EXITABILIDAD CELULAR Y EVENTOS IONICOS QUE DETERMINAN LA POLARIDAD DE LA MEMBRANA Todos los sistemas biolgicos son capaces de detectar

las variaciones energticas que ocurren en el medio que los rodea. Esta caracterstica de detectar cambios energticos del medio y reaccionar ante ellos constituye una de las principales propiedades de los sistemas biolgicos, y se le denomina irritabilidad. Las variaciones energticas (mecnicas, qumicas, elctricas, trmicas, lumnicas) son los estmulos Un estimulo es un factor externo o interno capaz de provocar una reaccin en una clula u organismo. En el caso de los estmulos externos, puede tratarse de cambios fsicos, qumicos, mecnicos o de otra ndole que pueden llamar a los receptores, los cuales pueden transmitir esta percepcin al sistema nervioso de los seres vivos, constituyen una informacin y desencadenan en ellos una respuesta. Los estmulos que llegan a los seres vivos son muy variados, pero a pesar de su diversidad todos se caracterizan por ser especficos, es decir, que cada estmulo solo puede ser recogido por un rgano especial, el receptor, o por tener una determinada intensidad o umbral para que sean capaces de estimular adecuadamente a los rganos receptores, y al ser captados constituyan una informacin para los seres vivos. En cuanto a la sensibilidad lo que podemos decir es que se trata de una facultad del ser vivo de percibir estmulos externos e internos a travs de los sentidos. En fisiologa, es la funcin del sistema nervioso que permite detectar a travs de los rganos sensoriales las variaciones fsicas o qumicas que provienen del interior del individuo o de su medio externo. La sensibilidad se hace consciente en el cerebro como experiencia subjetiva. El que las clulas tengan una capacidad de respuesta a los estmulos del medio ambiente ssignifica que la clula posee mecanismos fisiolgicos en su membrana plasmtica que le permiten captar estmulos fsicos-qumicos del medio ambiente y elaborar una respuesta favorable a cada tipo de estmulo percibido. Toda clula sea Procariota o Eucariota realiza la funcin fisiolgica de Sensibilidad o Irritabilidad (capacidad de relacionarse con el medio externo). Por ejemplo: las clulas del Tallo poseen un Fototropismo (capacidad para orientarse hacia la luz solar), en este caso la Luz Solar acta como un estmulo fsico del medio externo que hace que las clulas que forman el Tallo y las Hojas crezcan en la misma direccin que la Luz solar, las clulas que forman la Raz poseen un Geotropismo+(capacidad que poseen de ser atradas por la Humedad y la Tierra), en este caso la Humedad y las partculas del Suelo actan como estmulos fsicos haciendo que las clulas que forman la Raz crezcan en sentido contrario al Tallo. La membrana plasmtica que forma la nica clula de los Protozoos (Ameba, Paramecio) posee receptores qumicos que le permiten captar estmulos qumicos- fsicos del agua y elaborar respuestas favorables a cada uno de los estmulos percibidos, los receptores qumicos permiten detectar cambios de PH, Salinidad, etc. Un recetor es la estructura de un ser vivo que detecta diferentes estmulos del medio como el tacto, sonido, luz, dolor, fro y calor y los transmite al sistema nervioso de ah surge el impulso nervioso. Hay dos tipos de impulso elctrico y qumico. Los receptores pueden ser:

mecanorreceptores ( tctiles, como pacini) termorreceotores ( rufini y krause) nociceptores (terminaciones nervisosas libres) son los de dolor quimiorreceptores (papilas gustativas) electromagnticos: Responden a la luz que llega a la retina

Es decir, un estimulo seria la luz que llegara hasta sus receptores los conos (receptor electromagntico) y viajara como impulso elctrico para realizar una respuesta: la imagen. Cada tipo de receptor es muy sensible a la clase de estmulos para los que ha sido diseado, pero es casi insensible a otras. Todos los receptores sensitivos comparten una caracterstica: cualquiera que sea el tipo de estmulo que excite el receptor, su efecto inmediato es un cambio del potencial elctrico de la membrana. Los distintos receptores pueden excitarse de diversas maneras para originar los potenciales del receptor: 1. Por deformacin mecnica del receptor, la cual distiende la membrana del receptor y abre los canales inicos. 2. Por aplicacin de una sustancia qumica a la membrana, que tambin abre los canales inicos. 3. Modificando la temperatura de la membrana, lo que altera su permeabilidad. 4. Por los efectos de la radiacin electromagntica, con lo que cambian de forma directa o indirecta las caractersticas de la membrana y se favorece el paso de los iones a travs de los canales. A travs de las membranas de casi todas las clulas del organismo existen estos potenciales elctricos. Adems algunas clulas, como las nerviosas y musculares son excitables, es decir capaces de autogenerar impulsos electroqumicos rpidamente cambiantes en sus membranas. La causa primordial del cambio del potencial de membrana consiste en una modificacin de la permeabilidad de la membrana del receptor, que permite la difusin ms o menos rpida de los iones a travs de la membrana y la consiguiente modificacin del potencial transmembranal. FUNDAMENTOS DEL POTENCIAL DE MEMBRANA EN REPOSO

Se denomina potencial de membrana en reposo (PMR) de una clula, a la diferencia de potencial elctrico (diferencia de voltaje) a travs de la membrana plasmtica, cuando la clula no esta activa.

El interior de la clula suele ser relativamente negativa con respecto al lquido extracelular. El PMR es muy importante ya que de este depende la excitabilidad de la clula.

Es importante recordar algunos principios fisicoqumicos bsicos que dan lugar a la generacin y mantenimiento del PMR de una clula.

POTENCIAL DE DIFUSION

Si tenemos dos compartimentos A y B el compartimiento A tiene potasio (K+) a una concentracin de 10 mEq/L y en el B sodio (Na+) a una concentracin de 10 mEq/L , separados por una membrana permeable exclusivamente al ion potasio ( figura 1).

Si en este momento se mide la diferencia de potencial (voltaje) tendremos un equilibrio de cargas en ambos lados por lo que el voltaje seria de cero. Pero en el momento en que empieza a difundir el ion permeable las condiciones de nuestro sistema cambian generando un movimiento de potasio del compartimiento A al compartimiento B quedando nuestro sistema como se ve en la figura 2.

Cuando la membrana es permeable para un ion determinado provoca que este se mueva siguiendo su gradiente de concentracin generando una diferencia de cargas en ambos compartimentos, este fenmeno se conoce como potencial de difusin.

. . . K+ (10 mEq/L) . . . Na+ (10 mEq/L)

. . .

Figura 1. Esquema que muestra el equilibrio entre el compartimiento A y el compartimiento B. No existe diferencia de potencial ya que en ambos compartimientos se encuentra la misma cantidad de cargas.

. . . K+ (5 mEq/L) (-) . . . . (+) K+ (5 mEq/L) Na+ (10 mEq/L)

Figura 2. En el esquema se muestra la generacin de un potencial de Difusin que es generado cuando solamente uno de los iones es permeable a la membrana celular.

En el ejemplo de la figura 2 se genera una diferencia de potencial generada por la Difusin del potasio del compartimiento A al compartimiento B por lo que deja al compartimiento A con menor cargas positivas (parcialmente negativo (-)) y al compartimiento B con un exceso de cargas positivas (parcialmente positivo (+)).

EQUILIBRIO DE GIBBS-DONNAN

Las clulas en su citoplasma contienen protenas, polifosfatos orgnicos, cidos nucleicos y otras sustancias ionizadas que son impermeables a la membrana celular y se encuentran cargadas, generalmente con cargas negativas.

El hecho de que no puedan atravesar la membrana provocan que se generen en la clula cambios constantes, lo que origina que la clula siempre trate de mantener un equilibrio de elctrico (el numero de cargas negativas es igual al numero de cargas positivas) en cada uno de sus compartimientos (2). En condiciones fisiolgicas normales el equilibrio de Gibbs-Donnan no tiene gran relevancia clnica, pero en condiciones patolgicas cobra una gran importancia, ya que los iones no difusibles generan cambios importantes en el movimiento de los iones difusibles y el agua. Al final del capitulo mencionaremos algunos ejemplos en los que se encuentra involucrado este mecanismo.

Para poder entender mejor la generacin del equilibrio de Gibbs-Donnan tomaremos el ejemplo anterior, solamente agregaremos el ion impermeable y veremos como se comporta la clula.

. . . 10 K+ 10 PROT. . . . . . 10 K+ 10 Cl-

Figura 3. La figura muestra dos compartimientos que mantienen un equilibrio de cargas en cada uno de ellos.

Como podemos ver en la figura 3, tenemos dos compartimientos en los que se encuentran equilibradas la cantidad de cargas (10 cargas positivas y 10 cargas negativas) en cada uno de los compartimientos, solamente que en el compartimiento A las cargas negativas son de protenas y en el compartimiento B estn dadas por el cloro. Si suponemos que la

membrana es permeable nicamente al potasio y al cloro, cmo quedara el sistema despus de un cierto tiempo?

El potasio se encuentra en equilibro y los que tienen concentraciones diferentes son el cloro y las protenas, pero como las protenas no puede difundir por ser impermeables, el cloro es el primero que empieza a moverse del compartimiento B al A, vamos a suponer que un cloro se mueve en esa direccin, esto va a generar un desequilibrio de cargas ya que en el compartimiento B va haber 10 cargas (+) y solo 9 cargas (-) y en el compartimiento A va haber 11 cargas (-) y solo 10 cargas (+) en este momento la clula presenta un desequilibrio elctrico. Este gradiente elctrico parcial negativo en el compartimiento A hace que una carga de potasio se empiece a mover en la direccin de este (del compartimiento B al A) lo que genera la formacin de un nuevo equilibrio elctrico (no de concentracin). Ahora el compartimiento A tiene 11 cargas positivas y 11 cargas negativas y el compartimiento B tiene 9 cargas positivas y 9 cargas negativas (figura 4), por lo que la clula alcanz un nuevo equilibrio elctrico, este nuevo equilibrio como lo comentamos, es generado por los iones impermeables a la membrana celular.

. . . 11 K+ 10 PROT1 Cl. . . . . . 9 K+ 9 Cl-

Figura 4. En la figura podemos observar un nuevo equilibrio elctrico en cada uno de los compartimientos. Este nuevo estado de la clula es provocado por los iones no difusibles a la membrana.

ECUACIN DE NERNST

Todos los iones que se mueven a travs de canales ionicos activados por voltaje tienden a moverse hasta alcanzar su equilibrio elctrico esto es que llega un momento en el cual no hay un movimiento neto de este ion. Nosotros podemos calcular este potencial para cada uno de los iones, asumiendo que la membrana es permeable para dicho ion, para esto utilizamos la ecuacin de Nernst la cual nos dice que:

E= -RT/ZF ln Ci/Ce

Podemos clarificar esta ecuacin de la siguiente manera si mantenemos la temperatura constante y cambiamos el logaritmo natural a un logaritmo de base 10, por o que nos quedara de la siguiente manera:

E(ion)= -2.3 RT/ZF log10 Ci/Ce Donde: E= potencial de equilibrio para el ion. 3. RT/F= constante (60 mV a 37 0C) Z= carga del ion (+1 para el Na; +2 para el Ca; +1 para el potasio; -1 para el Cl) Ci= concentracin intracelular del ion Ce= concentracin extracelular del ion

Dicho de otra forma, la ecuacin de Nernst convierte la diferencia de concentracin de un ion en voltaje.

Por convencin el potencial de membrana se expresa como potencial intracelular en relacin al potencial extracelular. Por lo tanto una diferencia de potencial a travs de la membrana de 90 mV significa que el interior de la clula es 90 mV negativo con respecto al exterior. (3) Los valores promedio de los potenciales de equilibrio de los iones ms importantes son:

ENa+= +65 mV ECa+2= +120 mV

EK+= -85 mV ECl-= -90 mV

POTENCIAL DE MEMBRANA EN REPOSO:

Con los conceptos anteriores podemos ahora entender que es y como se genera el potencial de membrana en reposo (PMR). El PMR es la diferencia de potencial que existe a travs de la membrana de las clulas excitables, en el periodo entre potenciales de accin (valga la redundancia, cuando esta en reposo).

La generacin del PMR se establece gracias a la formacin de potenciales de difusin que son el resultado de las diferencias de concentracin de los iones en uno y otro lado de la membrana celular. Cada ion permeable genera una fuerza electromotriz tratando de llevar el PMR a su propio potencial de equilibrio. Por lo que el o los iones mas permeables son los que participan en mayor parte en la formacin del PMR y los menos permeables su contribucin es mnima o nula.

Cuando la clula se encuentra en reposo SU MEMBRANA ES PERMEABLE CASI EXCLUSIVAMENTE AL POTASIO, POR LO QUE LA SALIDA DE ESTE ION AL ESPACIO EXTRACELULAR GENERA EN MAYOR PARTE LA FORMACION DEL PMR DE LAS CELULAS EXCITABLES.

Una manera de evaluar la contribucin de cada ion al potencial de membrana en reposo es utilizar la ecuacin de conductancia del cable, que pondera el potencial de equilibrio para cada ion, segn su conductancia relativa. Un enfoque alternativo para las mismas cuestiones aplica la ecuacin de Goldman, que considera la contribucin de cada ion por su permeabilidad relativa y no por su conductancia. La ecuacin de conductancia del cable se escribe de la manera siguiente: (3)

Em= gK+/gT (EK+) + gNa+/gT (ENa+) +gCl-/gT (ECl-) + gCa+2/gT (ECa+2)

Debido a que la participacin del sodio, calcio y cloro es mnima esta ecuacin se reduce a la del potencial de equilibrio para el potasio ya que este ion es el que tiene la mayor permeabilidad.

El valor negativo que se le da al interior de la clula es convencional ya que de acuerdo a el equilibrio de Gibbs-Donnan la clula tiende a mantener la misma cantidad de cargas negativas y positivas en ambos lados de la membrana pero para poder diferenciar los dos compartimientos se tomo en cuenta la salida de potasio por lo que esto dejaba parcialmente negativa el interior de las clulas, adems de que en el interior tambin hay gran cantidad de protenas que se encuentran cargadas negativamente, pero esto es solo para poder diferenciar ambos lados de la membrana, por lo que no te quedes con la idea de que hay solamente cargas negativas dentro y positivas fuera de la membrana.

Adems de la salida de potasio de la clula tambin la pequea contribucin de la permeabilidad de los otros iones y de forma por dems importante esta la funcin de la bomba de Na+/K*ATPasa.

La bomba genera una pequea diferencia electrognica debido a su esteoquimetra ya que como recordaras la bomba saca mueve diferentes cantidades de carga hacia un lado y otro de la membrana (3 iones Na+ hacia fuera de la clula y 2 iones K+ hacia dentro de la clula). Adems hay una contribucin indirecta ya que mantiene el gradiente de concentracin para el potasio a travs de la membrana celular, gradiente que por su parte genera potenciales de difusin del K+ que llevan el potencial de membrana hacia el potencial de equilibrio del K+. Por lo tanto se requiere de la bomba Na+/K+ ATPasa para generar y conservar el gradiente de concentracin del K+ que establece el PMR.

POTENCIAL DE ACCION:

Cuando a una clula excitable en reposo, se le da un estimulo umbral, esta generara una respuesta en su PMR. Este cambio brusco del voltaje intracelular se conoce como Potencial de Accin (PA) (figura 5). El PA genera una inversin del potencial de forma breve pero que puede llevarlo a valores de voltaje positivos. Los mecanismos ionicos que originan el PA fueron objeto de estudio por largo tiempo. En 1949 Hodgkin y katz postularon que el PA es un cambio breve en la permeabilidad predominante en la membrana, para pasar del K+ al Na+. Esta conclusin fue posible gracias a que Hodgkin y Huxley estudiaron en forma exhaustiva las permeabilidades inicas de la membrana del axn gigante de calamar mediante una tcnica revolucionaria el Voltage-clamp, estudio que les mereci el premio Nbel de Medicina y fisiologa en 1952 (4) y posteriormente en 1963 por sus aportaciones sobre los mecanismos ionicos involucrados en la excitacin y en la inhibicin de las clulas nerviosas.

[pic] Sir John Carew Eccles

[pic] Alan Lloyd Hodgkin

[pic] Andrew Fielding Huxley The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1963 "For their discoveries concerning the ionic mechanisms involved in excitation and inhibition in the peripheral and central portions of the nerve cell membrane" Tomado de: http://www.fbmc.fcen.uba.ar/~26-22007/5A.%20Potencial%20de%20accion.pdf

El potencial de accin tiene varias caractersticas: amplitud y forma, propagacin y respuesta de todo o nada. (3)

Amplitud y forma: Cada potencial de accin normal para una determinada clula tiene un aspecto idntico, se depolariza hasta el mismo potencial y se repolariza nuevamente hasta el mismo potencial de reposo. Propagacin: un potencial de accin en un sitio depolariza los sitios adyacentes, arrastrando el potencial de esos sitios hasta el umbral. La propagacin de los potenciales de accin desde un sitio al siguiente ocurre sin decremento. Respuesta de todo o nada: un potencial de accin puede ocurrir o no. Si una clula excitable se despolariza hasta el umbral de una manera normal, entonces la aparicin de un potencial de accin es inevitable. Por otro lado, si la membrana no se despolariza hasta el umbral, no puede ocurrir potencial de accin ninguno. (3)

El PA se origina cuando el estimulo en la clula permite que los canales de sodio se abran, por lo que entra de forma progresiva el sodio al interior de la clula haciendo que el interior se vuelva positivo. Este cambio en el PMR de la clula se conoce como despolarizacin, esta despolarizacin continua hasta que los canales de sodio se inactivan por el voltaje (el estado inactivado es diferente al cerrado como se puede apreciar en la figura 5). Posteriormente la salida de potasio hace que la clula regrese a su potencial de

reposo (repolarizacion) lo cual permite que los canales de sodio pasen del estado inactivado al cerrado nuevamente y queden disponibles para poder abrirse nuevamente y generar otro PA. Es importante saber que si los canales de sodio no se cierran (que queden inactivados) es muy difcil que la clula pueda generar potenciales de accin, por lo que la clula incluso genera una pequea hiperpolarizacin (lleva su PMR a un valor mas negativo del normal) para asegurarse de que los canales de sodio queden cerrados.

[pic]

Figura 5. El esquema muestra un potencial de accin, as como las corrientes inicas que intervienen en la generacin de este. En la parte inferior se puede apreciar los estados por los que transitan los canales de sodio y potasio en cada una de las fases del PA.

PERIODO REFRACTARIO:

Una de las propiedades muy importantes del PA es su refractariedad, el cual no permite la generacin de otro PA hasta un tiempo determinado. En general se manejan dos periodos refractarios: el relativo y el absoluto.

Periodo refractario absoluto (PRA): Durante este periodo, no se puede generar ningn PA no importando la magnitud del estimulo. El fundamento de este comportamiento, es que, durante este lapso la mayora de los canales de sodio se encuentran inactivados, por lo que ningn estimulo permite que se abran.

Periodo refractario relativo (PRR): durante este lapso si es posible generar una respuesta (un PA), pero generalmente solo si se aplica un estimulo mayor al normal. Esto se fundamenta nuevamente sobre la corriente de sodio, ya que despus de cierto tiempo en la que la repolarizacion permite que una cierta cantidad de canales de sodio salgan de su estado de inactivacin y se cierren y de esta forma se puede generar un PA.

PROPAGACIN DE POTENCIAL DE ACCION:

La funcin del potencial de accin es la de propagarse de una clula a otra para generar una respuesta. Por lo que es importante saber como se propaga un potencial en una fibra nerviosa y que factores pueden modificar su propagacin.

La velocidad con que viajan los potenciales de accin a lo largo del nervio o de la fibra muscular es la velocidad de conduccin. Esta informacin es importantsima ya que determina la velocidad a la cual se puede transmitir informacin en el sistema nervioso. Esta velocidad esta determinada por dos conceptos: la constante de longitud y tiempo. Estos conceptos fueron obtenidos de la ecuacin del cable ya que de esta forma se explica como los nervios y el msculo se conducen de forma similar a un cable que conduce electricidad. La constante de tiempo ((): es el tiempo que debe transcurrir despus de la inyeccin de corriente para que el potencial de accin cambie a 63% de su valor final. Y se calcula con la formula:

( = RmCm

Donde:

( = constante de tiempo Rm = resistencia de la membrana Cm = capacitancia de la membrana

La constante de tiempo es mayor cuando la Rm y Cm son altos y viceversa. (3)

La constante de longitud ((): es la distancia desde el sitio donde se inyecta la corriente hasta el punto donde le potencial ha descendido 63% de su valor original. La constante de longitud indica que tan lejos se propaga una corriente despolarizante a lo largo del nervio. Esta determinada por la siguiente formula:

( ( Rm/Ri

Donde: ( = constante de longitud Rm = resistencia de la membrana Ri = resistencia interna

La constante de longitud es mayor (es decir la corriente viaja mas lejos) cuando el dimetro del nervio es grande, cuando la resistencia de la membrana es alta y cuando la resistencia interna es baja. (3)

Por lo tanto la velocidad de conduccin en el nervio va a estar dado por dos factores importantes: el dimetro del nervio y la cantidad de mielina que tenga.

Dimetro del nervio: a mayor dimetro del nervio la velocidad ser mayor debido a que la resistencia interna disminuye. Los nervios mas gruesos poseen la constante de longitud mas larga y las corrientes viajan ms lejos desde la regin activa hasta propagar PA.

Mielinizacin: la mielina es un lpido aislante de las fibras nerviosas que incrementa la resistencia de la membrana, en consecuencia, cuando se inyecta una corriente despolarizante al interior de un nervio mielinizado no puede fluir a travs de la va de alta resistencia de la membrana de la clula nerviosa; en su lugar, viaja por su interior donde la resistencia al flujo de corriente es menor. Es importante conocer que a intervalos de 1 a 2 mm la vaina de mielina presenta aberturas a nivel de los nodos de Ranvier. En estos nodos, la resistencia de la membrana es baja, la corriente puede fluir a travs de la membrana y pueden generarse potenciales de accin, lo cual genera lo que se conoce como conduccin saltatoria. (3)

INTEGRACION DE LOS PROCESOS DE MEMBRANA

SECRECION DE INSULINA

En el proceso de secrecin de insulina podemos integrar los procesos que se llevan a cabo a nivel de la membrana celular, con la ayuda del esquema realiza una explicacin donde integres los mecanismos de transporte con la excitabilidad celular.

[pic]

BIBLIOGRAFA:

1. Coro A. C., (1996). Fisiologa celular. Un enfoque biofsico. Textos cientficos. Benemrita Universidad Autnoma de Puebla. Primera edicin. Puebla, Mx. Unidad 3, pp. 135-136. 2. Berne R. M. Y Levy M. N. (2006). Fisiologa. Elsevier-Mosby. Cuarta edicin. Madrid, Espaa. 3. Costanzo L. S. (2000). Fisiologa. McGraw-Hill Interamericana. Primera edicin. Mxico D.F. pp. 17-30. 4. Silverthorn D. U. (2008). Fisiologa Humana. Un enfoque integrado. Cuarta edicin. Editorial Mdica Panamericana. Buenos Aires, Argentina.