reas e conceitos bsicos

A Toxicologia a cincia que tem como objeto de estudo o efeito nocivo decorrente da interao entre um agente txico e um sistema biolgico, com a finalidade principal de prevenir o aparecimento desse efeito, ou seja, estabelecer condies seguras de exposio a essas substncias e assim, permitir que o homem se beneficie das conquistas tecnolgicas da era atual. A toxicologia apia-se, ento, em trs elementos bsicos: 1. a existncia de uma substncia (agente txico) capaz de interagir com um sistema biolgico e produzir uma resposta; 2. o sistema biolgico com o qual o agente txico interage para produzir o efeito; 3. a resposta (efeito) que dever ser considerada nociva ao sistema biolgico com o qual interage. Toxicologia Ambiental e Ecotoxicologia: essa rea do conhecimento toxicolgico preocupa-se com o estudo das aes e dos efeitos nocivos de substncias qumicas, quase sempre de origem antropognica, sobre os organismos vivos. Em geral, empregam-se os termos Toxicologia Ambiental para os estudos dos efeitos diretos causados pela interao desses agentes contaminantes do ambiente (ar, gua, solo) com o organismo humano e, Ecotoxicologia, para os estudos dos efeitos txicos desses compostos sobre os ecossistemas e seus componentes no humanos. Como o homem se encontra no topo de muitas cadeias alimentares e existem poucos ecossistemas nos quais os seres humanos no participam, essa distino , portanto, bastante frgil.

Agente txico, toxicante ou xenobitico: uma substncia qumica ou agente fsico capaz de causar dano a um sistema biolgico, alterando seriamente uma funo ou levando-o morte, sob certas condies de exposio. A maioria das substncias consideradas como agentes txicos so exgenas, sem papel fisiolgico conhecido e denominadas xenobiticos. Outros termos que merecem ser mencionados so apresentados abaixo. Toxina: substncia txica produzida por um organismo vivo (microrganismo, animal ou planta). Veneno: termo de uso popular que, embora em princpio possa ser utilizado como sinnimo de agente txico, costuma ser reservado especificamente para designar substncias de origem animal ou vegetal, utilizadas para autodefesa ou comportamento predatrio, como o caso dos venenos de cobras, abelhas, e outros.

Qualquer substncia pode atuar como toxicante. Tanto os produtos exgenos como os prprios constituintes do organismo, quando se encontram em propores excessivas, podem produzir efeitos nocivos. Os agentes txicos apresentam estruturas qumicas

variadas e podem ser classificados utilizando-se diferentes critrios, conforme a finalidade de seu estudo. Assim, o toxicante pode ser classificado segudo: 1. estruturas qumicas gerais: aminas aromticas, hidrocarbonetos alifticos, hidrocarbonetos aromticos, metais, etc. 2. estado fsico: slidos, lquidos, gases, vapores, partculas, etc. 3. estabilidade ou reatividade qumicas: explosivos, inflamveis, oxidantes, radioativos, etc. 4. rgos-alvo dos efeitos txicos: nefro, neuro, hepatotxicos, por exemplo. 5. Toxicidade local ou sistmica (a sistmica necessita de absoro e distribuio) 6. efeitos txicosos: carcinognicos, mutagnicos, neurotxicos, nefrotxicos, etc. 7. usos: agrotxicos, solventes, aditivos alimentares. 8. mecanismos de toxicidade: anticolinestersicos, metemoglobinizantes, etc. 9. potencial de toxicidade: extremamente txicos, moderadamente txicos, levemente txicos, pouco txicos.

Toxicidade: a capacidade, inerente a uma substncia, de produzir danos aos organismos vivos, ou seja, a medida relativa do potencial txico da substncia sob certas condies controladas de exposio. Uma substncia muito txica pode causar dano a um organismo se for administrada em quantidades muito pequenas, enquanto que uma substncia de baixa toxicidade somente produzir efeito txico quando a quantidade administrada for muito grande. O conhecimento da toxicidade das substncias qumicas se obtm atravs de experimentos em laboratrio, utilizando-se animais. Os mtodos so empregados com todo rigor cientfico, com a finalidade de fornecer informaes relativas aos efeitos txicos e, principalmente, para se avaliarem riscos que possam ser extrapolados para o ser humano.

Risco e segurana:

O termo risco traduz a probabilidade estatstica de que se produzam efeitos adversos ou danos por exposio a um agente txico, em virtude das propriedades inerentes ao mesmo, bem como das condies de exposio. Nem sempre a substncia de maior toxicidade a que oferece maior risco para o homem. Dependendo das condies de uso ou exposio, uma substncia classificada como muito txica (elevada toxicidade intrnseca) pode ser menos apresentar menor risco do que uma pouco txica. Por exemplo, embora o tolueno seja um solvente carcinognico, no oferece risco se estiver adequadamente armazenado. Quando o risco txico absoluto de um agente txico associado a caractersticas de exposio, pode-se falar em perigo. A existncia de risco associado ao uso de uma substncia qumica, torna necessrio o estabelecimento de condies de segurana. Portanto, define-se como segurana a certeza de que no haver efeitos adversos quando um indivduo exposto a uma determinada substncia, em quantidade e forma de exposio especficas. Risco percebido, ou relativo, implica o risco txico da substncia nas condies especficas de cada indivduo ou de cada populao. Efeito txico: uma alterao anormal, indesejvel ou nociva, decorrente da exposio a substncias potencialmente txicas. Todo efeito txico indesejvel e nocivo, mas nem todos os efeitos indesejveis so txicos. A morte o efeito adverso mais drstico que pode ocorrer. Alvo: o termo usado com freqncia para designar o stio ou local onde o agente txico exercer suas aes. Intoxicao: o conjunto de efeitos nocivos, representados por manifestaes clnicas (sinais e sintomas) ou laboratoriais que revelam o desequilbrio orgnico produzido pela interao entre o agente txico e o sistema biolgico. Fases da intoxicao: Fase I Exposio: corresponde ao contato do agente txico com o organismo. Representa a disponibilidade qumica das substncias e passveis de serem introduzidas no organismo. Fase II Toxicocintica: consiste no movimento do agente txico dentro do organismo. composta pelos processos de absoro, distribuio, biotransformao e excreo. Todos esses processos envolvem reaes mtuas entre o agente txico e o organismo, conduzindo disponibilidade biolgica (biodisponibilidade). Fase III Toxicodinmica: corresponde ao do agente txico no organismo. Atingindo o alvo, o toxicante ou o seu produto de biotransformao interage biologicamente causando alteraes morfolgicas e/ou funcionais, produzindo danos. Fase IV Clnica: caracterizada pelas manifestaes clnicas e/ou laboratoriais resultantes da ao txica no organismo.

Fase I Exposio
Esta fase representada pelo perodo em que o ser humano fica exposto substncia

txica. o contato do toxicante com as superfcies externas ou internas do organismo. Nessa etapa, de suma importncia a disponibilidade qumica do agente txico, ou seja, a concentrao da substncia em condies de ser introduzida no organismo. Alm da magnitude, devem-se considerar tambm a durao e a freqncia da exposio, as vias de introduo e a suscetibilidade individual. Dose ou concentrao: A dose ou concentrao determina o tipo e a magnitude da resposta biolgica. Por definio, dose a quantidade de um agente administrado para um indivduo e, geralmente, expressa usando-se unidades de massa por massa (ex, mg de agente txico / kg de peso corpreo). O termo concentrao aplica-se exposio do indivduo a uma determinada concentrao de um agente presente em um compartimento (ex, solo, gua, ar). Neste caso, no se sabe exatamente quanto do agente efetivamente penetrou no organismo (por isso no se pode falar em dose). A concentrao expressa em unidades de massa por volume do meio (ex, mg de agente txico / m3 de ar; mg de agente txico / litro de gua, mg de agente txico / m3 de solo), mas tambm pode ser por massa do meio (ex, mg de agente txico / g de solo). A concentrao tambm comumente expressa atravs das unidades ppm (partes por milho) ou ppb (partes por bilho). Para facilitar, geralmente se usa apenas o termo dose, mas no se deve esquecer de que, se a exposio for ambiental, o termo correto concentrao. Com relao dose, podem-se definir: Dose efetiva 50 (DE50): Trata-se da quantidade de substncia (em mg, g ou mL por Kg de peso corporal) que, em condies bem determinadas, produz um determinado efeito na metade de um grupo de animais de certa espcie. Dose letal mdia (DL50): a dose calculada, em mg/Kg, de um determinado agente qumico ou Fsico necessria para matar 50% dos organismos vivos de uma populao de animais, sob um conjunto de condies definidas. Os agentes qumicos podem ser classificados, segundo cinco classes de toxicidade, de acordo com os valores de DL50:

Categorias de Toxicidade DL50 oral para ratos: Extremamente txica < ou = 1mg/kg Altamente txica > 1 a 50 mg/kg Moderadamente txica > 50 a 500 mg/kg Levemente txica > 0,5 a 5 g/kg Praticamente no txica > 5 g/kg Esta classificao utilizada para consultas rpidas, qualitativas, com a finalidade de se Obterem informaes relativas toxicidade intrnseca das substncias. A falha desta classificao est no fato dela se basear apenas na toxicidade intrnseca da substncia, sem levar em conta as condies da exposio e as do organismo alvo, Em situaes prticas no se deve conhecer somente a toxicidade das substncias, representadas geralmente pela DL50, pois to importante como conhecer a toxicidade dos agentes conhecer as condies nas quais se d a exposio a eles, bem como as caractersticas especficas dos organismos expostos.

Vias ou locais de exposio: As principais vias de introduo dos toxicantes no organismo humano, no contexto da Toxicologia ambiental, compreendem o trato gastrintestinal (ingesto), os pulmes (inalao) e a pele (cutnea). A via de introduo pode influenciar na toxicidade da substncia qumica. Por exemplo, espera-se que um agente que destoxificado pelo fgado seja menos txico quando introduzido no organismo por via oral (passagem pela circulao porta) do que por inalao (circulao sistmica). A comparao da dose letal de um toxicante por diferentes vias de exposio tambm fornece informaes teis relacionadas sua absoro. Nos casos em que as doses letais por via oral e drmica so similares quela administrada por via intravenosa, pressupe-se que o agente pronta e rapidamente absorvido por essas vias. Por outro lado, quando a dose letal drmica muito maior que a dose letal oral, significa que a pele constitui uma barreira efetiva absoro do agente txico. As substncias qumicas penetram no organismo humano, a partir das vias de exposio, em velocidades diferentes dependendo de suas propriedades fsico-qumicas e das condies existentes na superfcie de contato como, por exemplo, a rea e a permeabilidade das membranas e o fluxo sangneo no local de contato.

Durao e frequncia da exposio: O tempo e a frequncia com que o organismo permanece em contato com o toxicante so importantes na determinao da intensidade do efeito txico. Em seres humanos, essas condies de exposio no so to claramente definidas como nos estudos conduzidos em animais, mas a classificao das exposies quanto a seu tempo de durao extrapolada desses estudos. Assim, as exposies podem ser classificadas como: exposio a curto prazo (aguda) quando o contato de curta durao e a absoro do toxicante rpida. A dose administrada pode ser nica ou mltipla, num perodo de tempo no superior a 24 horas; exposio a mdio prazo (subaguda)quando as exposies so frequentes, ou repetidas, num perodo que varia de 2 a 3 semanas at alguns meses. Outra forma de definir essa exposio restring-la a menos de 10% do tempo de vida total do indivduo. Por exemplo, um indivduo de 20 anos estaria exposto subagudamente a agentes com os quais teve contato por menos de 2 anos. exposio a longo prazo (crnica) quando as exposies se repetem durante um longo perodo de tempo (muitos meses, anos ou toda a vida). Alguns autores classificam como crnicas as exposies por tempos que variam entre 10 e 100% do tempo total de vida do indivduo.

Fase II Toxicocintica:
Nessa fase tem-se a ao do organismo sobre o agente txico, procurando diminuir ou impedir a ao nociva da substncia sobre ele. de grande importncia, porque dela resulta a quantidade de toxicante disponvel para interagir com o stio alvo e, consequentemente, exercer a ao txica. o caminho da substncia no organismo, at o seu local de ao. A fase toxicocintica constituda pelos seguintes passos:

 Absoro Distribuio Biotransformao Excreo A movimentao do agente txico no organismo, desde a sua entrada at a sua eliminao, envolve a transposio de membranas celulares. Assim, de suma importncia o conhecimento dos fatores que influenciam no transporte das substncias qumicas pelas membranas, os quais podem ser agrupados em duas classes distintas: -Fatores relacionados com a membrana: As membranas celulares tm espessura de 7 a 9 nm, em mdia e so constitudas por uma camada lipdica bimolecular, contendo em ambos os lados, molculas de protenas que penetram e s vezes transpem esta camada. Os cidos graxos presentes na camada lipdica no possuem uma estrutura cristalina rgida. Ao contrrio, em temperaturas fisiolgicas sua estrutura quase fluida. Assim, o carter fluido das membranas define a sua permeabilidade. Distribudas entre os lipdeos, h protenas, que algumas vezes podem formar poros ao longo da membrana, com gua em seu interior. Considerando-se as caractersticas das membranas celulares, as substncias podem atravess-las por diferentes mecanismos, apresentados a seguir: .Transporte passivo: Esse mecanismo dividido em dois subtipos: difuso passiva lipdica, em que as substncias lipoflicas se difundem pelos lipdeos das membranas e caminham entre as mesmas, e difuso passiva aquosa, em que substncias hidroflicas passam pelos poros formados pelas protenas de membrana. O transporte passivo, especialmente o lipdico, vai a favor do gradiente de concentrao (de reas com maior quantidade da substncia para reas com menor concentrao) e o mais importante, tanto na Farmacologia quanto na Toxicologia. Outras formas de transporte so: difuso facilitada, transporte ativo e pinocitose. Estrutura da membrana celular:

. Fatores relacionados com a substncia qumica: A passagem dos toxicantes atravs das membranas celulares, de natureza lipoprotica, ser grandemente determinada por suas propriedades fsico-qumicas. Entre elas destacam-se: #Solubilidade - devido constituio lipoprotica das membranas biolgicas, as substncias qumicas lipossolveis, ou seja, apolares, tero capacidade de transp-las facilmente, pelo processo de difuso passiva. J as substncias hidrossolveis no atravessam essas membranas, a no ser que tenham pequeno tamanho molecular e possam ser filtradas, atravs dos poros aquosos. A hidrossolubilidade conferida molcula por grupamentos que permitem a formao de pontes de hidrognio com as molculas de gua em soluo como, por exemplo, os grupos hidroxila (-OH), carboxila (-COOH), amino (-NH2); sulfidrila (-SH) e carbonila (-C=O). A lipossolubilidade dada molcula pela presena de grupos alqulicos, fenlicos, naftlicos, etc. #Coeficiente de partio leo/gua - o parmetro que permite avaliar o grau de lipossolubilidade das substncias qumicas em relao sua hidrossolubilidade. Ou seja, dado pela relao lipossolubilidade/hidrossolubilidade. Este coeficiente obtido ao se agitar um agente qumico em uma mistura de solvente orgnico e gua (em condies de pH e temperatura controladas). As substncias polares, hidrossolveis, concentram-se na fase aquosa e as apolares, lipossolveis, na fase oleosa. o parmetro mais importante para se avaliar o caminho das substncias pelo organismo. #Grau de ionizao ou de dissociao a maioria dos agentes txicos comportam-se como cidos ou bases fracas, que possuem um ou mais grupos funcionais capazes de se ionizarem. A extenso desta ionizao depender do pH do meio no qual a substncia se encontra e do seu prprio pKa (capacidade de se dissociar). importante relembrar que a forma ionizada polar, hidrossolvel e com pouca ou nenhuma capacidade de transpor membranas por difuso passiva pela fase lipdica. O grau de ionizao das substncias, em diferentes pH, poder ser obtido atravs da aplicao da equao de Henderson-Hasselbach, para cidos fracos e bases fracas. De modo geral, em meio cido os cidos fracos se encontram preferencialmente na forma molecular, mais lipoflica e mais capaz de atravessar membranas, enquanto que as bases fracas comportam-se dessa mesma forma em meio bsico. importante, tambm, lebrar de que essa ionizao se d de forma reversvel em cidos e bases fracos e, portanto, os conceitos de equilbrio qumico aplicam-se aqui.

Absoro. A absoro pode ser definida como o processo por meio do qual o agente txico atravessa as membranas celulares para alcanar a circulao sangunea. Vias de absoro: distinguem-se como principais vias de introduo dos agentes txicos no organismo: -Via oral, digestiva ou trato gastrintestinal (TGI): uma vez no TGI, um agente txico poder sofrer absoro desde a boca at o reto, geralmente pelo processo de difuso passiva. Poucas substncias sofrem a absoro na mucosa oral, porque o tempo de contato pequeno nesse local. Estudos feitos experimentalmente, no entanto, mo stram que a cocana, a estricnina, a atropina e vrios opiides podem sofrer absoro na mucosa bucal. Esta absoro dependente,principalmente, do coeficiente de partio leo/gua (quanto maior este coeficiente

mais fcil a absoro) e resulta em nveis sanguneos elevados, j que as substncias no sofrero a ao dos sucos gastrintestinais. No sendo absorvido na mucosa oral, o toxicante poder sofrer absoro na poro do TGI onde existir a maior quantidade de sua forma no-ionizada (lipossolvel). Para se conhecer a frao da substncia no-ionizada, ou aquela apta a sofrer absoro por difuso passiva, utiliza-se a equao de Handerson-Hasselbach. Um dos fatores que favorecem a absoro intestinal de nutrientes e xenobiticos a presena de microvilosidades, que proporcionam grande rea de superfcie. Embora a grande maioria dos agentes txicos sofram absoro no TGI por difuso passiva, muitas substcias sero absorvidas por processos especiais, mais precisamente por transporte ativo. Exemplos: o chumbo absorvido por transporte ativo e utiliza o sistema que transporta o clcio, o tlio transportado pelo sistema carregador responsvel pela absoro de ferro, etc. Esses casos sero estudados em aulas especficas. Fatores que interferem na absoro pelo TGI: Alm das propriedades fsico-qumias dos toxicantes, j discutidas, outros fatores Podero interferir na absoro: estado de plenitude ou vacuidade gastrintestinal: a absoro ser favorecida se o estmago estiver vazio, devido ao maior contato do toxicante com a mucosa. importante considerar a apresentao do produto (slida ou lquida). Alimentos com elevado teor gorduroso como o leite e o tipo de veculo utilizado na formulao podem facilitar a absoro de substncias lipossolveis; concentrao enzimtica e acidez: estes sucos digestivos, seja por sua acidez inica, seja por ao enzimtica, podem provocar mudanas na atividade ou na estrutura qumica do agente, alterando assim a velocidade de absoro. Ex.: o pH estomacal das crianas possui menor acidez que o dos adultos. Isto implica em um desenvolvimento maior de microrganismos, principalmente a Escherichia coli, bactria que reduz, no estmago, o nitrato a nitrito. Como as crianas possuem dietas ricas em nitratos, estes sero reduzidos a nitritos, que so rapidamente absorvidos pela mucosa estomacal, o que pode ocasionar metemoglobinemia; motilidade gastrintestinal: a alterao do tempo de esvaziamento gstrico e da motilidade intestinal (pelo toxicante ou alimentos) poder aumentar ou diminuir o tempo de contato do agente txico com a mucosa e, consequentemente, a absoro nesse local. Deve-se considerar ainda, a capacidade da substncia de provocar irritao e vmito; efeito de primeira passagem pelo fgado: as substncias absorvidas no estmago e duodeno entram na circulao porta e passam pelo fgado, podendo ser biotransformadas de maneira mais ou menos intensa. Este efeito pode ser responsvel pela menor biodisponibilidade de algumas substncias, quando estas so administradas por via oral. Alguns fatores que interferem na absoro pelo TGI podem variar de acordo com o sexo e, no feminino, entre as gestantes e no gestantes. Este fato importante na avaliao da intensidade de absoro de xenobiticos por essa via. -Via cutnea A pele um rgo formado por mltiplas camadas de tecidos e contribui com cerca de 10% de peso corpreo. No estado ntegro, a pele constitui uma barreira efetiva contra a

penetrao de substncias qumicas exgenas. No entanto, alguns xenobiticos podem sofrer absoro cutnea, dependendo de fatores tais como a anatomia e as propriedades fisiolgicas da pele e das propriedades fsico-qumicas dos agentes. A pele formada por duas camadas, a epiderme que a camada mais externa da pele a derme, que formada por tecido conjuntivo e onde se encontram vasos sangneos, nervos, folculos pilosos, glndulas sebceas e sudorparas. Estes trs ltimos elementos da derme permitem o contato direto com o meio externo. As substncias qumicas podem ser absorvidas, principalmente, atravs das clulas epidrmicas ou folculos pilosos. Absoro transepidrmica: a absoro dos agentes qumicos pela pele tem sua velocidade limitada pela regio crnea da epiderme, mais precisamente pelo extrato crneo contnuo, formado por queratina. As substncias lipossolveis penetram por difuso passiva atravs dos lipdios existentes entre os filamentos de queratina, sendo a velocidade desta absoro indiretamente proporcional viscosidade e volatilidade do agente. J as substncias polares, de baixo peso molecular, penetram atravs da superfcie externa do filamento de queratina, no estrato hidratado. A absoro transepidrmica o tipo de absoro cutnea mais freqente, devido ao elevado nmero de clulas epidrmicas existente, embora no seja uma penetrao muito fcil para os toxicantes. Absoro transfolicular: a absoro nessa regio menos significativa do que a transepidrmica. Algumas substncias qumicas podem penetrar pelos folculos pilosos, alcanando rapidamente a derme. uma penetrao fcil para os agentes qumicos, uma vez que eles no necessitam cruzar a regio crnea. Qualquer tipo de substncia qumica, seja ela lipo ou hidrossolvel, ionizada ou no, gs ou vapor, cida ou bsica, pode penetrar pelos folculos. uma via de absoro tambm importante para alguns metais. Fatores que interferem na absoro cutnea: 1. Fatores relacionados ao organismo: superfcie corprea: a superfcie corprea total no homem maior do que na mulher (mdia de 1,70 a 1,77 m2 no homem e de 1,64 a 1,73 m2 na mulher). Este fato pode aumentar a absoro transepidrmica no homem (maior superfcie de contato com o xenobitico); volume total de gua corprea: quanto maior o volume aquoso corpreo, maior a hidratao da pele e consequentemente, a absoro cutnea. Quando comparado mulher, o homem possui maior volume aquoso total, extra e intracelular, o que favorece a absoro cutnea. Este fato deve ser considerado, tambm, quando se compara mulheres grvidas e no grvidas. As gestantes apresentam maior volume aquoso corpreo e, em conseqncia, maior hidratao do extrato crneo. Isto possibilita maior absoro cutnea de xenobiticos; abraso da pele: com a descontinuidade da pele, a penetrao torna-se fcil; fluxo sangneo atravs da pele: deve-se considerar a vascularizao das reas expostas, uma vez que, quanto mais vascularizada a regio, maior o fluxo sangneo no local. Estudos demonstram que, em mdia, 5% do sangue bombeado pelo corao passa pela pele, com fluxo em torno de 120 mL/kg/min. Inflamao ou fatores que levam hiperemia aumentaro a absoro cutnea. Durante a gestao tambm ocorrem aumentos significativos no fluxo sangneo das mos (em at 6 vezes) e ps (at 2 vezes), o que poder influenciar a absoro cutnea de xenobiticos nas gestantes expostas;

 queimaduras qumicas e/ou trmicas: apenas as leves ou moderadas, j que as severas destroem totalmente o tecido, formando uma crosta de difcil penetrao; pilosidade: nas reas em que existem plos, a absoro cutnea pode ser 3,5 a 13 vezes maior do que nas regies glabras. 2. Fatores relacionados ao agente qumico (j discutidos anteriormente): volatilidade e viscosidade; grau de ionizao; tamanho molecular. Via respiratria, pulmonar ou inalatria: A via respiratria de suma importncia para a Toxicologia Ambiental. Muitas intoxicaes so decorrentes da aspirao de substncias contidas no ar. A superfcie pulmonar total de aproximadamente 90 m2, a superfcie alveolar de 50 a 100 m2 e o total de rea capilar cerca de 140 m2. O fluxo sangneo contnuo exerce uma ao de dissoluo muito boa e muitos agentes qumicos podem ser absorvidos rapidamente a partir dos pulmes. Os agentes passveis de sofrerem absoro pulmonar so os gases e vapores e os aerodispersides (partculas). O coeficiente de partio ar/gua e o ar/leo, bem como o tamanho das partculas alteram a absoro por essa via, que ser estudada com detalhe em aulas posteriores.

Distribuio Entende-se por distribuio de um agente txico a ao de transportar o toxicante at o seu stio alvo. Aps entrada do agente txico na corrente sangunea, atravs da absoro ou por administrao direta, ele estar disponvel para ser transportado pelo organismo com diferentes destinos. Fatores que afetam a distribuio: normalmente a distribuio ocorre rapidamente e as suas velocidade e extenso dependero do fluxo sanguneo, do coeficiente de partio leo/gua, do grau de ionizao, da permeabilidade das membranas e da afinidade do tecido pelo composto. Esses fatores so agrupados em duas categorias. Fatores ligados substncia: coeficiente de partio e grau de ionizao (j discutidos) afinidade qumica do agente durante a distribuio, o agente alcanar o seu stio alvo, que o rgo ou tecido onde exercer sua ao txica, mas, poder, tambm, se ligar a outros constituintes do organismo, concentrando-se em algumas partes do corpo. Em alguns casos, estes locais de maior concentrao so tambm os stios de ao e disto resulta efeitos altamente prejudiciais. o caso do monxido de carbono para o qual o sangue representa, tanto o local de concentrao quanto o de ao txica. Felizmente para o homem, a maioria dos toxicantes atingem seus maiores nveis em locais diferentes do stio alvo (exemplo: Pb armazenado nos ossos e atua nos tecidos moles). Este acmulo do agente txico em outros locais que no o de ao, funciona como uma proteo ao organismo, uma vez que previne uma elevada concentrao no stio alvo. Os agentes txicos nos locais de concentrao esto

em equilbrio com sua forma livre no sangue e, quando a concentrao sangnea diminui, o agente que est concentrado em outro tecido liberado para o sangue. Ligao s protenas plasmticas. Vrias protenas do plasma podem se ligar a constituintes endgenos (ex.: cidos graxos, triptofano, hormnios, bilirrubinas, etc.) e tambm aos xenobiticos. A principal protena, sob o ponto de vista da ligao a xenobiticos, a albumina. O elevado peso molecular das protenas plasmticas impede que o complexo toxicante protena plasmtica atravesse as membranas dos capilares restringindo-o ao espao intravascular. Assim, enquanto ligado s protenas plasmticas, o agente txico no estar disponvel para a distribuio no espao extravascular. Deve-se observar, no entanto, que esta ligao reversvel (geralmente feita por pontes de hidrognio, foras de van der Waals, ligao inica) e, medida que o agente livre se difunde atravs da membrana capilar, a frao ligada se dissocia das protenas tornando-se apta para ser distribuda. Esta ligao atua, portanto, graduando a distribuio dos xenobiticos e, consequentemente, a chegada ao stio de ao. Membranas ou barreiras de excluso: -Barreira Hematoenceflica: a chamada barreira hematoenceflica, que protege o crebro da entrada de substncias qumicas, constituda de clulas firmemente justapostas, o que dificulta enormemente a distribuio das substncias. -Barreira Hematoplacentria: protege o feto das substncias que circulam no sangue materno.

Biotransformao. Para reduzir a possibilidade de uma substncia desencadear uma resposta txica, o organismo apresenta mecanismos de defesa que buscam diminuir a quantidade da mesma que chega de forma ativa ao tecido alvo, assim como diminuir o seu tempo de permanncia em seu stio de ao. Para isso, necessrio diminuir a difusibilidade do toxicante e aumentar a velocidade de sua excreo. A propriedade fsica que facilita a absoro de muitos xenobiticos atravs da pele, pulmes e trato gastrintestinal, a lipofilicidade, constitui um obstculo sua eliminao, porque as substncias lipoflicas podem ser reabsorvidas e tendem a se acumular no organismo. Os compostos hidroflicos, por sua vez, apresentam absoro mais precria, e por isso so facilmente excretados pelos rins. Consequntemente, a eliminao de um xenobiico depende de sua converso para compostos hidrossolveis atravs de um processo conhecido como biotransformao, que catalisado por enzimas presentes no fgado e em outros tecidos. A biotransformao pode ocorrer atravs de dois mecanismos: a) mecanismo de ativao ou bioativao - que produz metablitos com atividade igual ou maior do que o precursor. Ex.: a piridina biotransformada no on N-metil piridnico que tem toxicidade cinco vezes maior que o precursor. O mesmo ocorre com o inseticida paration que biotransformado em paraoxon, composto responsvel pela ao txica do praguicida; b) mecanismo de desativao - quando o produto resultante menos txico que o precursor.

 comum encontrar-se na literatura cientfica, os termos metabolizao e destoxificao como sinnimos de biotransformao. Hoje, no entanto, utiliza-se o termo metabolismo para descrever o comportamento geral das substncias (endgenas e exgenas) no organismo, o que inclui absoro, distribuio, biotransformao e eliminao. Esse termo comumente usado para se referir biotransformao o que compreensvel, visto que os produtos da biotransformao de xenobiticos so conhecidos metablitos. Entretanto, a destoxificao no sinnimo de biotransformao. Isto porque, destoxificao significa diminuio de toxicidade e nem todas as reaes de biotransformao originam compostos menos txicos. As enzimas mais importantes para a biotransformao esto no fgado, num complexo denominado citocromo P450. Duas so as fases da biotransformao: fase I, com reaes de oxidao, reduo ou hidrlise, buscando aumentar a polaridade da substncia, e fase II, com reaes de conjugao (principalmente com glicuronato, sulfato e glutationa), que visa aumentar o tamanho da molcula, e, assim, sua polaridade. A biotransformao pode ser alterada por fatores como idade, sexo, doenas hepticas, uso de medicamentos, de lcool e estado nutricional do indivduo.

Excreo Os xenobiticos que penetram no organismo so, posteriormente, excretados atravs da urina, bile, fezes, ar expirado, leite, suor e outras secrees, sob forma inalterada ou modificada quimicamente. Este processo , muitas vezes, denominado "Eliminao", embora pelo conceito atual a eliminao envolva tambm o processo de biotransformao. A excreo pode ser vista como um processo inverso ao da absoro, uma vez que os fatores que facilitam a entrada do xenobitico no organismo, podem dificultar a sua sada. Basicamente existem tres classes de excreo: eliminao atravs das secrees, tais como a biliar, sudorpara, lacrimal, gstrica, salivar, lctea; eliminao atravs das excres, tais como urina, fezes e catarro; eliminao pelo ar expirado. O processo mais importante para a Toxicologia a excreo urinria. Excreo urinria: A filtrao glomerular um dos principais processos de eliminao renal e est intimamente ligado a um outro processo, que a reabsoro tubular. As substncias, aps serem filtradas pelos glomrulos, podem permanecer no lmem do tbulo e serem eliminadas, ou ento podem sofrer reabsoro passiva atravs da membrana tubular. Isto depender de alguns fatores, tais como o coeficiente de partio leo/gua, o pKa da substncia e o pH do meio. De modo geral, as substncias de carter bsico so eliminadas na urina cida e as substncias cidas na urina alcalina. Isto porque nestas condies, as substncias se ionizaro, tornando-se hidrossolveis e a urina , em sua maior parte, formada de gua. Outro processo de excreo renal a difuso tubular passiva. Substncias lipossolveis, cidas ou bsicas, que estejam presentes nos capilares que circundam os tbulos renais, podem atravessar a membrana por difuso passiva e carem no lmen tubular. Dependendo do seu pKa e do pH do meio, elas podem ou no se ionizar e, consequntemente, serem excretadas ou reabsorvidas.
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O terceiro processo de excreo renal a secreo tubular ativa. Existem dois processos de secreo tubular renal, um para substncias cidas e outro para as bsicas. Estes sistemas esto localizados, provavelmente, no tbulo proximal. A secreo tubular tem as caractersticas do transporte ativo, ou seja, exige um carregador qumico, gasta energia, um mecanismo competitivo e pode ocorrer contra um gradiente de concentrao. Algumas substncias endgenas, tais como o cido rico, so excretadas por este mecanismo e a presena de xenobiticos excretados ativamente pode interferir com a eliminao de substratos endgenos. A Penicilina um exemplo de xenobitico secretado ativamente pelos tbulos. O uso de Probenecid (frmaco excretado pelo mesmo sistema) evita que este antibitico seja secretado muito rapidamente do organismo. Geralmente, o que ocorre no organismo uma combinao dos trs processos de excreo renal, para permitir uma maior eficcia na eliminao dos xenobiticos. Excreo pela bile: Dentre as secrees orgnicas, a mais significativa para a excreo de xenobiticos a biliar. O fgado tem uma posio vantajosa na remoo de substncias exgenas do sangue, principalmente daquelas absorvidas pelo trato gastrintestinal. Isto porque o sangue proveniente do trato gastrintestinal, atravs da circulao porta, passa inicialmente pelo fgado, e somente depois entra na circulao sistmica. No fgado parte do xenobitico pode ser biotransformada e os metablitos ou mesmo o produto inalterado podem ser secretados pela bile no intestino. Existem trs sistemas de transporte ativo para a secreo de substncias orgnicas na bile: para substncias cidas, bsicas e neutras. quase certa a existncia de um outro sistema para os metais. Uma vez secretado no intestino, os xenobiticos podem sofrer reabsoro ou excreo pelas fezes. No se conhece o mecanismo que determina se a excreo ser urinria ou biliar. Esquematicamente, tem-se:

o chamado ciclo entero-heptico, e a morfina um exemplo tpico de xenobitico que apresenta esse ciclo. Ela conjugada com cido glicurnico no fgado e o glicurondio de morfina secretado pela bile no intestino. Neste local, pela ao da enzima glicuronidase, a morfina liberada e reabsorvida. O glicorondio que no for hidrolisado ser excretado pelas fezes. importante observar que os agentes txicos que apresentam recirculao entero-heptica, podem ter sua ao prolongada. Fatores que interferem na velocidade e na via de excreo: Via de introduo: a via de introduo interfere na velocidade de absoro, na de biotransformao e tambm na de excreo; Afinidade por elementos do sangue e outros tecidos: geralmente o agente txico na sua forma livre est disponvel excreo. Facilidade de ser biotransformada: com o aumento da polaridade a excreo urinria estar facilitada; Freqncia respiratria: em se tratando de excreo pulmonar, uma vez aumentando-se a freqncia respiratria, as trocas gasosas e a excreo ocorrero mais rapidamente.

 Funo renal: sendo a via renal a principal via de excreo dos xenobiticos, qualquer disfuno renal interferir na velocidade e na proporo de excreo.

Fase III Toxicodinmica.

Uma vez que o agente txico alcana o seu alvo em concentrao adequada, ele desencadear alteraes bioqumicas e fisiolgicas que sero responsveis pelo seu efeito deletrio. Algumas substncias precisam, antes, passar pela bioativao para ento desencadearem os efeitos txicos. A bioativao envolve a biotransformao da molcula original levando formao de um metablito txico. Assim sendo, os desencadeadores do efeito txico podem ser: Agente txico original: ex. chumbo, tetrodotoxina, cianeto; Metablito do agente txico: ex. fluorocitrato (metablito do fluoroacetato), cido oxlico (metablito do etilenoglicol); Espcies reativas de oxignio ou de nitrognio (radicais livres): ex: formao do radical hidroxila, desencadeada pelo herbicida paraquat. Compostos endgenos: ex. Bilirrubina, deslocada da albumina pela sulfonamida. Quanto ao modo de ao, os agentes txicos podem ser: Inespecficos: ex. cidos ou bases que atuam indistintamente sobre qualquer tecido, causando irritao e corroso nos tecidos de contato; Especficos: so mais seletivos e causam injrias em determinado(s) tecido(s), sem lesar outros. A suscetibilidade de determinado(s) tecido(s) deve-se presena de molculas nas quais o agente txico se liga. Essas molculas-alvo exercem importantes funes no organismo e podem ser enzimas, molculas transportadoras, canais inicos, protenas reguladoras, cidos nuclicos, etc. Logicamente, quanto menor for a distribuio da molcula-alvo pelo organismo, mais seletiva ser a ao do agente txico. Relao dose-resposta ou concentrao-resposta: Um conceito fundamental na Toxicologia o da relao dose-resposta, proposta por Paracelsus: Somente a dose correta diferencia o veneno do remdio." Ela correlaciona a exposio e a intensidade dos efeitos txicos produzidos. As curvas dose-resposta so construdas a partir de observaes feitas em estudos experimentais com animais ou clulas isoladas, bem como observao clnica ou epidemiolgica de humanos. Acredita-se que, quanto maior a dose, maior e mais intensos (quanti e/ou qualitativamente) sero os efeitos e que devem existir condies seguras de exposio, para a sade humana, com exceo das substncias mutagnicas. Mecanismos de toxicidade: Os mecanismos pelos quais os diferentes agentes txicos especficos produzem seus efeitos deletrios dependem dos alvos moleculares desses agentes, e podem ser agrupados em: 1. Alterao da expresso gnica;

2. Alterao qumica de protenas de membrana especficas (receptores de fatores de crescimento celular) 3. Alterao do funcionamento de clulas excitveis (canais inicos) 4. Prejuzo da sntese de ATP (receptores ligados a protenas Gs e Gi) 5. Aumento de clcio intracelular (receptores ligados protena Gq) 6. Induo de estresse oxidativo (radicais livres) Interaes. Geralmente, estamos expostos a uma mistura de substncias qumicas, e no a uma substncia isolada. Por exemplo, na gua de beber podemos encontrar pequenas quantidades de praguicidas, metais, solventes, produtos formados durante a clorao, etc. Logicamente, essas diferentes substncias qumicas podem interferir nos efeitos umas das outras, tanto os aumentando quanto os diminuindo. Esta interferncia chamada de interao. Apesar da comunidade cientfica reconhecer a existncia e a importncia deste fenmeno, a compreenso da toxicologia de misturas ainda est longe de ser atingida devido dificuldade de se preverem, quali e quantitativamente, as combinaes possveis. Existem tres mecanismos de interaes: Toxicocintica Ocorre quando um agente txico modifica a toxicocintica (absoro, distribuio, biotransformao ou a excreo) do outro. Como exemplo de uma interao toxicocintica que resulta varfarina e o antiinflamatrio fenilbutazona. A taxa de ligao da varfarina albumina de, aproximadamente, 98%, o que significa que somente 2% fica na forma livre (farmacologicamente ativa). Como a fenilbutazona tambm se liga albumina, na presena dela h um aumento da frao livre da varfarina, o que pode causar hemorragia fatal. Como exemplo de uma interao toxicocintica que resulta em diminuio de efeito, podemos citar a alcalinizao da urina com bicarbonato feita em pacientes intoxicados agudamente com barbituratos. Como o barbiturato um cido fraco, a elevao do pH urinrio pelo bicarbonato aumenta a frao do barbiturato na forma inica (polar) e, portanto, aumenta a taxa de eliminao do mesmo. Toxicodinmica Ocorre quando um agente modifica o efeito do outro por ligao aos seus receptores ou estruturas-alvo. Pode ser: antagonismo, quando um agente dificulta a ao do outro, ou sinergismo, quando um facilita a ao do outro. O lcool produz depresso do sistema nervoso central por aumentar a ligao do neurotransmissor inibitrio acido gama-aminobutrico (GABA) no receptor GABAA e por diminuir a ligao do neurotransmissor excitatrio glutamato no receptor NMDA. Os benzodiazepnicos tambm so drogas depressoras do sistema nervoso central que atuam aumentando a ligao do GABA no receptor GABAA. Assim, dizemos que a interao entre lcool e benzodiazepnicos toxicodinmica e resulta em um aumento do efeito dos dois compostos (sinergismo). Um outro exemplo de interao toxicodinmica a que ocorre entre opiides (morfina, herona) e a naloxona (Narcan). Os opiides produzem seus efeitos ligando-se a receptores opioidrgicos presentes no organismo. A naloxona um antagonista destes receptores, ou seja, liga-se a eles, no os estimula, mas impede os agonistas (morfina, herona) de se ligarem. Neste exemplo temos uma interao toxicodinmica que resulta em diminuio do efeito do agente txico, ou seja, antagonismo.

Qumica. Envolve uma interao qumica direta entre os dois agentes txicos. O exemplo clssico deste tipo de interao a que ocorre entre metais e agentes quelantes (dimercaprol, EDTA9, etc).