Libro Equipo e Instrumentos de Micros

INSTITUTO DE EDUCACIN SUPERIOR TECNOLGICO PBLICO TRUJILLO
EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE MICROSCOPA
FREDDY VALLEJO LEN BILOGO MICROBILOGO
INSTRUMENTOS DE MICROSCOPA 1. Lminas portaobjetos: Las lminas portaobjetos son planas, delgadas y lisas, de aspecto transparente y forma rectangular. Se utilizan esencialmente para colocar sobre su superficie pequeas fracciones o volmenes de muestras, que sern sometidas o no a un proceso de coloracin, con la finalidad de ser observadas a travs del microscopio. Este tipo de lmina se emplea igualmente como soporte para realizacin de pruebas serolgicas de aglutinacin. Las lminas portaobjetos estndar presentan bordes cortados o bordes esmerillados en un ngulo de 90, estos ltimos especialmente recomendados si se trabaja con material infeccioso ya que presentan bordes mucho ms lisos y libres de rebabas minimizando el riesgo de sufrir cortes. Medidas estndar de 26 x 76 mm y grosor de 1 mm. Las lminas portaobjetos con banda mate tienen en uno de los extremos una banda mate de vidrio esmerillado para la rotulacin y perfecta identificacin de las muestras. Bordes esmerillados 90, medidas estndar de 26 x 76 mm y grosor de 1 mm. Las lminas portaobjetos con 1 o 2 cavidades para el montaje permanente de especmenes gruesos (insectos, minerales) o para aplicaciones diagnosticas en las que se desea visualizar clulas o partculas en suspensin. Bordes esmerillados 90, medidas estndar de 26 x 76 mm y grosor de 1,2 mm. 1
Con banda mate de color son portaobjetos con bandas de rotulacin en color blanco, verde, azul, amarillo y rosa. De medidas estndar de 26 x 76 mm resultan ideales para la clasificacin de muestras mediante cdigo de color segn urgencia, tcnica de preparacin, departamento del que proceden, etc. Presentan los bordes esmeriladlos y la banda de rotulacin de 20 mm Lmina portaobjeto diagnostica especialmente diseada para llevar a cabo tcnica de inmunofluorescencia, presentan un recubrimiento hidrofbico con 1, 3, 6, 8 10 campos de reaccin circulares hidroflicos que permiten el anlisis de un mismo tipo celular con distintos anticuerpos o distintas diluciones del mismo anticuerpo sin peligro de contaminacin cruzada. El recubrimiento de los portaobjetos est constituido por una mascara de tefln azul altamente resistente a los solventes orgnicos y reactivos utilizados en las tcnicas histolgicas. Los portaobjetos son de medidas estndar 26 x 76 mm y presentan bordes esmerillados 90 y banda para rotulacin de las muestras de 20 mm. Las lminas portaobjetos de tamao especial de 76 x 50 mm y espesor aproximado de 1 mm. Permiten el montaje de muestras de gran tamao o de varios cortes de tejido en una misma preparacin Lmina portaobjeto con micrmetro objetivo 1/100 con dimensiones de 26 x 76 mm, con Escala de 1 mm en divisiones de 0,01 mm para ralizar mediciones del campo microscpico observado
Hay que recordar que tambin las lminas portaobjetos pueden tener bordes biselados en especial para las extensiones sanguneas.
2. Lminas cubre objetos: Son laminillas muy delgadas, transparentes e incoloras. La forma vara de cuadradas a rectangular; cuando son cuadradas miden 22 x 22 mm y cuando son rectangulares 22 x 50 mm. Son empleadas para cubrir las muestras o preparaciones que han sido colocadas previamente sobre las lminas portaobjetos para ser observadas al microscopio. Son fabricadas en vidrio soda solamente, limpio y sin impresiones digitales, prsentan un espesor estndar de 0,13 0,16 mm uniforme en toda su superficie. Para preservar en todo momento la limpieza de los cubreobjetos, se suministran en paquetes envasados al vaco y de fcil apertura, cada uno de los cuales contiene 10 cajas con tapa superpuesta de 100 unidades listas para su utilizacin. Existen cuadrados o redondos.
Los cubrecmaras son fabricados en vidrio soda y con bordes esmerillados, presentan las superficies lisas y pulidas y un grosor de 0,4 mm que los hace ms robustos y resistentes que los cubreobjetos normales. Se suministran en cajas con tapa superpuesta de 10 unidades empaquetadas en bolsitas individuales. 3. Cmaras de recuento: El recuento celular es una practica de rutina en hospitales y laboratorios de investigacin para determinar anomalas sanguneas o realizar experimentos de cultivos celulares. Las cmaras de recuento son portaobjetos especiales, diseados con este propsito a partir 2
de una nica pieza de vidrio ptico con una retcula de medidas muy concretas grabada en superficie. Entre las cmaras ms conocidas tenemos la de Neubauer, Thoma, Fuchs-Rosenthal y Brker las cuales bsicamente se diferencian en el tipo de retcula que presentan, y cubrecmaras de diverso tamao. Las cmaras de recuento se utilizan para determinar el nmero de partculas por unidad de volumen de un lquido, las partculas leucocitos, eritrocitos, trombocitos, bacterias, esporas, polen etc. se cuentan visualmente con un microscopio. La placa base en vidrio ptico especial tiene el tamao de un portaobjetos. Las ranuras fresadas en la superficie de la placa base la dividen en dos zonas anchas exteriores y 3 campos pequeos interiores. A diferencia de las zonas exteriores, que se utilizan para rotulacin, los campos interiores estn esmerilados y pulidos. En el campo central (= fondo cmara) estn grabadas dos cuadrculas de recuento separadas una de otra por una ranura. El fondo de la cmara del campo central es usualmente 0,1 mm ms bajo (= profundidad cmara) que ambos campos adyacentes. Entre campo central y cubreobjetos ya colocado existe por tanto una ranura de 0,1 mm. La limitacin lateral del volumen a contar se forma mediante las superficies imaginadas por la proyeccin vertical sobre las lneas exteriores de la cuadrcula de recuento. Todas las cmaras de recuento presentan doble retcula dado que los anlisis deben de realizarse por duplicado para que los resultados derivados sean significativos, y adems, estn disponibles en diferentes formatos: Estndar: La retcula se encuentra grabada sobre el fondo de la cmara de recuento y bajo el microscopio aparece como una trama de lneas oscuras. Con pinzas: Igual que el formato estndar pero en este caso la cmara de recuento dispone de un par de pinzas que asegura una ptima sujecin de cubrecmaras. Lneas claras: El fondo de la cmara presenta un recubrimiento de rodio (fondo oscuro) sobre el que se graba la retcula que de este modo aparece bajo el microscopio como una trama de lneas claras, consiguiendo un ptimo contraste.
Estndar
Con pinzas
Lneas claras
leucocitos. El cuadrado grande central est dividido en 25 cuadrados medianos con aristas de 0,2 mm estando cada cuadrado mediano subdividido en 16 cuadrados pequeos con aristas de 0,05 mm y una superficie de 0,0025 mm2. Los 5 cuadrados medianos sealados con una "E" se utilizan para recuento de eritrocitos y de trombocitos. Tiene especial relevancia que todos los cuadrados medianos presentan en todos los lados lneas lmite triples. La lnea central es la frontera y decide si las clulas de esta zona se deben contar o no.
Frmula de valoracin: partculas contadas partculas por l volumen = superf. cont. (mm2) x profundidad cmara (mm) x dilucin Ejemplo: eritrocitos en cmara: Neubauer 1. clulas contadas: 528 eritrocitos 2. superficie contada: 5 cuadrados medianos corresponden a 0,2 mm2 3. profundidad cmara: 0,1 mm 4. dilucin: 1 : 200 528 x 200 = 5,28 x 106 eri/l sangre = 5,28 millones de eri/l sangre 0,2 x 0,1 x 1 Cmara Profundidad Volumen rea del cuadrado ms pequeo Recuento de Neubauer 0.1 mm 0,1 L 0,0025 mm2 Eritrocitos, trombocitos y leucocitos Brker 0.1 mm 0,1 L 0,0025 mm2 Eritrocitos, trombocitos y leucocitos Thoma 0,1 mm 0,1 L 0,0025 mm2 Eritrocitos y trombocitos FuchsRosenthal 0,2 mm 0,2 L 0,0625 mm2 Clulas LCR de Burker: La profundidad de la cmara es de 0,1 mm. La cuadrcula de recuento muestra 9 cuadrados grandes, cada uno de 1 mm2. Se utilizan para el recuento de leucocitos. Cada cuadrado grande est dividido por lneas dobles (a una distancia de 0,05 mm) en 16 cuadrados medianos, cada uno con aristas de 0,2 mm. Los cuadrados medianos corresponden en su tamao a los de las cmaras Neubauer, pero sin estar a su vez subdivididos. Se utilizan para recuento de eritrocitos y de trombocitos. Las lneas dobles forman cuadrados pequeos de una superficie de 0,0025 mm2.
Neubauer: El sistema de cmaras de recuento preferido hoy. La profundidad de la cmara es de 0,1 mm. La cuadrcula de recuento muestra 9 cuadrados grandes, cada uno de 1 mm 2. Los 4 cuadrados grandes de las esquinas sealados con una "L" estn divididos en 16 cuadrados con aristas de 0,25 mm. Se utilizan para el recuento de 3
Thoma: La profundidad de la cmara es de 0,1 mm. La cuadrcula corresponde al cuadrado grande central de la cmara Neubauer. La superficie de los cuadrados pequeos es de 0,0025 mm2 cada uno. Debido a que no existen cuadrados grandes exteriores, el sistema de cmaras Thoma slo se utiliza para recuento de eritrocitos y de trombocitos.
Fuchs-Rosenthal: La profundidad de la cmara es de 0,2 mm. Esta cuadrcula de recuento se diferencia de los sistemas habituales para recuento de clulas sanguneas por su gran superficie de 16 mm2. La cuadrcula de recuento muestra 16 cuadrados grandes, cada uno de 1 mm2. Cada cuadrado grande est subdividido en 16 cuadrados pequeos con 0,25 mm de aristas y una superficie de 0,0625 mm2. Esta cmara de recuento es muy utilizada habitualmente, entre otros para recuento de clulas en lquido lumbar.
4. Marcador para Laboratorios: El marcador es diseado para la rotulacin duradera de lminas portaobjetos y casetes de inclusin en color negro de alto contraste, es de punta ultra-fina resistente al agua, inodoro y no txico resistente a la mayora de los productos qumicos utilizados en laboratorios no se seca fcilmente y tiene una larga duracin escribe sin tratamiento previo de las superficies. Tambin se estila trabajar con etiquetas en algunas lminas para su rotulacin, en el caso de extendidos sanguneos y gota gruesa se trabajo con lpices de grafito.
6. Micrtomos: Un microtomo (del griego mikros, que significa "pequeo", y temnein, que significa "cortar") es un instrumento de corte que permite obtener rebanadas muy finas de material, conocidas como secciones. Los microtomos son un instrumento importante de la microscopa porque permiten la preparacin de muestras para su observacin en microscopios de luz transmitida o de radiacin de electrones. Los microtomos utilizan cuchillas de acero, vidrio o diamante, dependiendo del tipo de muestra que se est cortado en lonjas y del grosor deseado de las secciones del corte. Las cuchillas de acero se utilizan para preparar secciones de tejidos blandos animales o vegetales para estudios en el contexto de la histologa o de la indstria como corcho, madera balsa y otros como arcillas hmedas, gelatinas densas, poliestireno expandido para microscopa de luz. Las cuchillas de vidrio se utilizan para preparar secciones para microscopa de luz y para cortar secciones muy delgadas para microscopa electrnica. Las cuchillas de diamante (de grado industrial) son utilizadas para cortar materiales duros como el hueso, los dientes y materia vegetal como, maderas duras, etc, tanto para microscopa de luz como para microscopa electrnica.
5. Lpices diamante: Lpices con punta de diamante para escribir sobre vidrio, con mango de madera.
Micrtomo elctrico 5
Tcnicas en el contexto de la histologa, aunque ms habitualmente, tales muestras de tejidos suelen ser tejidos con patologas, removidos previamente por biopsia, y se desea saber de cual patologa se trata, con fines mdicos. Los rdenes de seccin de corte habituales en la microtoma son de 1 a 50 micras, pero varan segn el tipo de muestra y segn el microscopio en el que se desee observar la muestra. Debido a que los tejidos blandos son imposibles de cortar de manera uniforme, se procede siempre a su endurecimiento. La forma de obtener este endurecimiento distingue los tres tipos principales de tcnicas de microtoma: 1. Tcnica histolgica tradicional: los tejidos son endurecidos substituyendo el agua por parafina utilizando la tcnica de infiltracin y teidos para aumentar la visibilidad de las estructuras celulares. Los cortes en esta tcnica suelen tener un grosor entre 2 y 10 micrmetros. Esta tcnica es lenta y laboriosa, requiriendo al menos de 15 o 16 horas para obtenerse una muestra vlida para el corte. 2. Crioseccin: en esta tcnica los tejidos son endurecidos por congelacin. Esta tcnica se utiliza para los tejidos que no soportan el proceso impuesto por la tcnica histolgica tradicional, o cuando se requiere de resultados inmediatos (esta tcnica es mucho ms veloz que la primera, 5-10 minutos). Se usa una variante del micrtomo denominada criostato, alojado en una cmara de congelacin, que puede alcanzar temperaturas de hasta -35 C segn el modelo. Se suele trabajar a temperaturas de entre -20 y -25 C. 3. Microscopa electrnica: los tejidos son embebidos en resina epxica y luego se utiliza un micrtomo equipado con una hoja de vidrio o diamante para cortar secciones muy finas (tpicamente de 60 a 100 nanmetros). Las secciones se tien y se examinan con un microscopio electrnico de transmisin. A menudo a este instrumento se lo denomina ultramicrtomo. 7. Puente (soporte) para tincin de lminas: Se emplean para colorar las lminas portaobjeto en las coloraciones, sirven de base para que las lminas portaobjetos estn suspendidas en las coloracin.
8. Cubetas para tincin: Son cubetas en donde poseen colorantes para colorear muestras fijadas por inmersin u otras son cubetas que recolectan los reactivos usados en una coloracin. Las Cubetas para tincin segn Hellendahl, para mx. 8 o 16 (espalda contra espalda) portaobjetos 76 x 26 mm, con tapa, de plstico transparente (PMP) hay con tapa, vidrio prensado.
Las cubetas para tincin segn Schiefferdecker, para mx. 20 portaobjetos 76 x 26 mm, con tapa, vidrio prensado.
Las cubetas para tincin segn Coplin, para mx. 10 lminas portaobjetos 76 x 26 mm, con tapa, vidrio prensado, tambin hay con tapa roscada, polipropileno.
Existen otros modelos de cubetas para tincin, consistiendo de cubeta de vidrio y soporte para tincin, para mx. 10 lminas portaobjetos desde 76 x 26 mm hasta 76 x 52 mm de vidrio presnsado y acero inoxidable. 6
9. Gradilla para lminas portaobjetos: Se usan para secar las lminas una vez coloreadas. Existen para diferentes nmero de lminas portaobjeto. Las gradillas para 12 lminas portaobjetos, plexigls, plazas continuamente numeradas y con banda rotulable.
Otras cubetas para tincin, consistiendo de cubeta de vidrio, cestillo y asa de alambre, para 10 portaobjetos 76 x 26 mm.
La gradilla para porta-objetos 26 x 76 mm modelo en ABS con tapa superior transparente en policarbonato, para 100 diapositivas en posicin vertical, con ranuras numeradas y tabla ndice.
Cubetas para tincin segn Hausser/Gedigk, consistiendo de cubeta de vidrio, tapa y cestillo, para 60 lminas portaobjetos 76 x 26 mm.
10. Dispensadores de lminas portaobjetos: Permiten obtener portaobjetos limpios, secos y libres de huellas digitales cuando sea posible para realizar preparaciones microscpicas.
Cubetas para tincin, PVC, gris oscuro, 38 x 17 x 8 cm, sin puente para tincin reciben los colorantes, decolorantes y lquido de lavado segn la coloracin y las segundas (vase el dibujo del puente para tincin de lminas.
Los dispensadores para 50 lminas portaobjetos 76 x 26 mm, de plstico gris (ABS). Posibilita una conservacin clara y limpia. Colocar slo portaobjetos secos! Los portaobjetos se extraen mediante giro de uno de los dos volantes. 1 unidad por embalaje. 11. Envases para lminas portaobjeto: Sirven para contener y trasportar portaobjetos. Hay envases de transporte para 2 lminas portaobjetos 76 x 26 mm, ovalados, polietileno (HD-PE) y envases de transporte para 5 lminas portaobjetos 76 x 26 mm, rectangulares, polipropileno.
frente, fcil de abrir, con numeraciones interiores y tabla separada con ndice.
13. Bandejas para lminas portaobjetos: Presentan una ranura para dedos que facilita que facilita la extraccin de los portaobjetos. Normalmente son de cartn. 14.
12. Cajas de depsito para portaobjetos: Sirven para guardar portaobjeto e incluso lminas fijadas y coloreadas. De diferentes formas y cantidad. Hay cajas de depsito para portaobjetos 76 x 26 mm, marco de madera, cartn forrado con papel negro, con ranuras de plstico numeradas e ndice en la tapa otras cajas de depsito para portaobjetos 76 x 26 mm, poliestireno, apilables, con ranuras de plstico numeradas y tapa separada con ndice
Asas de siembra (asas bacteriolgicas): Es un filamento de metal en su extremo terminal del alambre de platino o nicrn forma un pequeo crculo en el extremo con un dimetro de 4 a 5 mm. Se esteriliza normalmente al mechero. Las asas de siembra para mangos de Kolle, de acero inoxidable.
Hay cajas de depsito para portaobjetos 76 x 26 mm, poliestireno, apilables, tapa con charnela a prueba de polvo, con cierre de plstico en la 8
Los mangos de Kolle, latn niquelado, 255 mm largo. Se les puede usar con asa de Kolle, aguas o incluso lanceta.
Existen asas de siembra, para sembrar en medios de cultivo, poliestireno, esterilizadas por radiacin gamma, desecheables, en bolsitas de 20 piezas. La elevada flexibilidad del material permite una siembra suave sin daar la superficie del medio de cultivo.
Tambin podemos ver que existen soportes para las asas de bacteriolgicas.
16. Recipientes de transporte para muestras patolgicas: Son recipientes en donde se pueden colocar las muestras que luego sern observada al microscopio u otro anlisis e el laboratorio. Los recipientes de transporte para muestras patolgicas, de polipropileno particularmente transparente, con base estable, con tapa rosca impermeable de polietileno (PE-HD) entregada por separado. El fondo especialmente redondeado facilita extraer pequeas muestras. El recipiente de 35 ml de capacidad puede utilizarle como contenedor protector para el recipiente de 20 ml y el recipiente de 100 ml para los contenedores de 35 y 50 ml de capacidad. Tambin se pueden utilizar de material de vidrio. Contador de clulas: Estos aparatos sirven para contar clulas al microscopio y en el caso de contadores diferenciales de leucocitos la diferenciacin de este tipo de leucocitos. El aparato elctrico para el recuento de clulas con pantalla digital. Es especialmente diseado para el recuento de clulas sanguneas pero es igualmente apto para el recuento de otras partculas. El aparato de recuento ofrece 6 teclas de funcin, 15 teclas de recuento individualmente nombrable as como 4 diferentes programas de recuento. Para uno de ellos, cada tipo de recuento y anlisis de recuento son libremente programables. Posibilita el recuento con cifras porcentuales o reales, alcance de recuento mx. 1000. El aparato es suministrado incluso con un manual de instrucciones detallado. 9 17.
15. Cajas o Placas Petri: Estn constituidas por una caja circular de vidrio de 11 ms cm de dimetro con el fondo plano pudiendo o no estar tabicado con un borde de 1 cm de altura en todo su permetro. La placa se completa con una tapa igualmente de vidrio con un diseo similar al de la caja, pero, ligeramente superior en dimetro. Cuando las dos partes se ensamblan, la superficie interior de la tapa queda descansando sobre el borde de la caja. En microcopia se suelen utilizan como recipiente para observar muestras al esteromicroscopio con dimetros de 40 a 150 mm.
Los contadores de clulas ms comunes poseen 4 dgitos, permiten realizar el conteo de clulas, como por ejemplo las clulas sanguneas, que se emplean en algunas pruebas de laboratorio clnico. Tienen mecanismo de puesta a cero, son pequeos y de poca masa (35 g). Son de fcil manejo, slo con accionar el mecanismo de conteo y al finalizar se gira el mecanismo de puesta a cero.
18. Pipetas cuentagotas: Son tubos largos de vidrio con el extremo distal m delgado y el extremo proximal donde se puede colocar una tetina de goma y poder contar gotas de lquido en las preparaciones al microscopio. Las pipetas cuentagotas, vidrio sdico-clcico, punta recta, con borde, sin tetina. Las tetinas de goma para pipetas cuentagotas, rojas, aprox. volumen de succin aprox. 0,8 ml
Los contadores manuales diferenciales de leucocitos sirven para realizar el recuento manual de glbulos blancos con los diferentes componentes de una formula leucocitaria,. La mayora de los modelos poseen 5 u 8 teclas con totalizador. Las 5 u 8 teclas representan los grupos normales de leucocitos con las denominaciones: BASO., EOSIN., SEG., LYMPH., MONO y aade MYELO., JUVEN., STAB. Segn el modelo de contador diferencial. Cada tecla tiene el nombre y la representacin grfica de su particular clula. Display va de 0 hasta 999 en cada una de las ventanas correspondientes a cada tecla. Adems tienen seal acstica que se activa al contar 100 clulas (100, 200). El mecanismo de puesta a cero mediante los mandos laterales. Sus pesos son variables segn el modelo 950 g y 1250 g.
19. Pipetas Pasteur: Son parecidas a las pipetas cuentas gotas pero con el extremo distal ms largo y delgado, sirve para contar gotas de lquido y extravasar volmenes d e un recipiente a otro. Las pipetas Pasteur, vidrio sdico-clcico con punta larga y fina, con estrangulacin en el tubo de aspiracin apta para colocar un tapn de algodn, suministrados sin tapn.
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Tambin hay pipetas Pasteur de polietileno, no estriles, longitud aprox. 150 mm con graduaciones.
Los frascos goteros existen en el mercado diferentes modelos. Los de vidrio, tradicionalmente empleado son incoloros o mbar. De acuerdo con su capacidad, pueden contener entre 25 y 100 mL. Estos frascos poseen una tapa de vidrio esmerilado provista de una ranura perpendicular, que cuando se rota la tapa y se hace coincidir con la ranura en el cuello del frasco, el contenido gotear si se inclina el frasco adecuadamente. Otros modelos consisten en frascos provistos de un gotero con tapn de caucho, similar a los empleados en los frascos de medicamentos, en tanto que otro estn diseados para que comiencen a gotear si el frasco es invertido.
20. Frascos lavadores: Frascos que contiene un lquido, por ejemplo agua para lavar las lminas y eliminar los excesos de colorantes en las coloraciones. Son de polietileno.
21. Frascos cuentagotas y para guardar reactivos en las coloraciones o preparados al microscopio: Los frascos para reactivos son de diferentes tipos y pueden contener de acuerdo a su tamao entre 25 mL y 1 litro. La tapa del frasco puede ser de cristal esmerilado o plstica si el cierre es de rosca, lo que depender del tipo de reactivo que contenga. Con ambas variantes se consigue el cierre hermtico del frasco. Esta cristalera puede ser incolora o mbar. 11
22. Cuenta minutos (timer, temporizadores): Se utilizan para medir los diferentes tiempos que puedes controlar desde minutos hasta horas con seal acstica graduable. Por ejemplo al realizar coloraciones al microscopio. Hay cuenta-minutos con alarma, caja de plstico blanco, para sobremesa y colgar. Otros como DIGI-TIMER, cuenta-minutos con pantalla de 4 dgitos para minuto y segundo, funcin Count-Down con alarma al alcanzar "0", con imn para fijar en superficie metlico con pila (pila tipo botn SR 44 1,5 V).
con alarma regulable y caja slida de plstico blanco de aprx. 175 x 130 x 40/95 mm 4 relojes con las funciones: Start/Stop/Reset, Addition, Flyback Count Down,Count Down batera: tipo mignon (AA) R 6.
24. Cmaras para guardar el microscopio: Los microscopios vienen en una caja de madera con su funda (antipolvo), pero a veces estos se deterioran, por lo que es necesario comprarles otra nueva e impedir que los agentes del ambiente como la temperatura, humedad y hongos los deterioren ms rpidamente El cuenta-minutos Universal, con pantalla digital y alarma, con imn y clip, pie para sobremesa y pila, dimensiones 68 x 53 x 20 mm. Realiza 3 funciones: - Cuenta-minutos desde 1 segundo hasta 24 horas - Reloj de 24 horas en pantalla digital - Cronmetro desde 1 segundo hasta 24 horas 25.
23. Cronmetros: Al igual que los timer miden un intervalo de tiempo. El cronmetros de sobremesa PRISMA 400, reloj avisador Interval-updown, para laboratorios, aptos para temperaturas de -10 hasta +55 C - pantalla LCD en dos lneas: arriba 3 dgitos, abajo 5 dgitos, indicador de 6 funciones en 2 lneas, altura de los dgitos 22/8 mm 12
Kit de limpieza de microscopios: El cuidado diario de los elementos pticos del microscopio permite alargar la vida del equipo mantenindolo siempre en perfectas condiciones de uso. Para ello, se ofrece el kit para una correcta limpieza y mantenimiento de las lentes del microscopio. Es un kit que se vende en el mercado para el cuidado del microscopio Incluye:
Solucin limpiadora de lentes (40 mL) Papel para lentes 5 Bastoncillos de algodn Pera con cepillo Gamuza
26. Mecheros: Son instrumentos de laboratorio diseados para obtener una llama calorfica a partir de la combustin del alcohol o del gas. Los mecheros de alcohol, consisten, en un pequeo recipiente de vidrio de forma redondeada, con el fondo plano, estando provisto por su parte superior de un pequeo saliente cilndrico por donde se enrosca un pequeo tubo metlico de unos pocos mm de dimetro a travs del cual se inserta una mecha cuyo extremo posterior queda en contacto con el alcohol contenido en el recipiente. Una pequea capucha cilndrica de metal con el extremo superior redondeado, se utiliza para tapar el mechero y que no se evapore el alcohol. Los mecheros de gas son los mas empleados. Existen diferentes modelos, pero todos estn estructurados bsicamente por tres partes separables: La base, el tubo quemador y el regulador de aire. La base: Es una pieza metlica de forma circular y fondo plano, lo que permite mantener el tubo quemador en posicin vertical. Tiene un dimetro de 4 a 6 cm y presenta en la parte superior un pequeo tubito en posicin horizontal de unos 6 mm de dimetro denominado tobera, donde se inserta ajustadamente, con una presilla de seguridad, una fina manguera que se inserta por su otro extremo a una llave de gas. 13
Tubo quemador: El tubo quemador puede tener un dimetro variable, en dependencia del modelo de que se trate. El mechero de "Bunsen" convencional, tiene aproximadamente 6 7 mm de dimetro x 6 7 cm de largo, en tanto que el mechero de "Fisher" es mucho ms grueso con una longitud tambin mayor y est provisto en su extremo superior de un quemador que propicia una llama grande e intensa. En ambos tipos de mecheros, muy prximo al extremo donde se enrosca a la base, el tubo presenta un orificio de un dimetro similar al del collarn que regula la entrada de aire. Regulador de aire: El regulador de aire est compuesto por un collarn metlico de forma anular, semejante a una alianza, que se inserta calibradamente en el extremo inferior el tubo quemador, quedando en contacto con la base. Est provisto de un orificio circular de un dimetro similar al del tubo quemador.
Mechero de Bunsen
Mechero de Fisher
Manipulacin del mechero: 1. Revise que las diferentes partes del mechero, estn debidamente acopladas y ajustadas. 2. Abra ligeramente la llave de gas. Cuando esta operacin se realiza, el gas que atraviesa la manguera y la tobera se dirige al centro de la base, donde hay un dispositivo provisto de un fino orificio, calibrado a dcimas de mm que regula el paso del gas hacia el tubo quemador. 3. Aproxima la llama de un fsforo o de una fosforera al orificio del tubo quemador por donde sale el gas para encender el mechero. 4. Regule la salida del gas en dependencia de la intensidad de la llama. 5. Ajuste la entrada de aire hasta obtener la llama deseada, para lo cual se har girar al collarn hasta hacer coincidir su orificio con el del tubo quemador. Al realizar esta operacin, en mayor o en menor grado se producir la entrada de aire en el tubo quemador lo que propiciar la mezcla gas aire (combustible y comburente). En la medida en que se enriquezca el gas con el aire. As ser la llama. Una mezcla rica en aire produce una llama azulosa, no luminosa y de gran poder calorfico. Si empobrecemos la llama cerrando la entrada de aire, obtendremos una llama de color amarillo - rojizo, luminosa y poco calorfica.
Diferentes zonas de la llama del mechero
Uso del mechero: El mechero tiene una funcin utilitaria muy diversa: se emplea a diario para esterilizar los instrumentos de siembra de nicrn o platino, mediante su exposicin directa a la llama, que los calentarn al rojo vivo en pocos segundos. Para flamear la boca de los tubos de ensayo 14
y otras cristaleras estriles. Por su parte externa con el objetivo de eliminar los microorganismos contaminantes, como paso previo a la realizacin de siembras, resiembras, distribucin de medios de cultivo en placas y otros procederes. El mechero tambin es utilizado para fijar frotis en lminas portaobjetos y calentar medios de cultivo durante su preparacin. Advertencia: El empleo del mechero entraa un peligro potencial de quemaduras en la piel o en la ropa, por lo que se debe tener sumo cuidado con su manejo. Se recomienda retirar de su alrededor, durante su uso, papeles (utilizados para la esterilizacin de la cristalera) as como, lquidos inflamables (alcoholes para coloraciones) y otros materiales similares. Por las mismas razones debe mantenerse el pelo recogido y concentrarse totalmente en la actividad que se est realizando. Los instrumentos de siembra (asas o agujas de platino o nicrn) que contengan restos de muestra o de cultivos, deben ser introducidos gradualmente en la llama del mechero de la siguiente manera: de inicio se expondr el extremo del instrumento a la zona azul de la llama y tan pronto se ponga al rojo, se introduce gradualmente el resto del alambre hasta que tambin se ponga al rojo vivo. La introduccin total del instrumento en la llama tiende a aumentar la intensidad de la formacin de aerosoles, potencialmente peligrosos para el manipulador. Lo idneo cuando se trabaja con muestras o cultivos, es disponer de un recipiente con arena humedecida en fenol, para introducir previamente el asa, con los restos de inoculo, antes de flamearla a la llama del mechero. Mechero J-2000 azul universal: Para gas butano. Encendido mltiple mediante pulsador de apoyo que proporciona ignicin instantnea segura. Dispositivo regulador de intensidad de llama. Sistema de bloqueo de seguridad incorporado, LOCK/ON que previene contra encendidos accidentales. Llenado de gas por una simple carga comn para encendedores. Larga duracin de encendidos. Alimentacin por batera de 1,5 V.
27. Instrumentos de diseccin (estuche de diseccin): Adems de los trocars y las agujas hipodrmicas de diferentes calibres en el trabajo de laboratorio, ocasionalmente se requiere del empleo de diferentes agujas, bistur y tijeras de diseccin, as como de charolas, una especie de bandeja donde, se realiza la diseccin de determinados especmenes de experimentacin. Estas luego se pueden observar en el estereomicroscopio o realizar preparaciones o cortes con el micrtomo para luego fijarlas a lminas , colorearlas y llevarlas al microscopio a observar.
c) Pinzas de diseccin: Instrumento, con o sin dientes en su parte activa, utilizado para tomar la fibromucosa bucal sin lesionarla o para estabilizar colgajos, especialmente al suturar. Ayuda a lograr una buena aproximacin de los bordes de los colgajos y acelera el procedimiento de sutura, traumatizando muy poco el tejido. - Pinzas gruesas con bocado. - Pinzas finas para manipulacin de estructuras delicadas. - Pinza Diente de ratn: sirve para pellizcar el objeto que est siendo disecado. - Pinza Mosquito. d) Agujas de diseccin: Es una aguja gruesa que casi siempre tiene un manguillo de color blanco o negro y sirve para separar tejidos de cualquier ser vivo sobre todo en las disecciones, algunas vienen en el estuche de diseccin, pero tambin las venden sueltas. 28. Pinzas para cubreobjetos: Estas pinzas para cubreobjetos se usan para sujetarlos, segn Kuehne son de acero niquelado y curvadas.
a) Bistur; b) Tijeras; c) Pinzas de diseccin; d) Agujas de diseccin a) Bistur: Es un instrumento con hoja de filo cortante, su mango puede ser de madera, plstico o metal. Se emplea para realizar cortes sobre la piel de los animales durante la diseccin. Viene a ser por sus dimensiones un instrumento en forma de cuchillo pequeo y que su uso se ha extendido para practicar incisiones en tejidos blandos. b) Tijeras: La hojas de las tijeras varan segn su objetivo, rectas, en ngulo o curvas y con las puntas romas o puntiagudas. Los mangos pueden ser cortos o largos. - Tijera de diseccin: El tipo y localizacin del tejido a cortar determina la tijera a usar; puede ser grande para tejidos duros, con ngulo para alcanzar estructuras, con mangos largos para cavidades corporales profundas y con hojas filosas. - Tijeras de hilo: tienen puntas romas para no cortar las estructuras cercanas a la sutura y tambin sirven para preparar material de sutura por parte de la arsenalera. 15 29. Reactivos de microscopa: Se incluyen bajo esta denominacin de calidad, todos los colorantes y reactivos utilizados en la preparacin de las muestras para su visualizacin mediante microscopio. La microscopa es una tcnica muy utilizada en citologa, hematologa y bacteriologa, donde es habitual realizar tinciones selectivas de clulas y rganos. Dependiendo de las caractersticas de la muestra, esta se sumerge en distintos fijadores, disolventes y medios de inclusin que le proporcionan la consistencia y caractersticas adecuadas para poder ser teida y visualizada correctamente. Existen muchos reactivos para microscopa, dependiendo que es lo que se desee observar y las caractersticas de lo que se desea observar, slo se trataran los ms importantes en el campo del Laboratorio Clnico. - Violeta de genciana - Solucin de lugol
Alcohol acetona Safranina Fucsina fenicada de Ziehl Azul de metileno Aceite de cedro Wright Giemsa Eosina Nigrosina Rojo neutro Xilol Alcohol etlico Blsamo de Canad Hidrxido de potasio Cloruro de sodio Agua destilada Formaldehido Glutardialdehdo Parafina Tolueno Isopropanol DPX medio de montaje
30. Algodn y aplicadores y depresores: El algodn se utiliza para taponear la boca de los tubos y otras cristaleras que van a ser sometidas a un proceso de esterilizacin y conjuntamente con los aplicadores de madera en la confeccin de hisopos finos y gruesos para extender las muestras en una lmina para su posterior coloracin y observacin. Los aplicadores, adems de ser utilizados en la confeccin de hisopos, se emplean tambin para la toma de algunas muestras, como por ejemplo: heces fecales, para su preparacin en lminas destinadas a la investigacin parasitolgica. Los depresores, de madera o plstico, se utilizan para deprimir la lengua en la toma de muestras de exudado farngeo y tambin, pueden emplearse para extraer medio de cultivo de sus frascos, para efectuar la pesada o como sustituto de los aplicadores en las preparaciones de heces en lminas para examen parasitolgico.
Esto no
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1. Microscopios simples: Estn formados por una sola lente convergente, que proporciona una imagen virtual, no invertida, varias veces mayor que el tamao real del objeto observado. Debido a su limitada capacidad de ampliacin, no se puede observar con ellos objetos microscpicos, quedando restringido su empleo para el examen de diversas estructuras u organismos microscpicos muy pequeos, cuyos detalles escapan a la agudeza visual del ojo humano, como por ejemplo: colonias muy pequeas, desarrolladas en los cultivos, vermes de poca longitud, como el Necator americanus o el Enterovirus vermicularis, etc. Entre los dispositivos utilizados se encuentran las lupas empleadas en las prcticas de diseccin. Para su manejo, se debe colocar la lente de manera que su cara plana o menos curva, quede hacia el objeto a examinar y observando por la cara opuesta, aproximar el instrumento gradualmente, hasta una distancia focal menor que la empleada si se fuera a observar directamente.
I. Concepto: La palabra microscopio proviene de la fusin de las palabras griegas micros que significa pequeo y skopien que significa ver o examinar. Dependiendo del sistema de contraste, los microscopios reciben diversos nombres. Entre los ms comunes estn los siguientes: Microscopio ptico de campo claro Microscopio ptico de campo oscuro Microscopio ptico de fluorescencia Microscopio ptico de contraste de fase Microscopio ptico de interferencia Microscopio ptico de luz polarizada Microscopio ptico invertido Microscopio estereoscopio
Fig.: Lupa
Estereomicroscopio: Instrumento que mediante la sobreposicin de dos imgenes planas, una por cada ojo, permite apreciar imgenes tridimensionales o volmenes.
MICROSCOPIO 17
Microscopio: Instrumento que usa diversos sistemas de lentes e iluminacin controlada para obtener la magnificacin de un objeto. II. Propsito del equipo: El microscopio es un instrumento de precisin conformado por subsistemas pticos lentes, filtros, prismas, condensadores; mecnicos elementos para controlar la posicin de la muestra en el espacio tridimensional X, Y, Z; elctricos transformadores y sistemas de iluminacin, y electrnicos cmaras, sistemas de televisin, etc., que interactan entre s para amplificar y controlar la formacin de imgenes de objetos de tamao reducido, cuyas caractersticas no alcanzan a ser detectadas por el ojo humano. Por lo general, para observar las muestras se requiere que estas hayan sido preparadas de acuerdo con tcnicas que permiten resaltar los detalles a observar. El microscopio constituye una ayuda diagnstica de primer orden en el rea de salud, en especialidades como hematologa, bacteriologa, parasitologa y la formacin de recursos humanos. (Existen microscopios con aditamentos especializados para que los estudiantes efecten las observaciones, dirigidos por un profesor). El desarrollo tecnolgico de estos equipos ha permitido fabricar una enorme cantidad de modelos de aplicacin especializada en la industria y la academia, y ha sido fundamental para el desarrollo del conocimiento humano y para entender el funcionamiento de la naturaleza.+
Ilustracin: Lente positivo (convergente)
Un objeto [h], ubicado a una distancia [a] del lente, produce una imagen [h], a una distancia [b], donde [h>h]. Relaciones matemticas que gobiernan la construccin de lentes: 1/f = 1/a+1/b, donde: f = distancia al foco. (Lugar donde se concentran las ondas luminosas); [a] = distancia del lente al objeto y [b] = distancia del lente a la imagen. La magnificacin [M] de un lente se define como [M] = h/h = b/a. Ilustracin: Funcionamiento del lente
III.
Principios de operacin: El microscopio ha sido construido utilizando las propiedades fsicas de los lentes al interactuar con la luz. Un lente es un elemento ptico, fabricado por lo general en vidrio, que tiene la propiedad de refractar la luz. Es de dimensiones calculadas con superficies generalmente parablicas o esfricas. Si los rayos de luz que inciden sobre una de las superficies del lente convergen al salir del mismo en un punto F, el lente se conoce como positivo o convergente; si el lente dispersa los rayos luminosos que lo atraviesan, se denomina divergente o negativo. Los
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lentes positivos (convergentes), como el que se presenta a continuacin, constituyen la base sobre la cual se fabrican los microscopios. En la ilustracin es posible identificar el foco [F] lugar donde se concentran los rayos luminosos y la forma en que es refractada la luz al atravesar el lente. La distancia entre el lente y el foco [D] se conoce universalmente como distancia focal. La ilustracin que se muestra a continuacin resume los conceptos relacionados con el funcionamiento de los lentes, los cuales se aplican en el diseo y fabricacin Explicacin: Cuando un objeto bien iluminado [h] se coloca a una distancia [a] a la izquierda de un lente convergente, los rayos de luz que provienen del mismo son refractados al cruzarlo. El rayo que proviene de la parte superior del objeto, que cruza el eje ptico del lente en el punto focal [F], es refractado por las dos superficies del mismo y sale en una direccin paralela al eje ptico. El rayo que parte paralelo al eje ptico y cruza el lente en la parte superior es refractado y cruza, a travs del punto focal [F] del lado de la imagen hasta que se cruza con el primer rayo a una distancia [b] del lente, donde se forma la imagen. En el caso presentado, la distancia [a] es mayor que la distancia focal [f], por lo que se forma una imagen real e invertida a una distancia [b] a la derecha del lente. La distancia focal [F] est relacionada a las distancias [a] y [b] por la ecuacin: 1 1 1 = = F a b La magnificacin [M] de un lente est definida por la relacin que existe entre el tamao del objeto y el tamao de la imagen y se representa por la ecuacin:
h M= =
h a donde: [h] y [h] corresponden respectivamente a las dimensiones de la imagen y del objeto, y [a] y [b] a las distancias existentes entre el lente y el punto donde se forma la imagen, y entre el lente y el punto donde se encuentra el objeto. Diagrama del equipo (isomtrico y corte)
Ilustracin: Corte del microscopio
Componentes: Los componentes principales de los subsistemas son los siguientes:
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V. Descripcin de fallas potenciales por componentes: 1. Cabeza binocular: A) Oculares: El problema ms frecuente que afecta los oculares es la presencia de polvo o suciedad, la cual puede ser externa en las superficies exteriores o interna en las superficies interiores. Dicha suciedad o polvo produce sombras que interfieren con la muestra bajo anlisis, especialmente cuando se usan objetivos de alto poder (40X-100X). Si la suciedad es externa, la reparacin se realiza limpiando las superficies de los lentes y, si es interna, desensamblando el objetivo, limpiando las superficies internas, reensamblando y verificando el estado final. Tambin los lentes de los oculares se ven afectados por rayones, especialmente en aquellos que ya tienen largo tiempo de servicio. Los mismos se producen por descuidos en los procedimientos de limpieza y por uso de elementos inadecuados en dichos procesos. Los rayones producen sombras en el campo visual del ocular, similares a los de una telaraa. Desafortunadamente, este tipo de defecto obliga a cambiar el ocular. Algunos disponen de mecanismos de enfoque que a veces se traban. Para reparar se desensambla el ocular, se aplica solvente a la rosca, se limpia el mecanismo de enfoque y se vuelve a ensamblar. Si los lentes del ocular presentan roturas debido a circunstancias fuera de control golpes por cada, uso indebido, debe cambiarse el ocular.
IV.Servicios requeridos: Normalmente, los microscopios utilizan energa elctrica de 110 V/60 Hz o 220 V/60 Hz. Algunos disponen de una fuente regulada que permite variar la intensidad lumnica. Tambin existen microscopios que, en lugar de bombillos, disponen de un espejo, mediante el cual se dirige la luz hacia la placa ubicada en la plataforma. Dichos microscopios son de mxima utilidad en regiones alejadas de los centros urbanos, donde no existen lneas de interconexin elctricas y se utilizan en brigadas de salud. Otras clases de microscopios requieren de preinstalaciones especiales. Un microscopio de fluorescencia necesita una cabina oscura para poder efectuar las observaciones. 20
B) Cabeza binocular: El estado de la cabeza binocular tiene un efecto directo sobre la calidad de la imagen del microscopio. Cualquier suciedad adherida a los componentes pticos de la cabeza afecta la
calidad de la imagen. Este componente puede llegar a ensuciarse debido a situaciones derivadas del trabajo normal en el laboratorio como las generadas en el cambio de oculares, la instalacin de accesorios como cmaras fotogrficas o el simple olvido de colocar los tapones cuando no est en uso el microscopio. Sus componentes ms importantes son prismas y espejos. A) Prismas: Tienen una superficie reflectora plateada que puede oxidarse con el tiempo y perder capacidad reflectiva. Algunos prismas solamente disponen de una capa de pintura reflectora aplicada sobre la superficie de sus caras, a travs de la cual la luz entra y sale. En el caso de daos en la superficie reflectora, el prisma puede ser removido, limpiado, replateado o repintado, instalado y alineado en la cabeza binocular. Esta clase de mantenimiento es altamente complejo y solo lo realizan laboratorios especializados o empresas que brindan servicios de mantenimiento especializado. La remocin de prismas, sin el entrenamiento y la herramienta adecuada, puede producir graves desajustes en la calidad de la imagen e inclusive la rotura del componente. B) Espejos: Tienen sus superficies reflectoras directamente expuestas y son susceptibles a la oxidacin. Si es necesario repararlos, se desmonta y se retira el espejo de la cabeza binocular y se sustituye por uno nuevo, que se corta, cementa y alinea directamente en el sitio de montaje. 2. Iluminador: Es un elemento fundamental para la utilizacin del microscopio. Si el sistema de iluminacin no funciona bien, el microscopio puede quedar fuera de uso, dado que la intensidad luminosa y el contraste son fundamentales para la identificacin y observacin de la muestra estudiada. Diversos factores afectan el sistema de iluminacin; los ms comunes son la suciedad o deterioro de los componentes pticos como espejos y lentes, fallas en los voltajes de alimentacin o la utilizacin de bombillos diferentes a los recomendados por los fabricantes. Las anomalas mencionadas producen pequeas sombras en el campo de visin, intensidad de luz insuficiente o falta de homogeneidad en la iluminacin. A) Suciedad interna: Aparece debido a que los sistemas de iluminacin no estn sellados para impedir el ingreso de polvo y partculas. El polvo que ingresa al sistema produce difusin y disminucin en la cantidad de luz proyectada sobre la muestra. Las partculas grandes producen sombras que dificultan la observacin. Para corregir el problema, se desensambla el iluminador, se 21
limpian sus componentes, se ensamblan y alinean de nuevo sus componentes.
B) Espejos: Los espejos se caracterizan por tener una superficie reflectiva directa, aplicada sobre el cuerpo del espejo. En microscopios de fabricacin reciente, generalmente se encuentra protegida por un recubrimiento. En equipos antiguos, la capa reflectora no dispona de tales recubrimientos, por lo que estaba expuesta a la oxidacin. C) Bombillo incandescente: El bombillo es un componente de consumo. Tiene una determinada vida til y por esto se debe planificar su adquisicin de forma que siempre est disponible un repuesto en el laboratorio o en la institucin donde se encuentra instalado el equipo. La instalacin del bombillo se realiza siguiendo las instrucciones del fabricante. Algunos equipos, como los microscopios pticos de fluorescencia, utilizan bombillos especiales lmparas de mercurio o xenn que requieren procedimientos de montaje y calibracin que, aunque sencillos, se deben efectuar segn las recomendaciones de los fabricantes. El voltaje suministrado al microscopio debe corresponder al especificado por el fabricante. De lo contrario, se corren riesgos innecesarios que afectan la calidad de la iluminacin. Algunos
microscopios utilizan transformadores internos o externos y sistemas de regulacin de voltaje. 3. Plataforma, platina o carro portamuestras y condensador:
dispone de dispositivos de tensin que permiten graduar la suavidad de los movimientos y unas guas tipo "cola de milano" que normalmente se lubrican. En la parte superior estn instaladas las platinas o uas de sujecin de las lminas portamuestras. El mantenimiento busca mantener limpios, lubricados y bien ajustados estos mecanismos. 4. Revlver portaobjetivos:
A) Condensador: El condensador controla la forma en que la luz se concentra o contrasta sobre la muestra bajo observacin. Est compuesto por elementos pticos y mecnicos. Los elementos pticos estn constituidos por lentes; los elementos mecnicos, por dispositivos que permiten controlar la posicin de los elementos pticos y la cantidad de luz que llega a la muestra mediante un diafragma mecnico. Normalmente, los componentes pticos son afectados por la presencia de polvo. El mismo debe ser limpiado de forma similar a la utilizada con los sistemas de lentes. Se limpian con un pincel fino de pelo de camello, con el cual se remueve el polvo que se haya depositado sobre sus superficies. Los componentes mecnicos requieren, para su ajuste, de herramientas de caractersticas especiales. Cada fabricante dispone de sus propios diseos. Las rutinas habitualmente estn enfocadas a procedimientos de limpieza, ajuste y lubricacin. D) Platina o carro portamuestras: La platina o carro portamuestras est constituido por una serie de componentes que interactan entre s y que tienen como propsito controlar la posicin de la muestra bajo anlisis. El carro dispone de movimientos de translacin en sentidos X/Y, que el operador controla a travs de botones macro/micromtricos independientes; adems, el carro 22
El mantenimiento del revlver portaobjetivos es sencillo. Internamente dispone de un trinquete que permite alinear cada uno de los objetivos con el tren ptico del microscopio. Simplemente, se gira con suavidad hasta que el mecanismo del trinquete ajusta la posicin correcta del siguiente objetivo. Cada fabricante define el nmero de objetivos que pueden ser montados en el revlver; lo comn es encontrar revlveres que aceptan desde tres hasta cinco objetivos. El mantenimiento busca mantener limpio, lubricado y bien ajustado el mecanismo rotatorio. Los objetivos reciben rutinas de limpieza de sus superficies pticas externas. Los de inmersin requieren que, cada vez que se termine de utilizar el objetivo, se limpie el aceite para evitar que, por capilaridad, este invada la estructura ptica interna del objetivo. 5. Cuerpo del microscopio: El cuerpo del microscopio est diseado para recibir y soportar los componentes ya descritos cabeza binocular, carro portamuestras, condensador y revlver portaobjetivos y algunos otros como el transformador y dems elementos elctricos/electrnicos que forman parte del sistema de iluminacin del microscopio. El mantenimiento del cuerpo del microscopio consiste bsicamente en mantener limpia la superficie, removiendo la grasa, suciedad o elementos que hayan podido afectar su presentacin y estado. Es necesario tener especial cuidado con sustancias qumicas que pueden ser corrosivas y los tintes que se utilizan en los laboratorios para teir las placas portamuestra.
VI.Mantenimiento general del microscopio: Ante todo es necesario enfatizar que el microscopio es un equipo de alta precisin. La integridad de sus componentes pticos, mecnicos y elctricos debe ser observada, a fin de conservarlo en las mejores condiciones. Cada elemento del microscopio ha sido desarrollado utilizando las ms avanzadas tcnicas de fabricacin. El ensamble de sus componentes y su ajuste se realiza en fbrica, utilizando equipos especializados que, mediante tcnicas de medicin avanzadas, controlan las tolerancias requeridas entre los diversos componentes del equipo. La limpieza del ambiente en el que se utiliza, su instalacin y uso cuidadoso resultan fundamentales para lograr una larga vida til. La humedad, el polvo y las malas condiciones de alimentacin elctrica, el mal uso o instalacin inadecuada resultan contraproducentes para su correcta conservacin. El mantenimiento del microscopio implica mucho cuidado, paciencia y dedicacin. Debe ser efectuado nicamente por personal que haya recibido capacitacin en el equipo y que disponga de la herramienta especializada que se requiere para intervenir. Se presentan a continuacin las recomendaciones generales para la instalacin y el mantenimiento necesarios para mantener un microscopio en buen estado de funcionamiento y que estn al alcance del microscopista. 23
1. Instalacin y almacenamiento: Asegurarse que el ambiente o rea en que se instale el microscopio est protegido o protegida del polvo y la humedad. El ambiente ideal debe disponer de un sistema de aire acondicionado que garantice aire libre de polvo o partculas, control de humedad y control de temperatura de manera permanente. Verificar que el ambiente o rea en que se instale el microscopio disponga de seguridad: puerta con cerradura para evitar su sustraccin no autorizada. Confirmar que el lugar seleccionado para ubicar el microscopio est alejado de lugares como pocetas de agua o donde se trabajen sustancias qumicas, para evitar que el equipo resulte afectado por un derrame o salpicadura. Tambin deben evitarse sitios que tengan luz solar directa. Verificar que el lugar seleccionado cuente con una toma elctrica en buen estado, cuyo voltaje est ajustado en magnitud y frecuencia con los cdigos y normas elctricas, y que resulte compatible con el del sistema de iluminacin del microscopio. En caso de que el microscopio utilice espejo, debe estar ubicado cerca de una ventana que permita una buena iluminacin, pero sin estar directamente expuesto a la luz solar. Instalar el microscopio sobre una superficie nivelada de estructura rgida, bajo la cual exista espacio suficiente para que el usuario microscopista coloque sus piernas y como consecuencia pueda acercar el cuerpo hacia el microscopio y la cabeza hacia los oculares, sin forzar la columna vertebral: cuello y espalda. Para facilitar la colocacin del microscopista, proporcionar una silla de altura variable, que le brinde un buen soporte lumbar; si es del caso, tambin proveer un apoyo para los pies, situado al frente del sitio de trabajo, no en la silla. El propsito es lograr que la columna vertebral est lo ms recta posible y se reduzca la flexin de los hombros y el cuello. Evitar que en sitios cercanos al lugar de instalacin del microscopio haya equipos que produzcan vibraciones como centrfugas o refrigeradores. Procurar no mover el microscopio de su sitio de instalacin y con mayor razn si el mismo se utiliza intensamente cada da. Cubrir el microscopio con un protector de polvo si no se usa por perodos de tiempo largos; tomar precauciones para que no lo afecten excesos de humedad. Mientras ms seco el ambiente, menos probabilidad de que se presente crecimiento de hongos. El
protector puede ser de plstico o de tela similar en calidad a la utilizada en la fabricacin de pauelos, que no suelte pelusa. En zonas de humedad alta, guardar el microscopio durante la noche, en una cabina provista de un bombillo de mximo 40 W. Esto ayuda a mantener seco el entorno y reduce la probabilidad de que se presente formacin de hongos. Si se utiliza esta alternativa, verificar que disponga de orificios que permitan la ventilacin del interior. 2. Procedimientos de limpieza: La limpieza del microscopio es una de las rutinas ms importantes y debe considerarse un procedimiento rutinario. Para realizar la rutina de limpieza se requiere lo siguiente: Una pieza de tela limpia, de textura similar a la de los pauelos. Una botella de lquido para limpieza de lentes. Se consigue en las pticas. Normalmente no afecta los recubrimientos de los lentes y tampoco afecta los pegantes o cementos utilizados para el montaje de los mismos. Entre los lquidos de limpieza ms utilizados se encuentran el etil ter, el xileno y la gasolina blanca. Algunos fabricantes recomiendan no utilizar alcoholes o acetonas, debido a que pueden afectar disolver los cementos o pegantes utilizados para fijar los lentes. Papel para limpieza de lentes. Se consigue normalmente en las pticas. Si no es posible conseguir este material, se puede sustituir con papel absorbente suave o con algodn tipo medicinal. Tambin puede utilizarse un trozo de seda suave. Una pieza de gamuza muy fina. Se puede conseguir en peleteras. Una pera de caucho para soplar aire. Se puede fabricar en el laboratorio un dispositivo con este propsito, acoplando una pipeta tipo Pasteur, con la pera de caucho. Una cubierta plstica. Se utiliza para proteger el microscopio del ambiente externo cuando no est en uso. Tambin podra utilizarse una bolsa de tela de textura similar a la de los pauelos. Un pincel suave de pelo de camello o un pincel fino para pintura. Lo importante es que el pelo del pincel sea natural, de longitud uniforme, textura muy suave, est seco y libre de grasa. En los almacenes que distribuyen artculos de fotografa, es posible conseguir este accesorio. Tambin es posible encontrar un equivalente en tiendas especializadas en suministro de cosmticos. Un paquete 250 g de material desecante (silica gel). Este material se utiliza para mantener controlada la humedad en la caja de almacenamiento del microscopio, si la misma es hermtica. Este material cambia de color cuando se encuentra saturado de 24
humedad, aspecto que permite detectar si requiere ser sustituido o renovado. Cuando est en buen estado, por lo general, es de color azul; cuando se encuentra saturado de humedad, es de color rosado. Bombillos y fusibles de repuesto. De la clase instalada por el fabricante o un equivalente de las mismas caractersticas del original. Nota: Todos los materiales requeridos para efectuar la limpieza deben mantenerse limpios y guardados en recipientes que los protejan del entorno externo. 3. Limpieza de los elementos pticos: En un microscopio se encuentran dos tipos de elementos pticos: los externos, que estn en contacto con el ambiente que rodea el equipo, y los internos, que se encuentran dentro del cuerpo del microscopio las partes internas de los objetivos, oculares, espejos, prismas, condensador, iluminador, etc. y que no tienen un contacto directo con el ambiente que rodea el equipo. Los procedimientos de limpieza, aunque similares, difieren en cuanto al cuidado y precauciones que deben preverse. Los elementos pticos externos de los oculares, los objetivos, el condensador y el iluminador se limpian frotando suavemente la superficie de los mismos, con el pincel de pelo de camello. Esto remueve las partculas de polvo que hayan podido encontrarse depositadas sobre la superficie de los mismos. A continuacin, se utiliza la pera para soplar chorros de aire sobre la superficie de los lentes y asegurar que los mismos quedan libres de polvo. Si el polvo se encuentra adherido a la superficie ptica, se utiliza la pieza de tela limpia y de forma muy suave se efecta un pequeo movimiento circular, sin ejercer mayor presin sobre la superficie del lente. Con la pera se sopla nuevamente la superficie del lente. Esto retira las partculas adheridas. Podra tambin utilizarse una pieza de gamuza fina. En este caso se instala la pieza de gamuza en la punta de un pequeo cilindro de dimetro ligeramente inferior al del lente y, sin ejercer mayor presin, se efecta una rotacin de la misma sobre la superficie del lente. Finalmente, con la pera, se sopla aire sobre la superficie del lente. Esto basta para limpiar las superficies externas. La pieza de gamuza puede humedecerse con agua destilada. En condiciones adecuadas de instalacin, las superficies interiores de los elementos pticos no deben resultar afectadas por la presencia de polvo o partculas. Si por alguna circunstancia aparecen partculas sobre la superficie interior de los lentes, se necesita abrirlos para efectuar la limpieza. Nunca debe abrirse un
ocular u objetivo, si no se cuenta con un ambiente limpio en el cual realizar el procedimiento de limpieza. Las superficies pticas interiores se limpian con el pincel de pelo de camello y con la pera para soplar aire, siguiendo un procedimiento anlogo al anteriormente explicado; se recomienda no desmontar por ningn motivo los elementos pticos para no alterar las tolerancias de ensamble del fabricante. Si se desmontan, sera necesario alinear nuevamente los elementos y estosolo es factible siguiendo instrucciones precisas del fabricante. La limpieza de los objetivos se limitar a conservar limpios los lentes frontal y posterior. Si se detectan residuos de aceite de inmersin en la superficie de los lentes, este debe removerse utilizando papel especial para limpieza de lentes o algodn tipo medicinal. A continuacin, la superficie del lente debe limpiarse con una solucin compuesta de 80 % ter petroleum y 20 % 2-Propanol. 4. Limpieza del cuerpo del microscopio: El cuerpo del microscopio puede ser limpiado con una solucin jabonosa que resulta til para remover la suciedad externa. La solucin jabonosa corta la grasa y el aceite. La misma puede aplicarse con un cepillo pequeo. Despus de que la grasa y la suciedad hayan sido removidas, debe limpiarse el cuerpo del microscopio con una solucin 50/50 de agua destilada y etanol al 95 %. Nota: Esta solucin no es adecuada para limpiar las superficies pticas. Las partes mecnicas, integradas por los mecanismos de ajuste macro/micromtrico ajuste grueso y fino, el mecanismo de ajuste del condensador y los mecanismos del carro portamuestras o plataforma, deben ser lubricados de forma peridica con aceite fino de mquina, para permitir su desplazamiento suave. 5. Mantenimiento del microscopio: Entre las rutinas ms importantes para mantener un microscopio en condiciones adecuadas de operacin, se encuentran las siguientes: Verificar el ajuste de la plataforma mecnica. La misma debe desplazarse suavemente, en todas las direcciones (X-Y) y debe mantener la posicin que selecciona o define el microscopista. Comprobar el ajuste del mecanismo de enfoque. El enfoque que selecciona el microscopista debe mantenerse. No debe variar la altura asignada por el microscopista. Verificar el funcionamiento del diafragma. Limpiar todos los componentes mecnicos. 25
Lubricar el microscopio de acuerdo con las recomendaciones del fabricante. Confirmar el ajuste de la ua fijalminas. Verificar el alineamiento ptico. 6. Precauciones: Evitar limpiar los componentes pticos con etanol, debido a que estos lquidos afectan los elementos pticos. Tampoco limpiar la base o la plataforma con xileno o acetona. No utilizar papel ordinario para limpiar los lentes, dado que en sus componentes constitutivos podra haber elementos de alta dureza que podran rayar la superficie de los lentes. No tocar los lentes con los dedos, para evitar las huellas digitales. No limpiar el interior de los lentes de oculares u objetivos con telas o papel, ya que los barnices de recubrimiento de los elementos pticos podran deteriorarse. Limpiar estas superficies con un pincel de pelo de camello o una pera para soplar aire. Evitar dejar el microscopio sin los oculares. Colocar los tapones si requiere retirar los oculares para evitar el ingreso de polvo o partculas a la cabeza binocular. No dejar el microscopio guardado en una caja, en ambientes hmedos. Evitar presionar los objetivos contra las "Placas", puesto que se podran producir daos en la laminilla o el lente frontal del objetivo. Enfocar el microscopio de forma lenta y cuidadosa. Mantener limpia la plataforma o carro portamuestras. No desensamblar los componentes pticos, pues se pueden producir desalineamientos. Las superficies pticas deben limpiarse en primera instancia con un pincel de pelo de camello; a continuacin, con gamuza o papel especial para lentes. Utilizar las dos manos para levantar el microscopio. Con una mano sostenerlo por el brazo, y con la otra sostener su base. Evitar tocar con los dedos la superficie de la bombilla cuando se la cambia. Las huellas digitales disminuyen la intensidad lumnica. Verificar que el voltaje de alimentacin es el correcto para prolongar la vida til de la bombilla; siempre que sea posible, utilizar la menor intensidad luminosa que resulte til para realizar las observaciones. Conectar el microscopio a travs de un estabilizador de voltaje, si el voltaje de alimentacin no es estable. 7. Cuidados especiales en climas clidos: Tanto en climas clidos como en secos el principal problema que afecta al microscopio es el
polvo, ya que afecta las partes mecnicas y a los sistemas pticos. Dicho problema se puede controlar mediante los siguientes procesos: Proteger siempre el microscopio con una cubierta plstica, cuando no est en uso. Limpiar el microscopio con aire, utilizando una pera de caucho, al finalizar el turno laboral. Limpiar los lentes con un pincel de pelo de camello o con un cepillo de aire. Si el polvo permanece unido a la superficie ptica, intentar removerlo con papel especial para lentes, pero frotando la superficie de forma muy suave, para evitar rayones. 8. Cuidados especiales para climas hmedos: En climas hmedos, por lo general calurosos, los microscopios suelen ser afectados por hongos, que se forman principalmente sobre la superficie de los lentes, en las ranuras de los tornillos y bajo la pintura protectora. En caso de no protegerse el equipo de forma adecuada, podra quedar inservible en muy corto plazo. Los cuidados que se detallan a continuacin ayudan a prevenir la formacin de hongos: Almacenar el microscopio durante la noche en una caja dotada de un bombillo elctrico que no exceda los 40 W de potencia. El bombillo debe estar instalado en la parte superior de la caja, cerca de la cabeza binocular y debe estar encendido durante toda la noche. La caja debe disponer de orificios para permitir la circulacin del aire. Se debe evitar que la temperatura del interior de la caja no exceda los 50 C, para que no se afecten las propiedades de los lubricantes del microscopio. Si no es posible utilizar la caja con el bombillo elctrico, como alternativa se puede utilizar un material desecante como silica gel o arroz. Cuando use el agente desecante, verificar que el microscopio est guardado en una caja o protegido con una cubierta protectora que puede ser fabricada en tela de caractersticas similares a la de los pauelos. Verificar que el agente desecante est en buenas condiciones; caso contrario, sustituirlo o regenerarlo. Limpiar el microscopio de forma peridica. Usar guantes de ltex si tiene que tocar los lentes. Esto evita que las huellas digitales de adhieran a la superficie y disminuye los riesgos o probabilidad de crecimiento de hongos donde quedaron impresas las huellas digitales. Si ninguna de las alternativas mencionadas es factible, ubicar el microscopio en un lugar que tenga buena circulacin de aire. Cuando el microscopio no est en uso, podra colocarse bajo la luz 26
solar de forma directa, por perodos cortos de tiempo. Esto reduce la humedad y el riesgo de que crezcan hongos en las superficies del equipo. El aire acondicionado control de temperatura y humedad evita significativamente el crecimiento de los hongos en los microscopios. Sin embargo, esta no es una opcin que disponga una gran cantidad de laboratorios. Si el servicio de aire acondicionado no es continuo en el rea donde se encuentra instalado el microscopio, se deben tomar precauciones para controlar la humedad. 9. Remocin de la pelcula de hongos: Revisar y limpiar con frecuencia el microscopio, utilizando los procedimientos mencionados en el presente captulo. Controlar las condiciones de humedad donde se usa y almacena el microscopio. Si se mantiene una ventilacin adecuada, disminuye la posibilidad de que se inicie la formacin de hongos en el microscopio. Si se detecta un crecimiento de hongos, utilizar una mota de algodn humedecida en una solucin limpiadora de hongos que normalmente es ter o xilol. Frotar suavemente siguiendo un movimiento circular, a lo largo de toda la superficie del lente. Tambin puede realizar un movimiento oscilatorio, hacia adelante y hacia atrs o izquierda- derecha-izquierda, ejerciendo sobre la superficie del lente una presin muy moderada. Si es necesario, repetir el procedimiento con una nueva mota de algodn. Cuando se termine la remocin de la pelcula de hongos, limpiar con una mota de algodn limpio. Los hongos solo pueden ser removidos cuando su crecimiento se limita a la superficie de los lentes. Si dicho crecimiento no se atiende a tiempo, el hongo puede penetrar el cuerpo del lente. Si este es el caso, el lente se pierde, all ya es imposible removerlo. Si el microscopio se utiliza con elementos potencialmente contaminados, debe ser limpiado con mayor frecuencia. 10. Cuidado del microscopio: Diaria (despus del uso): - Limpiar el aceite de inmersin del objetivo 100X. Usar papel para limpieza de lentes o en su defecto algodn tipo medicinal. - Limpiar el carro portamuestras. - Limpiar el condensador. - Colocar el restato de control de intensidad luminosa en la posicin mnima y luego apagar completamente el sistema de iluminacin.
Cubrir el microscopio con una funda protectora plstica o de tela. Asegurar que queda ubicado en un lugar bien ventilado, en el cual estn controlados la humedad y la temperatura. Si se dispone de caja de almacenamiento ventilada dotada con bombillo para control de humedad, colocar all el microscopio, encender la lmpara y cerrar la puerta de la misma. Cada mes: - Remover las partculas de polvo que pueda tener el cuerpo del microscopio. Usar una pieza de tela humedecida con agua destilada. - Retirar las partculas de polvo de los oculares, objetivos y del condensador. Utilizar la pera para soplar aire. A continuacin, limpiar la superficie de los lentes con solucin limpiadora de lentes. No aplicar directamente esta solucin a los lentes, sino en papel para limpiar lentes y luego frotar suavemente la superficie de los mismos con el papel mencionado. - Retirar el mecanismo de sujecin de las placas portamuestras; limpiar cuidadosamente y reinstalar. Cada seis meses: Como complemento a las rutinas mensuales de mantenimiento se recomienda lo siguiente: - 1. Efectuar una inspeccin visual general del microscopio. Verificar que cada componente se encuentre en buen estado, est limpio y est bien ajustado mecnicamente. - Verificar que en el lugar de instalacin se conserven las condiciones de buena ventilacin, control de humedad y temperatura. - Comprobar la calidad del sistema elctrico que alimenta el microscopio. Verificar la integridad de los conectores, los fusibles y la lmpara incandescente.
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