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Transferencia de Oxigeno en Biorreactores Agitados y Neumticos

Rafael Moreno Flores Francisco Rafael Chvez Garcia

Tanque agitado
Las conversiones microbianas aerbicas son reacciones de oxidacin que requieren de oxigeno molecular disuelto. El oxigeno con respecto a otros nutrientes tiene una solubilidad en agua extremadamente baja.

Esta caracterstica puede llegar a ser una factor limitante en productividad celular y/o de metabolitos. Debido a la influencia del oxigeno disuelto en la actividades metablicas de la clulas.

La velocidad de transferencia de oxigeno en un biorreactor agitado depende de las condiciones de agitacin y aireacin y de las caractersticas del caldo de cultivo.

La ecuacin de que describe la velocidad de transferencia de oxigeno (VTO) es la siguiente:


O

Kla es el parmetro que sirve para conocer la velocidad de transferencia del oxigeno de aire al liquido del biorreactor. En esta practica se combinan dos mtodos para determinar la VTO.

Balance de oxigeno del aire considerando la entrada y la salida


O

Donde:

En esta prctica para que haya una transferencia neta de oxigeno debe haber consumo del mismo, por lo que como consumidor de oxigeno se emplea sulfito de sodio. En este caso la reaccin de oxidacin es tan rpida que la concentracin de oxigeno disuelto en el liquido es cero.

Cu2+ 2 Na2SO3 + O2 -------------------------2Na2SO4

Columna de burbujeo
La velocidad de transferencia de oxigeno es determinada de manera importante por el rea superficial de las burbujas de aire, de aqu que el aire se disperse en forma de burbujas pequeas para proveer una gran rea de contacto entre las fases liquida y gaseosa. Sin embargo, en algunos caldos de fermentacin, las burbujas pequeas tienden a unirse formando burbujas ms grandes.

dependiendo de las propiedades fsicas del caldo de cultivo y de la intensidad de la turbulencia dentro del biorreactor, las burbujas pueden crecer hasta aproximadamente 6 mm de dimetro despus de dejar la zona de dispersin. Este fenmeno conocido como coalescencia de las burbujas, es causado por el hecho de que una pelcula liquida entre dos burbujas de aire adyacentes se hace cada vez ms delgada hasta que eventualmente se rompe.

Al ir aumentando la concentracin de electrolitos disueltos en dicho liquido, se va inhibiendo la coalescencia de las burbujas. Tambin la presencia de protenas, alcoholes y substancias surfactantes, afectan el grado de coalescencia de las burbujas.

La coalescencia de las burbujas afectan entonces el dimetro de las burbujas. Este junto con la fraccin de gas retenido determinan el rea superficial de contacto entre las fases liquida y gaseosa, de acuerdo a la siguiente ecuacin: a= 6 E/Db((1-E))

Donde:
a: rea interfacial gas-liquido. E: fraccin de gas retenido. Db: dimetro de las burbujas.

Airlift
Si el oxigeno molecular no fuera continuamente transferido del aire al caldo de cultivo de microorganismos, el oxigeno disuelto seria consumido en pocos segundos bajo condiciones normales de fermentacin, debido a la baja solubilidad del oxigeno en los caldos de cultivo

Un efecto importante de la circulacin del lquido es que disminuye la frecuencia de la coalescencia al aumentar la velocidad del lquido. Esto es resultado de que las distancias entre las burbujas de gas son ms grandes debido a que las fracciones de gas retenido son menores y a que la distribucin de gas es ms uniforme

En general, es los biorreactores de columna de burbujas se obtienen fracciones de gas retenido ms grandes, mientras que en los biorreactores airlift, la fraccin de gas retenido disminuye al aumentar la velocidad de circulacin del liquido. La velocidad del lquido representa por lo tanto, un parmetro muy importante para adaptar la fraccin de gas retenido y el tiempo de resistencia promedio de las burbujas a los requerimientos de proceso.

En los biorreactores airlift de gran altura, la velocidad de transferencia cambia a lo largo de la ruta de flujo de una manera complicada, debido a que el rea interfacial y la diferencia de concentracin de oxigeno cambian de un punto a otro debido a la expansin o comprensin, al consumo de oxigeno y a cambios a la presin hidrosttica y en la velocidad local de liquido.

Objetivo de la practica.
El alumno determinar la velocidad de transferencia de oxigeno, el coeficiente volumtrico de transferencia de oxigeno y la fraccin de gas retenido global en diferentes tipos biorreactores.

MATERIALES Y METODOS
Biorreactores 1.- Biorreactor de tanque agitado 2.- Biorreactor de columna de burbujeo 3.- Biorreactor airlift

Instrumentos
1.- Rotmetros 2.- Analizador de oxigeno en fase gaseosa 3.- Manmetros 4.- Termmetros 5.- Medidor de pH

Reactivos.
1.-Na2SO3 2.- Almidn en solucin al 1% 3.- HCL 3N 4.-NaOH 3N 5.- Soluciones reguladoras de pH, de 4 y 9

Mtodos
Determinacin de la velocidad de transferencia de oxigeno: mediante el mtodo combinado del balance de oxigeno con el del sulfito. Determinacin del kLa usando la siguiente ecuacin: kLa=VTO / C* C* se calcula con la ecuacin de la ley de Henry. Determinacin de la fraccin de gas retenido global: meto0do de expansin de gas.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Actividades Previas 1.- Preparar en el biorreactor una solucin de Na2SO3 0.6N 2.- Adicionar Cu2SO4 a la solucin de sulfito, para tener una concentracin final de 0.25 g/L 3.- Ajustar el pH a 7.6 y mantenerlo constante durante la experimentacin. Condiciones de operacin

Tanque agitado
Las velocidades de agitacin sern: 300, 500 y 700 rpm Para cada velocidad de agitacin, se probarn las siguientes velocidades de aireacin:0.3, 0.6, 1.0, 1.3, 1.6 wm.

Columna Velocidad de aireacin: 0.3, 0.6, 1.0, 1.3, 1.6wm. Airlift Velocidad de aireacin: 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 y 2.5wm. Tipos de tubos de arrastre :de 2 dimetros diferentes

Medicin de la concentracin de oxigeno gaseoso.


1.- Una vez establecidas las condiciones de operacin, medir la concentracin del oxigeno del aire que sale del biorreactor, utilizando el analizador de oxigeno previamente calibrado. Medicin de la fraccin de gas retenido global.

Tanque agitado y columna


1.-Medir el nivel del liquido sin airear y el nivel del liquido aireado para cada condicin de operacin.

Airlift
1.- Medir la diferencia de alturas del agua

contenida en los manmetros de presin diferencial de cada zona del biorreactor. 2.- Medir la distancia entre las tomas de presin esttica de la zona de flujo ascendente y entre la zona de flujo descendente.

RESULTADOS
1.- Calcular la VTO, kLa y la fraccin de gas retenido global, para cada condicin de operacin. 2.- Calcular C* 3.- Obtener la correlacin del kLa con la velocidad de aireacin, esta expresada en wm y en m/s 4.- obtener la correlacin del kLa con la fraccin de gas retenido.

DISCUSIN Y CONCLUSIONES
La discusin deber contener al menos la siguiente informacin: 1.-Comparacion de las diferentes condiciones de operacin y fraccin de gas retenido con respecto a los valores del kLa. 2.- Comparacin de los valores de kLa que obtuvo para cada uno de los biorreactores empleados y explique el por qu de las diferencias.

3.- Cual es el aspecto de la dispersin gasliquido para cada condicin de operacin 4.- Explicacin de los valores de kLa de los lquidos que promueven la coalescencia y de los lquidos que la inhiben.