PRUEBAS BIOQUIMICAS

MEDIO DE CULTIVO Agar de Almidn PROPOSITO Produccin de la exoenzima Amilasa INOCULACION 24-48 h/ 37C
Tratamiento Post incubacion

RESULTADOS POSITIVO rea clara alrededor del cultivo NEGATIVO Color negro alrededor del cultivo

Yodo (2-3 gotas)

Agar con Gelatina

Produccin de la exoenzima Gelatinasa

24-48h/ 37C Estocada hasta el fondo

Colocar en Nevera por 30 minutos

Licuefaccin de la gelatina

Solidificacin

Rojo Fenol
Carbohidrato

Dextrosa Mannitol Lactosa Sacarosa

Determinar si la bacteria puede utilizar, ese carbohidrato

24-48h/ 37C loop

Amarillo (produccin de cidos, fermentacin del carbohidrato) Puede haber produccin de gas Utilizacin de glucosa Rojo

Rojo, aumento del pH (produccin de sustancias alcalinas por utilizacin de peptonas)

Agar de Tres azucares y Hierro (TSIA)

Ver el patrn de fermentacin de la bacteria

18-28h/ 37C 1-estocada 2-estriar

Utilizacin de peptonas

Rojo 2 1 Amarillo Utilizacin de Lactosa y/o sucrosa Rojo

Am Am En ambos puede haber produccin de gas y H2S (negro) SIM 1. Determinar si la bacteria a travs de Triptofanasas puede degradar el 24-48h/ 37C Estocada hasta el fondo Para Indol: 2 a 3 gotas del reactivo de Kovac Rojo (anillo) presencia de indol (triptfano fue degradado). Amarillo, la bacteria no puede degradar el triptfano

Triptfano a indol. 2. Determinar si hay produccin de H2S a partir de aminocidos azufrados 3. Determinar si la bacteria es mvil.

Negro (precipitado), produccin de H2S

Medio de cultivo se queda igual.

Difuminacin de la bacteria hacia los lados

La bacteria slo crece en la lnea de inoculacin

Caldo MRVP Prueba de Rojo de Metilo

Determinar habilidad de las bacterias para producir cidos estables por fermentacin de la glucosa

48h/ 37C loop

2 a 3 gotas de Rojo de Metilo (despus de los siete das)

Rojo, presencia de cidos, pH 4

Amarillo,no produccin de cidos estables.

Prueba de VogesProskauer

Determinar la capacidad de producir acetoina por fermentacin de la glucosa Utilizacin del citrato como nica fuente de carbono.

48h/ 37C loop

10 gotas de naphtol 5 gotas KOH 40%

Color rosa, presencia de acetoina

No desarrollo de color rosa, ausencia de acetoina

Simmons Citrate

24-48h/ 37C Estriar

Azul Verde

Caldo de Urea

Determinar si la bacteria degrada la Urea

48h / 37C loop

Rosa intenso

Medio permanece igual

Litmus Milk

Observar diferentes reacciones metablicas que ocurren en la leche: Fermentacin Reduccin del Litmus Cogulo: a. Renina

24-48 h/ 37C loop

Rosa Blanco

Violeta Violeta

b. Acido

Suave, se mueve si se

No hay formacin de

Produccin de Gas Protelisis Reaccin Alcalina Agar de Nitrato Determinar si la bacteria tiene la capacidad de reducir nitratos a nitritos 24-48 h/ 37C 1 gota de cido sulfanlico 1 gota de naphtilamina Polvo de Zinc

inclina el tubo Duro, se queda atascado en las paredes del tubo, si este se inclina Cogulo roto

cogulo No hay formacin de cogulo

Cogulo intacto Violeta

Violeta arriba y brown acuoso abajo Violeta

Rosa

Rojo (sin echar el polvo de zinc)

Catalasa : Agar Nutritivo

Determinar si la bacteria produce catalasa para degradar el H2O2.

1 gota de H2O2 a una colonia

Efervescencia

Medio permanece igual (con el polvo de zinc cambia a rojo) Permanece igual