Resumen del captulo 9 del Abbas.

Activacin de Linfocitos T Por: Euphos12 Introduccin Los antgenos protenicos que atraviesan las barreras epiteliales son captados por las clulas dendrticas inmaduras, y transportados a los ganglios linfticos. Los que entran en la circulacin pueden ser captados por clulas dendrticas en la sangre del bazo. Si estos antgenos se asocian a patrones moleculares asociados a patgenos, como los ligandos tipo toll, las clulas dendrticas son activadas y se las induce para que expresen coestimuladores sobre la superficie celular. Tanto los linfocitos T vrgenes como las clulas dendrticas son atrados a las zonas de linfocitos T por quimiocinas que activan el receptor de quimiocinas CCR7. Las clulas dendrticas presentan los antgenos sobre las molculas del CMH y tambin expresan coestimuladores que pueden proporcionar segundas seales a los linfocitos T vrgenes. Cuando un linfocito T virgen reconoce el antgeno y recibe seales mediante la interaccin de B7 (coestimulador) con receptores de coestimuladores del linfocito T, ese linfocito T es activado. Se pueden inducir a los linfocitos T estimulados a que secreten citosinas y expresen receptores de citosinas. La IL-2 da lugar a la expansin de clones especficos de antgeno. La IL-2 y otras tambin estimulan la diferenciacin de los linfocitos T en linfocitos efectores y de memoria. Algunos de estos linfocitos T activados salen del rgano linftico y entran a la circulacin. Otros, quedan en el rgano y ayudan a los linfocitos B a diferenciarse en clulas plasmticas. Los linfocitos T efectores pueden migrar a cualquier foco de infeccin o de inflamacin. Ah, vuelven a entrar en contacto con el antgeno para el que son especficos. Los del subconjunto cooperador CD4+, expresan molculas de membrana y secretan citosinas que activan a los macrfagos para que maten los microorganismos fagocitados. Los linfocitos citotxicos del subconjunto CD8+, matan clulas infectadas y clulas tumorales que muestran antgenos asociados al CMH de clase I. Los linfocitos T de memoria son una poblacin expandida especficos de antgeno que pueden responder rpidamente a un encuentro posterior con el antgeno. La activacin de los linfocitos T de memoria depende solo de la ocupacin del RLT, y en esta fase de la diferenciacin, no son necesarias segundas seales coestimuladoras. Las respuestas de los linfocitos T disminuyen principalmente porque la mayora de los linfocitos T activados por el antgeno mueren mediante apoptosis. Cuando el antgeno es eliminado, los linfocitos quedan privados de los estmulos de supervivencia que normalmente proporcionan al antgeno, los coestimuladores y las citosinas.

Activacin de los linfocitos T CD4+ Los linfocitos T vrgenes migran desde la sangre hasta que entran en contacto con el antgeno para el cual expresan receptores especficos. Las clulas dendrticas tienen una funcin importante en la captacin de los antgenos en focos infecciosos. Durante su migracin hasta los ganglios linfticos, maduran y se convierten en CPA eficientes. Una vez en el ganglio linftico, presentan a los linfocitos T CD4+ vrgenes, pptidos derivados de los antgenos de la protena endocitada asociados a molculas del CMH de clase II. Las reacciones inmunitarias mediadas por los linfocitos T CD4+ son desencadenadas por los antgenos protenicos de microorganismos extracelulares que son ingeridos por clulas dendrticas o por antgenos protenicos solubles que son administrados con adyuvantes, en el caso de las vacunaciones, y captados por las clulas dendrticas. Algunos productos qumicos introducidos a travs de la piel tambin desencadenan reacciones mediadas por LT, denominadas reacciones de sensibilidad por contacto. Se piensa que se unen a protenas propias y las modifican, creando nuevos determinantes antignicos. Las clulas dendrticas responden a las estructuras microbianas expresando concentraciones elevadas de coestimuladores como las protenas B7-1 y B7-2

y mediante la secrecin de citosinas como la IL-2. La proliferacin de los linfocitos T est mediada principalmente por una va de crecimiento autocrina, en la que el linfocito T que responde secreta citosinas promotoras de su propio crecimiento y tambin expresa receptores para estas citosinas en la superficie celular. El principal es la IL-2. La consecuencia de la proliferacin de los linfocitos T vrgenes es la expansin clonal. Despus de la exposicin al antgeno, el nmero de LT CD4+ especficos, puede aumentar hasta aproximadamente 1 de cada 100 a 1000 linfocitos. Estos nmeros disminuyen rpidamente cuando se elimina el antgeno y los linfocitos de memoria supervivientes para el antgeno alcanzan nmeros del orden de 1 de cada 104. Los LT activados mueren mediante apoptosis, lo que constituye un mecanismo homeosttico que devuelve el sistema inmunitario a su estado basal de reposo despus de haber eliminado la infeccin. Mientras que los LT CD4+ vrgenes producen principalmente IL-2 tras su activacin, los LT CD4+ efectores son capaces de producir un gran nmero y variedad de citosinas que tienen diversas actividades biolgicas.

Activacin de los linfocitos T CD8+ Los LT CD8+ vrgenes deben reconocer los antgenos peptdicos asociados a la clase I y tambin establecer contacto coestimuladores sobre las CPA o seales proporcionadas por los linfocitos T cooperadores. Las respuestas de los LT CD8+ son activadas por pptidos microbianos presentes en el citosol de las clulas infectadas. Los microorganismos que producen antgenos citoslicos suelen ser virus. Los LT CD8+ pueden responder a algunas bacterias y virus fagocitados si estos grmenes o sus antgenos protenicos son transportados fuera de los fagosomas hasta el citosol. El antgeno que reconoce estos linfocitos puede ser producido en un tipo celular, como una clula tisular que es infectada por un virus o transformada, que no es una CPA profesional y no puede activar a los linfocitos T vrgenes. El antgeno tiene que acceder a la va del CMH del tipo I de las clulas dendrticas. Esta permisividad para el trfico de protenas desde las vesculas endosmicas hasta el citosol es exclusiva de las clulas dendrticas. Este proceso se denomina presentacin cruzada o cebado cruzado, para indicar que un tipo celular puede presentar antgenos de otra clula y cebar, o activar, a los LT especficos de estos antgenos. Los linfocitos T cooperadores pueden proporcionar segundas seales para los LT CD8+. La necesidad de los linfocitos cooperadores puede variar segn el tipo de exposicin antignica. Los LT cooperadores pueden secretar citosinas que estimulan la diferenciacin de los LT CD8+. Los LT cooperadores estimulados por el antgeno expresan el miembro trimrico de la familia del factor de necrosis tumoral (TNF) denominado ligando de CD40 (CD40L), que se une al CD40 de las CPA y activa a estas la clula presentadoras para hacer que sean ms eficientes en la estimulacin de la diferenciacin de los linfocitos T CD8+. Los efectos de los linfocitos T cooperadores parecen producirse sobre todo en la diferenciacin de los linfocitos T CD8+ en linfocitos de memoria completamente funcionales y menos sobre la expansin clonal inicial y el desarrollo temprano de los LTC. Despus de la exposicin al antgeno, el nmero de linfocitos T CD8+ especficos para ese antgeno puede aumentar hasta llegar a ser 1 de cada 10. Varias citosinas pueden actuar como factores de crecimiento para dirigir la expansin clonal de los LT CD8+; entre ellas estn IL-12, IL-15 e IL-7-. No est totalmente clara la funcin de IL-2, el primer factor de crecimiento de los LT identificado. La caracterstica ms especfica de la diferenciacin de los LTC es la aparicin de orgnulos citoplasmticos unidos a la membrana que contienen protenas como perforina y granzimas. Los LTC diferenciados pueden secretar citosinas, principalmente IFN-y, linfotoxina y TNF, que actan activando los fagocitos e induciendo la inflamacin. Los fenmenos moleculares de la diferenciacin de los LTC suponen la transcripcin de genes que codifican estas molculas efectoras.

Dos factores de transcripcin que son necesarios para este programa de nueva expresin gnica son T-bet y eomesodermina. Los LTC pueden ser ms importantes para la generacin de LT CD8+ de memoria que para una respuesta primaria mediada por LTC.

Funcin de los coestimuladores en la activacin de los linfocitos T La segunda seal para la activacin de los linfocitos T se denomina coestimulacin. En su ausencia, los LT que entran en contacto con antgenos no responden y mueren mediante apoptosis o entran en un estado de anergia. CD28 proporciona seales que potencian muchas respuestas de los LT al antgeno, como la supervivencia celular, la produccin de citosinas y la diferenciacin de los linfocitos T vrgenes en los LTE y LTM. B7-1 y B7-2 son glucoprotenas monocatenarias integrales de membrana, estructuralmente similares, cada una con dos dominios extracelulares del tipo inmunoglobulina. Se expresan principalmente en las CPA. La expresin de los coestimuladores B7 aumenta por productos microbianos que se unen a receptores de tipo toll y por citosinas como el IFN-y que se produce durante las reacciones inmunitarias frente a los microorganismos. Los LT activados expresan CD40L en su superficie que se une al CD40 que se expresa en las CPA y proporciona seales que potencian la expresin de los coestimuladores B7 sobre las CPA. Las clulas dendrticas maduras expresan las mayores concentraciones de coestimuladores y, en consecuencia, son los estimuladores ms potentes de los LT vrgenes. Muchos adyuvantes son productos de microorganismos o simulan microorganismos, y una de sus principales funciones en la activacin de los LT es estimular la expresin de coestimuladores sobre las CPA. La ausencia de expresin de los coestimuladores garantiza que no se activen los linfocitos T potencialmente autorreactivos, que pueden volverse anrgicos. Los LT efectores y de memoria activados previamente, dependen menos de la estimulacin por la va de B7:CD28 que los linfocitos vrgenes. Esta propiedad les permite responder a los antgenos presentados por diversas CPA que pueden residir en tejidos no linfticos y pueden expresar concentraciones nulas o bajas de B7. Los LT reguladores son linfocitos T CD4+CD25+ que pueden suprimir la funcin de los LTE. Una gran proporcin se desarrolla en el timo y se les conoce como LT reguladores naturales. El desarrollo de estos, precisa tanto de B7 como CD28. Las seales mediadas por CD28 aumentan la produccin de citosinas, especialmente el factor de crecimiento autocrino de los LT IL-2. Esto se puede deber a una combinacin de aumento de la transcripcin y estabilizacin del ARN mensajero de la IL-2. Adems, las seales de CD28 favorecen la supervivencia de los LT, en parte aumentando la expresin de la protena antiapoptsica Bcl-x. Una protena denominada ICOS (coestimulador inducible) es homloga a CD28 y se denomina as porque es inducida en los linfocitos T despus de su activacin. El ligando de ICOS es homlogo a B7-1 y B7-2. ICOS parece particularmente importante para estimular la produccin de algunas citosinas, sobre todo IL-10, y para la activacin LTE diferenciados previamente. Una protena denominada CTLA-4 (CD152) tambin es homloga a CD28, se une a B7-1 y B7-2 y se expresa en los LT activados. CTLA-4 acta finalizando las respuestas de los LT y participa en la autotolerancia. La reaccin del CD40L de los LT con el CD40 de las CPA potencia la activacin de los LT. Este fenmeno a veces se denomina licencia porque los linfocitos T activados licencian a otras CPA para que participen en una respuesta inmunitaria. As, la va de CD40 amplifica indirectamente las respuestas de los LT y en s misma no acta como va coestimuladora. Se estn obteniendo muchos productos teraputicos en funcin de los conocimientos de las vas coestimuladoras. CTLA-4Ig, una protena de fusin formada por el dominio extracelular de CTLA-4 y la porcin Fc de la IgG humana, se una a B7-1 y B7-2 y bloquea la interaccin B7:CD28 cuando se administra a pacientes. Actualmente tambin se estn evaluando inhibidores de la va de CD40L:CD40 en estudios clnicos para su uso en el rechazo del trasplante y en enfermedades inflamatorias crnicas de posible origen autoinmunitario. Se ha mostrado que muchas molculas de superficie de los LT, como CD2 y las integrinas, proporcionan seales coestimuladoras in vitro, aunque

est menos clara su funcin fisiolgica en ratones y seres humanos.

Transduccin de seales por el complejo RLT El reconocimiento del antgeno por el RLT inicia una secuencia de seales bioqumicas en los LT que produce la activacin transcripcional de genes particulares y la entrada de las clulas en el ciclo celular. La activacin de los LT supone la integracin de seales procedentes de mltiples receptores. La respuesta bioqumica temprana al reconocimiento del antgeno incluye el agrupamiento de los correceptores con el receptor del antgeno y la fosforilacin de las tirosinas de la estructura de activacin del inmunorreceptor basado en la tirosina (ITAM). Las seales procedentes del receptor del antgeno activan de forma coordinada diversas vas bioqumicas importantes, de las cuales algunas de las principales son la va de Ras-cinasa MAP, la va de la protena cinasa C (PKC) y la va de calcio-calcineurina. En los LT, varios componentes del complejo RLT, as como productos intermediarios corriente abajo, son sustratos de la tirosina-cinasa. Las porciones citoplasmticas de las cadenas CD3 y de las cadenas contienen un total de 10 secuencias peptdicas conservadas que contienen tirosina denominada ITAM. Cuando los RLT se unen a los complejos pptido-CMH, CD4 o CD8 se une al mismo tiempo a regiones no polimrficas de la molcula del CMH de la clase II o de la clase I de las CPA. Lck, una tirosina cinasa de la familia Src que est asociada a las colas citoplasmticas de CD4 y CD8, se aproxima de esta forma a las estructuras ITAM de las cadenas CD3 y . El agrupamiento del complejo RLT y del correceptor da lugar a la activacin de Lck por mecanismos que no estn claros. La enzima Lck activada fosforila despus a las tirosinas de las estructuras ITAM de las cadenas CD3 y . Otra tirosina cinasa citoplasmtica que se encuentra asociada al complejo RLT es Fyn asociada a CD3. Se piensa que Fyn puede activarse por una alteracin conformacional de las molculas del RLT y de CD3 despus de la unin del RLT a los complejos CMH-pptido. ZAP-70 es un miembro de una familia de tirosina cinasas diferente a la familia Src. Contiene dos dominios conservados denominados dominios homlogos a Src 2 (SH2), que se pueden unir a fosfotirosinas. La enzima ZAP-70 unida se convierte en sustrato para la enzima Lck adyacente, que fosforila tirosinas especficas de ZAP-70. ZAP-70 adquiere su propia actividad de tirosina cinasa y despus es capaz de fosforilar a otras diversas molculas transmisoras de seales citoplasmticas. Otra va de las cinasas en los LT supone la activacin de la cinasa PI-3. Esta enzima es reclutada hasta el complejo RLT y las protenas adaptadoras asociadas y genera PIP3 a partir de PIP2. PIP3 proporciona un punto de unin en el interior de la membrana plasmtica para intermediarios de transmisin de seales que contienen dominios homlogos a pleckstrima, incluyendo la fosfolipasa C y cinasas como ItK (y Btk en los LB). Otra cinasa importante dependiente de PIP3 es PDKI, que es necesaria para la activacin de una Akt, que es un regulador crucial de la supervivencia celular. La actividad de las cinasas de las vas de transmisin de seales de los LT puede estar regulada por tirosina fosfatasas. Dependiendo de qu tirosina est implicada, el efecto puede ser activar o inhibir la funcin enzimtica de las cinasas. Dos fosfatasas que son reclutadas hasta el complejo RLT son SHP-1 y SHP-2. Actan inhibiendo la transduccin de seales mediante la eliminacin de los fosfatos de la tirosina de molculas transmisoras de seales importantes. Otra fosfatasa inhibidora es especfica para los fosfolpidos de inositol y se denomina SHIP. CD45 contiene dominios de tirosina fosfatasa en tndem. CD45 desfosforila tirosinas inhibidoras en cinasa de la familia Src como Lck, y puede contribuir a la generacin de Lck y Fyn potencialmente activas. Cuando el complejo RLT reconoce a los pptidos asociados al CMH sobre una CPA, varias protenas de la superficie de los LT y molculas transmisoras de seales intracelular son movilizadas rpidamente hasta la zona de contacto entre el LT y la CPA. Esta regin de contacto fsico se denomina sinapsis inmunitaria o agregado de activacin supramolecular (AASM). Incluyen el complejo RLT, los correceptores de CD4 o CD8, receptores para coestimuladores, enzimas como PKC- y protenas adaptadoras que se asocian a las colas citoplasmticas de los receptores

trasnmembranarios. Las integrinas permanecen en la periferia de la sinapsis, donde actan estabilizando la unin del LT a la CPA, formando la porcin perifrica del AASM denominada AASM-p. Muchas molculas transmisoras de seales que se encuentran en las sinapsis estn localizadas en balsas lipdicas o microdominios enriquecidos en glucolpidos. La transmisin de seales del RLT y del receptor coestimulador induce reorganizaciones del citoesqueleto que permiten que las balsas confluyan y formen la sinapsis inmunitaria. Pueden tener diversas funciones: La sinapsis representa un punto en el que este pequeo nmero de complejos pptido-CMH de la CPA puede mantener la interaccin repetida de los RLT, facilitando de esta forma la transmisin de seales prolongada y eficaz de los LT. Las sinapsis pueden garantizar la liberacin especfica de grnulos efectores y seales de las CPA adecuadas o a otras clulas especficas. La sinapsis puede ser un punto importante para el recambio de las molculas transmisoras de seales, principalmente por ubicuitinacin y liberacin hacia los endosomas tardos y los lisosomas. Un fenmeno temprano fundamental en la activacin de los LT es la fosforilacin, mediada por ZAP-70, de las tirosinas de la protena adaptadora anclada a la membrana LAT. Las tirosinas fosforiladas de LAT actan como puntos de anclaje para los dominios SH2 de otras protenas adaptadoras y enzimas que participan en varias cadenas de transmisin de seales. LAT tambin contiene regiones ricas en prolina que se unen a los dominios SH3 de otras protenas. Se une directamente a la fosfolipasa Cl, una enzima fundamental en la activacin de los LT, y coordina el reclutamiento de otras diversas protenas adaptadoras, como SLP76 y Grb-2, hasta el agregado del RLT y las protenas asociadas al RLT que con frecuencia se denomina sealosoma. Ras es una protena de unin a nucletidos con guanina. Est unido de forma laxa a la membrana plasmtica mediante lpidos unidos covalentemente. En su forma inactiva, el punto de unin a los nucletidos con guanina de Ras est ocupado por GDP. Cuando el GDP unido es sustituido por GTP, Ras experimenta un cambio conformacional y despus puede reclutar o activar a varias enzimas celulares. Las protenas Ras mutadas que son reactivas de forma constitutiva (es decir, asumen la conformacin unida a GTP) se asocian a la transformacin neoplsica de muchos tipos celulares. El mecanismo de activacin de Ras en los LT implica a las protenas adaptadoras LAT y Grb-2. Cuando LAT es fosforilado por ZAP-70 en el punto del agregado del RLT, acta como punto de anclaje para el dominio SH2 de Grb-2. Una vez unido a LAT, Grb-2 recluta hasta la membrana al factor de intercambio de GTP/GDP de Ras denominado Sos. Sos cataliza el intercambio de GDP por GTP en Ras. Esto genera la forma de Ras unida a GTP que despus activa a un miembro de una familia de enzimas denominadas MAP cinasas. Hay tres importantes MAP cinasas en los LT, y el prototipo es la enzima llamada ERK. La activacin de ERK se debe a la activacin secuencial inducida por Ras GTP de dos cinasas diferentes, cada una de las cuales fosforila a la siguiente enzima de la cadena. La ltima enzima antes de ERK es una cinasa dual especfica que fosforila a esta cinasa MAP en treoninas y tirosinas muy prximas. La enzima ERK activada se transloca al ncleo y fosforila a una protena denominada EIK, y la protena EIK fosforilada estimula la transcripcin de Fos, un componente del factor de transcripcin de la protena de activacin -1 (AP-1). En paralelo, los adaptadores fosforilados por las cinasas asociadas al RLT tambin reclutan y activan una protena de intercambio de GTP/GDP llamada Vav, que acta sobre otra pequea protena llamada Rac. La Rac-GTP que se ha generado inicia una cadena enzimtica paralela que lleva a la activacin de una cinasa MAP distinta denominada cinasa de amino terminal c-Jun (JNK). JNK a veces se llama protena activada por el estrs (SAP) porque en muchas clulas es activada por diversas formas de estmulos nocivos como luz ultravioleta, agresin osmtica y citosinas proinflamatorias, como TNF e IL-1. La JNK activada fosforila despus a c-Jun, el segundo componente del factor de transcripcin AP-1. Un tercer miembro de la familia de las cinasas MAP, adems de ERK y JNK, es p38, que tambin es activado por RacGTP y que a su vez activa a diversos factores de transcripcin. Las actividades de ERK y JNK son inactivadas por retroalimentacin negativa para finalizar la activacin de los LT.

La transmisin de seales del RLT da lugar a la activacin de la isoforma 1 de la enzima fosfolipasa C (PLC 1), y los productos de la hidrlisis de los lpidos de membrana mediada por la PLC 1 activan enzimas que inducen factores de transcripcin especficos en los LT. La enzima es fosforilada por ZAP-70 y por otras cinasas, como la cinasa de la familia Tec llamada Itk. La PLC 1 fosforilada cataliza la hidrlisis de un fosfolpido de la membrana plasmtica denominado PIP2, generando dos productos de escisin, IP3 y DAG. IP3 difunde a travs del citosol hasta el retculo endoplsmico donde se une a su receptor y estimula la liberacin de los depsitos de calcio secuestrados en sistemas de membrana. La salida del calcio del RE activa un canal inico de la membrana plasmtica activado por los depsitos, denominado canal CRAC que facilita la entrada del calcio extracelular. El calcio citoslico libre acta como molcula transmisora de seales al unirse a una protena reguladora ubicua dependiente de calcio denominada calmodulina. Los complejos calcio-calmodulina activan a varias enzimas, incluyendo una serina/treonina-fosfatasa denominada calcioneurina. El DAG activa la enzima PKC mediante la induccin de un cambio conformacional que hace que el sitio cataltico de la cinasa sea accesible al sustrato. La isoforma PKC0 est localizada en la sinapsis inmunitaria y participa en la activacin y translocacin nuclear del factor de transcripcin del factor nuclear kB (NF-kB), mediante un complejo protenico trimrico formado por dos protenas que se identificaron en tumores linfticos (MALT1 y Bcl-10) y una tercera llamada CARMA1. Las enzimas generadas por la transmisin de seales del RLT activan factores de transcripcin que se unen a regiones reguladoras de numerosos genes de los linfocitos T y de esta forma potencian la transcripcin de genes. Tres factores transcripcin que son activados en los LT por el reconocimiento del antgeno y son crticos para la mayora de las respuestas de los LT son: el factor nuclear de los LT activados (NFAT), AP-1 y NF-Kb. NFAT es un factor de transcripcin necesario para la expresin de los genes de IL-2, IL-4, TNF y otras citosinas. NFAT1 y NFAT2 son los tipos que se encuentran en los linfocitos T. NFAT est presente en una forma inactiva, con la serina fosforilada, en el citoplasma de los linfocitos T en reposo. Es activado por la fosfatasa dependiente de calcio-calmodulina calcineurina. AP1 es un factor de transcripcin que se encuentra en muchos tipos celulares; es activado especficamente en los LT por seales mediadas por el RLT. AP-1 es realmente el nombre de una familia de factores de unin al ADN. El factor AP-1 mejor caracterizado est formado por las protenas Fos y Jun. Las seales inducidas por el RLT llevan a la aparicin de AP-1 activo en el ncleo de los LT. NF-kB es un factor de transcripcin que es activado en respuesta a seales del RLT y es esencial para la sntesis de citosinas. En los LT en reposo, NF-kB est presente en el citoplasma formando un complejo con otras protenas denominadas inhibidores de kB, que bloquean la entrada de NF-kB al ncleo. Las seales del RLT dan lugar a la fosforilacin de la serina de IkB y despus a su ubicuitinacin y degradacin protemica. Las seales de coestimulacin suministradas por los receptores, como CD28, cooperan con las seales del RLT para potenciar la activacin de los factores de transcripcin.

Atenuacin de las seales de los LT La transmisin de seales inhibidoras en los LT est mediada por diversos mecanismos que incluyen el reclutamiento de tirosina fosfatasas como SHP-1, la activacin de receptores inhibidores de la familia CD28 y el reclutamiento de protenas conocidas como E3 ubicuitina ligasas que marcan a ciertas molculas transmisoras de seales para su degradacin. La capacidad de CTLA-4 de inhibir las respuestas de los LF se descubri en estudios que analizaron los efectos de los anticuerpos anti-CTLA-4 sobre las respuestas de los LT frente a los antgenos propios y extraos. La mayora del CTLA-4 asociada a las clulas puede inhibir competitivamente la capacidad de CD28 de unirse a las molculas B7, o CTLA-4 puede reclutar una fosfatasa (SHP-2) hasta las sinapsis y de esta forma bloquear la fosforilacin normal de las cadenas asociadas al RLT. El otro receptor inhibidor de la familia de CD28 que tiene cada vez ms inters en los LT es PD-1. PD-1 tiene dos ligandos, PD-L1 y PD-L2, que son homlogos a B7-1 y B7-2, y son inducidos en las clulas dendrticas activadas, los monocitos y otros muchos tipos celulares. La cola citoplasmtica de PD-1 contiene estructuras tirosnicas inhibidoras, incluyendo una estructura ITIM (motivo inhibidor del inmunorreceptor basado en la tirosina) y un ITSM (motivo de cambio de inmunorreceptor basado en la tirosina) que pueden contribuir al

reclutamiento de tirosina fosfatasas como SHP-1 y SHP-2 que pueden atenuar la transmisin de seales de los LT. Las porciones de ubicuitina unidas a las protenas las marcan para su degradacin, pero en algunos casos esta modificacin tambin puede potenciar la transmisin de seales sin marcar las protenas para su degradacin. Se piensa que varias ligasas E3 median la degradacin dirigida de molculas transmisoras de seales especficas, y estas protenas E3 son, por tanto, componentes importantes de la maquinaria celular que atena la transmisin de seales de los LT. Cuando los adaptadores LAT y SLP-76 son fosforilados en sus tirosinas y reclutados hasta el sealosoma del receptor de los LT, la ligasa E3 Cbl-b puede ser reclutada tambin hasta el complejo. Cbl-b da lugar a la monoubicuitinacin, endocitosis t degradacin lisosmicas del complejo receptor de LT, y este puede ser un mecanismo importante para la atenuacin de la transmisin de seales del RLT. Las seales de CD28, mediante la activacin de Vav y de la va de Rac, bloquean la actividad inhibitoria de Cbl-b y de esta forma amplifican las seales del RLT.