Universidad Nacional Pedro Ruz Gallo

Facultad de Cie cia! Bi"l#$ica!

Escuela Profesional de Biologa
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PRODUCTOS BIOLGICOS DE ORIGEN MICROBIANO

MTODOS CUANTITATIVOS PARA UNA POBLACIN DE SALMONELLA ( NMP)

BASES TERICAS PARA LA OBTENCIN DE Ag OYH

ALUMNA: Andrea Miluska Flores Cabrera PROFESOR: Blgo. Carlos Es inoza !alera

NMP (N&MERO M'S PROBABLE)

o P(")"(ci"
a u (ecue t" de *ia+le!

Factor de dilucin !ri"ero u#ado$ % N&P ta'la$ ( n) c*lula#+ "l

BASES TERICAS PARA LA OBTENCIN DE AG O 6 / " OBTENCIN DEL ANT,-ENO O

. Cepa Salmonel la typhi e ,"(-a li!a 2 /ace( u a a !ada de culti*" )u(" -e0cla c" u a $"ta de !!, e!t1(il 23

5 Si " )(e!e ta $(u-"! !e (eali0a la !e("ti)i,icac i# !"-4tica O

MTODOS PARA LA OBTENCIN DE AG O

&*todo 2u/"ico0 FENOL

A7adi( a la !u!)e !i# +acte(ia a !!, c" 9<=>.3 de ,e "l? -a te i1 d"l" a 29:C;.2 @"(a!

&*todo ./#ico0 TE&PERAT1RA

La !u!)e !i# +acte(ia a !e c"l"ca e +a7" Ma(8a a .99:;59 -i ut"!

" OBTENCIN DEL ANT,-ENO H

&*todo# F/#ico#0 TE&PERAT1RA

Utili0a d" u a te-)e(atu(a de =9:C A B9:C )"( =A.9 -i ut"!<

&*todo 3u/"ico0 FOR&OL O FOR&ALINA

/aC Due a$(e$a( de ,"(-"l " ,"(-ali a al 9<23 C deEa( )"( u )e(i"d" de 2F @"(a!<

Fe #-e "! de *a(iaci# Due a,ecta la !e("ti)i,icaci#

Variacin S - R (Lisa - Rugosa) : Pa(a (e*e(ti(
u a ce)a de la ,"(-a R a la ,"(-a S? !e (eali0a !u+culti*"! !uce!i*"! de la -i!-a! e -edi"! de e (iDueci-ie t" (a$a( !a $(e " a$a( MGelle( /i t" )< Al$u "! culti*"! de Sal-" ella Due )"!ee ,i-+(ia! )uede i @i+i( la a$luti aci# !"-4tica<

4ARIACION ES SO&5TICAS 4ARIACION ES FLA-ELARE S

Variacin no f imbriada - f imbriada :

Variacin OH - O : Se de+e a la )1(dida de l"!

,la$el"!< E!te ,e #-e " !e "+!e(*a c" (elati*a ,(ecue cia e el $1 e(" Sal-" ella

PROCESAMIENTO DEL MICROORGANISMO? INOCULACIN 6 OBTENCIN DE ANTISUEROS O 6 /

PROCESAMIE ! O "EL MICROOR#A IS MO

Dete(-i a( cua titati*a-e te?c"-)a(a d" la tu(+ide0 de la !u!)e !i# +acte(ia a c" el tu+" N:5 (HI.9J -<"<;-l)K del e,el#-et(" de Mc Fa(la d (M1t"d" Ne,el"-1t(ic") .L I "culaci# M 9<=-l? e!)e(a( F d8a!< 2L I "culaci# M .<9-l? e!)e(a( F d8a! -4!< 5L I "culaci# M 2<9-l? e!)e(a( F d8a! -4!< FL I "culaci# M F<9-l Al te(-i a( la cua(ta i "culaci# K deEa( (e)"!a( el c"+aC" )"( B d8a!<

O$!E CI% "E LOS A !&#E OS O 'H

I OC(LACI% "EL MICROOR#A IS MO

4/a de inoculacin0 INTRAPERITONEA L

OBTENCIN DE ANTIS1EROS H YO La a$luti

TIT1LACIN DE ANTIC1ERPO S &*todo de Titulacin en Tu'o

aci# ,la$ela( tie e u a a)a(ie cia ,l"cula(? -e "! c"-)acta Due la a$luti aci# !"-4tica< Su e!t(uctu(a t(idi-e !i" al " e! e!ta+le? )"( l" ta t" " !e de+e a$ita( l"! tu+"! lue$" de la i cu+aci# a ,i de " di!$(e$a( l"! ,l#cul"!<

La t*cnica general con#i#te en e#ta'lecer una #erie de dilucione# del #uero 6a'itual"ente dilucione# al do'le$ 7 deter"inar la dilucin "8%i"a a la 2ue #e !roduce la reaccin ant/geno 9 anticuer!o<

&*todo de titulacin en tu'o

Antgeno Tfico O Tfico !

Temperatura T ambiente "#$

Tiempo de Incubacin 18-24 hora 2 hora

RES1LTADOS
" :;0 T"d"! l"! -ic(""($a i!-"! .993 a)a(ece !edi-e tad"! e el ," d" del tu+" C el
!"+(e ada te e! t"tal-e te cla("<

" <;0 A)("Ii-ada-e te el N=3 de l"! -ic(""($a i!-"! !e e cue t(a !edi-e tad"! C el
!"+(e ada te e! li$e(a-e te tu(+i"<

" =;0 A)("Ii-ada-e te el =93 de l"! -ic(""($a i!-"! !e e cue t(a !edi-e tad"! C el
!"+(e ada te e! -"de(ada-e te tu(+i"<

" >;0 A)("Ii-ada-e te el 2=3 de l"! -ic(""($a i!-"! !e e cue t(a !edi-e tad"! C el
!"+(e ada te e! tu(+i"<

" Ne$ati*"M N" !e "+!e(*a a$luti aci# C la !u!)e !i# e! tu(+ia<

REACCIONES FEBRILES
1- Reaccin de Widal para diagnstico de la fiebre tifoidea, entrica y ondulante. Salmonella typi, S.paratyphi A y S.paratyphi . ! ".- Reaccin de #uddleson para la brucelosis $ rucella abortus, .suis o . melitensis%. ! &.- Reaccin de Weil-'eli( para el tifo. )as especies de Ric*ettsias +ue causan tifo, tienen componentes antignicos idnticos a ,roteus $cepas -.-1/, -.-