Instituto Politcnico Nacional Escuela Superior de Medicina Materia: Bioqumica Mdica I Prctica 5: Protenas Equipo: 6 Integrantes:

Experimento 2. Reaccin del Biuret

Objetivo: Utilizando la reaccin de Biuret, la cual se realiza mediante una solucin de sulfato de cobre (CuSO4) en una solucin alcalina, diferenciar las protenas de los aminocidos, las soluciones contenedoras de protenas se teirn de prpura o violeta debido al complejo de los tomos de cobre y su unin con los tomos de nitrgeno. Resultados y discusin: De acuerdo a la coloracin obtenida en cada solucin, podemos asumir que las cuatro muestras contenan protenas, lo que afirmamos segn el conocimiento terico. Podemos observar que el tubo que contena peptona se ti ms que las dems, el tubo con albmina adems de teirse de color prpura se le reconoce un aspecto turbio. Estos resultados nos demuestran principalmente que en la solucin existen enlaces peptdicos y la cantidad de color producido es proporcional a la concentracin de protenas. 1 2 3 4

Ilustracin 1. Reaccin del Biuret en protenas

1) Anote sus resultados en la tabla que se encuentra al final del captulo

2) Se puede considerar la reaccin del Biuret como caracterstica para todas las protenas? S Por qu? Debido a que las protenas cuentan con dos o ms enlaces peptdicos, la presencia de estos se pone de manifiesto al teirse la solucin de prpura. 3) Escriba la reaccin

Ilustracin 2. Reaccin del Biuret.

Bibliografa: http://www.scribd.com/doc/62055042/Reaccion-de-Biuret Guarnizo F. A. Martnez Y. P. Experimentos de Qumica Orgnica. Con enfoque en ciencias de la vida.1 ed. Ed. Elizcom. Colombia 2009. Pg. 183 Harper H. Qumica Fisiolgica. 1 reimp. Ed Manual Moderno. Mxico. 1975. Pgs.36, 52

Experimento 4.Reaccin de aminocidos azufrados

Objetivo: Demostrar la presencia de azufre en las protenas, es decir en los aminocidos. Esto se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Esta reaccin se basa en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al reaccionar con una solucin de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo. Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de plomo, utilizndose el azufre de los aminocidos, lo que nos sirve para identificar protenas que tienen en su composicin aminocidos con azufre. Resultados y discusin: Al realizar el experimento se obtuvo lo siguiente: la peptona, la casena y la albmina dieron un resultado positivo, la gelatina no. De acuerdo a los datos tericos, el resultado de la peptona, casena y la gelatina son correctos. La albmina present un color ms obscuro que los dems, debido a la concentracin de azufre. 1) Anote sus resultados en la tabla al final del captulo 2) Escriba la reaccin qumica que se ha efectuado
Ilustracin 3 Reaccin de aminocidos azufrados. Experimento

La rehidrlisis alcalina con hidrxido de sodio. R-SH + 2 NaOHR-OH + Na2S + H2O De esta manera el sulfuro de sodio se encuentra libre para reaccionar con el acetato de plomo Na2S+ (Pb (CH3COO) 2) 2 CH3-COONa + PbS (precipitado) 3) Qu sustancias pueden interferir en esta reaccin? La cistena, cistina y metionina Bibliografa: http://www.euroschool.lu/prof.montilla/ficheroactivi/actividadesbio4_6/PPROTEINAS.pdf http://www.scribd.com/doc/40512891/A-a-Azufrados Melo V. Cuamatzi O. Bioqumica de los procesos metablicos. 2 ed. Ed. Revert. Mxico. 2007. Pg. 362 Tabla de resultados de algunas propiedades qumica de las protenas REACCION Sustancia Biuret Aminocidos azufrados Peptona Casena Gelatina Albmina Positivo (+++) Positivo Positivo (+) Positivo (++) Positivo (+) Positivo (++) Negativo Positivo (+++)

Experimento 6.Precipitacin de protenas por metales pesados

Objetivo: Observar el precipitado de las protenas peptona y gelatina y registrar su turbiedad. Resultados y discusin: Se pudo observar que la serie P, tuvo mayor turbiedad en cuanto a la reaccin con FeCl3 y con el acetato de plomo en comparacin con la serie G. La peptona en presencia de HgCl2 no present cambios en la Serie P.

Ilustracin 4. Serie P

Ilustracin 5 Serie G

1) Tiene alguna influencia el pH en el efecto de los metales pesados sobre las protenas? Si, ya que dependiendo de la protena que se trate, el pH influir para que las protenas estn ms all de si punto isoelctrico, ya que as son capaces de reaccionar con diferentes metales. 2) Tienen todos los metales pesados el mismo efecto precipitante sobre las protenas? Si ya que estos se fijan mejor a la protena formando as los diferentes protenados, los cuales son insolubles. Observaciones Serie Serie P G Tubos: 1 2 3 4 1 2 3 4 Metal Pesado Precipitado Agregar 2 gotas de solucin al 2% de: FeCl3 AgNO3 HgCl2 Pb(CH3COO)2 xx Serie P xxx x Serie G x x x x xx Con exceso Serie P xxx x Serie G xx xx xx xx

Bibliografa: http://agu.inter.edu/halices/caseina.pdf W. Walter. Curso breve de qumica orgnica 1 ed. Ed. Revert. Espaa. 1979. pag. 416 Harper H. Qumica Fisiolgica. 1 reimp. Ed Manual Moderno. Mxico. 1975. Pgs.36, 52

Experimento 8.Precipitacin de protenas por efecto del alcohol

Objetivo: observar la desnaturalizacin de las protenas efectuada por el alcohol. Los alcoholes y la acetona son agentes desnaturalizantes de las protenas ya que las deshidratan al competir por el agua de solvatacin y por lo tanto las precipita Resultados y discusin: No se observ turbidez en todos los tubos, se encontr mayor cantidad de sta en la albmina con cido tricloroactico y en la casena con alcohol de 96. Ni en la peptona ni en la gelatina se hubo precipitacin, esto se puede deber a las condiciones de temperatura, la cantidad de solucin o un error humano.

Ilustracin 7

Ilustracin 6 alcohol de 96

1) Observa turbidez en todos los tubos?

En la casena se observa turbidez al fondo del tubo, en la gelatina no, en la albmina y peptona se observa turbidez muy similar 2) Anote sus resultados en la tabla Agente sustancia Peptona Casena Gelatina Albumina xxx xx cido tricloroactico (CCI3COOH) al 5% Alcohol de 96 (CH3CH2OH) x xxx xx xx

Bibliografa: Tejin R. Fundamentos de bioqumica estructural. 2 ed. Ed Tbar. Espaa. 2006. Pg. 77 Vasudevan. D.M. Texto de Bioqumica para estudiantes de Medicina. 6 ed. Ed. Cullar Ayala. Mxico. 2011. Pg. 36 http://www.nutricionnatural.info/tipos/desnaturalizacion-de-las-proteinas.html