PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO (POP)

Profa. Ms. Dora Lcia Carrara Moreti

ENTREGAR O POP COM A CAPA (seguir normas de Vancouver)

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Procedimento Operacional Padro (POP)

CABEALHO

LOGO DA EMPRESA

PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO (POP)

N 01 REVISO: 00 PAG. 01/0..

NOME DO PROCEDIMENTO - MARCA

1.0 FINALIDADE 2.0 PRINCPIO

A glicose oxidase (GOD) catalisa a oxidao da glicose para cido glicnico e perxido de hidrognio. Atravs de uma reao oxidativa de acoplamento catalisada pela peroxidase (POD), o perxido de hidrognio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol, formando um complexo de cor vermelha (quinoneimina), cuja absorbncia medida em 500 nm, diretamente proporcional concentrao de glicose na amostra.
GOD

Gli cos e 1/2H2O cido Glicnico H2O2

2H2O2 4 a m in oantipirina Fenol Quinonei m in a 4H2O

POD

3.0 SIGNIFICADO CLNICO Diabetes Mellitus Tipo I Diabetes Mellitus Tipo II Diabetes Mellitus Secundria Diabetes Mellitus Gestacional

4.0 INFLUNCIAS PR-ANALTICAS

5.0 AMOSTRAS Preparo do Paciente Colher sangue pela manh aps jejum 8 horas, salvo orientaes mdicas.

Amostras utilizadas Soro, plasma, lquor e outros lquidos biolgicos. Anticoagulantes como heparina, oxalato, fluoreto ou EDTA, no interferem. Estabilidade e armazenamento da amostra O analito estvel por 7 dias a 2-8 C. Separar o soro ou plasma dos elementos celulares no prazo mximo de 1 hora. Adicionando um inibidor de glicolise como o fluoreto, melhora a preservao da amostra.

6.0 METODOLOGIA

7.0 REAGENTES 1- Padro - Contm Glicose 100 mg/dL. 2- Reagente de Cor - Contm tampo pH 7,5 de fosfato 70 mmol/L, fenol 5,0 mmol/L, glicoseoxidase 10000 U/L, peroxidase 1000 U/L, e 4-aminoantipirina 0,4 mmol/L.

8.0 CURVA DE CALIBRAO

Padro 1 2 3 4 5 6 7 Concentrao (mg/L) 0 50 100 250 400 600 800 Absorbncia 0,000 0,172 0,343 0,859 1,374 1,986 2,350

9.0 LINEARIDADE

A reao linear at 600 mg/dL . Quando obtido valor igual ou maior que 600 mg/dL, diluir a amostra com NaCl 150mmol/L, realizar nova medio e multiplicar o resultado pelo fator de diluio. Diluir a amostra de tal modo que o valor encontrado se situe entre 80 e 200md/dL. Sugerimos a verificao d linearidade metodolgica e fotomtrica, no mnimo semestralmente, utilizando amostra com valores at 600 mg/dL.

10.0 MATERIAIS NECESSRIOS

Procedimento Tcnico Manual

Banho-Maria a 37C Espectrofotmetro ou fotmetro para leituras em 500 nm Pipetas automticas volume: Cronmetro

11.0 CONTROLE INTERNO DA QUALIDADE Utilizao de amostras controles com valor:

situado na faixa de referncia (nvel de deciso)

em outra faixa de significncia clnica

12.0 PROCEDIMENTO TCNICO

Procedimento Manual 1- Deixar os reagentes atingirem a temperatura ambiente ou a do banho-maria antes da realizao do teste. 2- Identificar 3 tubos de ensaio com "Branco", "Teste" e "Padro" e proceder:

Tubos Amostra Padro (1) Reagente de Cor (2)

Branco 1000 L

Teste 10 L 1000 L

Padro 10 L 1000 L

3- Homogeneizar bem e incubar os tubos durante 10 minutos temperatura ambiente (15-30C) ou durante 5 minutos a 37C . 4- Ler a absorbncia (A) do Padro (Ap) e do Teste (At) zerando o aparelho com o Branco em 500 nm. 5- A cor estvel durante 2 horas .

13.0 CLCULOS
Ver linearidade Absorbncia do teste ____________________ X 100 Absorbncia do Padro

Glicose (mg/dL) =

Fator de Calibrao =

100 ____________________ Absorbncia do Padro

Glicose (mg/dL) = Absorbncia do Teste x Fator de Calibrao

14.0 INTERVALO DE REFERNCIA / VALORES RECOMENDVEIS OU DESEJADOS

Plasma: 70 a 99 mg/dL ou 3,9 a 6,1 mmol/L Lquor: 40 a 70 mg/dL

Lquidos Corporais: > 60 mg/dL (ou diferena entre glicemia e concentrao de glicose no lquido, desde que no for > 40 mg/dL)

15.0 REFERNCIAS

Bergmeyer HU. Methods of Enzimatic Analysis, Academic Press 2nd ed. 1205-1214. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. Philadelphia: W.B. Saunders Co. 1994: 932-958. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fundamento de Qumica Clnica, 4a Ed Editora Guanabara Koogan; 1998. Kaplan A, Szabo LL, Opheim KE. Clinical Chemistry: Interpretation and Techniques. Philadelphia: Lea & Febiger, 1988:288-293. Trinder P. Ann Clin Biochem 1969;6:24. Trivedi RC et al. Clin Chem 1978;24:1908-1911. GLICOSE-PP, Instrues de Uso, Gold Analisa Diagnstica.

16.0 APROVAO

Data:___/___/___ Setor Tcnico: nome completo de um colega

Sua assinatura Responsvel Tcnico: seu nome completo Data:___/___/___

Assinatura do colega

Data:___/___/___ Gerente da Qualidade: nome da profa. completo