina caseras.

Con ultrasonido obsttrico, el saco gestacional puede algunas veces visualizarse tan temprano como a las cuatro y media semanas de gestacin (aproximadamente dos semanas y media despus de la ovulacin) y el "saco de yema" (en ingls, yolk sac) unas cinco semanas despus de la gestacin. El embrin puede ser observado y medido a las 5 semanas y media. El latido del corazn puede ser detectado a las 7 semanas de gestacin, y en ocasiones se ha observado desde las 6 semanas.

Material Jeringa de 5 ml Torundas de alcohol Tubos de ensaye de 13x75 y 13x 100 Centrifuga Prueba de embarazo

Tcnica

1. Realizar una flebotoma y obtener de 3 a 5 ml 2. Depositar en un tubo de 13x100 con anticoagulante 3. Centrifugar 4. Separar el suero de la sangre y depositarlo en un tubo de 13x75 5. Hundir hasta la marca la prueba de embarazo en el tubo con suero 6. Esperar de 2 a 3 minutos para saber el resultado

Resultados

Paciente: Jared de Jesus Morales Landa Edad: 17 aos

Sexo: masculino

El resultado es negativo dado que solo se presento una lnea en la prueba, para haber sido positiva se tendran que haber presentado dos lneas bien definidas.

Bibliografa http://www.saludymedicinas.com.mx/articulos/1261/prueba-de-embarazoresultado-inmediato/4 http://es.wikipedia.org/wiki/Pruebas_de_embarazo http://www.embarazo/pruebasdeembarazo.php

DETERMINACION DE HEMOGLOBINA Objetivo: Que el alumno aprenda el mtodo colorimtrico de la cinometahemoglobina para la determinacin de hemoglobina ya que dicho mtodo es el ms empleado por presentar las siguientes ventajas: 1. 2. 3. 4. La cinometahemoglobina es estable en soluciones diluidas. El mtodo mide Hb, Metahb y COHb. No mide SHb. Existen en el mercado estndares certificados de cinometahemoglobina. Las lecturas se pueden hacer en espectrofotmetros de uso comn como son el Coleman y el Leitz.

Fundamento: Es una protena conjugada de color rojo integrantes de los eritrocitos entre un 3134%.

Existen varios mtodos para determinacin como hematina cida, hematina alcalina, oxihemoglobina, carboxihemoglobina y cianometahemoglobina; ste ltimo es el de eleccin por que es estable en soluciones diluidas, porque existen en el mercado estndares de cianometahemoglobina y porque las lecturas se pueden hacer en espectrofotmetro de uso comn y corriente. La sangre se hemoliza por agregado de un agente densoactivo, con el ferrocianuro de potasio se oxidan el tomo de fierro de ferroso a frrico para producir metahemoglobina. El cianuro de potasio estabiliza la metahemoglobina pasando de cianometahemoglobina. La cloracin producida es directamente proporcional a la concentracin de hemoglobina presente. Generalidades: La Hemoglobina (Hb) es una molcula de peso molecular 68000. Se halla formada por cuatro cadenas polipeptdicas (globina), a cada una de las cuales se une un grupo hemo. Las diferentes cadenas globinicas de las Hb se denominan segn el alfabeto griego: alfa y beta. En el hombre las hemoglobinas que se encuentran normalmente son: la HbA que comprende el 95-97% del total, la Hba2 que normalmente es inferior al 3% y una mnima fraccin de HbF, que si bien es muy abundante durante la vida fetal desaparece casi por completo en el transcurso de los primeros seis meses de vida. El grupo hemo es sintetizado en las mitocondrias de los eritroblastos a partir de la glicina y acido succinico.Es una porfirina con un tomo de hierro, estando formada por cuatro anillos pirrlicos unidos por puentes de metano y ocho cadenas laterales (metilo, venilo o acido 9ropinico). La hemoglobina adopta una configuracin helicoidal. Se distingue la estructura primaria o secuencia con que se halla los aminocidos en las cadenas polipeptdicas. Las cadenas alfa estn formadas por 141 aminocidos y las betas por 146. La estructura secundaria es la disposicin helicoidal de las cadenas. La estructura terciaria se refiere al especto tridimensional de las cadenas polipeptdicas junto con el repliegue, o bolsa donde se dispone el grupo hemo. El grupo hemo se halla unido a las cadenas polipeptdicas por dos cadenas compartidas de acido 9ropinico y por las dos valencias libres del hierro que se unen a molculas de histidina, ya sea directamente o a travs de una molcula de oxigeno (histidina distal) La funcin primordial de la Hb es la de servir de transporte del oxigeno desde los pulmones a los tejidos. La particular forma de la curva de disociacin de la Hb asegura la mxima capacidad de transporte y de liberacin tisular de oxigeno, aun en presencia depresiones de oxigeno bajas. Cuanto mayor es la hipoxia en los tejidos, tanto mayor es la capacidad de liberar oxigeno a partir de la hemoglobina. Cuando los glbulos rojos son destruidos debido a que son viejos, dentro de estas clulas el anillo del heme se abre, el hierro se separa y la globina es

liberada. El residuo que ya no contiene hierro ni protena, es la biliverdina, que luego se reduce a la bilirrubina. Los valores normales de la hemoglobina son: Recin nacidos alrededor de 17 gr/dl, Nios alrededor de 13 gr/dl Adultos: hombres: 14.5 a 18 gr/dl y mujeres de 13.5 a 16 gr/dl. Si estos valores estn por debajo de lo normal estaremos hablando de una anemia, que se refiere a cundo los valores de recuento de glbulos rojos, la hemoglobina y el hematocrito resultan inferiores. Los valores elevados de hemoglobina se debe a una hemoconcetracion o policitemia que puede ser como resultado de una fiebre alta.

Material: MATERIAL NECESARIO PARA LA EXTRACCION DE SANGRE 2 TUBOS DE ENSAYE DE 13 X 100 CON TAPON DE HULE 1 PIPETA GRADUADA DE 5 ML 1 PIPETA DE SAHLI CON BOQUILLA

Equipo: ESPECTROFOTOMETRO CON ADAPTADOR Y 4 CELDAS

REACTIVOS: E.D.T.A AL 10 % SOLUCION DE DRABKIN 1 AMPOLLETA DE SOLUCION ESTANDAR (ACUGLOBIN)

TECNICA PARA HEMOGLOBINA:

Solucin diluyente de Drabkin (Cianometa)

Bicarbonato sdico.1g Cianuro potsico..0.05g Ferricianuro potsico.0.2g Agua destilada c.b.p.1.000ml

1.- Colocar en un tubo de ensayo exactamente 5 ml de solucin diluyente de Drabkin. 2.- la muestra de sangre puede tomarse de una puncin capilar que fluya libremente o de una vena. En el ltimo caso hay que mezclarla bien. Se trasladan exactamente 0.02ml (20 microlitros) de sangre entera de la pipeta de Shali al tubo de ensayo que contiene el diluyente, enjuagando la pipeta varias veces con el mismo. 3.- Se mezcla la sangre y el diluyente invirtiendo varias veces el tubo. Se deja en reposos durante 10 minutos para permitir la formacin de la cianometahemoglobina, la cual es estable por varias horas. 4.- Se ajusta la escala de longitud de onda del espectrofotmetro a 540nm. 5.- Se emplea como blanco agua destilada o la solucin diluyente. La luz que absorbe el diluyente a 540nm es insignificante. 6.- El blanco se ajusta a 100 en la escala de transmitancia. (T) o a 0 en la escala de densidad ptica o de absorbancia (D.O. o A). 7.- Leer la densidad ptica del problema y calcular la concentracin de hemoglobina en la curva de calibracin o mediante el factor correspondiente.

Concentracin de hemoglobina (gr. /dl.)= Concentracin del estndar X Lectura Lectura del estndar del problema

VALORES DE REFERENCIA: Recin nacidos..Alrededor de 17 gr/dl Nios..Alrededor de 13 gr/dl

Adultos: Hombres14.5 a 18 gr/dl Mujeres..13.5 a 16 gr/dl

HEMATOCRITO

Objetivo Que el alumno aprenda y practique las tcnicas para la determinacin de la eritrosedimentacin o velocidad de sedimentacin globular (VSG) y el hematocrito ya que ambas pruebas son esenciales en el laboratorio de hematologa. La VSG es una prueba sencilla empleada universalmente como ndice de la presencia de enfermedades activas de muchas clases y el hematocrito es uno de los mtodos ms sencillos, exactos y valiosos en la deteccin de la anemia.

Fundamento El hematocrito mide el porcentaje del volumen de sangre total pero ocupado solamente por los eritrocitos

Mtodo de Wintrobe: La prueba consiste en someter a una fuerza centrfuga determinada a una muestra de sangre colocada en un tubo especial graduado en 100 partes iguales; de esta manera quedaran separadas las clulas sanguneas de la parte lquida que es el plasma y podra leerse directamente el porcentaje que ocupan dichas clulas (especialmente los eritrocitos). Mtodo del Microhematocrito: La prueba se basa en el uso de una microcentrfuga, en la cual proporciona una velocidad de centrifugacin cercana a 10,000 r.p.m y por lo tanto se obtiene un volumen constante de paquete globular en un tiempo corto (aproximadamente 5 minutos), utilizando un pequeo volumen de sangre.

Generalidades Hematocrito (Volumen de glbulos centrifugados) Es uno de los mtodos ms sencillos, ms exactos y valiosos en la hematologia. Por medio de el, as como por una medicin de hemoglobina y recuento eritrocitico, adecuados, pueden ser calculados los ndices absolutos. La columna de clulas blancas resultante, proporciona una idea aproximada del recuento de leucocitos; es decir, una columna de clulas blancas, de 1mm de altura, corresponde aproximadamente a 10000 leucocitos por mm3. La columna de clulas blancas puede dividirse en una capa superior muy delgada de color blanco amarillento formado por plaquetas, y una capa inferior ms gruesa de color gris rojizo, que consiste de leucocitos. En casos de leucopenia marcada, la columna de clulas blancas es muy delgada. En casos de leucemias, la capa de clulas blancas puede ser muy gruesa. No es raro, que el primer indicio de leucopenia y leucemia sea el hematocrito, y todo tcnico debe cultivar el habito de inspeccionar tanto la capa de clulas blancas como el plasma sobrenadante al leer el valor del hematocrito.

Las grandes ventajas de las muestras de la capa de clulas blancas han sido relatadas ya, sobre todo en los casos de leucopenia, donde las clulas leucmicas u otras clulas malignas son escasas en la sangre perifrica; tambin en la bsqueda de clulas L.E y de megaloblastos. La icticeria temprana puede ser denotada por la inspeccin de la columna del plasma.

Los valores normales de hematocrito son: Hombres 44 a 54% Mujeres 41 a 49% Recin nacidos 50 a 60% Nios de 1 ao 45% Nios de 10 aos 37.5 5

Material material necesario para la extraccion de sangre 1 tubo de ensaye de 13 x 100 con tapon de hule 1 pipeta pasteur con bulbo de hule (talle largo) 1 tubo de wintrobe 1 tubo capilar para microhematocrito 1 quemador bunsen o plastilina

Equipo centrifuga gradilla especial para tubos de wintrobe microcentrifuga lector para microhematocrito

Reactivos

E.D.T.A. al 10%

Tcnica para Hematocrito (mtodo de wintrobe):

1.-Llenar el tubo de Wintrobe con sangre mediante la pipeta Pasteur evitando la formacin de burbujas.

2.-Dejar sedimentar la sangre normalmente durante 1 hora.

3.-Centrifugar el tubo durante 30 minutos a 3,000 r.p.m.

4.-Leer el hematocrito en la escala derecha de el tubo. Cuyo borde superior est marcado con 10, considerando el extremo superior la banda obscura de eritrocitos reducidos, inmediatamente debajo de la capa gris-rojiza de leucocitos. El resultado se expresa en %.

PRUEBA DE VIH Objetivo: El objetivo de esta prctica es detectar la presencia del virus de sida mejor conocido como VIH dentro del sistema de algn paciente.

Fundamento: Las pruebas estn basadas en distintos principios tcnicos que han ido evolucionando con el tiempo, la experiencia adquirida y las recomendaciones nacionales e internacionales. slo hay que lavarse las manos antes de pincharse el dedo con el punzn esterilizado que proporciona el Kit, el cual incluye tambin varias pipetas para recolectar la sangre para posteriormente aplicar un par de gotas en el cassette.

Identificar por mtodos inmunocromatograficos para presencia de anticuerpos contra el VIH 1 y 2. Los reactivos poseen una especificad del 99.5 % no son pruebas confirmatorias, solo de escrutinio.

Generalidades: El Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH) fue descubierto y se consider como el agente de la naciente epidemia de SIDA por el equipo de Luc Montagnier en Francia en 1983. El virin es esfrico, dotado de una envoltura y con una cpside proteica. Su genoma en una cadena de ARN monocatenario que debe copiarse provisionalmente a ADN para poder multiplicarse e integrarse en el genoma de la clula que infecta. Los antgenos proteicos de la envoltura exterior se acoplan de forma especfica con protenas de la membrana de las clulas infectables, especialmente de los linfocitos T4. El proceso de conversin de ARN en ADN es una caracterstica principal de los retrovirus y se lleva a cabo mediante acciones enzimticas de transcriptasa inversa. Con la demostracin de la existencia de la transcriptasa inversa, se inici en la dcada de 1970 la bsqueda de los retrovirus humanos, que permiti el aislamiento en 1980 del virus de la leucemia de clulas T del adulto, HTLV-I (R. Gallo y cols.) El VIH tiene un dimetro de aproximadamente 100 nanmetros. Su parte exterior es la "cubierta", una membrana que originalmente perteneca a la clula de donde el virus emergi. En la cubierta se encuentra una protena del virus, la gp41, o "glicoprotena transmembrana". Conectada a la gp41 est la gp120, la cual puede unirse al receptor CD4 localizado en la superficie de los linfocitos T para penetrar en ellos. El ncleo tiene la "cpside", compuesta por la protena p24. En su interior est el ARN, la forma de informacin gentica del VIH. En diciembre de 2006, de acuerdo con la Organizacin Mundial de la Salud, haba 39,5 millones de personas con VIH en el mundo, de las cuales 24,7 millones vivan en frica Subsahariana. No es posible establecer un diagnostico clnico de la enfermedad por lo que este solo puede establecer de un modo definitivo por tcnicas de laboratorio. Por medio de ellas es posible detectar al propio virus o algunos de sus componentes, como protenas y cidos nucleicos.

La mayora de las tcnicas empleadas se basan en el enzimoinmunoanlisis (mtodo ELISA o EIA) para las pruebas masivas de cribado o en los inmunoblots para las pruebas de confirmacin.

Material: Una pipeta de shally Una prueba de hiv Suero humano Tcnica: Obtener la muestra de suero del paciente. Se saca del empaque el hexagon HIV Ya una vez teniendo la prueba de HIV tenemos que colocar sobre ella misma dos gotas de suero. Debemos de esperar alrededor de unos 10 minutos. Despus de ese lapso de tiempo transcurrido podremos interpretar los resultados.

Observaciones: Cuento en la prueba solo aparece una lnea remarcada en rojo, el resultado es negativo. Cuando en la prueba aparecen dos lneas en rojo remarcado, el resultado de la prueba ser positivo.

Resultados: Nombre del paciente: Jared de Jesus Morales Landa Edad: 17 aos Sexo: masculino

Prueba HIV: negativo (-)

Conclusin: La conclusin de esta prctica es que mediante pruebas de inmunocromatografia se pudo realizar la determinacin de VIH en el paciente observando la reaccion AG-AC.

Bibliografa: http://www.google.com.mx/imageneshiv http://anodis.com.mx/nota/5086.spp http://www.thebody.com/content/art6681.htmll.

HEPATITIS C Objetivo Identificar si un tipo de hepatitis se presenta en el paciente ya que un familiar padeci de esta enfermedad, lo haremos por medio de los anticuerpos que se presenta en el suero, esperndose una reaccin de precipitacin. Fundamento La prueba rpida de un solo paso de anti-HCV, permite la deteccin de enlace directo para determinar la presencia de anticuerpos del virus de la hepatitis C, en una muestra de suero, lo que sirve como ayuda para el diagnostico de la infeccin de la hepatitis C. esta prueba es un inmuno ensayo basada en el principio de

doble emparedado, utilizando antgenos recombinantes purificados para la identificacin especifica de ANTI-HCV. Esta prueba es altamente sensible y especifica, los resultados se leen sin ninguna instrumentacin. Generalidades La hepatitis C es un tipo de hepatitis - una enfermedad heptica - causada por el virus de la hepatitis C (VHC). Generalmente se disemina a travs del contacto con sangre infectada. Tambin puede contagiarse a travs de las relaciones sexuales con una persona infectada y de madre a hijo durante el parto. La mayora de las personas que estn infectadas con hepatitis C no tienen sntomas durante muchos aos. Con un anlisis de sangre se puede saber si una persona tiene el virus. Generalmente, la hepatitis C no mejora espontneamente. La infeccin puede durar toda la vida y conducir a la cicatrizacin del hgado o al cncer de hgado. Algunas veces las medicinas ayudan, pero los efectos secundarios pueden ser un problema. Los casos ms graves pueden requerir un trasplante heptico. No existe una vacuna contra el VHC. a mayora de las personas no presentan ningn sntoma. Sin embargo, algunas pueden sentirse como si tuvieran un estado gripal. MATERIAL Y EQUIPO: Cartucho para pruebas de hepatitis C Material para extraccin sangunea Pipetas desechables Tubos de ensaye

Tcnica 1.- Extraer sangre de 2 a 3 ml 2.- Dejar que la sangre coagule 3.- Centrifugar a 3500 rpm durante 3 minutos 4.- depositar 3 gotas de suero en el cartucho

5.- Agregar 3 gotas del antgeno hepatitis C, esperar 20 minutos y leer el resultado Valores de referencia: Mujeres: 12-14 gr/dl Hombres: 13-19 gr/dl Resultados: Nombre del paciente: Jared de Jesus Morales Landa Edad: 17 aos Sexo: masculino Prueba hepatitis C: negativo (Se observ una banda de color oscuro en la C de control) Fuentes www.tusalud.com.mx bq.unam.mx/-evazquez Mujeres embarazadas: 11-14 gr/dl recin nacido: 13.19 gr/dl

COOMBS DIRECTA E INDIRECTA

Objetivo Que el alumno pueda determinar la existencia de globulos rojos recubiertos con inmunoglobulinas o en complemento in vivo, en particular IgG y C3d (coombs directo) Determinar la presencia receptor(Coombs indirecto) Fundamento: la prueba de Coombs directa se utiliza para detectar anticuerpos que ya se han fijado a la superficie de los glbulos rojos. Muchas enfermedades y de anticuerpos irregulares en el suero del

frmacos(quinidina, metildopa y procainamida) puede llevar a la produccin de estos anticuerpos. Estos anticuerpos algunas veces destruyen los globulos rojos y causan anemia. Esta prueba algunas veces se lleva a cabo para diagnosticar la causa de anemia o ictericia. La prueba de coombs indirecta busca anticuerpos circulantes libres contra una seria de globulos rojos estandarizados. Esta prueba indirecta solo se usa rara vez para diagnosticar una infeccin medica y, con mas frecuencia, se utiliza para determinar si una persona podra tener o no una reaccin a una transfusin de sangre Generalidades La sangre se extrae tpicamente de una vena, por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano. El sitio se limpia con un desinfectante (antisptico). El mdico envuelve una banda elstica alrededor de la parte superior del brazo con el fin de aplicar presin en el rea y hacer que la vena se llene de sangre. Luego, el mdico introduce suavemente una aguja en la vena y recoge la sangre en un frasco hermtico o en un tubo pegado a la aguja. La banda elstica se retira del brazo. Una vez que se ha recogido la muestra de sangre, se retira la aguja y se cubre el sitio de puncin para detener cualquier sangrado. En bebs o en nios pequeos, se puede utilizar un instrumento puntiagudo llamado lanceta para punzar la piel y hacerla sangrar. La sangre se recoge en un tubo pequeo de vidrio llamado pipeta, en un portaobjetos o en una tira reactiva. Finalmente, se puede colocar un vendaje sobre el rea si hay algn sangrado. Valores normales La falta de agrupacin de clulas (aglutinacin), indicando que no hay anticuerpos para los glbulos rojos, es lo normal. Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios. Hable con el mdico acerca del significado de los resultados especficos de su examen. Significado de los resultados anormales Una prueba de Coombs directa anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actan contra sus glbulos rojos, lo cual puede deberse a:

Anemia hemoltica autoinmunitaria sin otra causa Leucemia linfoctica crnica u otro trastorno linfoproliferativo Anemia hemoltica inducida por frmacos (muchos frmacos han sido asociados con esta complicacin) Eritroblastosis fetal (enfermedad hemoltica del recin nacido)

Mononucleosis infecciosa Infeccin por micoplasma Sfilis Lupus eritematoso sistmico u otra afeccin reumatolgica Reaccin a transfusin como la ocasionada por unidades de sangre cotejadas de manera impropia

Esta prueba tambin es anormal en algunas personas sin una causa clara, especialmente entre los ancianos. Hasta el 3% de las personas que estn hospitalizadas sin un trastorno sanguneo conocido tendrn un resultado anormal en la prueba de Coombs directa. Una prueba de Coombs indirecta anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actuarn contra los glbulos rojos que el cuerpo asume como extraos. Esto puede sugerir la presencia de:

Anemia hemoltica auto inmunitaria o inducida por frmacos Eritroblastosis fetal (enfermedad hemoltica) Incompatibilidad sangunea (cuando se utiliza en bancos de sangre)

TECNICA: COOMBS DIRECTO: Dilumos 1 ml de suero de coombs (suero de conejo con antiglobulina humana, anti Rh) con 10 UI de sangre del paciente (tubo de hematimetra). Identificar dos pocillos de una tarjeta de coombs con los datos del paciente. Dispersar en los pocillos 50 UI de la dilucin. Centrifugar durante 10 min.

Interpretar: Si el tapn de hemates se encuentra en el fondo del pocillo, significa que no ha aglutinado, por lo que el Coombs es negativo. Si aglutina (Coombs Directo positivo), el paciente presenta una anemia hemoltica, genera sus propios Ac. COOMBS INDIRECTO:

Nos sirve para identificar si el suero de mujeres con Rh negativo, poseen Ac capaces de fijarse a los eritrocitos del feto, si la embarazada est sensibilizada. Identificar con los datos del paciente una tarjeta de Coombs y una salina.

Aadimos en cada pocillo una gota de reactivo de hemates 1 y una gota de hemates 2+ 50 UI de suero o plasma. Incubar la tarjeta de Coombs a 37C durante 15 min. La tarjeta salina se debe incubar a T ambiente durante 15 min. Interpretar:

Hemates control + suero paciente = Hemates sensibilizados. Hemates sensibilizados + suero coombs = Aglutinacin. Materiales Centrifuga para tubos de masa heparina Neveras de conservacin de sangre 4 a 5 c poliespecifico Aglutinoscopios anti C3d Tubos de ensayo de 13x100 Gradillas para tubos de ensayo Material para flebotoma Anticoagulante EDTA o Suero de coombs

Suero de coombs monoespecifico anti IgG y Solucion salina

Resultados: Nombre del paciente: Jared de Jesus Morales Landa Edad: 17 aos Sexo: masculino Prueba Coombs negativa Fuentes

http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003344.htm http://www.sld.cu/galerias/pdf/sitios/hematologia/prueba_de_coombs.pdf.pdf

PRUEBAS CRUZADAS

Objetivo: Las pruebas cruzadas consiste en saber si la sangre del donante puede ser transfundida al receptor, para ello, se realizar una serie de procedimientos. Identificar el grupo sanguneo del donante y del receptor. Las pruebas cruzadas pretransfusionales intentan detectar reacciones Ag-Ac potenciales antes de que la sangre sea transfundida.Cada unidad de sangre extraida debe ser examinada y clasificada de forma individual para descartar incompatibilidades entre el donante y el receptor, a fin de que la transfusin se realice con las mximas garantas.

Fundamento: Esta es una prueba inmunohematolgica cuyo principio es la hemaglutinacin y su objetivo es evitar la destruccin intravascular de los hemates en un receptor. Estudio practicado in vitro empleando muestras de sangre del disponente y del receptor, para comprobar la existencia de afinidad recproca entre las clulas de uno y el suero del otro, para efectos transfusionales Se ponen en contacto los glbulos rojos del donador y el suero del receptor, y los glbulos rojos del receptor con el suero del donador, en presencia del suero de Coombs, en solucin albuminosa y liss. Las pruebas de compatibilidad se realizan antes de transfundir la sangre para asegurarse de que los hemates del donante son compatibles con el paciente. Comprende las siguientes determinaciones: Tipaje de grupo ABO y Rh del receptor. Deteccin e identificacin de Acs en el suero del receptor. Tipaje correcto de grupo ABO y Rh del donante. Deteccin de Acs en el donante. Pruebas cruzadas (compatibilidad pretransfusional). Las posibilidades de incompatibilidad se reducen mucho si el paciente y el donante, presentan pruebas negativas de screening de Ac. La prueba cruzada debe ser lo ms completa posible, a fin de proteger al paciente. Las pruebas cruzadas se denominan: Mayor y menor. El Coombs cruzado es una variante del Coombs indirecto y se realiza a pacientes poli transfundidos, pacientes con antecedentes de reaccin post transfuncional hemoltica y a multparas para escoger sangre compatible.

Generalidades: La sangre se clasifica en diferentes grupos sanguneos llamados A, B, AB y O. El sistema inmunitario normalmente puede diferenciar las clulas sanguneas propias de las clulas sanguineas de otra persona. Si otras clulas sanguneas entran al cuerpo, el sistema inmunitario puede producir anticuerpos contra ellas. Estos anticuerpos trabajarn para destruir estas clulas que el cuerpo no reconoce. Por ejemplo, una persona con sangre tipo A produce anticuerpos contra las clulas sanguneas tipo B. Otra manera como se pueden clasificar las clulas sanguneas es por medio de los factores Rh. Las personas que tienen factores Rh en su sangre se denominan

"Rh positivos" y las personas sin estos factores se denominan "Rh negativos". Las personas Rh negativas forman anticuerpos contra el factor Rh si reciben sangre Rh positiva. Hay tambin otros factores para identificar las clulas sanguneas, adems del sistema ABO y el Rh. La sangre que usted recibe en una transfusin debe ser compatible. Ser compatible significa que su cuerpo no producir anticuerpos contra la sangre que reciba. La transfusin sangunea entre grupos compatibles (como O+ a O+) por lo regular no causa ningn problema. La transfusin de sangre entre grupos compatibles (como O+ a O+) generalmente no causa ningn problema; mientras que la transfusin de sangre entre grupos incompatibles (como A+ a O-) causa una respuesta inmunitaria, la cual puede llevar a una reaccin seria a la transfusin. El sistema inmunitario ataca las clulas sanguneas donadas, haciendo que stas estallen. Tcnica: PRUEBAS CRUZADAS (salina) 1.Marcar tres tubos de la siguiente manera: Ds (prueba mayor), Rs (prueba menor) y Ts (autotestigo). 2. Al tubo Ds colocar dos gotas de suero del receptor ms una gota de glbulos rojos del donador y mezclar 3.Al tubo Rs colocar dos gotas de suero del donador ms una gota de glbulos rojos del receptor y mezclar 4.Al tubo Ts colocar dos gotas del suero del donador ms una gota de glbulos rojos del donador 5.Centrifugar los tubos Ds Rs y Ts a 3400 r.p.m. durante 30 segundos y observar si hay aglutinacin 6. Mezcle y centrifugue a 340 r.p.m. durante 30 segundos y observe si hay aglutinacin. PRUEBAS CRUZADAS (Albmina) 1. Marcar tres tubos de la siguiente manera: DA (prueba mayor), RA (prueba menor) y TA (autotestigo). 2. Al tubo DA colocar dos gotas del suero del receptor ms una gota de glbulos rojos de donador y mezcle 3. Al tubo RA colocar dos gotas del suero del donador ms una gota de glbulos rojos del receptor y mezcle

4. Al tubo TA colocar dos gotas del suero del receptor ms una gota de glbulos del receptor y mezcle 5. Agregue a los tubos DA RA y TA albmina bobina 2 gotas si es al 22% y dos gotas si es al 30% y mezcle 6. Centrifugue los tubos DA RA y TA a 3400 r.p.m. durante 90 segundos y observe si hay aglutinacin 7. Si no hay hemoaglutinacin incube a 37C durante 15 minutos.

8. Saque los tubos DA RA y TA y centrifugue a 3400r.p.m. durante 90 segundos y observe si hay aglutinacin. 9. Si no hay aglutinacin lave tres veces con solucin salina isotnica.

10. En ltimo lavado elimine totalmente la solucin salina remanente 11. Adicione a cada tubo DA RA y TA una gota de suero antiglobulina humana e incubar 15 minutos a 37C. 12. Mezcle y centrifugue a 3400r.p.m. durante 30 segundos y observe si hay aglutinacin. Observaciones: Tabla de interpretacin de compatibilidad ABO Grupo ABO AB A B O Reactivo anti-A + + Tabla de compatibilidad de Grupos Sanguneos Donante Receptor A A B AB O B A B Compatibilidad compatible no compatible compatible no compatible no compatible compatible Reactivo anti-B + + -

Tabla de compatibilidad de Grupos Sanguneos Donante Receptor AB O A AB B AB O A O B AB O Resultados: Nombre del donante: Luis Omar Gudio Cobos Edad: 18 aos Nombre del receptor: Jared de Jesus Morales Landa Edad: 17 aos El resultado fue de compatibilidad debido a que el grupo sanguneo es el mismo y no hubo complicaciones a la hora de realizarse las pruebas cruzadas dando resultados positivos. Y por lo consiguiente mostrando aglutinaciones en las pruebas mencionadas. Compatibilidad compatible no compatible no compatible no compatible compatible no compatible compatible compatible compatible compatible

Bibliografa: http://www.google.com.mx/search? hl=es&biw=1024&bih=677&q=pruebas+cruzadas+de+compatibilidad&aq=1&aqi=g 10&aql=&oq=pruebas+cr&gs_rfai= http://www.binasss.sa.cr/revistas/rccm/v5n2/art10.pdf

PRCTICA 2

HEMATOCRITO

PRCTICA 1

HEMOGLOBINA

PRACTICA 3

SISTEMA

ABO

PRCTICA 4

PRUEBA

DE EMBARA ZO

PRCTICA 5

VIH

PRCTICA 6

HEPATITIS C

PRCTICAS 7 Y 8

COOMBS DIRECTA E INDIRECTA

PRCTICA 9

PRUEBAS CRUZADAS

PRCTICA 10

F R M U L A D E H B Y G. R. A PARTIR DE HTO

NDICE

Introduccin............................................. Hemoglobina............................................ Sistema ABO............................................ Hormona Gonadotropina(Embarazo).... VIH Hepatitis C. Coombs Directa e Indirecta.. Pruebas Cruzadas................................... Formula de Hb y G.R. por Hto................

INTRODUCCIN

La misin de los servicios de sangre de una nacin es colectar y preparar productos sanguneos seguros en una forma eficiente y oportuna, y trasfundirlos de una manera apropiada Este manual proporcionara al lector una amplia gama de conocimientos que sern entendidos y aclarados con el simple hecho de haberlo escogido como su tutor personal para la realizacin de estas prcticas. Las prcticas vienen interpretadas con los resultados que se fueron dando conforme se iban realizando todas y cada una de estas prcticas.

MANUAL DE BANCO DE SANGRE

Centro de Bachillerato Tecnolgico industrial y de servicios No. 13 (CBTis. No. 13) Jos Maria Cos y Perez

Banco de Sangre

Profra. Almudena Frnces Navarro

Tec. Laboratorista clnico.

5 L

Vespertino

Practicas de Banco de Sangre

Yulissman Snchez Morales