Accin de la Lipasa Pancretica Introduccin La lipasa es una enzima de la clase de las hidrolasas, que se usa en el organismo para disgregar

los lpidos (grasas) de los alimentos de manera que se puedan absorber. Su funcin principal es catalizar la hidrlisis de triacilglicerol a glicerol. Las lipasas se encuentran en gran variedad de seres vivos, al igual que las esterasas hidrolizan grasas y aceites en los procesos digestivos; tambin estn involucradas en el rompimiento y movilizacin de los lpidos dentro de las clulas de un organismo y de la transferencia de lpidos de un organismo a otro. Las lipasas, cuya denominacin bioqumica es acil-esterhidrolasas, son enzimas relativamente especficas en su actividad cataltica y algunas de ellas se distinguen por su alta estereoespecificidad. Poseen un sustrato especfico y tienen una ptima actividad en un amplio rango de temperatura, esto las hace unos biocatalizadores verstiles. Las lipasas son enzimas lipoliticas que hidrolizan las uniones esteres de los trigliceridos, estas enzimas se encuentran ampliamente distribuidas en plantas, procariontes y eucariontes especialmente en animales, en vertebrados se encuentrantres isoenzimas tejido especificas (pncreas, hgado, intestino)se a

encontrado que estas enzimas estn altamente asociadas a quilomicrones, y protenas de bajo peso molecular. En estas protenas se encuentra una regin altamente conservada, la cual esta alrededor de una serina, la cual participa junto con residuos de histidina y acido aspartico en la estabilizacin de la molcula esta misma regin se encuentra en otras lipasas procariotas como lecitin-colesterol aciltransferasa la cual cataliza cidos grasos transferidos entre la fosfatidil colina y el colesterol. La funcin principal de esta lipasa gstrica es ayudar a la absorcin de grasas. Hay que destacar que la produccin de jugo gstrico est controlada por dos mecanismos: * nervioso (sensaciones visuales, gustativas, etc),hormonal * a travs de la hormona Gastrina.

Fundamento Las lipasas hidrolizan triacilgliceroles de cidos grasos, diacilglicerol, monoacilglicerol y glicerol, y son conocidas como hidrolasas de triacilglicerol acilo. Su principal funcin, es la hidrlisis de grasa, rompiendo y modificando los enlaces ster de lpidos y sus derivados. Algunos miembros de la familia de las lipasas como la Lipoprotena lipasa (LPL), lipasa heptica y lipasa pancretica poseen importantes funciones en el metabolismo lipdico. Lipasa pancretica es sintetizada por las clulas acinares pancreticas que es secretada en el lumen intestinal y ayuda en la absorcin intestinal de cidos grasos de cadena larga como los triglicridos, mientras que
la LPL y lipasa heptica son criticas para la transformacin de lipoprotenas circulantes. La lipasa heptica juega un papel en la absorcin de colesterol HDL y se sintetiza exclusivamente en el hgado, donde se encuentran predominantemente. Recientemente, LPL ha sido implicado en la captacin celular de lpidos, posiblemente formando un puente entre lipoprotenas de plasma y en los receptores de superficie de las clulas. Las lipasas son molculas de dominio simple y tienen una organizacin estructural. El sitio activo de las lipasas contiene la triada cataltica: Ser105-His224-Asp187, comn en todas las hidrolasas, donde Ser es el nuclefilo, His es el residuo bsico, y Asp o Glu es el residuo cido. El sitio activo consiste en una serina, histidina y una trada de cido carboxlico, que pueden estar protegidos por una cubierta, en donde la posicin cerrada o abierta determina la conformacin de la enzima, si est inactiva o activa, respectivamente. Objetivos * Aplicacin y manejo adecuado de tcnicas de laboratorio para la identificacin, aislamiento de enzimas y determinacin de la actividad enzimtica * Entender de forma practica una parte importante del proceso digestivo que tiene lugar en el intestino delgado en el cual la lipasa pancretica consigue la hidrlisis de triacilgliceroles a cidos grasos. Materiales Vaso de precipitado Varilla de vidrio Gotero 4 Tubos de ensaye 4 pipetas Bao mara Mechero Tripie Tela de asbesto

Gradilla Termometro Reactivos Fenolftalena CarbonatoSdico .2M Bilis Pancreatina Leche de vaca Agua destilada Mtodo Aadir unos 30 ml de leche de vaca al vaso de precipitado y adicionar unas gotas de fenolftalena. Agitar e irle aadiendo, gota a gota, disolucin de carbonato sdico 0,2 M, agitando continuamente con la varilla, hasta que el lquido adquiera una coloracin rosa persistente, de intensidad moderada. Se numeran, a continuacin, cuatro tubos de ensayo y se les aade las siguientes cantidades (en ml) de los reactivos indicados: Reactivo | 1 ml | 2 ml | 3 ml | 4 ml | Leche de vaca | 5 | 5 | 5 | 5 | Agua destilada | 1,5 | 1 | 0,5 | 0 | Bilis | 0 | 0,5 | 0 | 0,5 | Pancreatina | 0 | 0 | 1 | 1 | Agitar todos los tubos hasta total homogeneizacin, y situarlos en el bao termosttico a 37 C, observando lo que sucede en ellos a lo largo del tiempo. Anotar las decoloraciones que tengan lugar, y el tiempo en que se producen, contado desde el comienzo de la reaccin. 30ml de leche 3 gts de Fenolftalena Carbonato sdico Adicionar Adicionar hasta lograr un tono rosa 5ml de leche de la preparacin anterior Agua destilada Bilis Pancreatina ml= 1.5 1 .5 0 ml= 0 .5 0 .5 ml= 0 0 1 1 Poner a bao mara a 37C hasta cambio de color Diagrama Resultados Tubos | Uno | Dos | Tres | Cuatro | Solucin Inicial | Rosa | Rosa | Rosa | Rosa |

Adicin de los reactivos | Rosa | Rosa | Amarillo | Amarillo | Despus

del calentamiento | Rosa | Rosa plido | Amarillo con sedimentacin | Amarillo con floculacin | Conclusiones Se pudo comprobar la accin de la Pancreatina y bilis en conjunto y por separado, las cuales son capaces de hidrolizar a cidos Grasos los triglicridos contenidos en la leche, mediante la adiccin de un indicador, fenolftalena en este caso, el cual nos permiti obtener un cambio de color, de rosa a amarillo, al presentarse la reaccin en la solucin, adems se obtuvo floculacin en el tubo en el cual se adicionaron las dos sustancias. La bilis no tiene un efecto de hidrlisis si se adiciona sola y la pancreatina causa el mismo efecto sola, que en conjunto con la bilis. Glosario Hidrolasas: es una enzima capaz de hidrolizar un enlace qumico Triacilglicerol: triglicridos, triacilglicridos o triacilgliceroles son acilgliceroles, un tipo de lpidos, formados por una molcula de glicerol, que tiene esterificados sus tres grupos hidroxilo por tres cidos grasos, saturados o insaturados. Esterasas: son enzimas que catalizan reacciones de hidrlisis (fase I de la biotransformacin) de steres carboxlicos (carboxiesterasas), amidas (amidasas), steres de fosfato (fosfatasas), etc. Estereoespecificidad: si reactivos que difieren slo en su estereoisometra son transformados preferentemente o exclusivamente en productos que se diferencian tambin slo en su estereoisomera. Esto es, la estereoqumica de los reactivos de partida condiciona la estereoqumica de los productos resultantes. Lipoliticas: Que causa lipolisis, desintegracin o divisin qumica de las grasas Isoenzimas: son enzimas que difieren en la secuencia de aminocidos, pero que

catalizan la misma reaccin qumica. Quilomicrones: son lipoprotenas sintetizadas en el epitelio del intestino caracterizadas por poseer baja densidad (inferior a 0,94) y gran dimetro, entre 75 y 1.200 nm. Serina: (abreviada Ser o S) es uno de los veinte aminocidos componentes de las protenas codificado en el genoma. Histidina: es un aminocido esencial (no puede ser fabricado por el propio organismo y debe ser ingerido en la dieta). Es uno de los 22 aminocidos que forman parte de protenas codificadas genticamentes se abrevia como His o H. Acido aspartico: o su forma ionizada, el aspartato (smbolos Asp y D) es uno de los veinte aminocidos con los que las clulas forman las protenas. En el ARN se encuentra codificado por los codones GAU o GAC. Presenta un grupo carboxilo (COOH) en el extremo de la cadena lateral. Su frmula qumica es HO2CCH(NH2)CH2CO2H. Bibliografa 1. VALENZUELA, SANCHUEZA J & NIETO S; 2002; El Uso De Lipidos Estructurados En La Nutricin: Una Tecnologa Que Abre Nuevas Perspectivas En El Desarrollo De Productos Innovadores; Rev Chil Nutr Vol. 29, N2 2. WONG, H. DAVIS, R. THURENLL;1994; Lipoprotein Lipase Domain Function; The Journal of Biological chemetry. Vol. 269, No. 14, Issue ofApril 8, pp. 1031910323. 3. WONG, H. SCHOTZ, M.; 2002; The lipase gene family; Journal of Lipid Research, Vol. 43, 993