Agar Papa Dextrosa: Medio para el cultivo y enumeracin de levaduras y mohos a partir de alimentos y otros materiales.

Los hidratos de carbono y la infusin de papa favorecen el crecimiento de levaduras y hongos, en tanto que por el bajo rango de pH, la flora acompaante se reduce significativamente. Composicin por Litro: Agar -15g Dextrosa - 20g Infusin papa - 4g

OBJETIVOS: 1. Identificar medios de cultivo para el aislamiento de las posibles bacterias presentes en el almidn de papa sabanera. 2. Aislar los posibles microorganismos presentes en el almidn de papa sabanera (hongos, levaduras o bacterias). 3. Aislar microorganismos presentes en el almidn de papa sabanera por la tcnica de siembra en dilucin por estras en medios de agar nutritivo y agar PDA, y obtener un cultivo exnico o puro. MARCO TEORICO

La contaminacin fngica de un alimento tiene mucha importancia, notan slo por su accin deteriorante, que pudre y malogra materias primas y productosmanufacturados, sino tambin por la capacidad de algunos hongos para sintetizar granvariedad de micotoxinas, para provocar infecciones y, incluso, para provocar reaccionesalrgicas en personas hipersensibles a los antgenos fngicos. Por estos motivos, para conocerla calidad microbiolgica de un producto, es pertinente realizar un recuento de hongos ylevaduras.En general, los hongos son microorganismos eucariotas pluricelulares filamentosos, nopresentan pigmentos fotosintticos y son quimiohetertrofos aerobios estrictos. A diferenciade las plantas, presentan un bajo grado de diferenciacin en los tejidos.Poseen pared celular contiene quitina un polisacrido que le da rigidez y es responsable desu morfologa y en ocasiones celulosa. Algunos hongos presentan cpsula, formada porpolisacridos, con propiedades inmungenas y antifagocitarias.La estructura o cuerpo vegetativo de un hongo se denomina talo 3 . El talo esta formado porfilamentos, o hifas , de unas 5m de dimetro, que generalmente estn ramificadas.Las hifas son tubos largos que estn formadas por la pared celular de quitina (componentemayoritario) y el citoplasma con sus inclusiones y ncleos con la informacin gentica. En elcitoplasma se realiza la actividad bioqumica del hongo.Las hifas pueden estar separadas en clulas por paredes transversales (septos) en los hongossuperiores (Eumicetos), o carecer de paredes en los hongos inferiores (Ficomicetos).

El conjunto de hifas se llama micelio. En el micelio se distinguen dos partes: una que penetraen el medio de cultivo y se extiende por su superficie (micelio vegetativo), y otra que seproyecta y contiene las esporas (micelio reproductor o areo).Los hongos crecen por el extremo de las hifas (crecimiento apical). Una pequea cantidad demicelio es suficiente para la formacin de un nuevo talo.

Absorcin de nutrientes: Debido a que su pared celular es rgida no pueden englobar losalimentos (pinocitosis, fagocitosis). Los extremos en crecimiento de las hifas expulsanenzimas sobre la materia orgnica en que crecen. Las cadenas de carbohidratos se rompen encompuestos ms sencillos como glucosa o aminocidos, lo suficientemente pequeos comopara absorberlos por las paredes de las hifas, hasta el citoplasma del hongo.Segn el tipo de sustrato nutritivo que empleen se clasifican en: 1. Hongos saprfitos (utilizan materia orgnica muerta) 2. Hongos parsitos (organismos vivos, plantas o animales)

TIPOS DE REPRODUCCIN . Las formas y mecanismos de reproduccin sexual y asexualson muy variados y constituyen la base de la clasificacin de los hongos. (Fig. 7.1) 1. Reproduccin sexual: (Hongos perfectos) Por unin de gametos 5, estado teleomorfo.Zigsporas, Ascsporas, Basidisporas. Zigomicetos. Hongos que se reproducen sexualmente por zigosporas. Constituyen el grupode Ficomicetos ms evolucionado y mejor adaptado a la vida terrestre. Eumicetos (hongos superiores) abarcan a los ascomicetos y a los basidiomicetos. Escaracterstico de los mismos la posesin de un micelio septado y la formacin deconidiosporas. No presentan clulas flageladas. Setas (hongos erectos):En el momento propicio, y en lugares cercanos a la superficie, lashifas del micelio vegetativo de un hongo basidiomiceto, forman una masa decrecimiento (cuerpo fructifero) de aspecto tisular denominado plectnquimas (setas). Esla parte reproductiva de un conjunto ms amplio. Una vez desarrollado emite esporas deforma variable segn las especies (p.ej. 100.000 esporas/h durante 4-5 das). 2. Reproduccin asexual (hongos imperfectos) Los hongos que tienen reproduccinasexual o desconocida (estado anamorfo) se denominan Deuteromycetos.

Fragmentacin de las hifas(utilizado para resiembras en laboratorio) c. Esporulacin por germinacin de esporas

En esta entrada veremos cmo preparar un medio de cultivo estndar para cultivar hongos: el

Agar PDA. Agar Papa Dextrosa o Agar PDA es un medio sencillo que incluye

El

dextrosa e infusin de patata blanca (Solanum tuberosum). Es importante resaltar que se han obtenido mejores resultados con la Patata blanca que con otras variedades. En este medio los hongos crecen y se reproducen muy fcilmente. Puede aadirse cido tartrico al 10% o cido lctico para bajar el pH hasta 3.5 e inhibir el crecimiento bacteriano. Tambin pueden aadirse pequeas proporciones (50-200 ppm) de antibiticos como cloranfenicol, que resiste bastante bien la esterilizacin, o eritromicina, penicilina... En funcin del hongo cultivado es probable que no sea necesaria la adicin de ningn antibitico, pues los propios hongos suelen disponer de potentes antibiticos e inhibidores del crecimiento bacteriano.

Material Necesario
Olla, cazuela 1500 ml de Agua destilada 200-250g de Patata 13-18 g de Agar 13 - 20g de Dextrosa Los rangos de agar y dextrosa no son equiparables entre s. Es decir, usar 13g de agar no implica usar 13 de dextrosa. Se trata de las diferentes variaciones que he observado en la preparacin. Segn se quiera un medio ms duro se usar ms agar. La adicin de ms dextrosa ir en funcin de la cantidad sembrada o los requerimientos del hongo.

Preparacin del Agar PDA

Tomar 500 ml de agua destilada y cocer en ella una patata de 200 g pelada y cortada en trozos. En otro recipiente disolver el agar en 500 ml de agua destilada al fuego.

Colar la infusin de patata a travs de un colador de algodn o un colador chino. Mezclar ambos lquidos. Agregar la dextrosa Homogeneizar Enrasar a 1000 ml (ya que parte se habr evaporado y ya no tendremos un litro). El pH resultante suele ser de 5.6 Lo mejor es verterlo directamente en los botes que utilizaremos para hacer la siembra de los hongos y esterilizarlos. Importante no cerrar del todo los botes (o explotarn) y taparlos con papel de aluminio para evitar salpicaduras y contaminacin.

Se dejan enfriar y se cierran bien los botes hasta su utilizacin.

Referencia bibliogrfica: http://www.blog.naturaleza.eldietista.es/2012/01/medio-de-cultivo-para-hongos.html http://biotecnologiatqi.blogspot.com/ http://es.scribd.com/doc/21179458/7-Hongos-y-levaduras