Vous êtes sur la page 1sur 12

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN

MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA


FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

INFORMACIN BSICA
NOMBRE DE LA PRCTICA:
Hidrlisis de Carbohidratos.

PRCTICA No.

ASIGNATURA: Bioqumica.
TEMA DE LA PRCTICA: Biomolculas.
LABORATORIO A UTILIZAR: Laboratorio de Bioqumica.
CONTENIDO DE LA GUA
OBJETIVO
Detectar mediante pruebas qumicas la formacin de monosacridos como producto de la hidrlisis cida de
polisacridos y disacridos como el almidn, la celulosa y la sacarosa
INTRODUCCIN
El trmino carbohidrato es usado para nombrar una gran cantidad de polihidroxialdehdos y
polihidroxicetonas que por condensacin polimrica forman molculas denominadas disacridos o
polisacridos. El almidn de los alimentos, el azcar de cocina, la celulosa de la madera, el algodn y el
papel son algunos ejemplos de carbohidratos que comnmente conocemos.
Los carbohidratos generalmente se clasifican en monosacridos, disacridos o polisacridos. Los
monosacridos son azucares simples como la glucosa y la fructosa que no se pueden convertir por hidrlisis
en molculas ms pequeas, en cambio los disacridos o polisacridos son azucares complejos formados por
dos o ms monosacridos, por ende cuando son hidrolizados pueden producir este tipo de azucares.
En esta prctica de Laboratorio se hidrolizara almidn, sacarosa y celulosa por medio de la adicin de cido
diluido, el estudiante estar en capacidad de comprobar la formacin de los monosacridos
correspondientes por medio de la adicin del reactivo de Fehling.
MARCO TERICO
1. LOS CARBOHIDRATOS
Los carbohidratos representan aproximadamente un 50% de la biomasa presente en el planeta, lo que los
hacen las biomolculas ms abundantes sobre la superficie terrestre. stas son muy importantes porque
conforman la estructura del material biolgico, juegan un papel importante en el reconocimiento molecular y
son la principal forma metablica de almacenamiento de energa. Usualmente, menos del 1% de la luz del sol
disponible es convertida en energa qumica potencial por fotosntesis, pues la energa del sol es almacenada
en los enlaces qumicos de los componentes estructurales de los carbohidratos. Si esta biomasa es procesada
eficientemente, ya sea qumica o biolgicamente, extrayendo la energa almacenada en los enlaces qumicos,
la energa producida se combinar con el oxgeno presente, oxidando el carbono y produciendo CO2 y H2O,
este proceso es cclico, pues el CO2 producido estar disponible para producir nuevamente biomasa. El
hombre desde sus inicios ha sacado provecho de la energa almacenada en los enlaces qumicos de la
biomasa, por medio de la quema de combustibles y el consumo de plantas para la nutricin (McKendry,
2002).
1.1 LA SACAROSA
La sacarosa (azcar comn) sintetizada en las plantas, es un producto intermedio de la fotosntesis, en la que
la energa de la luz del sol es reunida y usada para la sntesis de glucosa de CO2 y H2O (Cooper, 2000). Se trata
Pgina 1 de 12

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN


MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA
FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

de un disacrido formado por glucosa y fructosa (Figura 1) unidos por un enlace glicosdico el cual bloquea
los dos enlaces de los grupos carbonilo, por lo cual es considerado como un azcar no reductor. Este azcar
no se oxida y por tanto se obtienen resultados negativos al reaccionar con el reactivo de Fehling. La sacarosa
se puede hidrolizar (incorpora una molcula de agua) por diferentes medios, ya sean por accin de la enzima
invertasa presente en la saliva y el tracto digestivo o por accin de cidos diluidos como el cido clorhdrico.
Al hidrolizarse, la sacarosa produce un equivalente de glucosa y otro de fructosa esta mezcla se conoce como
azcar invertida (Biogeo_OV, 2011).
OH

Sacarosa

O H

(Dglucopiranosil Dfructofuransido)

H
OH

HO
H

OH
O

OH

O
HO

Glucosa

Fructosa
H

HO

OH

Figura 1. Estructura de la sacarosa.

1.2 EL ALMIDN
Es un polisacrido muy abundante en las semillas, frutos y tubrculos. Est formado por molculas de -Dglucosa, en la molcula de almidn se puede distinguir dos fracciones: La amilosa, que es insoluble en agua
fra y en la que la glucosa se enlaza por las uniones 1,4- - glicosdicas, y la otra fraccin denominada
amilopectina (Figura 2), ste es un polmero soluble en agua fra cuyas ramificaciones 1,6- -glucosdicas se
presentan aproximadamente cada 25 unidades de glucosa.

Figura 2. Fragmento de la molcula del almidn correspondiente a amilopectina, la unidad encerrada en el crculo
corresponde a la glucosa. Tomado de Biogeo_OV (Biogeo_OV, 2011)

El almidn se digiere en la boca y en el estmago por medio de las enzimas glicosidasas, las cuales hidrolizan
selectivamente los enlaces -glicosdicos, estas enzimas catalizan la hidrlisis de estos enlaces y liberan las
Pgina 2 de 12

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN


MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA
FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

molculas de glucosa. La hidrlisis del almidn tambin se puede llevar a cabo por accin del calor y un cido
en medio acuoso dando como resultado la formacin de unidades de glucosa.
La celulosa es otro polisacrido de gran importancia que consta de miles de unidades de D-glucosa que se
enlazan por uniones 1,4-b-glicosdicas como las de la celobiosa (Figura 3). La molculas de celulosa pueden
interactuar por enlaces de hidrgeno, formando una macroestructura, que es la responsable de la resistencia
y rigidez caractersticas de las plantas, por ejemplo en el pasto, las hojas y el algodn (Nelson, 1993) (Stryer,
1995)

OH

O
H

OH
3

1
2

OH

OH
2

OH

H
H

H
1

OH

OO
H

OH
3

1
2

OH

OH

Figura 3. Estructura de la celulosa donde se observa los enlaces 1,4-glucosa

La celulosa puede ser degradada por diferentes compuestos, entre los cuales se encuentra el cido sulfrico,
cuya accin depende de la concentracin y duracin del contacto. Si el cido se usa concentrado y fro
aumenta el volumen y produce una sustancia parecida a la fcula y al engrudo de almidn. Cuando sta, se
vierte en mucha agua separa unos copos incoloros que dan una coloracin azul al tratarse con lugol
(solucin de yodo), llamndose por esta razn amiloide. Si contacto del cido sulfrico con la celulosa es
corto la capa amiloide solo se forma en la superficie, propiedad que es aprovechada para la fabricacin de
papel pergamino (Stryer, 1995)
CONSULTA PREVIA
1. Complete el mapa conceptual que aparece a continuacin con los siguientes trminos: Lactosa, Rafinosa,
Azcares simples, Fructosa, Disacridos, Celulosa. (0,5/5,0)

Pgina 3 de 12

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN


MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA
FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

2. El siguiente diagrama muestra los resultados tanto positivos como negativos que se pueden obtener al
tratar una muestra con el reactivo de Fehling y a continuacin se muestran los resultados obtenidos en
un laboratorio para diversos carbohidratos que fueron tratados con este reactivo (glucosa, Fructosa
maltosa, sacarosa, celulosa y almidn). De acuerdo a esta informacin complete la tabla de resultados
que se muestra: (1,0/5,0)
Tipo de
carbohidrato
Monosacrido
Disacrido
Polisacrido
Monosacrido
Polisacrido
Disacrido

Figura 4. Resultados con el reactivo de Fehling (Adaptado de


Aguirre y Morales, 2011)

Resultado con
Fehling
+
+
+
-

Nombre

3. Cul es la diferencia del enlace qumico entre las glucosas que conforman el almidn y la celulosa?
Explique sealando las diferencias en los dibujos de los respectivos enlaces qumicos (1,0/5,0).
DIBUJO ENLACE GLUCOSAS EN EL ALMIDN

DIBUJO ENLACE GLUCOSAS EN LA CELULOSA

EXPLICACIN:

EXPLICACIN:

4. Complete la siguiente reaccin de hidrlisis de la sacarosa (1,0/5,0)


OH
HO

O H

H
OH

H
H

HO

HO

O
OH

OH

Sacarosa
5.

OH

O
H

OH

Complete la reaccin de hidrlisis del almidn (1,0/5,0)


OH

OH

OH

O H

OH

Almidn

H
H

OH

O
H

OH
n

Pgina 4 de 12

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN


MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA
FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

RIESGOS Y SEGURIDAD (0,5/5,0)

REACTIVO

PELIGROS

CONSEJOS DE PRECAUCIN

Frases H

Frases P

cido Clorhdrico

cido Sulfrico

Hidrxido de
Sodio
(Presente en reactivo
de Fehling B)

Lugol de Gram

Sulfato de Cobre II
(Presente en reactivo
de Fehling A)

METODOLOGA
1. Ingreso de los estudiantes a la prctica (Cada uno debe tener sus elementos de bioseguridad: Guantes,
Tapabocas y bata).
2. Entrega y revisin de consulta previa.
3. Presentacin de Quiz sobre los objetivos, introduccin, marco terico y consulta previa.
4. Retroalimentacin de consulta previa, la cual incluye aclaracin en las posibles dudas que tengan los
estudiantes.
5. Explicacin del procedimiento por parte del docente.
Pgina 5 de 12

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN


MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA
FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

6. Entrega de material laboratorio.


7. Desarrollo de la prctica.
8. Puesta en comn de los resultados obtenidos, posibles causas de error y conclusiones.
9. Realizacin y entrega del Informe de Laboratorio.
10. Entrega y revisin del material de Laboratorio.
MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS A UTILIZAR
MATERIALES Y EQUIPOS

1
1
1
1
8
1
1
5
5
8
1

Beaker de 400 mL
Beaker de 250 mL
Pinza para tubo de ensayo
Vidrio de Reloj
Tubos de ensayo
Gradilla
Probeta 50 mL
Pipeta Graduada de 5 mL
Pipeteadores
Pipetas Pasteur
Plancha de Calentamiento

REACTIVOS

2 mL
10 mL
10 mL
3 mL
2 mL
4 mL
10 mL
1g
5 mL

MATERIALES ESTUDIANTE

cido Sulfrico concentrado Elementos de Bioseguridad


HCl 10%
1 Encendedor o fsforos
Almidn 1%
1 Marcador Sharpie
NaOH 10%
1 Pao absorbente
Lugol
Felhing A y B
Sacarosa 50%
Algodn
Agua destilada
Papel Indicador Universal

PRECAUCIONES Y MANEJO DE MATERIALES Y EQUIPOS. CONSULTA DE EQUIPO ESPECIALIZADO.

Usar elementos de proteccin bata, tapabocas, guantes y gafas como requisitos mnimos de
seguridad al ingresar al laboratorio.
NUNCA corra o juegue en el Laboratorio, puede ocasionar un accidente.
EN LO POSIBLE, no saque de la cabina los reactivos que emitan vapores peligrosos.
Nunca pipetear con la boca. Utilice los pipeteadores.
No utilizar la misma pipeta para varios reactivos ya que los contamina.
Dejar el lugar de trabajo limpio, seco y organizado.
Lavar cuidadosamente todo el material al iniciar y al finalizar la prctica.
Al emplear la plancha de calentamiento tenga precaucin de que el cable NO toque
superficies calientes.
NUNCA coloque material de vidrio caliente sobre superficies fras.

Pgina 6 de 12

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN


MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA
FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

PROCEDIMIENTO A UTILIZAR
HIDRLISIS DE ALMIDN
Tubo de Ensayo
5 mL Almidn al 1%
3 mL HCl al 10%
Calentar en Bao de Maria
1 Calentar por 5 min.

Rotular como Sln AH

PRUEBAS AL ALMIDN HIDROLIZADO


PRUEBA DE FEHLING

PRUEBA DE LUGOL
Vidrio de Reloj

Tubo 1

Tubo 2

2 mL Sln AH
1 gota Sln AH

1 gota Almidn 1%

0.5 mL Fehling A
0.5 mL Fehling B

2 gotas de Lugol

Observar Coloracin

2 mL Almidn 1%

0,5 mL NaOH
3M

Bao de Maria, 100C


Observar Coloracin

1 Agitar los tubos.


2 La aparicin de una coloracin Oscura indica la presencia de ALMIDN.
4 La aparicin de una coloracin precipitado Rojo Ladrillo indica la presencia de AZCARES REDUCTORES.

Pgina 7 de 12

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN


MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA
FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

HIDRLISIS DE LA SACAROSA
Tubo 2

Tubo 1

2 mL Sacarosa al 50%

Tubo 3
2 mL Sacarosa al 50%

2 mL Sacarosa al 50%

2 mL Agua Destilada

2 mL NaOH 10 %

1 Bao de Mara 70C

1 Bao de Mara 70C

2 mL HCl 10 %

1 Bao de Mara 70C


1 mL NaOH 10%

0,5 mL de Fehling A
0,5 mL de Fehling B
Bao de Mara, 100C
Observar Coloracin

1 Calentar por 5 min.


3 Aparicin de precipitado Rojo Ladrillo es positiva para Azcares Reductores.

HIDRLISIS DE LA CELULOSA

PRUEBA DE FEHLING A LA CELULOSA

Beaker 250 mL

Tubo 1

Tubo 2

2 mL Sln CH

0,2g Algodn
1 mL H2SO4

0,5g Algodn

1 mL NaOH 10%

10 mL Agua Destilada

0.5 mL de Fehling A
0.5 mL de Fehling B

Bao de Mara, 70C, 15min


Bao de Mara, 100C, 5min
Rotular como Sln CH

Observar Coloracin

1 Adicionar gota a gota por la paredes del beaker.


2 Aparicin de precipitado Rojo Ladrillo es positiva para Azucares Reductores.

BIBLIOGRAFA
Aguirre,

O., Morales E. (2011). Universidad del Qundio, Facultad de educacin. Obtenido


http://www.uniquindio.edu.co/uniquindio/ntic/trabajos/10/davidyoscar/paginas/reccarb.htm
Biogeo_OV. (2011). http://www.educastur.es/. Obtenido de
http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/2bch/B1_BIOQUIMICA/t13_GLUCIDOS
Cooper, G. (2000). Books: NCBI. Obtenido de http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK9861/
McKendry, P. (2002). faculty.washington.edu: University of Washington. Obtenido de
http://faculty.washington.edu/stevehar/Biomass-Overview.pdf
Nelson, D. L. (1993). Lehninger Principles of Biochemistry. Worth Pubs.
Stryer, T. (1995). Bioqumica. Revert S.A.
ELABOR

REVIS

Firma:
Firma:
Nombre: Profesores Laboratorio de Nombre: Lic Alba Chaparro
Bioqumica
Fecha: Julio 2013
Fecha: Julio 2013

APROB
Firma:
Nombre: Ing. Claudia Fernndez
Fecha: Julio 2013
Pgina 8 de 12

de

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN


MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA
FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

INFORME DE LABORATORIO
ESTUDIANTES:

GRUPO:

NOTA:

CARRERA:
Formule tres objetivos que desee cumplir con la prctica de laboratorio.(0,5/5,0)
(Deben realizarse durante la prctica)
___________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

1.
2.

___________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

3.

___________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

Elabore un Mapa conceptual del tema a tratar en la Prctica de Laboratorio (0,5/5,0).

Pgina 9 de 12

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN


MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA
FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

RESULTADOS
1.

Completar las siguientes tablas con los resultados obtenidos (1,0/5,0)


LUGOL
MUESTRA

OBSERVACIONES

FEHLING
RESULTADO
(+) o (-)

OBSERVACIONES

RESULTADO
(+) o (-)

ALMIDN SIN
HIDROLIZAR

ALMIDN
HIDROLIZADO

FEHLING
MUESTRA

OBSERVACIONES

RESULTADO
(+) o (-)

SACAROSA
CON AGUA

SACAROSA
CON NaOH

SACAROSA
CON HCL

FEHLING
MUESTRA

OBSERVACIONES

RESULTADO
(+) o (-)

ALGODN

ALGODN
HIDROLIZADO

CUESTIONARIO
1.

A Qu se debe la diferencia de color al realizar la prueba del lugol con el almidn hidrolizado y con el
almidn sin hidrolizar? (0,3/5,0)
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
Pgina 10 de 12

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN


MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA
FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

2.

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

A Qu se debe la diferencia de color al realizar la prueba de Fehling con el almidn hidrolizado y con el
almidn sin hidrolizar? (0,3/5,0)
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

3.

Con cul prueba se detect la hidrolisis de un polisacrido y por qu esta prueba permite determinar
que realmente se llev a cabo la reaccin? (0,3/5,0)
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

4.

Cul es la accin que ejercen el cido y el hidrxido sobre la sacarosa? (0,3/5,0)


______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

5.

Qu le sucede al algodn cuando est en contacto con el cido sulfrico? (0,3/5,0)


______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

CAUSAS DE ERROR Y ACCIONES PARA OBTENER MEJORES RESULTADOS:


Mencione y explique dos razones por las cuales no se producira la hidrlisis de los carbohidratos estudiados
en esta prctica (0,5/5,0):
Razn 1: __________________________________________________________________________________________
Explicacin:________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
Razn 2: __________________________________________________________________________________________
Explicacin:________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________

Pgina 11 de 12

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN


MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA
FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

CONCLUSIONES (0,5/5,0)
1.
2.
3.

______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

APLICACIN PROFESIONAL DE LA PRCTICA REALIZADA (0,25/5,0)


__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________

BIBLIOGRAFA UTILIZADA (0,25/5,0)


__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________

Pgina 12 de 12

Vous aimerez peut-être aussi