PURIFICACIN DEL AGUA El agua es una sustancia cuya molcula est formada por dos tomos de hidrgeno y uno

de oxgeno (H2O), sin embargo el agua en la naturaleza no se encuentra totalmente pura. Segn el uso para diversos usos y aplicaciones tiene que tener una ciertas condiciones y libre de contaminantes no admisibles en el agua pura. Es purificada mediante diversas operaciones tales como destilacin, filtracin, ultrafiltracin(UF), osmosis inversa, desionizacin, electrodesionizacin (EDI), adsorcin y oxidacin ultravioleta (UV), dependiendo del grado de pureza deseada se escoge la operacin entre otros parmetros. IMPUREZAS MS COMUNES DEL AGUA Partculas en suspensin La arena, el limo, la arcilla y otras partculas en suspensin enturbian el agua. Estas partculas pueden interferir en el funcionamiento de instrumentos, atascar vlvulas y otras reas del flujo angostas, as como obstruir membranas de smosis inversa. Su tamao tpico oscila entre 1 y 10 m. Coloides Las partculas coloidales suelen tener una ligera carga neta negativa, un tamao entre 0,01 y 1 m, y pueden ser orgnicas o inorgnicas. A diferencia de las partculas en suspensin, los coloides no se depositan por gravedad, sino que permanecen suspendidos en el lquido que los contiene. Los coloides atascan filtros, interfieren en el funcionamiento de los instrumentos, obstruyen membranas de smosis inversa y pueden eludir las resinas de intercambio inico, produciendo una menor resistividad en los sistemas de agua desionizada. Sustancias orgnicas disueltas Los slidos orgnicos proceden de la descomposicin animal y vegetal, as como de la actividad humana. Pueden incluir protenas, alcoholes, cloraminas y residuos de pesticidas, herbicidas y detergentes. Obstruyen las resinas de intercambio inico e interfieren en los anlisis orgnicos como la cromatografa de lquidos de alto rendimiento (HPLC), la cromatografa de gases y la fluoroscopa. Tambin dificultan la electroforesis y el cultivo tisular y celular. Iones inorgnicos Las impurezas como silicatos, cloruros, fluoruros, bicarbonatos, sulfatos, fosfatos,nitratos y compuestos ferrosos estn presentes en forma de cationes (iones con carga positiva) y aniones (iones con carga negativa). El agua con alta concentracin de iones conduce la electricidad fcilmente y tiene alta conductividad y baja resistividad, ya que la conductividad y la resistividad guardan una relacin inversa. Los iones afectan negativamente a los resultados de anlisis inorgnicos tales como cromatografa de intercambio inico (IC), absorcin atmica (AA), espectroscopa de plasma acoplado por induccin/espectrometra de masas (ICP/MS), y pueden retardar el crecimiento celular y tisular en lainvestigacin biolgica. Tambin pueden afectar a la vida til de los cartuchos en los sistemas de agua desionizada Gases disueltos El agua, por naturaleza, contiene gases disueltos como el dixido de carbono, el nitrgeno y el oxgeno. El dixido de carbono se disuelve en el agua y forma cido carbnico de

baja acidez (H2CO3) que puede alterar el pH del agua. Adems, el oxgeno, el gas no ionizado ms comn, puede corroer superficies metlicas. Microorganismos Las bacterias, los hongos y las algas se encuentran en todas las fuentes de agua naturales. Aunque la cloracin elimina las bacterias perjudiciales, el agua corriente sigue conteniendo microorganismos vivos que interfieren en las aplicaciones estriles como el cultivo celular y tisular. Pirgenos y virus Los pirgenos o endotoxinas bacterianas son molculas de lipopolisacridos que incorporan a la membrana celular de las bacterias Gram negativas. Los virus consideran cidos nucleicos no vivos. Ambos pueden tener efectos negativos en experimentos de laboratorio, pues suelen afectar al crecimiento celular y tisular en cultivos.

se se los los

Nucleasas Las ARNasas y ADNasas son enzimas naturales que se pueden utilizar para regular funciones orgnicas. As como de importantes son estas enzimas para el proceso de la vida lo son con un efecto devastador que pueden tener en los experimentos de cidos nucleicos. La presencia de estos contaminantes en el agua pura utilizada supone una grave limitacin a la hora de amplificar molculas de ADN. Igualmente, pueden arruinar los experimentos que utilizan ARN.

Figura 1. Contaminantes no admisibles en el agua PURA segn su aplicacin o rea de inters.

TECNOLOGAS DE PURIFICACIN DE AGUA Para poder obtener agua pura y ultrapura, las impurezas sealadas anteriormente se deben eliminar de forma efectiva y eficaz. Los sistemas de purificacin de agua utilizan varias tecnologas, algunas simultneamente, para eliminar las impurezas y proporcionar agua PURA de forma constante. La purificacin de agua es un proceso escalonado que suele requerir la combinacin de diversas tecnologas, cada una con su propia capacidad para eliminar contaminantes especficos. En la siguiente tabla se ilustran las impurezas que elimina cada tecnologa.

Figura 2. Grado de eliminacin de impurezas de diversas tecnologas. Destilacin La destilacin es el sistema de purificacin de agua que por s solo cuenta con ms capacidad de eliminacin. Durante el proceso de destilacin, el agua hierve y pasa por distintas fases, cambiando de lquido a vapor y de nuevo a lquido. En su paso de lquido a vapor es cuando el agua se separa (en distintos grados) de las impurezas disueltas en ella, como iones y iones, contaminantes orgnicos con puntos de ebullicin bajos (< 100 C), bacterias, pirgenos y partculas. La destilacin no basta por s sola para eliminar iones inorgnicos, gases ionizados, sustancias orgnicas con punto de ebullicin superior a 100 C o gases no ionizados disueltos. Ventajas:

 Es el sistema de purificacin de agua que por s solo cuenta con ms capacidad de eliminacin. No necesita consumibles. Limitaciones: Necesita un mantenimiento regular y la limpieza manual del sistema para conservar la pureza del agua. Necesita agua para enfriarse. Filtracin Los productos de purificacin de agua disponen de filtros de profundidad (nominal) y de membrana (absoluto) generalmente. Los filtros de profundidad se suelen utilizar en el pretratamiento y estn hechos de fibras reforzadas que envuelven tubos huecos y ranurados. Conforme pasa el agua por la matriz de fibra reforzada hacia el tubo central, las partculas se quedan en las fibras. Este tipo de filtro es el utilizado tradicionalmente para eliminar la mayor parte de las impurezas de tamao superior al del poro del filtro. Por lo general, estos filtros se disean para eliminar las partculas ms grandes (> 1 m) para proteger las tecnologas posteriores. A los filtros de membrana se les llama con frecuencia absolutos, ya que estn diseados para eliminar todas las partculas superiores al tamao de poro nominal del filtro. Utilizan una membrana (en forma de lmina plana o fibra hueca) y se suelen utilizar en el extremo del sistema para eliminar bacterias y otras partculas no eliminadas por los filtros anteriores. Los filtros de membrana que tradicionalmente se utilizan en los sistemas de agua de laboratorios tienen un tamao nominal de poro inferior a 0,45 m; con frecuencia, de 0,2 m. Ventajas: Funcionamiento eficaz. Mantenimiento solo para reposiciones. Limitaciones: Obstruccin. No elimina sustancias orgnicas, nucleasas, pirgenos, gases disueltos, ni sustancias inorgnicas disueltas. Ultrafiltracin (UF) En la purificacin de agua, la ultrafiltracin se utiliza para eliminar pirgenos (endotoxinas bacterianas) y nucleasas, lo que resulta fundamental para el cultivo tisular, el cultivo celular y la preparacin de medios. Para eliminar partculas y macromolculas, los ultrafiltros utilizan la exclusin por tamao. Por su diseo, funcionan de forma similar a las membranas de smosis inversa: las partculas quedan atrapadas en la superficie de las membranas y se eliminan mediante una corriente de rechazo. Los ultrafiltros se utilizan en el extremo de los sistemas para garantizar la eliminacin de casi la totalidad de impurezas macromoleculares como pirgenos, nucleasas y partculas. Ventajas:

 Elimina eficazmente las molculas (pirgenos, nucleasas, microorganismos y partculas) de tamao superior al nominal del filtro. Larga duracin. Ayuda a eliminar pirgenos y nucleasas. Limitaciones: No elimina sustancias inorgnicas disueltas, gases disueltos ni sustancias orgnicas. smosis inversa La smosis inversa es el mtodo ms econmico para eliminar hasta el 99% de los contaminantes del agua de suministro. Para entender la smosis inversa, primero es necesario saber qu es la smosis. En la smosis natural, el agua pasa de una solucin menos concentrada a una ms concentrada, pasando por una membrana semipermeable, hasta que la concentracin y la presin en ambos lados de la membrana es la misma. En los sistemas de purificacin de agua, se ejerce presin externa en el lado de la membrana con mayor concentracin (agua de suministro) para revertir el flujo osmtico natural. As se fuerza el paso del agua de suministro por la membrana semipermeable. Las impurezas se depositan en la superficie de la membrana y se envan a drenar. El agua que pasa por la membrana como agua producida, apenas tiene impurezas. Las membranas para smosis inversa tienen una superficie fina de microporos que rechaza las impurezas pero permite el paso del agua. La membrana impide el paso de bacterias, pirgenos y entre el 90 y el 95% de slidos inorgnicos. Los iones polivalentes se rechazan ms fcilmente que los monovalentes. La membrana rechaza los slidos orgnicos con un peso molecular superior a 200 Daltons, pero no puede eliminar eficazmente los gases disueltos. La smosis inversa es una tecnologa de rechazo porcentual. La pureza del agua producida depende de la pureza del agua de suministro. El producto suele tener entre un 95 y un 99% ms de pureza que el agua de suministro. La naturaleza restrictiva de la membrana hace que el caudal sea ms lento que en otras tecnologas de purificacin. La velocidad de caudal ms baja provoca que todos los sistemas de OI necesiten un depsito de almacenamiento para poder suministrar agua de OI de forma constante siempre que se necesite. Ventajas: En distintos grados, elimina la mayora de los tipos de contaminantes, bacterias, pirgenos y entre el 90 y el 95% de iones inorgnicos. Necesita un mantenimiento mnimo. Limitaciones: El paso del caudal por la membrana a una velocidad limitada exige el uso de dispositivos de almacenamiento para atender las necesidades del usuario. No elimina gases disueltos. Necesita pretratamiento para evitar el deterioro de la membrana. Desionizacin La desionizacin tambin se puede denominar desmineralizacin o intercambio inico.

El proceso elimina iones del agua de suministro mediante resinas sintticas. Son resinas que se alteran qumicamente para que tengan afinidad con iones inorgnicos disueltos y se clasifican en dos tipos: resinas de eliminacin de cationes y resinas de eliminacin de aniones. Los cationes tienen carga positiva e incluyen sodio (Na+), calcio (Ca+2) y magnesio (Mg+2). Los aniones tienen carga negativa e incluyen cloruro (Cl-), sulfatos (SO4-2) y bicarbonatos (HCO-3). Los iones desaparecen del agua mediante una serie de reacciones qumicas. Estas reacciones tienen lugar cuando el agua atraviesa los lechos de resina de intercambio inico. La resina catinica contiene iones de hidrgeno (H+) en la superficie, que se intercambian por iones con carga positiva. La resina aninica contiene iones de hidrxido (OH-) en los puntos de intercambio, que se intercambian por iones con carga negativa. El resultado final de estos dos intercambios es H+ y OH-, que se combinan para formar agua (H2O). La desionizacin es la nica tecnologa que alcanza el requisito de resistividad del agua de tipo 1 con grado de reactivo. En los sistemas de agua de laboratorio, las resinas catinicas y aninicas se utilizan casi siempre combinadas para poder alcanzar la mxima pureza inica. Desionizacin de doble lecho Las resinas catinica y aninica se encuentran en capas diferentes de un cartucho. En general, este mtodo resulta menos eficaz para desionizar agua que el lecho mixto, pero es ms tolerante hacia otros tipos de impurezas. Desionizacin de lecho mixto Utilizamos resina de lecho mixto para alcanzar la mxima resistividad y un COT bajo. La combinacin de resina catinica y aninica permite realizar una desionizacin completa, por lo que resulta ms eficiente y eficaz para la eliminacin de iones. Ventajas: Elimina los iones inorgnicos disueltos con gran eficacia. El agua producida tiene una resistividad superior a 18 M.cm. Limitaciones: Capacidad limitada. Una vez que estn ocupados todos los sitios de enlaces inicos, ya no quedan retenidos los iones y es necesario sustituir el cartucho. No elimina sustancias orgnicas, partculas, pirgenos ni bacterias. Electrodesionizacin (EDI) Al contrario de lo que ocurre con el intercambio inico convencional en el que las resinas se agotan y deben regenerarse qumicamente o descartarse, la EDI utiliza una corriente elctrica para una regeneracin continua de resinas. Funcionamiento de EDI Varias capas de membranas selectivas de iones se sitan entre un ctodo y un nodo. Los lechos de resina de intercambio inico estratificado y las cmaras de concentracin se sitan de forma alterna entre ellas. Al aplicar una tensin elctrica, el agua (H2O) se divide en H+ y OH en la celda. Los cationes de H+ y Na+ pueden migrar a travs de membranas permeables a cationes y los aniones pueden hacerlo a travs de membranas permeables a aniones. Los iones migran en la direccin de la tensin aplicada, es decir, los aniones se dirigen al polo positivo (nodo) y los cationes al negativo (ctodo). Los iones del agua H+ y OH que

migran a travs de una cmara de intercambio inico desplazan a los iones de sal que retienen las resinas de intercambio inico, por lo que regeneran las resinas de forma continua. Los iones de sal migran a travs de las membranas selectivas de iones correspondientes hacia las cmaras de concentracin y el agua los arrastra. Cuando, una tras otra, las cmaras de concentracin se lavan, el exceso de iones H+ y OH se pueden volver a combinar para formar H2O. Ventajas: Elimina los iones con gran eficacia. Se regenera de forma automtica y continuada. Limitaciones: Capacidad limitada: el agua de suministro debe ser de alta calidad. No elimina sustancias orgnicas, partculas, pirgenos ni bacterias. Adsorcin La adsorcin utiliza el carbono activo en un rea superficial muy alta para eliminar sustancias orgnicas y cloro del agua de suministro. La mayora de los sistemas de purificacin de agua lo utilizan, combinado con resinas de intercambio inico, como primer o segundo paso, o incluso como ltimo paso, para alcanzar un carbono orgnico total (COT) ultrabajo. Las sustancias orgnicas y el cloro se adhieren a la superficie del carbono activo y se quedan acoplados al carbono. Ventajas: Elimina sustancias orgnicas disueltas y cloro. Larga duracin. Limitaciones No elimina iones ni partculas Oxidacin ultravioleta (UV) La oxidacin fotoqumica con luz ultravioleta elimina lastrazas orgnicas y desactiva los microorganismos del agua de suministro. Las lmparas UV de los sistemas de agua pura generan luz en dos longitudes de onda (185 y 254 nm). La luz generada a 254 nm tiene la accin antibacteriana ms potente, al reaccionar con su ADN y desactivarlas. La combinacin de luz de 185/254 nm oxida los compuestos orgnicos y permite niveles de carbono oxidable total inferiores a 5 ppb. Ventajas: Mtodo eficaz para evitar la contaminacin bacteriana Oxida compuestos orgnicos para producir agua pura con niveles de COT bajos Limitaciones: No elimina iones, coloides ni partculas NORMAS INTERNACIONALES DEL AGUA El agua para reactivos tiene especificaciones cuantitativas del nivel de pureza. La descripcin de estas especificaciones se rige por las normas ASTM (American Society for

Testing and Materials) D1193, ISO (International Organization for Standardization) 3696 y CLSI-CLRW (Clinical and Laboratory Standards Institute-Clinical Laboratory Reagent Water). La norma ms utilizada, la ASTM D1193-6, se resume en la tabla siguiente.

Figura 3. Valores estndar ATM para agua de reactivos. OTROS PARMETROS QUE SE UTILIZAN PARA INDICAR LA PUREZA DEL AGUA Resistividad La tendencia del agua sin iones a resistirse a la conduccin de electricidad. La unidad de medida es el megaohmio-centmetro (M.cm), Se utiliza comnmente para el agua de gran pureza. El valor mximo terico es de 18,2 M.cm a 25 C. Cuanto ms alto es el contenido inico ms baja es la resistividad y cuanto ms bajo es el contenido inico, ms alta es la resistividad (un nivel alto de resistividad es bueno). En los sistemas de agua ultrapura, este valor se determina mediante un contador en lnea. Las medidas de conductividad y resistividad son proporcionalmente inversas. Conductividad Tendencia del agua con iones a conducir electricidad. La unidad de medida es microsiemens/centmetro (S/cm) o microhmio/cm. Se utiliza para medir el agua de suministro o aguas tratadas de calidad inferior. Cuantos ms iones hay en el agua, mayor es la conductividad. Se mide con un contador de conductividad. Carbono orgnico total (COT) Medida de los contaminantes orgnicos encontrados en el agua. La unidad de medida es partes por milln (ppm) o partes por mil millones (ppb). En el agua de suministro puede oscilar entre 2 y 5 ppm, y la pureza ms alta del agua estara entre 1 y 5 ppb. La medicin del COT se realiza con un sistema en lnea. DESTILACION

En la prctica, la destilacin puede llevarse a cabo segn dos mtodos principales. El primer mtodo se basa en la produccin de vapor mediante la ebullicin de la mezcla lquida que se desea separar y condensacin de los vapores sin permitir que el lquido retorne al caldern. Es decir, no hay reflujo. El segundo mtodo se basa en el retorno de una parte del condensado a la columna, en unas condiciones tales que el lquido que retorna se pone en ntimo contacto con los vapores que ascienden hacia el condensador. Cualquiera de los dos mtodos puede realizarse de forma continua o por cargas. La primera seccin de este captulo trata de los procesos de destilacin continua en estado estacionario, incluyendo vaporizacin parcial en una sola etapa sin reflujo (destilacin de flash) y destilacin continua con reflujo (rectificacin). DESTILACIN FLASH La destilacin flash consiste en la vaporizacin de una fraccin definida del lquido, en una forma tal que el vapor que se forma est en equilibrio con el lquido residual, la separacin del vapor y el lquido, y posterior condensacin del vapor. La Figura 4 muestra los elementos de una planta de destilacin flash. La alimentacin se hace circular, por medio de la bomba a, a travs del calentador b, y se reduce la presin en la vlvula c. Una ntima mezcla de vapor y lquido entra en el separador d, en el que permanece suficiente tiempo para que se separen las corrientes de lquido y vapor. Debido al gran contacto existente entre el lquido y el vapor antes de su separacin, las corrientes que salen de ambos estn en equilibrio. El vapor sale a travs de la lnea e y el lquido a travs de la lnea g.

Figura 4. Planta para la destilacin flash.