EXAMEN BACTERIOLOGIQUE DES SELLES (COPROCULTURE CLASSIQUE)

Elabor par : ALIMOU Sofia BEKAR Oumaima BOUSSAADANE Sara DIDAH Fayza Encadr par: Mme.HSAINE Samira

PLAN

INTRODUCTION QUAND PRESCRIRE EBS? DIHAREES INFECTIEUX PRELEVEMENT & TRANSPORT QUE RECHERCHER DANS EBS? COPROCULTURE CLASSIQUE: -EXAMEN MACRO ET MICROSCOPIQUE -MILIEU DE CULTURE -IDENTIFICATION & INTERPRETATION CONCLUSION

INTRODUCTION

L'examen bactriologique des selles se fait par coproculture, c'est--dire par ensemencement des selles sur des milieux de culture appropris. Le but est de rechercher et didentifier parmi une flore commensale trs abondante soit des bactries habituellement absentes et rputes pour leur pouvoir pathogne, soit une espce bactrienne anormalement prdominante

Quand prescrire EBS?

Diagnostic diarrhe: Diarrhe infectieuse bactrienne ? Diarrhe aigu Diarrhe chronique si patient immunodprim

TIAC Toxi-Infection Alimentaire Collective

Prvention risque infectieux: Sujets risque ( immunodprim, en ranimation, oncohmatologie ) Contexte rglementaire (cuisiniers p.ex) Intrt pidmiologique: Entourage patient Ranimation nonatale

DIARRHEES INFECTIEUSES

Selon LO.M.S, Une diarrhe : mission dau moins 3 selles/j de consistance anormale Aigu < 14 j Persistante > 14j Chronique > 4 semaines TIAC Toxi-Infection Alimentaire Collective dfinie par l'apparition d'au moins deux cas groups similaires d'une symptomatologie, en gnral gastro-intestinale, dont on peut rapporter la cause une mme origine alimentaire

Prlvement et transport

Recueil ds lmission
Volume noix dans conteneur hermtique propre usage unique Choisir chantillon mucopurulent ou sanglant Acheminement rapide au laboratoire (<2h) Conservation: maximum une nuit +4C, audel milieu transport

Ecouvillonnage rectal: nouveau-n, petit

enfant Biopsies rectales = coproculture

Que rechercher dans EBS? (3)

Coproculture classique: Salmonella Shigella Campylobacter Yersinia enterocolitica

Coproculture classique

Examen macroscopique Noter consistance: Selles moules refuses Prsence de glaires, de pus et de sang: choix de ces zones Examen microscopique Etat frais: Mobilit caractristique / levures/ hmaties/Parasites Peu informatif (manque de sensibilit) Colorations Bleu de mthylne: leucocytes Prsence leucocytes diarrhe germes invasifs ex: Salmonella spp., Shigella spp., Campylobacter Absence leucocytes diarrhe germes entrotoxinognes ex: V. cholerae, C. difficile Gram

COPROCULTURE CLASSIQUE Examen microscopique

Coloration de Gram :

1) Flore normale: majorit BGN Prsence qqs BGP Apprcier dsquilibre flore

2) Morphologie caractristique

Mise en culture Milieu slectif pour les entrobactries BCP/ Mac Conkey Milieux pour recherche Salmonella , Shigella . Hektoen ASAP SS, XLD, DCL Milieu denrichissement pour Salmonella . Bouillon slnite (12-24h dincubation) Incubation 35C pendant 24-48H

Milieu Hektoen

Milieu slectif par sels biliaires (taux lev de peptone pour Shigella) tude de 3 sucres ( lactose, saccharose, salicine) et H2S

Couleur Jaune saumon

Germes E. coli, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, S. arizonae, Vibrio cholerae (ox+), Aeromonas (ox+), Yersinia Proteus vulgaris Proteus mirabilis Salmonella Shigella, S.Typhi, Pseudomonas (ox+)

Jaune saumon centre gris-noir Bleues centre noir vertes

Milieu ASAP

sensibilit amliore par enrichissement pralable

rose pourpres Bleu vert

Salmonella Klebsiella, Enterobacter Serratia

Bleu violet

Incubation 37C; lecture 24H

COPROCULTURE CLASSIQUE

Mise en culture Recherche Yersinia enterocolitica (glose spcifique) Milieu CIN peu slectif 48-72h, lire 24 h Milieu Wauters Incubation 48h 30C Identification: Yersinia: +++ galerie

Yersinia sur CIN

COPROCULTURE CLASSIQUE

Mise en culture

Recherche Campylobacter (glose slective) Milieu Karmali En microarophilie (5 % O2, 10% CO2, 85% N2) Incubation 37C Lecture partir J2J5

Campylobacter sur karmali

COPROCULTURE CLASSIQUE

Identification
Compylobacter.jejuni Campylobacter.j ejuni Doylei + ou S S + ou Campylobacter. Coli + + R S + Campulobacte r.fetus + S R -

Croissance 25C Croissance 42C Hippurate Cfalotine Acide nalidixique indoxylactate

+ + R S +

COPROCULTURE CLASSIQUE

Identification Salmonella : Galerie: identification espce Srotypage : Mlange agglutinines anti-O / srum monovalent/ anti-H 1 et 2/ anti-Vi ( selon labo) puis envoy CNR Test Sven Gard ( CBPE) Antibiogramme Salmonella , Shigella ., Campylobacter, Yersinia .

COPROCULTURE CLASSIQUE

Interprtation:
Mise en vidence de Salmonella , Campylobacter ., Yersinia enterocolitica, Shigella . pathologique Culture pure ou majoritaire sur PBC/Hektoen:

Identifier et rendre P. aeruginosa, S. aureus et levures

Antibiogramme sur bactries en situation de pathognicit Salmonella . dclar la TIAC

CONCLUSION

Les rsultats d'une coproculture doivent tre interprts et confronts aux donnes cliniques. La prsence d'une bactrie ne tmoigne pas forcment de son caractre pathogne. Par ailleurs il faut savoir que l'mission dans les selles, de certaines bactries agents de diarrhes, peut tre trs brve et que souvent les coprocultures sont ralises trop tard. En effet, il peut tre difficile de recueillir des selles en cas d'pidmie. Il ne faut pas oublier galement que de nombreuses diarrhes ont une origine virale, expliquant alors la ngativit des cultures bactriennes