Absorbtia selectiva a drojdiilor

Scopul lucrarii Configurarea si desfasurarea unei lucrari practice care sa puna in evidenta transportul de substante a drojdiilor. Dezvoltarea practicilor de laborator. Principiul lucrarii Drojdiile ca orice organism viu trebuie sa absoarba din mediul exterior o serie de substante necesare pentru desfasurarea proceselor metabolice. Acest proces poate avea loc prin difuzie pasiva (in sensul gradientului de concentratie) sau printr-un proces activ si selectiv. O data intrate in drojdii, aceste substante vor afecta chimia interna a celulelor determinand modificari de pH. Mod de lucru: Tuburi Corning Pipete si salpeta Pipettus Seringi

Reagentii necesari: Solutii de drojdii Solutie bicarbonat de Na+ 2% Colorant neutru (rosu) Solutie NaOH 0,01 M Solutie HCL 0,01 M

Procedura: 1. Puneti aproximativ 1 ml solutie colorata intr-un tub. Adaugati solutie bicarbonat de Na+ 2% cate o picatura si observati (notati) momentele in care culoarea se schimba. Adaugati solutie de HCl si observati schimbarea culorii. Repetati si cu NaOH. Explicati ce parametru al solutiei se schimba si ce proprietate are colorantul neutru (fenol rosu). 2. Din sticla cu suspensie de drojdii luati 10 de ml si puneti intr-un tub Corning de 50 ml. Adaugati 5 ml solutie bicarbonat de Na+ in suspensie, omogenizati apoi extrageti 5 de ml din aceastra

suspensie intr-un pahar separat. Adaugati 5 ml din solutia neutra (rosu). Observati culoarea imediat. Observati orice schimbare de culoare intr-un interval de 5 minute. Notati rezultatele. 3. Repetati pasul anterior cu solutie de NaOH in loc de bicarbonat de Na +, adaugata a.i culoarea sa fie identica cu cea de la punctul anterior. 4. Centrifugati 5 ml din solutiile: -suspensia de drojdii care contine colorantul neutru (punctul 2) dar nu contine nici bicarbonat de Na+, nici NaOH - suspensia de drojdii care nu contine colorant. -suspensia de drojdii cu NaHCO3 (bicarbonat de Na+) -suspensia de drojdii cu NaOH 5. Puneti sedimentul (drojdiile) intr-un vas petri siadaugati ~ 1 ml apa. Observati la microscop. Observati si inregistrati culoarea drojdiilor, si a lichidului filtrat.

Raspundeti la urmatoarele intrebari: Se afla in supernatant colorant? Credeti ca drojdiile au absorbit colorantul? Cum argumentati raspunsul? Credeti ca este un proces de transport activ sau pasiv? Ce puteti deduce despre aciditatea sau bazicitatea drojdiilor?

6. Adaugati cu grija colorant in solutia filtrata. Exista vreo dovada a prezentei bicarbonatului de Na+? bicarbonatul de Na+ este eliminat?

Ce dovada aveti ca este absorbit colorantul si/sau

Puneti 5 ml din suspensia cu colorant intr-un pahar cu apa fiarta si observati modificarile de culoare. Interpretati rezultatul.

7. Aruncati la chiuveta solutiile si curatati vasele cu care ati lucrat.