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UNIVERSITE DABOMEY CALAVI FACULTE DES SCIENCES TECHNIQUES DEPARTEMENT DE GENETIQUE MOLECULAIRE

Option : Chimie Biologie Gologie

Anne : CBG1

Prsent par : Vigan Jros

Nom du professeur : Dr AGBANGLA Clment

ANNEE ACADEMIQUE: 2012-2013

Tout sur la rplication du matriel gntique

PLAN
INTRODUCTION LA REPLICATION DE LADN I LADN se rplique de faon semi-conservative. II Sens de copie de lADN. III Vitesse de rplication de lADN. IV La rplication de lADN commence des sites prcis. V Rplication chez les procaryotes. VI La rplication chez les eucaryotes. VII Les rparations. VIII Les rarrangements. CONCLUSION

REFERENCE BIBLIOGRAPHIQUES

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Tout sur la rplication du matriel gntique INTRODUCTION Comment le matriel gntique se transmet de faon aussi exact e dune gnration une autre .En 1953 quand Watson et Crick ont dcrit la structure de lADN, ici une molcule bicatnaire avec appariement des bases, il est devenu vident quune matrice rgissait le transfert de linformation au cours des divisions successives Mais cette rplication est-elle conservative ? Ici une fois rpliqus les brins parentaux se rassocient ils entre eux ou avec les brins noforms ? Comment samorce cette rplication ? Comment avance-t-elle le long du chromosome ? Quelles sont les enzymes qui participent ce phnomne ? Y a-t-il des erreurs ? LADN ne peut servir de lien gntique que la squence nuclotidique est strictement reproduite. Do lutilit des fonctions rparatrices de la cellule. I LADN se rplique de faon semi-conservative. Exprience de Meselson-Stahl dan E.Coli + chromosomes mitotiques marqus au 3H. II Sens de copie de lADN. Comment la machinerie de rplication progresse-t-elle le long du duplex ? Il existe trois possibilits :

1/ Il existe deux origines de rplications et de bouts en croissance. Ce mcanisme est celui le plus utilis par les virus ADN linaire comme les adnovirus. Dans ce cas les extrmits des molcules dADN servent de point fixes pour lamorage et larrt de la rplication.

2/ Il peut exister une origine et une seule fourche de rplication qui migre dans un sens et ou les deux brins sont recopis.

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Tout sur la rplication du matriel gntique 3 / Il peut exister une origine mais deux fourches de rplication qui migrent dans les deux sens de sorte que les deux brins soit copi aux niveaux des deux fourches de rplication. Cest ce mode ci qui est utilis par la majorit.

Pour les chromosomes circulaires, ici bactries, les plasmides et certain virus, une origine de rplication suffit et les deux fourches qui en partent se confondent au ct oppos. En ce qui concerne les longs chromosomes eucaryotes, en gnrale ils comportent un grand nombre dorigines de rplication. Les deux fourches partent dune origine donne et progressent jusqu' ce quelles rencontrent les fourches parties dune origine adjacente. Chaque rgion copie par une origine de la rplication sappelle un REPLICON. Exprience avec alternance de milieu lourd 3H et lger. III Vitesse de rplication de lADN. Afin de dterminer la vitesse de progression des fourches de rplication des autoradiographies des fibres dADN de cellules marques pendant des laps de temps croissant. Un cycle de rplication de E.Coli est de 42min, sachant que le chromosome unique contient 4,4*106pb et quil est copi par deux fourches de rplication en mme temps, la vitesse de progression dune fourche est denviron 1000pb.s-1 par fourche. La vitesse de propagation des fourches dans les cellules humaines est de 100pb.s -1. Comme le gnome humain fait 3*109 Pb, et quil se rplique en 8 heures, il doit comporter au moins 1000 fourches de rplication. En fait les autoradiographies montrent quil y a entre 104 et 105 rplicons. IV La rplication de lADN commence des sites prcis. Origine de rplication = le tronon ncessaire et suffisant la rplication dun ADN. Les origines de rplication sont des squences formes de petites squences rptitives reconnues par des complexes se fixant lorigine essentielle dans lassemblage du
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Tout sur la rplication du matriel gntique complexe de rplication. Cette zone est flanque de squences riches en AT, disposition propice la dtorsion de lhlice bicatnaire. V Rplication chez les procaryotes. Il nexiste pas dADN polymrase qui puisse faire la synthse de 3 vers 5, toutes les ADN polymrase font la synthse de 5 en 3, et aucune ne peut amorcer de synthse de novo, ici sans amorce ADN ou ARN prexistantes. Au niveau du brin 53 la synthse est continue, il sagit du brin avanc ou prcoce. Au niveau du brin 35 la synthse se fait galement de 5 en 3 grce au fragment dOkasaki denviron 1000 nuclotides, il sagit du brin retard. Il y a une seule ADN polymrase de type III (mais deux sous unit) qui travaille sur les deux brins au niveau dune fourche de rplication. Les enzymes qui interviennent sont : Protine DnaA : qui se fixe lorigine de rplication et permet linitiation de la rplication en aidant louverture de lADN. ATP dpendante. 2 hlicases ou Protine DnaB : (une sur chaque brin) elles sparent progressivement les deux brins dADN par rupture des liaisons hydrognes. Elles sont ATP dpendante.

Protine DnaC : convoie DnaB au bon endroit. Une Gyrase : qui rduit les torsades formes par la progression de la fourche.

Une Droulasse ou protine SSB : elle fixe le simple brin ce qui permet la stabilisation pour viter que lADN ne se referme.

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Tout sur la rplication du matriel gntique Une Primasse : cest ARN polymrase ADN dpendante qui synthtise des amorces dune 10ne de nuclotides.

LADN Polymrase de type III : longation de 5 en 3 et de la correction sur preuve (2 sous unit une pour chaque brin). LADN pol I : qui limine les amorces ARN du brin retard par son activit exonuclasique 53 et comble le trou par son activit polymrase.

LADN ligase : qui lie entre eux les fragments dOkasaki. Protine Tus au site de terminaison met fin la rplication. VI La rplication chez les eucaryotes. Mme principe que procaryotes avec le brin avanc et le brin retard, mais avec quelques diffrences : LADN est beaucoup plus long, La vitesse de rplication est de 50 nuclotides secondes ; Ceci compens par de multiples origines de rplication ; LADN est intgr dans la chromatine associe aux histones, au moment de la rplication il y a production dhistones ; Les ADN polymrases sont est responsable de la rplication de lADN mitochondriale ;

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Tout sur la rplication du matriel gntique Duplication de la masse des histones, les protines nosynthtises et parentales se rpartisse de faon alatoire sur chaque brin ; Le tlomre synthase empche le brin retard de se raccourcir progressivement lors de la rplication. Transcriptase inverse VII Les rparations. Il existe un grand nombre de facteurs environnementaux pouvant induire des erreurs sur le code gntique ici des mutations. Si il ny avait pas de corrections ++ Pb / cancer, perte ou gain de fonctions. LADN est la seule macromolcule pouvant tre rpare (pas ADN mitochondriale). Rparation des msappariements d une erreur de lADN polymrase : chez les procaryotes il existe un systme multi enzymatique comprenant une endonuclases associe une exonuclase bidirectionnelle (35 et 53), une ligase et une ADN Pol III. Rparation des dimres de thymines : ces dimre sont produit par les UV lorsque deux thimines sont contigus sur le mme brin = photodimrisation. La rplication sarrte au niveau du dimre car la polymrase en peut plus avancer, une endonuclase coupe une dizaine de nuclotides autour du dimre, il y a ressynthse par lADN Pol III pour les procaryotes et lADN Pol pour les

eucaryotes. Afin, une ligase referme les dernires liaisons phosphodiester. Il existe une maladie rare (Xeroderma pigmentosum) ou il ny a pas dendonuclase et donc pas de rparation. Les patient son extrmement sensible la lumire et la kratose volue vers un cancer cutan.

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Tout sur la rplication du matriel gntique Rparation des mutations C/U = Dsamination oxydative : comme lU est une base trangre lADN elle est limin par un systme spcifique dexcision par lUracyl-glycosylase qui coupe la liaison -osidique entre lUracyl et le dsoxyribose. La lacune est comble par lADN Pol VIII Les rarrangements. LA RECOMBINAISON : Il sagit dun phnomne dynamique, il sagit dun change gntique. Il y a rarrangement entre deux rgions dADN condition quil existe des homologies de squence ici que les squences soit trs proche ; et quun des deux brins soit coup. Dans ce cas il peut y avoir une recombinaison qui formera soit une structure dHtroduplexe ie formation dun X entre les deux brins dADN adjacent. On obtient ainsi deux types de rarrangements : dans 50% des cas on a une Htrophilie = structure en htroduplexe ; dans 50% des cas on a une recombinaison.

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Tout sur la rplication du matriel gntique CONCLUSION La rplication permet, lors dune mitose ou de la premire partie dune miose, de former, partir dune cellule mre , deux cellules filles possdant les mmes chromosomes (dans lesquels un brin provient de la cellule mre, et lautre est nouvellement synthtis), par ailleurs identiques ceux de la cellule mre. Les mcanismes de rplication ne sont toutefois pas infaillibles, et introduisent quelques erreurs dans les nouveaux brins ; mais des processus de rparation permettent de limiter le taux final derreurs (voir mutations) moins de 1 pour 1 milliard de nuclotides.

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REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
1. Watson, Francis Crick (1916 2004) et Rosalind Franklin (1920 - 1958) 2. Franois Jacob et Andr Wolf en 1965 3. Langlais Fred Griffith (1877 - 1941) suivie en 1944 de son compatriote, Oswald Avery (1877 - 1955), de lamricain Alfred

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