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Resumen………………………………………………………………..….1
Introducción……………………………………………………………..…2
I.- Mediciones…………………………………………………….….…….……....2
II.-Exactitud y precisión………………………………………………….…….…3
III. Manejo de las pipetas……..………………..…………………………………3
IV. Preparación de soluciones………………………..……………………….…..5
Objetivos………….……………………………………….……………..….6
Hipótesis………...……………………………………………….……..……6
Material………………...……………………………………….………...…..6
Metodología…………….………………………………………….……..…..6
Resultados………………………..……………………………………………7
Discusión de Resultados………………………………….………… ………..8
Conclusiones…………………………………………….…………………….8
Referencias……………………………………………….……………...……..9
RESUMEN:
En esta práctica se tiene el concepto de calidad y algunos de los parámetros más importantes, que tienen que ver
con esta como la importancia de las mediciones en un proceso de calidad al ser preparadas las soluciones que
podrían llegar a ser de un medicamento, por lo que es importante que se tenga precisión y/o exactitud en las
mediciones de estas para que el medicamento este correctamente elaborado debido a que si no es así hasta se
puede llegar a causar la muerte por su incorrecta elaboración.
Se utilizó como técnica el uso de las pipetas para la preparación de soluciones de la misma concentración que fue
lo que se determinó, de esta manera se lograría comprobar que las mediciones en el laboratorio son susceptibles a
error, sobretodo si no se tiene un buen manejo de las técnicas de preparación de estos.
Para la técnica se prepararon 1 solución de dicromato de potasio al 10% en ácido sulfúrico 0.8N aforado a 100ml ,
para esto la realizó después una dilución 1:50 de la solución de dicromato utilizando matraces aforados y pipetas
volumétricas; esta operación se realizó diez veces y después para comprobar como la concentración en estos
varaba se hicieron lecturas de las absorbancias de las soluciones en el espectrofotómetro a una longitud de onda de
507nm, utilizando H2SO4 0.8N como blanco.
Se determinaron las absorbancias correspondientes a cada solución, donde se observó que estas variaban de una a
otra, después con los datos obtenidos se determinó la desviación del valor promedio y la desviación estándar de
los resultados obtenidos, así como su coeficiente de variabilidad dándonos en este último del 5.45%, el cuál dentro
de los rangos determinados se considera como bueno, lo que indicó que dentro de lo que cabe las lecturas no nos
dieron tan malas, y de esta forma que la concentración final entre cada una de las soluciones preparadas eran
simil.
Con los resultados obtenidos, logramos comprobar que en un laboratorio es común tener desviaciones en los
resultados de medición que se puede atribuir a errores de tipo sistemático, operativos y/o instrumentales, por lo
que es muy importante el buen manejo de las técnicas de medición.
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INTRODUCCIÓN
El error es la diferencia numérica entre el valor
Definimos control de calidad como "el proceso de medido y el valor real. El valor real es una abstracción
alcanzar los objetivos de calidad durante las filosófica generada a partir de la medición
operaciones". Según Juran, "Control de calidad es un experimental más refinada posible.[4]
proceso universal de gestión para dirigir las
operaciones de forma que proporcionen estabilidad, Errores determinados
para prevenir cambios adversos y mantener el statu
quo". Los errores determinados son aquellos que pueden
atribuirse a causas definidas, como fallas en los
El control de la calidad es uno de los tres procesos materiales o equipos, impurezas en las substancias y
básicos de gestión mediante los que se gestiona la reactivos, propiedades físicas o químicas no
calidad. Los otros dos son la planificación de la calidad consideradas en las muestras, o cambios físicos
y la mejora de la calidad. inducidos a éstas últimas, como sobrecalentamiento.
stos errores suelen ser predecibles y reproducibles.
Pasos Asimismo, se clasifican en:
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dependiendo del analista observador, siendo mayores otra parte, es de suma importancia cuidar que, durante
en el inexperto o descuidado y menores en el el proceso de cálculo intermedio, no se pierda precisión
experimentado y meticuloso. También pueden innecesariamente. Es importante mantener el máximo
originarse en factores ambientales no controlables, posible de decimales, pues esto ayuda a controlar la
impredecibles o imperceptibles por el analista, por lo aparición y propagación de errores numéricos que
que parecen fluctuaciones al azar. En realidad son invaliden los resultados.
causadas por el ruido estático en instrumentos
eléctricos y electrónicos, o vibraciones mecánicas Estos son errores de precisión y exactitud ajenos al
(sísmicas o tectónicas) o corrientes de viento en proceso de medición inicial y son introducidos
instrumentos mecánicos, como balanzas o buretas. típicamente por los métodos numéricos usados y por la
aritmética del computador que tiene una precisión
Exactitud y precisión finita para representar interiormente a los números.[6]
La exactitud de una medición hace referencia a su Las pipetas se llenan succionando suavemente con una
cercanía al valor que pretende medir. pera de goma hasta unos 2 cm arriba de la línea de
La precisión está asociada al número de cifras aforo (en lugar de la pera de goma puede usarse una
decimales utilizadas para expresar lo medido. jeringa o cualquier otro aparato de succión). Durante la
Un instrumento inexacto nos entrega resultados operación de llenado, la punta de la pipeta se debe
sesgados, "desplazados"; uno impreciso, resultados mantener sumergida en el líquido. Enseguida se coloca
"ambiguos", "difusos". sí, por ejemplo, una pesa es el dedo índice en la parte superior de la pipeta y se deja
exacta si nos entrega el peso correcto, sin agregarle ni salir la solución hasta que el fondo del menisco
quitarle. Asimismo, es más precisa en la medida que el coincida con la línea de aforo.
aparato usado es capaz de detectar diferencias de peso
más pequeñas. Las pipetas deben limpiarse si el agua destilada no
resbala de manera uniforme por sus paredes, sino que
La exactitud y precisión exigibles a una medición, se adhiere en forma de gotitas en la superficie interna.
dependerán de los objetivos del estudio que la utiliza. La limpieza puede hacerse con una solución caliente de
La precisión de un resultado estadístico debe estar de detergente o con solución de limpieza.
acuerdo con la precisión de los datos originales y con
las exigencias propias del proyecto que los usa.
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común en el laboratorio tienen nombres particulares
como Micro-Folin, Sahli para medición de
hemoglobina, Kirk Micro, White-Black Lambda entre
otros.
Uso correcto de las pipetas. La pipeta se debe llenar hasta un poco más arriba del
inicio de la graduación de la escala y luego poco a poco
Existen básicamente dos tipos de pipetas manuales: se ajusta, frente a los ojos y en posición vertical, al
aquellas para contener y aquellas para verter. Aquellas punto exacto de graduación de la escala (generalmente
para contener deben ser enjuagadas con el solvente 0). Recuerde que para líquidos transparentes, el fondo
después de haber dispensado la solución en cuestión. del menisco del líquido se ajusta a la graduación,
Estas pipetas contienen un volumen exacto de líquido, mientras que para líquidos no transparentes, los
el cual debe ser transferido completamente para que la extremos del menisco se ajustan a la graduación de la
medida sea precisa. Algunas pipetas de contener de uso
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escala. Una vez ajustado el volumen, la pipeta Una solución es una mezcla homogénea de al menos
conteniendo el líquido a dispensar es transferida al dos sustancias, una que se conoce como soluto y otra
recipiente donde se depositará el líquido. En este que se conoce como solvente, disolvente o diluyente y
momento se presiona la pera suavemente en el punto que generalmente está en mayor proporción que la
que permitirá la salida del líquido, manteniendo la primera. El solvente universal es el agua y por lo tanto
pipeta en posición vertical y con la punta de la misma no es de extrañar que casi todas las soluciones
descansando en el recipiente. Una vez dispensado el utilizadas en bioquímica utilicen agua como disolvente.
volumen, se retira la pera y la pipeta se descarta
cuidadosamente, con la punta hacia abajo en el La concentración de una solución debe ser expresada
recipiente para descartar pipetas. Si por algún motivo en unidades del SI, es decir en mol/l cuando el peso
debe volver a utilizar una pipeta en la misma solución molecular del soluto se conoce, o en términos de peso
en la que fue utilizada, es recomendable dejar la pipeta (masa) por litro si el peso molecular del soluto se
en posición horizontal sobre la mesa de trabajo, con la desconoce. Sin embargo, existen todavía algunas
punta de la misma unos centímetros fuera del borde de expresiones que no pertenecen al SI pero que su uso se
la mesa.[13] ha mantenido, por razones históricas o prácticas.
Existen básicamente dos tipos de expresiones que
Uso correcto de las micropipetas. prevalecen: aquellas que expresan la concentración de
forma porcentual y aquellas que la expresan como
Las micropipetas son dispositivos que permiten medir molaridad. Las concentraciones expresadas de forma
volúmenes pequeños que van desde 1 μl hasta 1 ml o porcentual se refieren a partes de soluto por 100 partes
más. Al igual que las pipetas éstas pueden ser para de la solución, de ahí el término porcentaje o por cien.
contener o para verter volúmenes. Durante el curso Estas pueden enunciarse como:
utilizaremos micropipetas para verter, ya sea un
volumen fijo o un volumen variable. En las de volumen - Peso por unidad de peso (o peso en peso o p/p): los
variable, se puede seleccionar un volumen dentro de un dos, el soluto y el solvente son pesados en gramos y la
rango de valores determinado. La micropipeta más proporción de soluto se expresa por 100 g de solución.
comúnmente usada en los laboratorios de análisis fue - Volumen por unidad de volumen (o v/v): número de
introducida por la compañía Eppendorf y este nombre ml de soluto en 100 ml de solución.
se adoptó de forma genérica para estos dispositivos, - Peso por unidad de volumen (o p/v): número de g de
aunque hoy en día existen una gran cantidad de soluto en 100 ml de solución.
compañías y modelos similares que funcionan bajo un
mismo principio de pistones para operar. Por lo tanto, Si el porcentaje no especifica la forma de expresión, es
es aconsejable consultar las instrucciones del fabricante decir, p/p, v/v o p/v, se asume que el porcentaje está
sobre el empleo correcto de cada modelo. Sin embargo, expresado en peso por unidad de volumen. Cabe
todas ellas utilizan puntas o “tips” descartables destacar que al ser estas relaciones porcentuales, el
plásticos que se ajustan al extremo de la micropipeta. volumen o peso final puede ser cualquier cantidad pero
En estas puntas de plástico es donde se deposita el lo importante es mantener la relación entre las partes.
líquido a medir.
Con respecto al término molaridad, éste expresa la
Con respecto a la micropipeta multicanal, éstas tienen concentración de una sustancia en particular en
la ventaja de que se puede pipetear el mismo volumen términos de número de moles por litro de solución y su
al mismo tiempo en varios recipientes a la vez. Estas símbolo es “M”. Este término también debe ser
micropipetas fueron diseñadas principalmente para los descontinuado y reemplazado por la expresión mol/l o
ensayos en formato micro, donde se utiliza también un mol/m3.[15]
plato de plástico de 96 pozos para trabajar esa cantidad
de ensayos de forma simultánea. Las micropipetas Cálculo y expresión de diluciones.
multicanal son dispositivos más complejos que las
micropipetas unicanal ya que básicamente pueden Una dilución consiste en preparar una solución menos
repetir varias veces la función que realiza esta última concentrada a partir de una más concentrada. Esta
en un solo momento. Para ello, poseen un solo mango, práctica es muy común en los laboratorios y de ella
botón pulsador, etc pero un cono que permite la depende en gran parte el resultado final analítico que se
inserción de 4 hasta 12 puntas al mismo tiempo.[14] obtenga. Por lo tanto es imperativo el manejo de este
tipo de cálculos para cualquier persona que trabaje
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES dentro de un laboratorio. Las diluciones generalmente
se expresan como una razón matemática, por ejemplo
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1:5 (o 1/5), 1:10 (o 1/10), etc. En el caso de una absorbancias en el espectrofotómetro, se podrán
dilución 1:5, ésta expresa la cantidad, sea volumen o trabajar los datos estadísticamente para observar la
peso de una sustancia en un volumen total o final de la precisión o exactitud que se tenga en las mediciones y
forma 1 volumen (o peso) en un volumen (o peso) total preparación de las muestras así como determinar las
de 5 volúmenes. Nótese que el volumen total o final razones por las cuáles una medición no se realiza
estará compuesto de 1 volumen de la sustancia a diluir correctamente o los errores que se presenten en dichas
y 4 volúmenes del disolvente. Para calcular la mediciones.
concentración final de una solución diluida, se
multiplica la concentración de la solución original por MATERIAL
la dilución expresada como fracción.
- 2 Propipetas
La ecuación más comúnmente utilizada para preparar - 2 Vasos de precipitados de 250ml
soluciones es: - 3 Pipetas volumétricas de 1ml
V1 x C1 = V2 x C2 - 1 Espátula
- 3 Pipetas graduadas de 1ml
Donde V1 es el volumen de la solución concentrada - 1 Vidrio de reloj
que se debe añadir para preparar la solución diluida, - 3 Pipetas graduadas de 5ml
C1 es la concentración de la solución concentrada - Matraces aforados de 50ml
V2 es el volumen de la solución diluida - 3 Pipetas graduadas de 10ml
C2 es la concentración de la solución diluida. - 1 Agitador de vidrio
- 15 Tubos de ensayo de 16x150mm
Al utilizar esta ecuación debe tomarse en cuenta que - Parafilm
tanto las unidades de V1 y V2 así como las de C1 y C2 - 1 Gradilla
deben ser las mismas, preferiblemente ml y mol/l - Masking tape
respectivamente. - 1 Pizeta con agua destilada
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Diluciones 1:50 de Dicromato de Potasio
FECHA: 19 de octubre de 2007
No. de Valor individual Desviación del valor Cuadrado de las
determinaciones medio desviaciones
1 0.411 0.0081 6.561E-05
2 0.430 0.0271 0.00073441
3 0.405 0.0021 4.41E-06
4 0.380 -0.0229 0.00052441
5 0.399 -0.0039 1.521E-05
6 0.370 -0.0329 0.00108241
7 0.387 -0.0159 0.00025281
8 0.443 0.0401 0.00160801
9 0.408 0.0051 2.601E-05
10 0.396 -0.0069 4.761E-05
n= ∑Xi= 4.029 ∑(X i
___
− X ) 2 = 0.0043609
X = 0.4029
2. calcular el valor promedio (X) por equipo. resultando entonces una distribución totalmente
___ homogénea.
X = 0.4029
___
Desde el punto de vista práctico, resulta ciertamente
3. Calcular la desviación estándar s= ∑(X i− X )2
n −1 improbable la obtención de curvas de distribución
S = 0.02201237 acumulada que presenten valores del CV iguales a
4. Calcular el coeficiente de variabilidad cero, tanto si los ensayos se realizan en las
s × 100% instalaciones al efecto como si se trata de pruebas de
C.V . = ± ___ C.V . = 5.46348232 campo.
X
5.- ¿Qué rango de coeficiente de variabilidad es La interpretación del valor del CV obtenido se basa en
aceptable? ¿Por qué? Coeficiente de Variación (CV) unos parámetros previamente determinados, que
parámetro estadístico que indica, en términos varían según se trate de ensayos de laboratorio o
porcentuales, la dispersión de una serie de datos pruebas de campo.
respecto al valor medio. El valor del CV es igual a 0
cuando no existen diferencias entre los puntos,
6. ¿Por qué es importante la estadística para el control análisis multivariante como el análisis factorial,
de calidad? La utilización de la estadística constituye análisis de correspondencias, variables latentes,
uno de los pilares fundamentales sobre los que se regresión múltiple... así como el desarrollo de técnicas
asienta la calidad total. Afortunadamente, son muchas de muestreo y análisis de encuestas. El análisis de la
las técnicas estadísticas que pueden aplicarse para varianza, el diseño de experimentos y el análisis de
obtener mejoras en la calidad. Para el análisis del regresión son ampliamente utilizados para la mejora
comportamiento de los consumidores existen muchas de procesos a través de la experimentación. El análisis
técnicas estadísticas entre las que cabe destacar el de series temporales se utiliza tanto para predecir la
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demanda como para construir sistemas de control asegurar que la calidad especificada en el diseño llega
dinámico de procesos. Finalmente, el control al cliente.[17]
estadístico de procesos y el muestreo de aceptación
son las principales herramientas que permiten
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[2]http://www.intertek- 1999
labtest.com/services/inspection/chemical_quality_inspe [12] Facultad de Medicina UNAM, Departamento de
ction/?lang=es (27ct/07:05:30p.m.) Bioquímica. Bioquímica y Biología Molecular.
[3] Objetivos del curso y manual de prácticas de
www.cca.org.mx/dds/web/ventana/ligas/nlaboratoriom laboratorio. Mc Graw-Hill Interamericana Editores,
19.htm - 7k - México, 2000.
[4] SABATER TOBELLA, A. VILUMARA [13] Schosinsky, K et al. Manual de Técnicas de
TORRALLARDONA; Buenas Practicas de Laboratorio en Química Clínica. X Edición,
Laboratorio GLP). Ed. DÍAZ DE SANTOS. Universidad de Costa Rica, 1997
[5] [14] Manual de uso de micropipetas Biorad, versión
http://www.galeon.com/scienceducation/error00.htm(2 BR0605
7/OCT/07:05:39P.M.) [15]
[6] R. COMPAÑÓ BELTRÁN, A. RIOS CASTRO; http://www.medvet.una.ac.cr/carrera/mva505_Practica1
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Ed. Síntesis, Madrid, 2002. [16] M. VALCARCEL, A. RIOS, “La Calidad en los
[7]http://es.mt.com/mt/ed/news/27/OCT/07:06:06PM) Laboratorios Analíticos”, Editorial Reverté, Barcelona,
[8] 1992.
http://docencia.udea.edu.co/cen/tecnicaslabquimico/01i [17]
ntro/intro01.htm(27/OCT/07:06:09PM) http://metodosestadisticos.unizar.es/asignaturas/16625/
[9] Errores y mediciones, A. González Arias,Ed. 16625material/material_clase/capitulo1.pdf
Científico Técnica,1983; Laboratorio de Fisica , Ed. [18] Plumier, David. Introducción a la Bioquímica
ENPES, agosto 1988. Práctica 2ª. Edición. Ed Mc Graw Hill. Bogota,
[10] Amato M, S y Granados P, F. Manual de Colombia, 1981
Laboratorio. Cátedra de Bioquímica. Universidad [19] Rendina, Georg. Técnica de Bioquímica Aplicad.
Nacional, 1994 Ed Interamericana. México, D.F. 1974
[11] Angulo Ugalde, Y. Bioquímica Manual de [20] Whithead, P. Control de calidad 1ª. Edición 1982
Laboratorio. Universidad de Costa Rica.