LABORATORIO MICROBIOLOGIA DE PESCADO

By jamg

INTRODUCCIN

Debido a que la carne de pescado es un alimento con grandes nutrientes, los microorganismos encuentran la oportunidad para crecer y reproducirse, as rpidamente deterioran dicho alimento y pueden transmitir enfermedades a sus consumidores. Es importante estudiar las tcnicas empleadas para identificar vibrios en la carne de pescado, ya que afectan regularmente la carne de pescado. En el siguiente trabajo solo se busca identificar vibrios, ya que se han estudiado y se conocen las dems tcnicas para identificar otros microorganismos en otros tipos de carnes.

OBJETIVOS

Conocer la tcnica empleada para el aislamiento de vibrios en pescado. Determinar los anlisis microbiolgicos que se realizan a las carnes pescado. Interpretar los resultados obtenidos y compararlos con normas vigentes para este tipo de productos.

MICROBIOLOGA DE PESCADO

MATERIALES, MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS Bistur Pipetas con graduacin Caja de petri de vidrio Mechero de bunsen Incubadoras TCBS 200 gramos de pollo fresco Algodon Papel vinipel Alcohol antisptico Solucin salina METODO Se procedi a limpiar la superficie de trabajo y desinfectar con alcohol antisptico. Se tom un pescado pequeo, se le quitaron las agallas y se le hicieron cuatro cortes para tomar dos de manera intercalada, como se muestra en las imgenes. De estos cortes se tomaron 10 gramos para pesar y diluir en 90 ml de solucin. Luego se tomaron 10 ml y se llevaron hasta 100 ml nuevamente con solucin salina. En total se realizaron 2 diluciones. Se encendi el mechero para flamear las bocas de los recipientes donde se realizaran las diluciones. Despus de las diluciones se tomaron 100 y se le agregaron a los medios de cultivo de TCBS y se sembraron placa en superficie.

RESULTADOS Y DISCUSIONES CONTAJE DE SALMONELLA SP Placa 10-3 A 0 B 0

Muestra Pollo fresco

Contaje reportado 0 UFC/ml ESTC

En el medio de cultivo TCBS no crecieron vibrios, por lo que el producto estudiado en el laboratorio es apto para el consumo humano y podra salir al mercado de acuerdo a la resolucin 0670 del 9 marzo de 2007. Aunque cabe decir que no se analizaron los dems microorganismos que se encuentran dentro de los requisitos microbiolgicos que se deben identificar segn la resolucin antes mencionada

ANEXO

TCBS MEDIO Medio selectivo para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholerae, Vibrio parahemolyticus y otras especies de Vibrio a partir de heces, agua y alimentos contaminados. Tambin es conocido como Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa, o como Agar Selectivo para Vibrios. FUNDAMENTO En el medio de cultivo, el extracto de levadura, la peptona de carne y la triptena aportan nutrientes para el desarrollo bacteriano. Es este, el medio selectivo ms adecuado para el aislamiento de las especies de Vibrio, e inhibidor para la mayora de las enterobacterias. Esta inhibicin se basa en las altas concentraciones de tiosulfato y citrato, la presencia de bilis y un pH fuertemente alcalino. La degradacin de la sacarosa es variable entre las especies de Vibrio y las colonias son verdes para las cepas que no la utilizan y amarillas para aquellas que producen cido a partir de este azcar. Esto es debido al viraje del color de los indicadores de pH azul de timol y azul de bromotimol, del color azul al amarillo en medio cido. Es importante tener en cuenta, que la proporcin de sacarosa en el medio est equilibrada de forma tal que no inhiba el crecimiento bacteriano por exceso de cido. El cloruro de sodio favorece el crecimiento de microorganismos. El tiosulfato de sodio aporta azufre y junto con el citrato frrico permiten la deteccin de produccin de cido sulfhdrico. Aumentando la concentracin de cloruro de sodio y disminuyendo la temperatura de incubacin, pueden aislarse especies marinas sin importancia sanitaria. Frmula (en gramos por litro) Extracto de levadura Peptona de carne Triptena Citrato de sodio Tiosulfato de sodio Bilis de buey 5.0 5.0 5.0 10.0 10.0 8.0 Suspender 89 g del polvo en un litro de agua destilada. Calentar hasta ebullicin y hervir de 1 a 2 minutos. NO AUTOCLAVAR. Distribuir en Instrucciones

Sacarosa Cloruro de sodio Citrato frrico Azul de bromotimol Azul de timol Agar

20.0 placas de Petri estriles. 10.0 1.0 0.04 0.04 15.0 pH final: 8.6 0.2

Incubacin

En aerobiosis, durante 18-24 horas a 35-37C. Resultados Microorganismo Crecimiento Caractersticas de las colonias Amarillas de 2-3 mm de dimetro, de borde traslcido Centro verde azulado, borde traslcido Amarillas grandes ---

Vibrio cholerae

Bueno

V. parahaemolyticus V. alginolyticus Aeromonas spp. E. coli Caractersticas del medio Medio preparado: verde azulado. Almacenamiento Medio deshidratado: a 10-35 C. Medio preparado: a 2-8 C.

Bueno Bueno Inhibido Inhibido