Reaccin de identificacin de la Cumarina

Reaccin del bergapteno

Reaccin del psolereno

CONCLUSIONES
Se concluye que existen cumarinas fijas en la ruda y el apio. Tambin se concluye que todas las cumarinas se caracterizan por la presencia de la estructura de benzopirona y su carcter lactnico hacen que sean solubilizadas en solventes polares como el etanol, lo que facilita su extraccin. Mediante la propiedad de fluorescencia que presenta la cumarina (especialmente la furanocumarina y las alcoxicumarinas) estas sern detectadas fcilmente mediante lmpara UV a 365nm. La adicin de NaOH es importante en la adicin de las cumarinas, ya que aumenta la fluorescencia.

RECOMENDACIONES
En la extraccin de las cumarinas es importante tener en cuenta la polaridad de la muestra ya que de eso depender la eleccin del solvente. Cuando se realice la extraccin de cumarinas, tener cuidado en el armado del cartucho para que no se permita la salida de partculas posibles de muestra seca. El cartucho no debe ser tan tupido. Se debe recuperar el etanol una vez extradas las cumarinas, en el mismo equipo retirando el cartucho y poniendo en reflujo solo el solvente hasta concentrar por lo menos 30 mL del extracto, ya que en esta era abocada al medio ambiente en la que vivimos, no se puede verter nada que aun se pueda utilizar al drenaje. Cuando se prepara el sistema de cromatografa de capa delgada, los cromatofolios no deben ser movidos del solvente, es decir no se debe trasladar de un lugar a otro hasta que el solvente haya alcanzado la distancia mxima.

CUESTIONARIO
1.- Esquematice el mtodo de extraccin de las cumarinas e indique otro mtodo de extraccin.

muestra seca y molida

muestra molida y seca

etanol por 3h

mezclar en EtOH : agua 1:1

filtrar

maserar en bao de ultrasonido pr 2 h

concentrar a 50 C

filtrar

Extraccin mediante maceracin en ultrasonido 2.- Qu reacciones se pueden utilizar para identificar las cumarinas? Teniendo presente su estructura qumica. FeCl3 (1%): detecta OH fenlicos (azul o verdoso). Reactivo de Emerson: Solucin 4-aminoantipirina al 2% en EtOH y de hexacianoferrato (III) de potasio al 18% en H2O de colores rojo-naranja o rojo-salmn. Prueba de Erlich: Para detectar el anillo furano: Solucin al 5% de p-dimetil-aminobenzaldehdo en EtOH (1%) seguido de cloruro de hidrgeno gaseoso. Si da coloracin naranja es (+). KOH en MeOH al 5%: SbCl3 al 20% CHCl3 tambin da color y a diferentes diterpenos absorbe el UV pero no es, especfico.

3.- Cules son las funciones de actividad biolgica conocida de estos compuestos? De cinco ejemplos con su actividad biolgica. En las plantas :Inhiben la germinacin de semillas y en pequea concentracin favorecen el crecimiento de las races, tambin se ha observado que influyen en el contenido de carotenoides en zanahoria, tiene propiedades antimicrobianas, captadoras de radiacin UV En personas: Presenta accin espasmoltica, dilatadora de vasos coronarios. Especialmente las piranocumarinas. 4.- Nombre cinco cumarinas (las ms importantes) con su respectiva estructura.

a.- Dafnina:

b.- Peucedanina

c.- Dicumarol

d. Cumestrol

e. Umbeliferona

5.- A qu cree Ud que se debe la fotosensibilidad de estos compuestos? Esta actividad fotosensibilizante es explicable debido a la reactividad del estado triplete de las furanocumarinas que se genera cuando stas interactan con la radiacin UV, y cuyas posibles reacciones se pueden agrupar en dos categoras: Los fotoenlaces directos con macromolculas como el DNA, el RNA y las protenas. Las fotomodificaciones indirectas a los sustratos biolgicos a travs de formas reactivas del oxgeno. 6. Por qu usa la cromatografa para su deteccin? Cul es la diferencia de usar una cromatografa de celulosa y una de silicagel? Se usa la cromatografa por ser un mtodo sencillo que nos permite ver a travs de la lmpara UV y porque permite una buena expansin, permitiendo as separarse de alguna impureza que se encuentre. Cromatografa en papel: Es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar anlisis cualitativos ya que pese a no ser una nica tcnica muy potente no requiere de ningn tipo de equipamiento. La fase estacionaria est constituida simplemente por una tira de papel de filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeas gotas de la solucin y evaporando el solvente. Luego el disolvente empleado como la fase mvil se hace ascender por capilaridad. Esto es, se coloca la tira de papel verticalmente y con la muestra del lado de abajo dentro de un recipiente que contiene fase mvil en el fondo. Despus de unos minutos cuando el solvente deja de ascender o ha llegado al extremo se retira el papel y seca. Si el solvente elegido fue adecuado y las sustancias tienen color propio se vern las manchas de distinto color separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el papel se somete a procesos de revelado. Hay varios factores de los cuales depende una cromatografa eficaz: la eleccin del solvente y la del papel de filtro. Cromatografa de silicagel: La muestra aplicada en la capa es adsorbida en la superficie del material por la accin de fuerzas electrostticas (fuerzas de Van der Waals, puentes de

Hidrgeno, efectos inductivos, etc.). Luego, cuando la capa es expuesta a un flujo por accin capilar, se inicia una competencia de enlaces entre los sitios activos del adsorbente y la sustancia con el solvente. La diferencia es que cromatografa de silicagel se puede usar reveladores corrosivos, que sobre la cromatografa de papel destruirn el cromatograma. 7.- Qu son aflatoxinas? Cmo se forman? Quin las produce? Cmo se les puede identificar? Con reacciones qumicas y tcnicas cromatogrficas u otros mtodos de anlisis. Las Aflatoxinas (AF) son un grupo de mohos, micotoxinas producidas por hongos del gnero Aspergillus (especialmente A. Flavus, A. Parasiticus y A. nominus). Se trata de mohos toxignicos, capaces de desarrollarse en gran variedad de sustratos, pudiendo contaminar los alimentos cuando stos son cultivados, procesados, transformados o almacenados en condiciones adecuadas que favorezcan su desarrollo. El crecimiento de estos mohos y la produccin de toxinas dependen de muchos factores como el alimento en cuestin, su grado de acidez, la temperatura o humedad ambientales y la presencia de microflora competidora. La composicin qumica de las aflatoxinas vara con las cepas, el sustrato o materia orgnica sobre el cual crece y las condiciones ambientales del crecimiento del hongo. En los alimentos (leche y carne, entre otros) y granos (maz, trigo etc.), generalmente se han identificado cuatro tipos de aflatoxinas, que son aflatoxina B1 (AFB1), aflatoxina B2 (AFB2), aflatoxina G1 (AFG1) y aflatoxina G2 (AFG2). La AFB1 es la ms txica y carcinognica y generalmente es la que predomina. En rumiantes la AFB1 se metaboliza por la microfloraruminal a aflatoxina M1, identificndose concentraciones sanguneas apreciables de sta. La glndula mamaria constituye una ruta de eliminacin importante para estas sustancias. Se reporta que del 1 al 3 % de la AFB1 ingerida por el organismo, se elimina en la leche en forma de AFM1. Los micelios de sta y otras especies afines productoras de aflatoxinas, son capaces de colonizar semillas y tortas de oleaginosas de man, girasol, algodn, soja, ssamo, avellanas, almendras y cereales y sus derivados dispuestos en sacos o silos. El crecimiento de este hongo se ve afectado por la termohigrotropa, es decir que responde al estmulo de la temperatura y la humedad relativa de la atmsfera y del sustrato. As, la formacin de aflatoxinas en el man tiene lugar si este se almacena entre 20 y 40C con un 10-20% de humedad y con un 70-90% de humedad relativa en

el aire: el crecimiento del hongo se ve favorecido si los granos estn daados por insectos o roedores. Para el anlisis de aflatoxinas totales se utiliza un mtodo de cromatografa de afinidad con anticuerpos monoclonales (AFLATEST) y su confirmacin e identificacin se realiza mediante cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC) con deteccin por fluorescencia. Entre las principales manifestaciones sustancias, estn el dao heptico carcinognesis, inmunosupresin y importantes de estas toxinas son bioacumulacin y su gran estabilidad. asociadas a la exposicin de estas y renal, mutagnesis, teratognesis, citotoxicidad. Algunas caractersticas su capacidad de bioconcentracin,

8.- En que tipos de alimentacin y bajo qu condiciones se pueden formar las aflatoxinas y cuales serian las consecuencias en el ser humano. Los mayores niveles de contaminacin por aflatoxinas se han descrito en semillas de algodn y maz, cacahuates, nueces, avellanas y otros frutos secos. En cereales como el trigo, arroz, centeno o cebada, la presencia de estos txicos suele ser menor. Se cree que las condiciones climticas de las zonas tropicales favorecen la contaminacin por aflatoxinas, aunque estn pueden estar presentes tambin en zonas templadas. Se han identificado hasta 18 tipos de aflatoxinas, de las cuales la B1, secretada en la leche de los animales que consumen alimentos contaminados ostenta una preocupacin sanitaria especial. Estudios fisiolgicos han revelado que las aflatoxinas poseen una actividad mutgena y carcingena, as como que la variedad B1 es la ms toxica. Un comit mixto de la FAO y la OMS, integrado por expertos en aditivos, ha definido a las aflatoxinas como potentes carcingenos humanos, si bien no existe aun informacin suficiente para establecer una cifra fija sobre grados de exposicin tolerable. Los expertos se limitan a aconsejar que no se abuse en el consumo de frutos secos. Los efectos nocivos de la intoxicacin por aflatoxinas en los animales (y presumiblemente en humanos) ha sido clasificada en dos formas generales: Se produce aflatoxicosis aguda cuando se consumen niveles medios a altos de aflatoxinas. Los efectos de esta intoxicacin pueden incluir hemorragia, dao agudo del hgado, el edema, la alteracin en la digestin, la absorcin y/o el metabolismo de alimentos, y posiblemente la muerte. La aflatoxicosis crnica resulta del consumo de niveles bajos a moderados de aflatoxinas. Los efectos son generalmente subclnicos y difciles de reconocer. Algunos de los sntomas comunes son una difcil y deteriorada absorcin de los alimentos e ndices de crecimiento ms lento. Para que un animal (o ser humano) haya muerto por causa de las aflatoxinas debi ser suministrado con grandes dosis de las mismas y posiblemente durante largo tiempo , esto pone en duda la

cadena entera de control de calidad sobre la que el gobierno nacional (adems de la empresa) tiene una gran cuota de responsabilidad. 9.- Qu tipo de cumarinas estn presentes en la ruda y el apio? Las cumarinas que estn presentes en la ruda y el apio son: APIO: Piranocumarina como la rutaretina de la familia Apiaceae. RUDA: Furanocumarina (bergapteno y psoraleno) de la familia Rutaceae. Ruda Apio

Ruda (Ruta graveolens L.) Familia: RUTACEAS. Otros nombres: ARRUDA, BESADA. Contiene aceite esencial, tanino, derivados de la cumarina, alcaloides y flavonglucosido rutina. Principalmente se encuentran las furanocumarinas como el bergapteno. Las furocumarinas y el aceite de ruda son citados por tener efecto espasmoltico sobre los msculos lisos. Arborinina y furocumarina tienen tambin propiedades antihistastamnicas y antiinflamatorias. Las furocumarinas tienen propiedades fototxicas y son tiles en el tratamiento de la psoreasis. Se ha demostrado en ratas el efecto abortivo del extracto alcohlico de ruda.

El apio (Apiumgraveolens) es una especievegetal perteneciente a la familia de las Apiceas, antiguamente conocidas como umbelferas. Las cumarinas, otro fitonutriente del apio, ayudan a evitar que los radicales libres daen las clulas y previene la formacin y el desarrollo del cncer de estmago o de colon. El tipo de cumarina presente en el apio es la furanocumarina principalmente bergapteno, isopimpinelina y xantotoxina.

10. En qu consiste la fluorescencia? Indique ejemplos que reportan esta propiedad. La Fluorescencia de todos los derivados de cumarinas es muy sensible a los cambios en la polaridad del entorno y del pH; modificndose notablemente tanto la

posicin de los mximos de absorcin y de emisin como la intensidad de fluorescencia. La dimerizacin provoca cambios en la intensidad de la fluorescencia, debido a que los dmeros generalmente no emiten o tienen rendimientos cunticos muy bajos. Estas variaciones en la fluorescencia se deben a la interaccin dipolo-dipolo entre los monmeros y pronostica que el estado excitado del monmero se divide en dos al dimerizar, uno de mayor y otro de menor energa que el original. Por ejemplo las pironinas:

La 7-hidroxicumarina

BIBLIOGRAFIA
Olga Lock de Ugaz, INVESTIGACIN FITOQUMICA Mtodos en el estudio de productos naturales, segunda edicin, Fondo editorial PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATOLICA DEL PERU, Lima-Per, 1994. Xorge Alejandro Domnguez, Mtodos de investigacin Fitoqumica, Editorial LIMUSA, Mxico, 1973. http://www.plantas-medicinal-farmacognosia.com/productosnaturales/plantas-medicinales-a/plantas-medicinales-con-cumarinas/ http://www.plantas-medicinal-farmacognosia.com/productos naturales/acerolo-acerola/ http://www.elergonomista.com/fitoterapia/cumarinas.htm

 http://es.wikipedia.org/wiki/Aflatoxina http://www.veterinaria.unal.edu.co/inv/tox/Regulaciones%20micotoxinas,%2 0Vet%20al%20Dia,%201(3),%2022-27,%201995.pdf http://www.profitocoop.com.ar/monografias/Ambay.pdf