Universidad de Antofagasta Facultad de Recursos del Mar Departamento de Acuicultura

Crecimiento y capacidad de biorremediacin de Chlorella vulgaris cultivada en aguas residuales generadas en la produccin de Seriola lalandi (Valenciennes, 1833)

SEMINARIO PARA OPTAR AL TITULO DE: INGENIERO EN ACUICULTURA ALUMNO: ROBERTO ANDRES PIZARRO HUERTA PROFESOR ORIENTADOR: DR. ROBERTO OMAR RAMOS DIAZ Contacto: r.pizarro.huerta@gmail.com

ANTOFAGASTA 2012

ndice 1. 1. 2. 3. RESUMEN ABSTRACT INTRODUCCIN OBJETIVOS 1 2 3 6 6 6 7 7 7 8 8 8 9

3.1 Objetivo General 3.2Objetivos Especficos 4. MATERIALES Y MTODOS 4.1. Local y Periodo de experimentacin 4.2. Material Biolgico 4.3. Obtencin del Efluente 4.4. Condiciones de Cultivo 4.4.1 Masificacin 4.4.2 Crecimiento y eficiencia de remocin de nutrientes.

4.5 Procedimientos Experimentales 11 4.5.1 Crecimiento 11 4.5.2 Eficiencia de Remocin (ER) 12 ! ! 4.5.3 Determinacin de Amonio (NH! ), Nitrito (NO2 ) Nitrato (NO3) Y Fosfato (PO! ) 12 4.5.4 Determinacin de temperatura, salinidad, pH, oxigeno disuelto (OD) e intensidad de luz 12 4.6 Anlisis Estadstico 5. RESULTADOS Parmetros fsico-qumicos del efluente bruto. 5.1.2 Parmetros fsico-qumicos e intensidad de luz. Condicin experimental indoor 5.1.3 Parmetros fsico-qumicos. Condicin experimental outdoor 5.1.4 Intensidad de luz. Condicin experimental outdoor 13 13 13 13 15 15

5.1.

5.2 Crecimiento. Condicin experimental indoor 5.3 Crecimiento. Condicin experimental outdoor 5.4 Remocin de Nutrientes en condiciones experimentales indoor y outdoor 6. DISCUSIN 7. CONCLUSIN 8. SUGERENCIAS 9. BIBLIOGRAFA

16 18 20 25 30 31 32

ndice de figuras

Figura 1. Microalga Chlorophyta Chlorella vulgaris utilizada en los experimentos Figura 2. Etapa de masificacin, cultivo de Chlorella vulgaris Figura 3. Crecimiento y remocin de nutrientes en condiciones indoor Figura 4. Diagrama de la condicin experimental indoor Figura 5. Estanques de crecimiento y remocin de nutrientes en condicin outdoor Figura 6. Diagrama de la condicin experimental outdoor Figura 8. Valores promedios de intensidad de luz en condicin indoor Figura 7.Parmetros fsico qumicos registrados en condicin indoor. Figura 9. Parmetros fsico qumicos registrados en condicin outdoor. Figura 10.Valores promedios de intensidad de luz en condicin outdoor. Figura 11. Crecimiento (n de cel/ mL) de Chlorella vulgaris en condicin indoor Figura 12. Crecimiento (n de cel/ mL) de Chlorella vulgaris en condicin outdoor

8 9 10 10 11 11 14 14 15 16 18 20

Figura 13. Proceso de remocin de amonio por Chlorella vulgaris en condiciones indoor y outdoor. 22 Figura 14. Proceso de remocin de Nitrito por Chlorella vulgaris en condiciones indoor y outdoor. 23 Figura 15. Proceso de remocin de Nitrato por Chlorella vulgaris en condiciones indoor y outdoor . 23 Figura 16. Proceso de remocin de Fosfato por Chlorella vulgaris en condiciones indoor y outdoor . 24

ndice de Tablas
Tabla 1. Crecimiento (ncel/ mL) de Chlorella vulgaris en condiciones indoor. Tabla 2. Crecimiento (n cel/ mL) de Chlorella vulgaris en condiciones outdoor Tabla 3. Eficiencia de remocin de Chlorella vulgaris en efluente 17 19 21

Dedicatoria Este seminario se lo dedico especialmente A mis Padres Thelma y Humberto. A mis hermanos Daniela, Javiera y Pablo. Los quiero Inmensamente.

AGRADECIMIENTOS

A mis padres quienes me criaron con esfuerzo y cario. Que confiaron en m, para finalizar mis estudios, que los logre gracias a su enseanza Que toda meta se logra con perseverancia, tenacidad y amor por uno mismo. A mis queridos hermanos que siempre nos hemos mantenido juntos y lo estaremos en un futuro. Tambin Agradecer a mis amigos Sebastin Gallardo, Priscilla Mancilla y Pilar Iribarren, por los consejos tcnicos acerca del seminario, por la compaa incondicional de Catherine, Daniel y Juan Pablo. En los aspectos tcnicos del seminario agradecer a Juan Morales a quien me enseo todo lo relacionado en la produccin y cultivo de microalgas. A Gloria Segovia por realizar los anlisis de este seminario. Finalmente, al Profesor Orientador Dr. Roberto Ramos Daz, quien desde un principio se mostro interesado en mi propuesta de seminario, otorgndome la completa confianza de hacer y deshacer, para que finalmente me diera cuenta en donde enfocar de una manera eficaz en el estudio de efluentes.

Mar- Ciencia - Pasin (Ordenes, 2003)*

*datos sin publicar

1. RESUMEN A escala de laboratorio se evalu el crecimiento y la eficiencia de remocin de nutrientes disueltos en el efluente producido por la psicultura de Seriola lalandi en la Facultad de Recursos del Mar por la microalga Chlorella vulgaris. Para el proceso de investigacin se evaluaron condiciones experimentales indoor y outdoor en un tiempo de 8 das, con un efluente filtrado, desinfectado e inoculado con una concentracin inicial de 2.061064.16103 cel/mL de Chlorella vulgaris cultivada en estanques de 50 litros de capacidad. El diseo experimental para evaluar el crecimiento y la remocin de nutrientes se realizo con 6 estanques para cada condicin experimental (indoor y outdoor), de estos 6 estanques 3 fueron para un control de crecimiento, cultivando en estos, Chlorella vulgaris en agua de mar filtrada, desinfectada y enriquecida con F2, mientras que los 3 estanques restantes se cultivo Chlorella vulgaris en efluente filtrado y desinfectado en donde se evalu el crecimiento y la remocin de nutrientes por parte de Chlorella vulgaris. Los resultados de crecimiento obtenidos en la condicin indoor, los cultivos en efluente alcanzaron valores mximos de 4.171067.57105 cel/mL en el da 6, crecimiento similar en los cultivos controles que obtuvieron 4.75106 2.29105 cel/mL, mientras que en la condicin experimental outdoor el crecimiento mximo obtenido por los cultivos en efluentes fueron de 2.811062.69105 cel/mL alcanzado en el da 2, en comparacin que los controles tuvieron un crecimiento mximo de 1.83107 2.29105 cel/mL. Los mejores resultados de remocin de nutrientes se registraron con nitrito, alcanzando valores de 91.67% y 88.41%, en las condiciones indoor y outdoor. Por su parte, el nitrato fue removido en un 57.47% y 29.31% para las condiciones indoor y outdoor. En cuanto a la remocin de amonio los valores fueron de 42.22% para ambas condiciones experimentales. Finalmente, el fosfato registro una remocin del 65.78% en indoor y un 75.78% en outdoor. Palabras claves: Efluente, Crecimiento, Remocin, Nutriente, Chlorella vulgaris

1. ABSTRACT

A laboratory scale assessed the growth and efficiency of removal of dissolved nutrients in the effluent produced by the psiculture of Seriola lalandi at the School of Marine Resources by the microalgae Chlorella vulgaris. For the research process were evaluated indoor and outdoor experimental conditions in a time of 8 days, with an effluent filtration, disinfection, inoculated with an initial concentration of 2.06 106 4.16 103 cells / mL of Chlorella vulgaris cultivated in ponds of 50 liters. The experimental design to assess growth and nutrient removal was performed with 6 pools for each experimental condition (indoor and outdoor), of these 6 pools 3 were to control growth, Chlorella vulgaris cultivated in these filtered sea water, disinfected and enriched F2, while the 3 remaining ponds in Chlorella vulgaris culture filtration and disinfected effluent which evaluated the growth and nutrient removal by Chlorella vulgaris. The results obtained in growing crops in indoor condition effluent reached maximum values of 4.17106 7.57 105 cells / mL on day 6, similar growth in control cultures that were 4.75106 2.29 105 cells / mL, while in the outdoor experimental condition obtained by growth of crops in effluent were 2.81 106 2.69105 cells / mL was reached on day 2, compared to controls had a maximum growth of 1.83 107 2.29 105 cells / mL. The best results were recorded nutrient removal with nitrite, reaching values of 91.67% and 88.41% in the indoor and outdoor conditions. Meanwhile, nitrate was removed in a 57.47% and 29.31% for indoor and outdoor conditions. As for the removal of ammonium values were 42.22% for both experimental conditions. Finally, the phosphate removal record of 65.78% to 75.78% indoor and in outdoor.

Keywords: Effluent, Growth, Removal, Nutrient, Chlorella vulgaris

2. INTRODUCCIN La acuicultura comercial se inicio en Chile en la dcada de los 80 coherentemente con la poltica econmica nacional que incentiv la actividad privada, la apertura al comercio internacional y como respuesta a la situacin de aumento de la sobreexplotacin de stocks pesqueros de las especies nativas destinadas al mercado internacional. Desde ese entonces, la acuicultura nacional ha tenido un crecimiento sostenido ayudado por la alta produccin de los sistemas de cultivos intensivos que son los que ms retornos econmicos aportan al pas. La produccin representada por este tipo de cultivos est estrechamente ligada al uso de altas tecnologas y recursos humanos capacitados, que buscan cada da optimizar an ms los procesos de produccin (FAO, 2012). Si bien desde los aos 80 a la actualidad, la acuicultura intensiva en Chile ha generado importantes beneficios econmicos y sociales. Sin embargo, se reconocen pocos avances en el uso sustentable del ambiente y equidad en el acceso a la actividad para lograr el desarrollo sustentable (Buschman, 2001). Como cualquier otra actividad productiva, la acuicultura no deja de generar impacto en el medio ambiente (Vinatea, 1999). Dentro de esta realidad, el cultivo de peces y camarones son los que ms impacto provocan en el medio ambiente, debido a las caractersticas de los efluentes generados en el proceso productivo (Paniagua-Michael & Garcia, 2003). Entre los contaminantes ambientales ms significativos se encuentran liberacin de excretas, restos de alimento y medicamentos, hasta contaminantes genticos (Prado et al, 2006). Dentro de los contaminantes mencionados, el suministro de alimento es el principal causante del deterioro de la calidad de agua. El aporte de nutrientes en los estanques no es del todo aprovechado y en el momento de la cosecha gran parte de la materia orgnica es lanzada a los cuerpos de agua naturales (Boyd, 1992). En muchos sistemas de produccin en estanques, solamente el 30% de los nutrientes suministrado son convertidos en producto, el resto es acumulado en los sedimentos o es liberado en el efluente (Acosta-Nassar et al, 1994). Los efectos que tiene el efluente en el medio ambiente se pueden resumir en la disminucin en la concentracin de oxigeno (OD), aumento en la concentracin de slidos (SST), aumento en la demanda biolgica de oxigeno (DBO), aumento en la demanda qumica de oxigeno (DQO), formas de nitrgeno
3

(amonio, nitrito y nitrato) y fosforo, crecimiento exagerado de algas, eutrofizacin, entre otros efectos. Entre los diversos modos de tratar los efluentes y disminuir su impacto ambiental, se incluye como piedra angular de una acuicultura responsable la utilizacin de buenas prcticas en la produccin de especies acuticas, adems de procesos fsicos qumicos y aplicaciones biolgicas. Boyd (1992) recomienda entre las aplicaciones de buenas prcticas, usar tasas de siembra y de alimentacin no superiores a la capacidad de carga del sistema de produccin; usar practicas de alimentacin conservadoras, es decir mejorar la calidad de dietas artificiales con fuentes de nitrgeno y fosforo de alta digestibilidad (Cho, 2001), fertilizar solamente lo necesario para promover el fitoplancton; reducir el recambio de agua tanto como sea posible; cosechar sin drenar el estanque y pasar el efluente por un estanque de sedimentacin antes de la descarga final, para asegurar la reduccin de los slidos disueltos (Boyd, 1992). Por su parte, las aplicaciones biolgicas consisten en el uso de humedales artificiales para la remocin de nutrientes (SanchezCarillo & Alvarez-Yepiz, 2008), remocin de materia orgnica e inorgnica mediante la utilizacin de moluscos filtradores (Jones et al, 2001, 2002; Mugg & Rice, 2003), remocin de nutrientes por macroalgas y microalgas (Wong et al, 1995; Abalde et al, 1999; Pagand et al, 2000; Nelson et al, 2001), y sistemas combinados de sedimentacin, moluscos filtradores, macroalgas y microalgas (Neori et al, 1998; Jones et al, 2001; Jones et al, 2002; Preston et al, 2003; Ramos et al, 2008). En la actualidad el tratamiento de efluentes representa un costo y un proceso que no generan ganancia alguna para las empresas de acuicultura, por lo tanto, la investigacin sobre este tema se debe centrar en el desarrollo de tecnologas eficientes y de bajo costo. En ese contexto, la utilizacin de microalgas como organismos biorremediadores para disminuir los productos nitrogenados en el efluente resulta eficiente (Abalde et al. 1999; Richmond, 2004; Salazar, 2005). Las microalgas son organismos que contienen clorofila a y otros pigmentos capaces de realizar fotosntesis oxignica (Abalde et al, 1999). Actualmente el desarrollo del cultivo microalgal en altas densidades tiene un sinfn de aplicaciones que van desde suplementos alimenticios, tratamiento de enfermedades, obtencin de pigmentos, aplicaciones biotecnolgicas como la obtencin de biodiesel y el
4

tratamiento de aguas residuales, entre otros (Abalde et al, 1999; Salazar, 2005).

Richmond, 2004;

La aplicacin de microalgas en el tratamiento de aguas residuales, tiene su antecedentes en la poca de Caldewell (1940), quien reporta los primeros estudios sobre la posibilidad de cultivos masivos de microalgas para tratar efluentes industriales (Salazar, 2005). El objetivo fundamental de la aplicacin de microalgas para el tratamiento de aguas residuales es la utilizacin y transformacin de los nutrientes a biomasa, lo cual trae como consecuencia, en un proceso global, la remocin de amonio, nitritos, nitratos y orto fosfatos, el aumento del pH lo cual favorece la precipitacin de los orto fosfatos, la oxigenacin del agua que favorece la oxidacin de la materia orgnica, accin bactericida reduciendo la sobrevivencia de organismos patgenos y la recuperacin de CO2 liberado en los procesos fotosintticos, entre otros beneficios. La biomasa microalgal producida durante este proceso representa una fuente potencial de alimento y de pigmentos para mltiples aplicaciones (Borowitza & Borowitza, 1988). La seleccin de la cepa de microalga es un aspecto muy importante si se quiere tener un crecimiento adecuado y una ptima capacidad de remocin de los nutrientes. Existen estudios sobre abundancia de microalgas en aguas residuales, por ejemplo, Escorihuela (2007) en una laguna de estabilizacin de efluentes report que las microalgas con mas abundancia en dicha laguna fueron de las divisiones Chlorophyta y Cianophyta, encontrando valores de abundancia entre 99.5 y el 98.11%, respectivamente. Por su parte, estudios realizados por Chacn (2004), con el objetivo de probar la eficiencia de Chlorella sp y Scenedesmus sp, en la remocin de nitrgeno, fosforo y DQO en aguas residuales, concluyo que la remocin de nitrgeno y el fosfato, entre 44,0% y 48,7%; y la DQO entre 54,8% y 55,8%, favorecen el uso potencial de Chlorella sp y Scenedesmus sp, para el tratamiento de aguas residuales. Con la finalidad de desarrollar tecnologas eficientes y de bajo costo para la acuicultura el siguiente estudio est orientado en evaluar la capacidad de crecimiento y biorremediacin de Chlorella vulgaris en los efluentes generados por la produccin de Seriola lalandi.

3. OBJETIVOS

3.1 Objetivo General

Desarrollar tecnologas eficientes y de bajo costo para el tratamiento de aguas residuales de la acuicultura.

3.2 Objetivos Especficos

Evaluar el crecimiento

de Chlorella vulgaris en efluentes generados por la

produccin de Seriola lalandi en condiciones indoor y outdoor. Evaluar la eficiencia de remocin de nutrientes de Chlorella vulgaris en condiciones indoor y outdoor.

4. MATERIALES Y MTODOS 4.1. Local y Periodo de experimentacin

El proceso de experimentacin se realiz desde mayo del 2011 hasta febrero del 2012, en las dependencias del Laboratorio de Cultivo de Microalgas del Laboratorio de Estudios en Acuicultura (LEA), de la Facultad de Recursos del Mar, Universidad de Antofagasta. Dicho proceso se dividi en dos sub etapas como: a. Masificacin de Chlorella vulgaris b. Crecimiento y eficiencia de remocin de nutrientes La primera etapa se llev a cabo desde mayo a septiembre del 2011, realizando la masificacin del material biolgico en condiciones de laboratorio, hasta llegar a la concentracin de 2.0610074.1610+03 cel/mL y volmenes requeridos, partiendo desde cepa hasta bidn de 20 litros de capacidad. En la segunda etapa experimental se llevo a cabo desde diciembre 2011 hasta Febrero del 2012. En esta etapa se prob la capacidad de crecimiento y eficiencia de remocin de nutrientes de Chlorella vulgaris en condiciones controladas de laboratorio (indoor) y en condiciones exteriores (outdoor). 4.2. Material Biolgico

La microalga Chlorella vulgaris, (Fig. 1), fue obtenida del cepario del laboratorio de microalgas del Departamento de Acuicultura para luego ser masificada hasta llegar a cultivos en bidones de 20 litros.


Figura 1. Microalga Chlorophyta Chlorella vulgaris utilizada en los experimentos (disponible sitio: http://botany.natur.cuni.cz/algo/CAUP/H1998_Chlorella_vulgaris.htm)

4.3. Obtencin del Efluente

El

efluente para la segunda etapa de experimentacin se obtuvo a partir de la

piscicultura de reproductores de dorado Seriola lalandi localizado en la Facultad del Mar (FAREMAR). En esta piscicultura se encontraban 12 reproductores con un peso promedio 15 kilogramos, que eran mantenidos en un estanque de tipo australiano de 180 ! . La obtencin del efluente fue mediante una bomba sumergible ubicada en la cmara de descarte del estanque de los reproductores. Desde all se bombearon 264 litros de efluente, utilizados solo una vez, que representaron el volumen total necesario para realizar la segunda etapa de experimentacin. Posteriormente, el efluente fue filtrado a 1, desinfectado con cloro y neutralizado con tiosulfato de sodio. 4.4. Condiciones de Cultivo

4.4.1 Masificacin La masificacin de Chlorella vulgaris fue, desde cepa a bidn de 20 L en condiciones controladas de aireacin y una intensidad lumnica constante de 15.711.09 mol/m! /seg. Para lograr este cultivo, se inocul la cepa en matraces de 2 L con agua de mar filtrada a 1 autoclavada y enriquecida con medio de cultivo general F2 (Guillard, In: Stein, 1979), posteriormente se sigui el crecimiento durante 10 das, finalizando cuando los matraces
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alcanzaron el crecimiento exponencial. Luego los matraces que registraron un crecimiento exponencial con una concentracin de 2.01106 cel/ml aproximadamente, fueron F2 inoculados en bidones de 20 litros con agua filtrada a 1, desinfectada con cloro y neutralizada con tiosulfato de sodio, enriquecida con medio de cultivo general (Guillard, In: Stein, 1979). Este cultivo tambin estuvo en condiciones controladas de aireacin e intensidad de luz constante de 15.711.09 mol/m! /seg. El crecimiento fue monitoreado por 10 das. Aquellos que se encontraban en la fase exponencial, fueron desdoblados y mantenidos en un stock de 80 litros de biomasa microalgal con una concentracin de 2.061074.16103 cel/mL. El volumen del inoculo para los matraces y bidones fue del 10% del volumen total del recipiente (Fig. 2)

Figura 2. Etapa de masificacin, cultivo de Chlorella vulgaris en bidones de policarbonato con capacidad de 20 L.

4.4.2 Crecimiento y eficiencia de remocin de nutrientes. En la determinacin del crecimiento y remocin de nutrientes se utilizaron 12 estanques cilindro cnicos transparentes de 50 litros de capacidad, utilizando un volumen de 44 L. El experimento se realiz en dos condiciones experimentales, indoor y outdoor. El diseo experimental para evaluar el crecimiento y la remocin de nutrientes se realizo con 6 estanques para cada condicin experimental (indoor y outdoor), de estos 6 estanques, 3 fueron para un control de crecimiento, cultivando en estos Chlorella vulgaris en agua de mar filtrada, desinfectada y enriquecida con medio de cultivo general F2, mientras que los
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3 estanques restantes se cultivo Chlorella vulgaris en efluente filtrado y desinfectado en donde se evalu el crecimiento y la remocin de nutrientes por parte de Chlorella vulgaris. (Fig. 3, 4, 5 y 6).

Figura 3. Crecimiento y remocin de nutrientes en condiciones indoor

Figura 4. Diagrama de la condicin indoor

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Figura 5. Estanques de crecimiento y remocin de nutrientes en condicin outdoor.

Figura 6. Diagrama de la condicin experimental outdoor

4.5 Procedimientos Experimentales 4.5.1 Crecimiento Para las etapas de masificacin, crecimiento y remocin de nutrientes, se utiliz el mtodo de recuento celular mediante la cmara de Neubauer. Las muestras para el recuento
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celular eran extradas cada dos das de cultivo en tubos Eppendorf de 50 mL. Una vez extradas las muestras de las unidades experimentales se colocaba 1mL en la cmara de Neubauer para realizar el contaje utilizando un microscopio con un aumento de 40x. El procedimiento para cuantificar la concentracin celular fue el siguiente: Concentracion celular !" =
!"# !"!!"!!"!!" !

1 10! , donde

C= Numero de clulas por cuadro, de medida de 1mm por lado. 4.5.2 Eficiencia de Remocin (ER) Para evaluar la eficiencia de remocin de nutrientes se utiliz la relacin propuesta por Paniaguia-Michel & Garca (2003): ER (%) =
!" !!" !"

100, donde

Ca= Concentracin del Afluente Ce= Concentracin del Efluente

! 4.5.3 Determinacin de Amonio ( ), Nitrito ( ), Nitrato ( ) y Fosfato (! )

Para la determinacin de la eficiencia de remocin de nutrientes, se extrajeron muestras de 50 mL cada dos das de cultivo, para luego ser centrifugadas a 2000 G por 5 minutos en una centrifuga Eppendorf modelo 5804, el sobrenadante se analiz en el Laboratorio de Anlisis Qumicos del LEA, utilizando un test de anlisis en cubetas de Merk !" , para ser finalmente ledo en un fotocolormetro Nova 60 Espectroquant. 4.5.4 Determinacin de temperatura, salinidad, pH, oxigeno disuelto (OD) e intensidad de luz

Los parmetros de temperatura (T), salinidad (), pH y oxgeno disuelto (OD), fueron medidos todos los das en la etapa de crecimiento y remocin de nutrientes,

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mediante la utilizacin de un equipo multiparmetro HANNA Instruments modelo HI9828, para la medicin de intensidad de luz se utiliz un Luxmetro HANNA modelo HI97500. 4.6 Anlisis Estadstico

En el anlisis estadstico de los resultados fue utilizado el software Assistat versin 7.5 beta (Silva & Azevedo, 2006). Se aplic el anlisis de varianza (ANOVA) de una va para determinar diferencias significativas en los resultados de crecimiento y eficiencia de remocin. Cuando se verific diferencias significativas entre los tratamientos se aplic el test de TUKEY (P<0.05). El anlisis estadstico para los resultados de crecimiento y remocin de nutrientes se realiz comparando los resultados da a da, tanto en las condiciones indoor como en la outdoor. 5. 5.1. RESULTADOS Parmetros fsico-qumicos del efluente bruto. En el efluente bruto, antes de ser filtrado, desinfectado y neutralizado con tiosulfato de sodio, se controlaron los parmetros fsico qumicos, oxigeno disuelto, pH, temperatura y salinidad, registrando valores de 4.8 mgO2/L, 8.30, 27.26C y 35.03, respectivamente.

5.1.2 Parmetros fsico-qumicos e intensidad de luz. Condicin indoor

experimental

Los parmetros fsico-qumicos fueron medidos diariamente a las 11:00, 16:00 y 18:00 h, respectivamente (Fig. 7). En la condicin indoor los parmetros de oxgeno disuelto (OD), pH, temperatura (C) y salinidad (), se mantuvieron estable a lo largo del experimento. Los valores promedio de oxigeno disuelto fueron de 5.370.16 mgO2/L, el pH alcanz 8.320.06, la temperatura alcanz 27.260.05C y la salinidad registr un valor promedio de 36.340.05. Mientras que la intensidad de luz tuvo un comportamiento estable registrando 15.710.005 mol/m2/s (Fig. 8).

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40 35 30 25 20 15 10 5 0 Salinidad Temperatura Ph Oxigeno Disuelto 18:00 16:00 11:00 11:00 16:00 18:00

Figura 7. Parmetros fsico qumicos registrados en condicin indoor, en diferentes horas de da

20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 11:00 15:00 18:00 20:00 11:00 15:00 18:00 20:00 11:00 15:00 18:00 20:00

Intensidad de Luz

Horas del Dia

Figura 8. Valores promedios de intensidad de luz durante en el da medida en mol/m2/s. En condicin indoor

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5.1.3 Parmetros fsico-qumicos. Condicin experimental outdoor

Al igual que la condicin experimental anterior, se sigui la misma frecuencia de tiempo en las mediciones de los parmetros fsico-qumicos. En esta condicin experimental los parmetros de oxgeno disuelto (OD), pH, temperatura (C) y salinidad (), registraron variaciones a lo largo del tiempo. Los valores alcanzados para el oxigeno disuelto alcanzaron un valor mnimo 4.060.57 mg O2/L a las 18:00 h y 5.400.30 mg O2/L como valor mximo las 11:00 h, por su parte el pH vari entre 8.140.19 a las 16:00 h y 9.810.14 a las 18:00 h, la temperatura alcanz un valor mnimo de 27.932.19C y un mximo de 39.520.75C, la salinidad registr un valor mnimo y mximo de 36.250.16 y 38.650.36, respectivamente. (Fig.9)

40 30 20 10 0 Salinidad Temperatura Ph Oxigeno disuelto 18:00 16:00 11:00

11:00 16:00 18:00

Figura 9. Parmetros fsico qumicos registrados en la condicin outdoor, en diferentes horas de da

5.1.4 Intensidad de luz. Condicin experimental outdoor

Los resultados de intensidad de luz en la condicin experimental outdoor, se muestran en la figura 10.

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Los valores ms elevados de la intensidad de luz fueron registrados a las 11:00 y 15:00 h con 1508.12 25.51 y 1672.25 22.69 mol/m2/s, respectivamente. Mientras que los menores valores fueron registrados a las 18:00 y 20:00 h con 755.1769.92 y 164.9466.65 mol/m2/s respectivamente, como se aprecia en la figura 10.

2000 1800 1600 Intensidad de Luz 1400 1200 1000 800 600 400 200 0

Horas del dia

Figura 10.Valores promedios de intensidad de luz durante en el da medida en mol/m2/s. En condicin Outdoor

5.2 Crecimiento. Condicin experimental indoor

Los resultados de crecimiento en la condicin experimental indoor, se muestran en la Tabla 1 y Figura 11. Con los datos de crecimiento se elabor una ecuacin de regresin entre la concentracin celular y los das de cultivo. Verificndose que la relacin entre las dos variables es lineal. Y fue representada por la ecuacin Y= 0.601x+2.044 con un ndice de correlacin positivo r2= 0.9148 para el cultivo control, (cultivo con F2), mientras que el cultivo con efluentes fue definido por la ecuacin Y= 0.27x+1.87 con un ndice correlacin positivo r2= 0.7866 (Fig.11).

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El cultivo de Chlorella vulgaris con efluente (EF) y enriquecidos con F2 (control), se inici con una concentracin promedio de 2.061064.16103 cel/mL. El crecimiento experimentado por Chlorella vulgaris en ambos medios, fue gradual, se identificaron las fases de inicio y exponencial de crecimiento, que en el caso de Chlorella vulgaris con efluentes fue hasta el da 6 de cultivo, mientras que los estanques con F2 (controles) fue hasta el da 8 la fase exponencial de crecimiento. La fase estacionaria para el tratamiento con efluente se inici el da 6 hasta 7, mientras que el tratamiento con F2 esta fase se verific despus del da 8. Por su parte, la fase de cada de la curva de crecimiento microalgal, en los estanques con efluentes se inicia al finalizar el da 7, mientras que en los estanques con F2 fue al da 15. Durante el experimento de crecimiento de Chlorella vulgaris, en ambos tratamientos, estos presentaron diferencias significativas (P<0.05) en los das 2,4 y 8, mientras que en el da 6 no se observan diferencias significativas (P >0.05), porque ambos tratamientos registraron un crecimiento similar, es decir, los estanques con efluente (EF) registraron 4.171067.57105cel/mL en comparacin con el estanque control que registr un crecimiento de 4.751062.29105 cel/mL (Fig.11).

Tabla 1. Crecimiento (ncel/ mL) de Chlorella vulgaris en condiciones indoor.

Das de Cultivo Tratamientos Efluente 0 2.0610 a 4.110
03 6

2 2.2310 b 1.8110
6 5 6

4 2.5010 b 1.5710
6 5 6

6 4,1710 a 7.5710
6 5 6

8 3.7110 b 6.9210
6 5 6

2.0610 a Control 6.6010

3

3.5910 a 1.7610
5

4.3510 a 5.5010
5

4.7510 a 2.2910
5

7.4910 a 4.7110
5

Letras diferentes en la misma columna muestran diferencias significativas (p < 0,05)

17

8 7 y = 0,601x + 2,044 r = 0,9148

Concentracion Celular 106

6 5 4 3 2 1 0 0 2 4 6 y = 0,267x + 1,876 r = 0,7797

EF Control Lineal (EF) Lineal (Control)

10

Dias

Figura 11. Crecimiento (n de cel/ mL) de Chlorella vulgaris en ambos medios de cultivo (EF = Efluente ; Control = F Medio).

5.3 Crecimiento. Condicin experimental outdoor

Los resultados de crecimiento de la condicin experimental outdoor, se muestran en la Tabla 2 y Figura 12. Con los datos de crecimiento se elabor una ecuacin de regresin entre la

concentracin celular y los das de cultivo. Verificndose que la relacin entre las dos variables es lineal. Y fue representada por la ecuacin Y= 2.3525x+0.47 con un ndice de correlacin positivo r2= 0.9057 para el cultivo control, (cultivo con F2), mientras que el cultivo con efluentes fue definido por la ecuacin Y= -0.0285x+2.498 con un ndice correlacin positivo r2=0.0642 (Fig.11).

El cultivo de Chlorella vulgaris en ambos tratamientos, estanques con efluente (EF) y estanques con F2 (control), se inici con una concentracin 2.071062.65103 cel/mL.
18

promedio de

El crecimiento experimentado por Chlorella vulgaris en los estanques con efluentes y F2 fue gradual, en el que se identificaron las fases de inicio, exponencial, estacionaria y de cada, respectivamente. Se puedo observar que el crecimiento de Chlorella vulgaris en los estanques con efluente y F2, presentaron diferencias significativas (P<0.05) a lo largo del periodo de experimentacin. El periodo de crecimiento de Chlorella vulgaris fue relativamente corto en los estanques con efluentes (EF), donde el mximo crecimiento registrado fue en el da 2 con una concentracin de 2.81106 3.98105 cel/mL, mientras que en los estanques con F2 el mximo crecimiento se registr en el da 6 con una concentracin de 1.801072.32105 cel/mL (Fig.12).

Tabla 2. Crecimiento (n cel/ mL) de Chlorella vulgaris en condiciones outdoor

Das de cultivo Tratamientos Efluente 0 2.0710 a 3.2710

6 3 6

2 2.8110 b 2.6910
6 5 6

4 2.6510 b 3.9810
6 5 6

6 2.4010 b 4.4110
7 4 6

8 1.9910 b 1.0110
7 5 6

2.0710 a Control 2.6510

3

3.5510 a 8.3910
4

7.5410 a 9.0310
4

1.8010 a 2.3210
5

1.8310 a 2.2910
5

Letras diferentes en la misma columna muestran diferencias significativas (p < 0,05);

19

25,00

Concentracion Celular 106

20,00 y = 2,3525x + 0,47 r = 0,9057 15,00 EF Control 10,00 Lineal (EF) Lineal (Control) 5,00 y = -0,0285x + 2,498 r = 0,0642 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

0,00

Dias
Figura 12. Crecimiento (n de cel/ mL) de Chlorella vulgaris en ambos medios de cultivo (EF = Efluente ; Control = F2).

5.4 Remocin de Nutrientes en condiciones indoor y outdoor

Los valores de remocin de nutrientes en las condiciones indoor y outdoor se muestran en la Tabla 3 y Figuras 13, 14,15 y 16.

20

Tabla 3. Eficiencia de remocin de Chlorella vulgaris en efluente

Condiciones experimentales Nutriente Da 0 Amonio
! (N H ! )

Indoor 0.45 0.350.06b

nd nd nd

ER% 21.48 0 0 0

Outdoor 0.45 0.260.00a

nd nd

ER% 42.22 0 0 *

2 4 6 8

Condiciones experimentales Nutriente Da 0 Nitrito (N O ! ) 2 4 6 8 Nutriente Da 0 Indoor 1.64 1.350.50a 0.210.03a 0.170.02a 0.140.03 ER% 17.68 87.40 89.63 91.67 Outdoor 1.64 1.640.00a 0.260.00a 0.190.03a * ER% 0 87.40 88.41 *

Condiciones experimentales Indoor 0.58 0.380.09a 0.380.02a 0.310.03a 0.250.05 ER% 35.06 33.91 46.55 57.47 Outdoor 0.58 0.410.07a 0.560.11b 0.450.07b * ER% 29.31 2.87 22.41 *

Nitrato (N O ! )

2 4 6 8

Condiciones experimentales Nutriente Da 0 Indoor 3.4 2.830.31a 2.440.57a 1.290.13a 1.160.07 ER% 16.67 28.14 62.16 65.78 Outdoor 3.4 1.880.54a 1.840.40a 0.820.30a * ER% 44.61 45.88 75.78 *

Fosfato (P O ! !)

2 4 6 8

Letras diferentes en la misma fila muestran diferencias significativas (p < 0,05);

Concentracin expresada en mg/L; *Cada del cultivo antes de llegar al da 8 Da 0 = Concentracin inicial. ER% = Eficiencia de remocin. Nd = Valores no detectados por el mtodo analtico utilizado.

21

! Respecto al porcentaje de remocin de Amonio (NH! ), en el da 2 en ambas

condiciones experimentales presentaron diferencias significativas (p < 0,05), registrando la condicin indoor un 21.48% de remocin y la condicin outdoor un valor mximo de remocin de este nutriente de un 42.22%. Despus del da 2 los valores no fueron registrados por el mtodo analtico utilizado, puesto que el mnimo de lectura era 0.02 mg/L (Fig.13).

0,5 0,45 0,4 0,35 0,3 0,25 0,2 0,15 0,1 0,05 0 0 2 4 Dias 6 8 10

Concentracion (mg/l)

EI EO

Figura 13. Proceso de remocin de amonio por Chlorella vulgaris en condiciones indoor (EI) y outdoor (EO).

La remocin de Nitrito (NO! ) en ambas condiciones experimentales no presentan diferencias significativas en el transcurso de los das de cultivo, logrando en indoor una remocin total de 91.67%, mientras que en outdoor present una remocin del 88.41%. Sin embargo, el inicio de la remocin en outdoor comienza despus del da 2, al contrario de la condicin indoor que en el da 2 ya registraba una remocin de nitrito de un 17.68%. (Fig.14).

22

2 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 0 1 2 3 4 Dias 5 6 7 8 9

Concentracion (mg/l)

EI EO

Figura 14. Proceso de remocin de Nitrito por Chlorella vulgaris en condiciones indoor (EI) y outdoor (EO).

En la remocin de Nitrato (NO! ), se observaron diferencias significativas (P<0.05) a partir del da 3 en adelante, para ambas condiciones experimentales. Los niveles de nitrato en indoor registraron una baja significativa durante los das de experimentacin logrando una remocin total del 57.47%. Mientras que en outdoor, el comportamiento de la remocin no fue gradual, registrando una mxima remocin en el da 2 con 29.31%, luego en el da 3 baja a un 2.87% y finalmente en el da 6 logra una remocin del 22.41% (Fig.15).

Concentracion (mg/l)

0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 0 2 4 Dias 6 8 10 EI EO

Figura 15. Proceso de remocin de Nitrato por Chlorella vulgaris en condiciones indoor (EI) y outdoor (EO).

Por su parte, la remocin de Fosfato (PO! ! ) en ambas condiciones fue gradual y sin registrar diferencias significativas en el tiempo (P>0.05). En la condicin outdoor se
23

alcanza una remocin final del 75.78% en el da 6, mientras que en la condicin indoor se alcanza una mxima remocin en el da 8 con un 65.78% (Fig.16).

4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 0 1 2 3 4 Dias 5 6 7 8 9

Concentracion (mg/l)

EI EO

Figura 16. Proceso de remocin de Fosfato por Chlorella vulgaris en condiciones indoor (EI) y outdoor (EO).

24

6. DISCUSIN

El crecimiento microalgal se rige por la ley del mnimo, es decir, el factor limitante del crecimiento es aquel que est presente en cantidades ms prximas al mnimo crtico necesario para la microalga. Tal y como lo defini Leibig, el concepto de factor limitante solo se aplica a deficiencias en nutrientes qumicos. Sin embargo, el concepto se ha ido ampliando hasta incluir parmetros fsicos qumicos como Luz, Temperatura, pH, etc. (Abalde et al, 1999). En la etapa experimental indoor, la intensidad de luz siempre se mantuvo con un promedio constante 15.711.09mol/! /, mientras que en la etapa experimental outdoor los valores mximos de intensidad fueron a las 11:00 y 15:00 horas, con 1580.1225.51 y 167222.69 mol/! /, respectivamente. La gran diferencia en las intensidades entre las condiciones experimentales evaluadas reflej que la densidad microalgal tambin fuera distinta, registrando 4.171067.57105 cel/mL para indoor alcanzada en el da 6 de cultivo y 2.811063.98105 cel/mL para outdoor en el da 2 de cultivo. Autores como Mora et al, (2002 y 2005), observaron que Chlorella vulgaris fue capaz de crecer en un rango de 58 y 576 mol/! /, sin embargo, agregan que a bajas intensidades de luz Chlorella vulgaris tiene un mejor rendimiento fotosinttico que a intensidades de luz altas, lo que explica que en la condicin experimental indoor Chlorella tuvo un crecimiento estable. En la condicin experimental outdoor, la microalga debido a experiment un proceso de inhibicin del proceso fotosinttico o foto inhibicin, que segn Darley (1987), estn relacionados con la detencin del crecimiento intensidades de luz supra ptimas, lo cual se reflejo que el cultivo en el da 2 al 4 decayera abruptamente. Por lo tanto, la luz representa la fuente de energa para la fotosntesis, y tanto la intensidad luminosa, como la longitud de onda y el fotoperiodo afectan al crecimiento y metabolismo microalgal (Lips & Avissar, 1986). Respecto de los parmetros fsicos qumicos en la condicin experimental indoor, se observ que los valores de temperatura, pH, OD y salinidad se mantuvieron constantes. Mientras que para los mismos parmetros los valores en la etapa experimental outdoor registraron fluctuaciones durante el da. En el caso de la temperatura su mximo valor fue
25

de 39C, la cual excede al rango ptimo de temperatura propuesto para el aumento de la tasa de crecimiento. Para la mayora de las microalgas, el rango ptimo de temperatura se sita entre los 18 y 25C y para las microalgas ms resistentes como Chlorella vulgaris estos valores llegan hasta los 36C. (Laing & Ayala, 1990 y Richmond, 2004). Segn Abalde (1999), a altas temperaturas el crecimiento se detiene, puede ser debido a la interrupcin de la regulacin metablica o muerte celular, lo cual fue constatado por la cada del cultivo en el da 2 experimentado en la etapa experimental outdoor (39C). Los valores de pH en la etapa experimental indoor se mantuvieron estables registrando un valor promedio de 8.320.06 mientras que en la etapa experimental outdoor el valor del pH tuvo un valor mnimo de 8.250.24 a las 11:00 horas y un mximo de 9.810.14 a las 18:00 horas. El pH es uno de los factores ms importantes en el cultivo, puesto que las microalgas muestran una dependencia respecto al pH del medio de cultivo variando su respuesta a este parmetro segn la especie de microalga. Al respecto, cada microalga presenta un pH ptimo para su cultivo (entre 7 y 8). Un descenso de pH suele ser letal, en cambio suelen soportar mejor los incrementos del pH, hasta un cierto lmite (Richmond, 2004), as lo expone Mora et al. (2005) quien concluy que los mayores crecimientos experimentados por Chlorella vulgaris se encontrara en un rango de pH 8.0 y 9.0. En el caso de la salinidad en la condicin experimental indoor tuvo un comportamiento constante de 36.040.18, mientras que en la condicin outdoor la salinidad registro un valor mximo de 38.650.36 a las 18:00 h, este valor se explica por las altas temperaturas registradas para esta condicin, provocando evaporacin del medio y as aumentando la concentracin de sales. Los valores de salinidad en las dos condiciones exceden al rango de salinidad para el crecimiento ptimo de las microalgas, que van desde 25-35, por lo que es deducible que Chlorella vulgaris es una especie de microalga halotolerante. Los niveles de OD en la condicin experimental indoor registr un valor constante de 5.370.16 mgO2/L, lo que constituye un valor normal, segn Neori et al. (1996), que indica que el cultivo de microalgas y macroalgas hacen aportes de OD al sistema. Por su parte, el valor OD de la condicin indoor se mantuvo constante, debido a que no se aplic
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fotoperiodo, es decir la intensidad de luz siempre fue constante en el transcurso del experimento. Por su parte, los valores en la condicin experimental outdoor presentaron variaciones, registrando un valor mnimo de 4.060.57 mgO2/L a las 18:00 horas y un valor mximo de 5.400.30mgO2/L a las 11:00 horas, esto se explica por las altas intensidades de luz que se registraron en esta condicin experimental, ayudando a la produccin de oxigeno a travs de la fotosntesis, mientras que la disminucin de oxigeno al finalizar el da se explica por el proceso de respiracin, que experimentan las microalgas durante la fase oscura del proceso de fotosntesis (Borowitza&Borowitza, 1988 y Abalde et al, 1999). Entre los factores ms importantes que ayudan al proceso de absorcin de las microalgas, sin duda que est la concentracin microalgal y la intensidad de luz (Richmond, 2004). Tambin existen otros factores que incluyen el periodo de adaptacin por parte de la microalga; composicin del efluente y tratamiento del efluente (Hernndez, 2010). Al respecto, el proceso de remocin de nutrientes se evidenci desde las primeras horas de cultivo, logrando remover gran parte de la concentracin de los nutrientes, corroborando los estudios hechos por Hernandez. (2010) y Chacn et al, (2002), los cuales concluyen que al usar un efluente bruto, es decir sin tratamiento, las microalgas del genero Chlorella vulgaris, tienen un proceso de adaptacin para realizar la absorcin de nutrientes, como lo expresado por Hernandez (2010), quien describe una adaptacin de 13 das para iniciar la absorcin de nutrientes por Chlorella vulgaris. Mientras que un efluente filtrado y desinfectado Chlorella vulgaris comienza la absorcin de nutrientes a partir del segundo da de cultivo. La remocin del nitrgeno en forma oxidada es decir como amonio, nitrito y nitrato, en un cultivo microalgal tiene un comportamiento secuencial, es decir el nitrito y nitrato no son absorbidos por las microalgas hasta que el amonio en su gran mayora es consumido (Abalde, 1999), hecho que en la condicin outdoor la remocin de nitrito comenzara en el da 3, mientras que el nitrato la remocin comenz en el da 2. En la condicin indoor la remocin de nitrito y nitrato comenz a partir del da 2, pero con valores ms bajos que la remocin de amonio que registr un 42.22% comparado con 17.68% para el nitrito y un
27

35.06% para el nitrato. Posteriormente la

remocin de nitrito y nitrato en ambas

condiciones aument, despus que la remocin de amonio se mantuviese constante en 42.22%, llegando a una remocin final de nitrito de 91.67% en indoor en el da 8 y un 88.41% en el da 6 en la condicin outdoor. Mientras que en la condicin indoor el nitrato registr una remocin final 57.47% en el da 8, por el contrario en la condicin outdoor la mxima remocin se registr en el da 2 con un 29.31%, puesto que en los da 4 y 6 fue menor, por aumentar la concentracin de nitrato en el medio. La remocin de fosfato se inici dentro los primeros das llegando a una remocin final del 65.78% en el da 8 en la condicin indoor, mientras que para condiciones outdoor alcanz un valor de 75.78% en el da 6. Estos resultados se diferencian a lo presentado por Hernndez (2010) que en 20 das de cultivo en la condicin experimental indoor, la remocin de fosfato por Chlorella vulgaris alcanz un valor final de 24%. Si bien lo expuesto por Hernandez (2010) y Chacon et al (2002) en el sentido que los mejores resultados de crecimiento y remocin se obtienen con un efluente filtrado y desinfectado, tambin hay otros aspectos que deben ser considerados en la asociacin microalgas/efluentes, como el tipo de cultivo y la interaccin microalgas/bacterias, lo que constituye un consorcio microbiano. Estudios realizados por de-Bashan et al (2002) y Hernandez (2004), concluyen que el uso de un consorcio microbiano teniendo como base la asociacin de Chlorella vulgaris y la bacteria Azospirillum brasilense, en sistema de cultivos Batch (discontinuos), reportan un crecimiento de 4106cel/mL en el segundo da de cultivo, comparado con los sistemas semi continuos que logran crecimientos de 3106 cel/mL y en sistema continuo con 1106 cel/mL. Por su parte, la absorcin de nitrgeno en su forma oxidada comenz a partir del segundo da de cultivo, removiendo el 93% del total, comparado con este estudio que en el da 2 las formas de nitrgeno es decir Amonio
! (NH! ), Nitrito (NO2), Nitrato (NO3), fueron removidas en un 74.22% en condiciones

indoor y un 71.53% en outdoor. La absorcin de fosfato por Chlorella vulgaris asociada con Azospirillum brasilense logra tener una absorcin del 65% despus de dos das de cultivo, sin aumentar despus de ese periodo. En este estudio los valores de remocin de fosfato fueron en aumento al transcurrir el periodo de experimentacin, logrando valores

28

mximos de 65.78% y 75.78%, en los das 8 y 6 en condiciones indoor y outdoor, respectivamente. Ramos et al (2008) y Gac & Virreira (2008) recomiendan que para el proceso de absorcin de nutrientes nitrogenados la utilizacin de macro y microalgas es una alternativa viable. Por su parte, Gallardo (2008), quien trabajo con procesos de sedimentacin y absorcin de macroalgas, con un efluente similar a este estudio, concluye que la aplicacin de un sistema integrado de sedimentacin y absorcin por macroalgas, en el sptimo da de experimentacin en condiciones indoor, alcanza una remocin del nitrgeno inorgnico total de 68.24% y un 47.03% de fosforo, mientras que en condiciones outdoor las macroalgas remueven el 51% del nitrgeno inorgnico total y un 48.41% del fosfato. Los resultados anteriores demuestran que la aplicacin de macroalgas para la absorcin de nutrientes es eficaz, al igual que la aplicacin de microalgas, no obstante estas ltimas presentan una velocidad de absorcin de nutrientes mayor que las macroalgas, ya que los resultados alcanzados con la aplicacin de macroalgas en el sptimo da son similares a los resultados alcanzados por este estudio en el segundo da de experimentacin.

29

7. CONCLUSIN

A partir de los resultados obtenidos en las condiciones experimentales indoor y outdoor se puede concluir que: La microalga Chlorella vulgaris experimenta un mayor crecimiento en los cultivos controles enriquecidos con F2, en comparacin con los cultivos con aguas residuales, en ambas condiciones experimentales. No obstante, en aguas residuales, se logra constatar que el crecimiento de Chlorella vulgaris es significativamente mayor en la condicin experimental indoor que en la condicin outdoor, lo que se atribuye a los factores ambientales intensidad de luz y temperatura que influyeron negativamente. En ambas condiciones experimentales, la utilizacin de Chlorella vulgaris es efectiva en la remocin de nutrientes disueltos generados en la piscicultura de dorado Seriola lalandi. Logrando reducir entre 50% y 91% la concentracin de todos los nutrientes en estudio. En las condiciones indoor y outdoor, los mximos crecimientos alcanzados por Chlorella vulgaris son directamente proporcionales a la mxima remocin de nutrientes.

30

8. SUGERENCIAS

Para aumentar el crecimiento y la eficiencia de remocin de nutrientes, por parte de Chlorella vulgaris en aguas residuales, se sugiere trabajar en cultivos discontinuos en sistemas race-way, para evitar el incremento de temperatura del agua de cultivo, en la condicin experimental outdoor. Realizar estudios de escalamiento, de modo evaluar los resultados obtenidos en volmenes mayores. Si bien el proceso de crecimiento y remocin de nutrientes por parte de Chlorella vulgaris fue eficiente, es necesario considerar en un prximo estudio la caracterizacin bioqumica de la biomasa de microalga, puesto que Chlorella vulgaris presenta compuestos de inters nutricional (protenas, aminocidos, vitaminas, pigmentos, entre otros) que podran ser utilizados en un sinfn de intereses.

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9. BIBLIOGRAFA

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