UNIVERSIDAD DEL ATLNTICO FACULTAD DE QUMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGA SEXTO SEMESTRE PRCTICA No 1 DETERMINACION DE ALCOHOL METILICO EN MUESTRAS

AS BIOLOGICAS

GENERALIDADES: Cuando se sospecha de una intoxicacin por alcohol metlico, debern remitirse al laboratorio para su anlisis cualquiera de las siguientes muestras: 10mL de sangre sin anticoagulante. 100ml de orina Contenido gstrico ( vmitos) Residuos de botellas de licor. Si bien en todo caso es aconsejable no aadir conservantes, en este caso es fundamental abstenerse de conservar la muestra con formol, formaldehido, o acido frmico, porque precisamente los mtodos de investigacin se basan en tcnicas de deteccin de acido frmico, y formaldehido. Su amplio uso en la industria aumenta el riesgo de exposicin ocupacional por inhalacin de sus vapores o la absorcin por piel. La principal causa de intoxicacin aguda en la poblacin general adulta ocurre principalmente por el consumo de licor adulterado; no obstante, su venta libre, fcil acceso, bajo costo (es tres veces ms econmico que el alcohol etlico) y capacidad de producir similares efectos embriagantes al etanol, hacen de l una sustancia ideal para la adulteracin de las bebidas alcohlicas Diagnstico Antecedente o sospecha de exposicin a la sustancia Cuadro clnico compatible con la intoxicacin aguda por metanol Presencia de alteraciones visuales. Aparicin de acidosis metablica. Anin Gap elevado: (> 14 mEq/L) La confirmacin se obtiene mediante la determinacin de niveles de metanol en sangre o niveles de formaldehido y acido frmico en orina/sangre Niveles sricos de > 20mg/dl son txicos Niveles sricos > 40 mg/dl son letales Niveles sricos bajos o ausentes de metanol no descartan la intoxicacin

Materiales y reactivos: Soluciones: Solucin de permanganato de potasio 0.2N Sulfito o bisulfito de sodio anhidro. cido cromotrpico. cido sulfrico concentrado. Sangre (muestra). Etanol (absoluto). Metanol (absoluto). Agua destilada. Acido pcrico. Fenilhidracina clorhidrato al 1%. Ferricianuro de potasio (1-10) Resorcinol (1-200) Cloruro frrico al 10% Otros: Tubos de centrifuga. Pipetas de 1, 2, 5 ml. Papel de filtro. Embudo. Agitador. Probetas de 10 ml.

PROCEDIMIENTO: Se coloca la muestra a analizar en un baln de destilacin, se agregan 20ml de solucin saturada de acido pcrico, 20mL de agua, unas perlas de vidrio y se somete a destilacin, recogiendo unos 10-15 mL del destilado en unos 2 mL de agua para evitar prdidas por volatilizacin. OXIDACION DEL DESTILADO: a la cantidad del destilado se aade 1 ml de acido sulfrico al 25% y 4mL de KMnO4 0.2N agitar y dejar reposar por diez minutos, filtrar y decolorar el exceso de permanganato con bisulfito de sodio. Al filtrado se le realizan las siguientes pruebas para reconocimiento de formaldehido: CH3OH + MnO4- + 2H + HCOH+ MnO2 - +2 H2O

REACCION CON ACIDO CROMOTROPICO: En un tubo de ensayo que contenga 3 ml del filtrado se agregan unos mg de cido cromo trpico (lo que tome con la punta de una esptula) se agita la solucin y se agrega lentamente por las paredes del tubo inclinado para evitar que se mezclen los lquidos 4 ml de cido sulfrico concentrado, la aparicin en la zona de contacto de un anillo de color prpura indica la presencia de formaldehido en la muestra. limite de deteccin 1 ppm. REACCION DE HEHNER: En un tubo de ensayo con 2ml del filtrado se aade 1ml de solucin de FeCl3 al 10%, se agita y se aade 5ml de leche, luego cuidadosamente por las paredes del tubo inclinado se aade 4ml de H2SO4 concentrado; un anillo de color violeta en la interface indica la presencia de formaldehido. CONFIRMACION: A 2ml del filtrado contenidos en un tubo de ensayo aada unas gotas (8) se solucin de resorcinol (1-200), cuidadosamente por las paredes del tubo aada 4ml de H2SO4 concentrado, dejar en reposo por tres minutos, un anillo de color rosa en la interface indica la presencia de formaldehido. Limite de deteccin 3ppm. REACCION CON EL REACTIVO DE SHIFF: En un tubo de ensayo que contenga 1ml del reactivo de shiff se aaden algunas gotas del filtrado, se deja en reposo, despus de un rato entre dos minutos y media hora aparecer una coloracin prpura dependiendo de la cantidad de aldehdo presente. A la solucin coloreada aada algunas gotas de HCL concentrado. La aparicin de un color azulado indica la presencia de formaldehido, el acetaldehdo se decolora.

REACCION DE SCHRYVER: A 2ml del filtrado aada 2ml de fenilhidracina clorhidrato al 1%, luego 1ml de solucin recin preparada de ferricianuro de potasio (1-10) y unas gotas de HCL (c), la aparicin de una coloracin rojo cereza indica la presencia del formaldehido.

Precauciones Consultar la M.S.D.S para mayor informacin. Tenga cuidado con:

 cido Sulfrico (H2SO4): esta sustancia provoca quemaduras graves, es un fuerte oxidante, ataca la ropa, madera y otros materiales carbonizndolos. En caso de contacto con los ojos, lave inmediatamente y con abundante con agua y obtenga atencin mdica inmediata. NUNCA le adicione agua a este producto. En caso de accidente o malestar, acuda inmediatamente al mdico. Permanganato de potasio: con esta sustancia existe peligro de fuego en contacto con materias combustibles. Nocivo por ingestin. Muy txico para los organismos acuticos, puede provocar a largo plazo efectos negativos en el medio ambiente acutico. Elimnese el producto y su recipiente como residuos peligrosos. Evtese su liberacin al medio ambiente. Bisulfito de sodio: esta sustancia es nociva por ingestin. En contacto con cidos libera gases txicos. Evtese el contacto con los ojos. En caso de ingestin, acdase inmediatamente al mdico y mustrele la etiqueta o el envase. Etanol: esta sustancia es fcilmente inflamable. Mantngase el recipiente bien cerrado. Conservar alejado de toda llama o fuente de chispas. No fumar.

Elementos de proteccin personal. Bata de laboratorio e indumentaria resistente a cidos. Gafas de seguridad con proteccin lateral. Guantes de caucho.