INSTITUTO TECNOLGICO DE TUXTLA GUTIRREZ PROTOCOLO DE INVESTIGACIN MICROPROPAGACIN DE CULTIVO IN VITRO DE LA PLANTA DE CAF PRESENTAN: GORDILLO RUZ FERNANDO

NGEL IC VZQUEZ FRAGEDIS EDITH PREZ BENTEZ ITZEL TOLENTINO MARTNEZ YAJHAYRA ASESOR: ING. JOS FRANCISCO MARTNEZ

TUXTLA GUTIRREZ, CHIAPAS. A MAYO DE 2013

MICROPROPAGACIN DE CULTIVO IN VITRO DE LA PLANTA DE CAF

INTRODUCCIN
En la actualidad los avances genticos de cultivo in vitro han permitido la multiplicacin de recursos hereditarios, muchos de ellos se encuentran en extincin. La propagacin de plantas in vitro o micropropagacin, es una tcnica muy utilizada en cultivos de importancia econmica.

El objetivo de la metodologa es propagar masivamente plantas en vas de extincin, o de aquellas incapaces de propagarse por otros mtodos.
En algunas ocasiones se lleva a cabo este mtodo para obtener plantas libres de virus y as conservar la diversidad gentica de una poblacin.

JUSTIFICACIN
El desarrollo agroindustrial que cuenta el estado de Chiapas, origina potencializar a los subsectores econmicos primarios, secundarios y terciarios debido a su gran biodiversidad de plantas y animales. Sin duda alguna, Chiapas, se encuentra caracterizado dentro de las zonas tropicales ms importantes en donde se lleva el cultivo y la comercializacin del caf. De acuerdo con el Consejo Mexicano del Caf, de los 12 estados productores, Chiapas ocupa un honroso primer lugar nacional. La variedad de caf que ms se produce en el estado es la denominada arbica (Coffea arabica).

OBJETIVO GENERAL
Realizar la micropropagacin in vitro de la planta de caf (coffea arabica).

OBJETIVO ESPECFICOS
Eleccin de la planta original donante de explantos de caf.
Obtencin y desinfeccin de los explantos. Adaptacin de explantos al medio de cultivo.

Formacin de races con el fin de convertir los brotes en plntulas completas.

Aclimatacin de las plntulas obtenidas in vitro a las condiciones medio
ambientales ex vitro.

ANTECEDENTES
La micropropagacin en cultivo in vitro de tejidos vegetales, es una tcnica de reproduccin en condiciones totalmente aspticas. El caf es el producto agrcola ms importante en el mercado internacional. Los cafetos son arbustos de las regiones tropicales del gnero Coffea, de la familia de los rubiceos. Existen dos cafetos de importancia comercial: Coffea arabica y Coffea canephora Pierre (variedad robusta). Las tcnicas de cultivo de tejidos se puede llevar a cabo en especies de cafeto, resaltando Coffea arabica y Coffea canephora, a partir de muestras obtenidas de la mayora de los rganos. La propagacin puede ser mediante microesquejes (por organognesis) o por embriognesis somtica, siendo esta ltima la principal va de regeneracin por presentar la mayor tasa de multiplicacin.

(Baumann y Neuenschwander 1990).

En la micropropagacin de cultivo in vitro del caf se pueden reconocer las siguientes fases:

Germinacin del embrin (Crecimiento del brote y de la raz). Fortalecimiento de la plntula. Transferencia al suelo.
Se han identificado varios factores generales que controlan la ESAF: TEJIDOS DONANTES

Medio de induccin (Divisin celular y redeterminacin). Medio de acondicionamiento (Diferenciacin). Rescate del embrin (Aislamiento).

Especies vegetales o variedades. Fuente del explante. Pretratamiento del explante.

MEDIO DE CULTIVO

Constituyentes orgnicos e inorgnicos. Reguladores del crecimiento (Tipos y concentraciones). Osmolaridad total.

 CONDICIONES DE CRECIMIENTO

Luz (Calidad, intensidad, fotoperiodo). Temperatura (Termoperiodo). Intercambio gaseoso. Rgimen de subcultivo.
Seleccin de cultivos durante el subcultivo.
Se pueden distinguirse dos patrones generales de desarrollo de la embriognesis in vitro:

EMBRIOGNESIS DIRECTA.
Los embriones se originan directamente de los tejidos sin que haya proliferacin de callo. (Kato y Takeuchi, 1966; Konar y Nataraja, 1965).

EMBRIOGNESIS INDIRECTA.
La proliferacin de callo y el TE estn asociados con el desarrollo del embrin.

(Kato y Takeuchi, 1966; Konar y Nataraja, 1965).

CRONOGRAMA
FECHA METODOLOGA 1
1. RECOPILACIN DE INFORMACIN 2. SELECCIN DE MUESTRAS 3. PRIMERA FASE (DESINFECCIN) CORTADO LAVADO COLOCADO (CAJA PETRI) PRECULTIVO 4. SEGUNDA FASE (MEDIO DE INDUCCIN) CULTIVO PRIMARIO 5. TERCERA FASE (ACONDICIONAMIENTO) CULTIVO SECUNDARIO 6. CUARTA FASE(AISLAMIENTO) COLOCADO (CAJA PETRI) EXTRACCIN LAVADO TRASPLANTADO FORTALECIMIENTO 7. QUINTA FASE (TRANSFERENCIA AL SUELO)
FEBRERO SEMANA MARZO SEMAN A ABRIL SEMANA MAYO SEMANA JUNIO SEMANA JULIO SEMANA

CONCLUSIONES
La micropropagacin in vitro ha permitido ampliar el campo del mejoramiento vegetal a partir del manejo y la transferencia de genes de inters, aplicndose especialmente en plantas de importancia agronmica y comercial, como es el caso del caf. Esta planta ha sido la base de estudios y pruebas que incluyen el cultivo in vitro y la transformacin gentica con mtodos fsicos y biolgicos, logrando la expresin de genes forneos (de origen vegetal y bacteriano) y la modificacin de la expresin de genes endgenos (como los que regulan la maduracin del grano y el contenido de cafena). El fruto de estas investigaciones puede ser utilizado para incrementar la produccin, el rendimiento y la calidad de esta planta de gran demanda internacional, e incluso para estimular y potenciar su cultivo en pases con tradicin cafetalera, como Mxico.