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UNIVERSIDAD DEL QUINDIO, FACULTAD CIENCIAS BSICAS, PROGRAMA DE BIOLOGIA, LABORATORIO DE BIOLOGIA CELULAR.

PRACTICA # 3 TANSPORTE PASIVO Y TRANSPORTE ACTIVO. JURADO, E; CASTILLO, L.


RESUMEN El transporte celular permite que se lleven a cabo procesos de intercambio de molculas del espacio intracelular al espacio extracelular y viceversa. Cuando se lleva a cabo experimentos en los que se demuestra el transporte pasivo los cuales no requieren de energa para que la sustancia cruce la membrana plasmtica, se puede observar que este paso se lleva a cabo en muchos procesos naturales de la naturaleza y de la vida de un organismo. De igual manera el transporte activo se da como motor de utilizacin de fuente de energa en forma de ATP que finalmente pasa a convertirse en ADP. Gracias a la existencia de estos procesos, podemos llevar a cabo una vida equilibrada en los rangos de lo natural, ya que las plantas pueden llevar a cabo su fotosntesis, los animales que se alimentan de las plantas pueden llevar a cabo sus procesos metablicos, y por consiguiente nosotros tambin llevamos a cabo estos mismos procesos. Por lo tanto, el transporte celular permite que la clula se encuentre en equilibrio con el medio externo. Palabras Clave Transporte celular, membrana plasmtica. Abstract Cellular transport allows processes to be carried out exchange of molecules from the intracellular into the extracellular space and vice versa. When carrying out ATP, energa, experiments that show the passive transport which do not require energy for the substance to cross the cell membrane can be seen that this step is performed in many natural processes of nature and life of an organism. Similarly active transport engine is given as sources of energy use in the form of ATP that ultimately go on to become ADP. Thanks to the existence of these processes, we can make a balanced life in the range of natural, since plants can carry out photosynthesis, animals that eat plants can carry out their metabolic processes, and therefore we also carry out these same processes. Therefore, cellular transport allows the cell to be in equilibrium with the external environment. Keywords Cellular transport, ATP, energy, plasma membrane.

Introduccin La membrana plasmtica regula el intercambio de substancias con el exterior, lo cual hace posible que la clula mantenga su integridad estructural y funcional. Esta regulacin depende de las interacciones entre la membrana y los materiales que pasan a travs de ella. Esta es permeable a sustancias como el agua, el oxigeno y el dixido de carbono que se mueven a travs de ella por simple difusin. Otras molculas utilizadas o que son producidas por la clula no tienen la capacidad de difundirse por la

membrana, ya que su tamao o su polaridad hacen que este proceso no sea posible. Por consiguiente uno de los medio por los cuales se pueden transportar es e transporte pasivo que es el mecanismo en el que se mueven las molculas dentro de las clulas. Uno de los factores que limita ms el tamao de las clulas es su dependencia a este mecanismo de transporte, siendo un proceso lento, pero con distancias cortas, en distancias largas es menos eficaz (Bernstein y Bernstein- 1998)De esta forma para tener un buen rendimiento en el transporte pasivo no solo requiere una distancia corta, sino que tambin es necesario un gradiente de concentracin siendo este movindose de las regiones de concentracin ms alta a regiones de concentracin ms baja. Siendo un ejemplo claro son las molculas de un perfume que se escapan de una botella abierta alejndose una en una continuando las molculas el proceso de transporte pasivo hasta dispersarse uniformemente a lo largo de todo el saln. Las molculas o iones que se encuentran muy unidos se hallen entre ellas muchas ms colisiones teniendo una gran probabilidad de que reboten en la regin. La frecuencia ms alta de colisiones en regiones de concentracin ms alta mueve estos materiales a las regiones de concentracin ms baja. Por lo tanto el transporte pasivo a travs de la membrana no requiere protenas transportadoras de membrana ni un gasto de energa por parte de la clula. Este proceso se caracteriza por ser lento pero se puede acelerar elevando la

temperatura (los movimientos que se ejecutan con gran rapidez llevan a mas colisiones) y por aumento del gradiente de concentracin. Por otra parte otro mtodo de transporte en las clulas es el transporte activo en el cual el movimiento de los materiales a travs de la membrana de regiones de baja concentracin a regiones de alta concentracin es decir, va en contra del gradiente de concentracin. Este se caracteriza por la necesidad de tener una protena transportadora de membrana, tambin requiere un gasto de energa por parte de la clula ya que los materiales que estn en movimiento van en direccin opuesta a lo normal. Las protenas de transporte tiene el fin de transportar materiales de un lado al otro de la membrana (Curtis. 1995). Estas tienen la caracterstica de ser especficas para un tipo de materia en particular. Algunas sustancias inicas tambin pueden cruzar la membrana plasmtica por difusin, pero empleando los canales constituidos por protenas integrales llenas de agua. Algunos ejemplos notables son el Na+, K+, HCO3, Ca++, etc. Debido al pequeo tamao de los canales, la difusin a travs de estos es mucho ms lenta que a travs de la bicapa fosfolipdica. El transporte activo se puede dividir en: a) primario cuando est directamente relacionado a una reaccin qumica como la hidrlisis del ATP, b) donde las protenas de la especie en contra del gradiente electroqumico est ensamblada al transporte de otra especie a favor de dicho gradiente, de modo que la capacidad absoluta de la energa libre es lo suficientemente alta para impulsar

el transporte de ambas. Cabe destacar que el transporte puede ser uniporte cuando solo se transporta una molcula, simporte cuando en el mismo sentido se transporta dos molculas y antiporte cuando se transportan dos molculas en sentido contrario. Al tomar un ejemplo claro de transporte activo es la bomba de sodio-potasio, ya que la mayora de clulas mantienen unos gradientes muy fuertes de iones sodio (Na+) y potasio (K+) en su membrana plasmtica. La concentracin de Na+ exterior de la clula puede ser hasta a14 veces la concentracin interna de la clula. En contra posicin, la concentracin de K+ dentro de la clula es, segn el tipo de clula, una 10 a 30 veces mayor que la concentracin externa. Los gradientes de concentracin ya mencionados tienen un papel de gran importancia para mantener el equilibrio osmtico y controlar el volumen celular, se alcanza gracias al trabajo realizado por un sistema de transporte activo llamado bombo de sodio-potasio.

Reconocer la cacusa por la cual se requiere energa en uno de los mecanismos. METODOLOGIA TRANSPORTE PASIVO Para comenzar el procedimiento de transporte pasivo como primera medida se recort un cuadro de papel celofn, se arrugo y se meti en agua caliente luego de 1 minuto se saco y se dejo enfriar. Aparte se tomo un embudo de vidrio y se le coloco el papel celofn y se aseguro con una banda de caucho evitando as de esta forma que entrara o saliera sustancias. Por otra parte se preparo una solucin de almidn y sal al 10% y se llevo dentro del embudo con la ayuda de una pipeta, luego se traslado a un beaker el cual contena agua destilada y cubra hasta la mitad del papel celofn. De esta menar se tomaron de una forma inmediata 2 muestras cada una de 2ml y se del agua destilada contenida en el beaker, luego se pusieron en un tubo de ensayo cada una, relazndoseles de manera posterior una prueba de almidona y de sal a cada uno de los tubos de ensayo. La prueba de almidn se efecto adicionando 10 gotas de Lugol a uno de los tubos de ensayo y se tuvo como conocimiento previo que si daba una coloracin azul violeta esta prueba seria positiva. Tambin se realizo la prueba que dio presencia de de sal se ejecuto adicionando 1 ml de HNO3 luego se hirvi durante 2 minutos, se dejo enfriar y se agrego 4 gotas de AgNO3 de 0.2M teniendo en cuenta que una respuesta positiva seria un precipitado de color blanco.

OBJETIVO GENERAL Identificar el proceso de transporte pasivo y transporte activo. OBJETIVOS ESPECIFICOS Establecer diferencias entre el transporte activo y pasivo. Identificar qu tipo de molculas se transporta por transporte activo y transporte pasivo.

Ahora bien, luego del procedimiento que se realizo, se dejo el montaje funcionando la durante 30 y 60 minutos ms y se llevo a cabo de nuevo todo el transcurso de deteccin del almidn y de sal. Los resultados que se obtuvieron de esta experiencia se consignaron en una tabla de datos donde se pusieron las respectivas presencias positivas o negativas al almidn y la sal. TRANSPORTE ACTIVO Para este procedimiento se utilizo levadura como un modelo de membrana puestos que estos en su interior celular son acidas. Primeramente se preparo 60ml de una solucin de levadura al 4% esto se reparti para tres grupos de laboratorio la cual se diluyo en Na2CO3 al 0.3%. Luego se tomaron 12 tubos de ensayo a los cuales se les adiciono ciertas sustancias descritas en la siguiente tabla:
T to Cian uro 0.2 % 1 gota Na2 CO3 20 got as Solu cin leva dura 20gt as Roj o Fe nol 20 go tas 92 o C 2 mi n 37 0 C 30 mi n HC L 0.2 5M 20 got as NaO H 0.02 5M 20 gota s

8 9 1 0 1 1 1 2

+ + + + +

+ + + + +

+ + +

+ + + + +

+ + -

+ +

En los tubos 1, 2,5 y 6 fueron fundamentales para el proceso de anlisis con el resto de los tubos que se marcaron con el nmero de tratamiento correspondiente, tambin fue de gran importancia conocer conocimientos bsicos sobre el fenol. Se centrifugaron los tubos de ensayo a 3000rpm durante 5 minutos. Cuando se finalizo el proceso se puedo observa ciertos colores en los precipitados que se produjeron (clulas de levadura) y el sobrenadante y se llevaron estas observaciones a una tabla de datos. RESULTADOS Y DISCUSION TRANSPORTE PASIVO El transporte pasivo es el intercambio simple de molculas de una sustancia a travs de la membrana plasmtica en el cual no hay gasto de energa. Al realizar este procedimiento en el laboratorio utilizamos un papel celofn para simular la actuacin de la membrana plasmtica y como es el paso de molculas en ella. Al agregar la solucin de almidn y sal al 10% dentro de la membrana de forma inmediata se tomo una muestra del agua destilada del beaker donde estaba puesta (Img. 1.0), como resultado al realizar la prueba de almidn y de sal dio negativo.

1 2 3 4 5 6 7

+ +

+ + -

+ + + + +

+ + + + +

+ + + -

+ + + + + + +

Luego se dejaron pasar 30 minutos y se realizo de nuevo la prueba de sal y de almidn dando positivo para la sal y negativo para el almidn. Tambin se realizo la misma prueba 60 minutos despus de colocar el montaje y resulto positivo para la sal con mayor precipitado blanco (a la prueba de 30 minutos) y para el almidn de nuevo dio negativo. Estos resultados se muestran en la tabla 1.0.
Sustancia 0 minutos 30 minutos 60 minutos sal Negativo Positivo positivo Almidn Negativo Negativo Negativo

selectiva al paso de las sustancias. Cabe destacar que esta es semipermeable de igual forma los poros de la membrana son demasiados pequeos para permitir el paso de molculas de gran tamao como lo es el almidn. TRANSPORTE ACTIVO El transporte activo puede mover solutos dentro de la clula o fuera de ella, pero la energa es siempre usada para mover el soluto en contra del gradiente de concentracin. Al realizar esta prctica se utilizo la levadura como un modelo de la membrana celular observando como resultado en cada uno de los tubos de ensayo si las sustancias aadidas a la levadura entraron o no a esta. De esta manera los tubos 1, 2 (Img.2.0) permitieron adquirir una informacin clara de que la membrana a cierta temperatura acta de determinada manera y en los tubos 5 y 6 (Img.2.0) se puedo observar que al agregarle Na2CO3 que es una sustancia utilizada para nivelar o colocar neutro el pH, el rojo carmes que dio como color demuestra que tiene un pH bsico pero en otros tratamientos el color dio amarillo-naranja y amarillo demostrando que tiene cidos (9 y 10). Pudo determinar que la membrana es selectiva, y requiere de energa en este proceso para permitir el paso cmo el sodio, los resultados se pueden observar en la tabla 2.0.
tratamiento Color del sobrenadante Blanco Color del precipitado Beige

Tabla 1.0: Resultados de transporte pasivo

Imagen 1.0: Montaje del la prueba.

Esto permite solucin a muchas preguntas como Por qu la membrana dejo pasar con ms facilidad la sal y no al almidn? La respuesta a este interrogante es que la membrana es

2 3 4 5

Blanco Rojo Rojo Rojo

Beige Beige Rojo Rojo carmes No hay precipitado Beige Rojo carmes Beige Beige

molculas de una sustancia a travs de la membrana plasmtica, durante el cual no hay gasto de energa aportada de la clula, esto nos permite dar una conclusin clave sobre el paso de la sal que es ms fcil que el del almidn. Tambin identificamos el momento en que ocurre el transporte activo, el cual se pude dar como consecuencia de la hidrlisis o por acoplamiento del movimiento de una sustancia por otra, y este funciona en contra del gradiente de concentracin. Para el traspaso de sustancias de gran peso molecular es necesario que la clula tenga energa para ejercer este proceso. Tambin es de gran importancia destacar que el laboratorio permiti observar que la clula necesita de varios procesos de transporte como transporte activo y pasivo ya mencionados puesto que no todas las sustancias logran a travesar la membrana puesto que influye el tamao de las molculas, los ionizacin y el tamao del poro segn el tipo de membrana que sea. BIBLIOGRAFIA Bernstein, R. y Bernstein S. 1998. Biologa. Editorial McGRAW-HILL INTERAMERICANA, S.A.

Rojo

7 8

Salmon Rojo

9 10

Naranja AmarilloNaranja AmarilloNaranja Naranja

11

Beige

12

Beige

Tabla 2.0: Resultados de transporte activo.

Imagen 2.0: Resultados transporte activo. CONCLUSIONES Con la realizacin de esta prctica logramos conocer cmo acta y como es el funcionamiento del transporte pasivo, con el cual nos pudimos dar cuenta es el intercambio simple de

Curtis, H. 1995. Invitacin a la Biologa. Editorial MDICA PANAMERICANA, S.A. Vol. 5. ANEXOS INVESTIGACION ROJO DE FENOL El rojo de fenol existe como cristal rojo que sea estable en aire. Su solubilidad es 0.77 gramos por el litro (g/l) en agua

y 2.9 g/l adentro etanol.[1] Es a cido dbil con pKa = 8.00 en 20C. Una solucin del rojo de fenol se utiliza como a indicador del pH: su color exhibe una transicin gradual de amarillo al rojo sobre la gama 6.6 a 8.0 del pH. Sobre pH 8.1, el rojo de fenol da vuelta a un color de rosa brillante (fucsia) color. Rojo de fenol (indicador del pH) debajo de pH 6.6 6.6 sobre pH 8.0 8.0

sulfuro que es parte de un grupo cclico, similar a la estructura de phenolphthalein.[1][3] Sin embargo, esta estructura cclica no se poda confirmar cerca Cristalografa de la radiografa.[4] Varios indicadores comparten una estructura similar al rojo de fenol, incluyendo azul del bromothymol, azul del thymol, prpura del bromocresol, thymolphthalein, y phenolphthalein. (La tabla de A de otros indicadores qumicos comunes est disponible en el artculo encendido indicadores del pH.) Prueba de Phenolsulfonphthalein

Este cambio observado del color es porque el rojo de fenol pierde los protones (y color de los cambios) como el pH aumenta. En forma cristalina, y en la solucin bajo condiciones muy cidas (pH bajo), el compuesto existe como a zwitterion segn lo en la estructura demostrada arriba, con sulfato el grupo carg negativamente, y cetona grupo que lleva un protn adicional. Esta forma se escribe a veces + simblicamente como H2 Picosegundo y es naranja-rojo. Si se aumenta el pH (pKa = 1.2), el protn del grupo de la cetona se pierde, dando por resultado el ion negativamente cargado HPS del amarillo. En pH ms alto inmvil (pKa = 7.7), fenol grupo del hidrxido pierde su protn, dando por resultado el ion rojo picosegundo2.[2] En varias fuentes, la estructura del rojo de fenol se demuestra con el tomo del

El rojo de fenol fue utilizado en prueba del phenolsulfonphthalein, tambin sabido como la prueba de PSP. Esta prueba fue utilizada para estimar la sangre total atraviesa rin y es obsoleto ahora. La prueba se basa en el hecho de que el rojo de fenol est excretado casi enteramente en la orina. Midiendo la cantidad de rojo de fenol excret colorimtrico, la funcin del rin puede ser determinada.[5] Se administra la solucin del rojo de fenol intravenoso, todo el orina producido se recoge y se determina el presente del rojo de fenol.

UNIVERSIDAD DEL QUINDIO, FACULTAD CIENCIAS BSICAS, PROGRAMA DE BIOLOGIA, LABORATORIO DE BIOLOGIA CELULAR. PRACTICA # 1