INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

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LABORATORIO DE FISIOLOGIA Y BIOQUIMICA MICROBIANA

PRACTICAS DEL SEGUNDO PARCIAL


NOMBRE DE LOS INTEGRANTES:
ORTEGA DAZ GLORIA MICHEL
RAMOS CONTRERAS LUIS
AYALA GMEZ LAURA MARIANA

GRUPO: 6QV1


EQUIPO: 6


NOMBRE DE LA MATERIA
ECOLOGIA MICROBIANA DEL SUELO




FECHA DE ENTREGA DE INFORME
10 DE ABRIL DE 2014














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Observacin IN SITU de los microorganismos del suelo

Este tipo de estudios permite establecer la distribucin de los microorganismos en relacin con los agregados
de suelo, partculas de materia orgnica, races de las plantas. Uno de los mtodos ms antiguos consiste en
la introduccin de un portaobjeto en la tierra y su posterior observacin, previa tincin con colorantes
adecuados (cidos, anticuerpos fluorescentes). La tcnica de Rossi-Cholodny nos permite tener estudiar de
manera cualitativa la poblacin microbiana del Suelo.
En el suelo Erosionado se observaron:
1. Actinomicetos con arcillas
2. Levaduras
3. Hongos
Sin embargo en el portaobjetos sin tratamiento y con tratamiento se observ que haba una baja poblacin
microbiana en comparacin con los suelos Forestales y agrcolas ya que en estos la poblacin fue mayor.
En general en el portaobjetos se observaron 3 secciones la parte superior donde se encontraban en la
mayora microorganismos aerobios, debido a que se encontraba en la parte en contacto con oxgeno.
Despus en la parte media, se tena una poblacin microbiana no muy alta debido a que an hay presenci a
de oxigeno pero la concentracin disminuyo.
En la parte inferior la poblacin fue menor debido a que la concentracin de oxigeno era menor.
Sin embargo no solo las condiciones aerobias o anaerobias favorecen el crecimiento microbiano sino tambin
la influencia de la fuente de Carbono (Sacarosa) y fuente de Nitrgeno (NH4NO3).
Otro de los factores que influyen estas poblaciones son:
pH
Materia Orgnica
Esta tcnica nos permite tener un panorama de las relaciones microbianas que existen. Por ejemplo se
observ la presencia de actinomicetos que se encuentran con absorbidas en las arcillas que se menciona que
esta relacin permite combatir la desecacin.

OXIDACIN DE AZUFRE ELEMENTAL

El azufre tiene diversas funciones en las plantas. Algunas funciones principales son:

Se encuentra en algunos aminocidos, en los bloques de construccin de las protenas. La mayor
parte del azufre absorbido por las plantas, aproximadamente el 90%, se utiliza para ese propsito.
El azufre es esencial para la formacin de la clorofila. Es un constituyente principal de una de las
enzimas necesarias para la formacin de la molcula de clorofila.
Es esencial en la sntesis de los aceites en las plantas, especialmente en cultivos de aceite.
Es activo en el metabolismo de nitrgeno.

Se hicieron cuatro diferentes tratamientos:
1. Se utiliz una muestra de suelo, es decir es un Testigo (-) de la oxidacin de Thiobacillus thiooxidans
en el suelo.
2. Se agreg azufre, si en la muestra de suelo hay presencia de Thiobacillus thiooxidans se pondr de
manifiesto un proceso de acidificacin del medio por la oxidacin que se producir.
3. En este se coloc el cultivo puro de Thiobacillus thiooxidans, si en la muestra de suelo hay presencia
de azufre se producir un proceso de oxidacin.
4. Se colocaron los elementos para la oxidacin de azufre, siendo este nuestro Testigo (+).
En la muestra Forestal observamos que la acidez de la muestra incremento en el tratamiento 2 indicndonos
la presencia de Thiobacillus thiooxidans, en la muestra de suelo.
En la muestra Erosionada observamos que en el tratamiento 3 se disminuy el pH, indicndonos la presencia
de azufre en la muestra de suelo.
En la muestra Agrcola de Chapingo y Agrcola de Oaxaca se observ una disminucin de acidez en el
tratamiento 2 al igual que en la muestra Forestal.
Thiobacillus thiooxidans


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Conclusiones:
Se evalu el efecto que tiene sobre el suelo el introducir azufre elemental e inocularlo con una bacteria
oxidadora.
Se observaron cambios en el pH del suelo de las cuatro diferentes muestra utilizadas principalmente en el
tratamiento 2.

Fijadores Asimbioticos de Nitrgeno

Fijacin Biolgica. El trmino fijacin del Nitrgeno se usa normalmente para definir la fijacin de Nitrgeno
por bacterias, libres o en asociacin simbitica. Este tipo de fijacin de Nitrgeno desde el estado gaseoso a
la forma orgnica se lleva a cabo biolgicamente por microorganismos especializados.
Los microorganismos fijadores de nitrgeno no constituyen un grupo taxonmico homogneo, la nica
caracterstica que comparten es la presencia de la enzima Nitrogenasa.
La fijacin de N2 es un proceso redox estrictamente anaerobio. Lo cataliza un complejo ferro-enzimtico
denominado Nitrogenasa, tan importante que la naturaleza nos muestra tres tipos:
Tipo I. Es el sistema ms eficiente y el ms frecuente. Se conforma en medios donde hay suficiente
molibdeno
Tipo II. Propio de bacterias que como el Azotobacter, crecen en medios donde no hay Molibeno y el Vanadio
le sustituye.
Tipo III. Se conforma en medios donde existe una carencia simultnea de Molibdeno y Vanadio. El
Azotobacter tambin puede expresar este complejo. Es el sistema menos eficiente de los tres.
El oxgeno inhibe la sntesis de Nitrogenasa, pues la expresin de los genes nif est estrictamente regulada,
tanto por oxgeno como por nitrgeno combinado a travs del sistema Ntr-NifA. Asmismo, la enzima
nitrogensa es fcilmente inactivada por oxgeno, de tal forma que todos los sistemas fijadores han
desarrollado estrategias especiales para protegerse de concentraciones elevadas de este elemento y evitar
su inactivacin.
En base a los resultados obtenidos podemos observar que en base al crecimiento de Azotobacter se favorece
el desarrollo de Clostridium esto es debido a que los clostridios fijadores no slo son incapaces de crecer en
presencia de aire sino que generalmente son muertos por el oxgeno, a menos que se encuentren en forma
de endosporos, pero pueden crecer por debajo de la pelcula de Azotobacter, generando burbujas de gas por
la fermentacin de azcares.
Azotobacter crece en un medio lquido sin agitacin, en forma de una pelcula superficial. Es bastante
sensible a la acidez pues no suele crecer por debajo de pH 6. Al microscopio se observan bacilos gram-
negativos, grandes, de 4 a 6 mm de largo, acompaados de clulas de mayor tamao con paredes gruesas y
apariencia de levadura, conocidas como cistos. Esta bacteria tiene una gran capacidad respiratoria, medida
como velocidad de consumo de oxgeno, para proveer la energa requerida por la fijacin.
Y observamos que hay un elevado porcentaje de Azobacter en los suelos Agricolas debido a la concentracin
de la materia orgnica al igual que el favorecimiento de la presencia de oxgeno.
En base a la morfologa colonial se observ en los cultivos la presencia de Azotobacter debido a que se
observaron colonias lisas y mucosas y sobre de ellas se tenan burbujas de gases que es indicio de la
presencia de Clostridium.
Y en base a la morfologa microscpica se observaron bacilos largos gram (+) que nos indicara la presencia
de Clostridium; y Azotobacter se observ con diferentes formas debido a que esta es pleomorfica adems de
tener presencia de cistos.

Conclusiones:

Se determine el paisaje microbiano de las muestras de suelos utilizados, mediante la tcnica de
Rossy-Colodny.
Se observaron halos de inhibicin en la determinacin de fosforo
Se obtuvieron colonias de Azotobacter y burbujas de gases sobre ellas indicndonos la presencia de
Clostridium.
Thiobacillus thiooxidans oxida al azufre elemental y comprobndose este con la acidificacin de la
muestra de suelo.
Solubilizacin de fsforo

El fsforo es un elemento fundamental para la nutricin de las plantas. Es absorbido por stas en forma de
fosfatos mono y dicidos. A diferencia del nitrgeno y del azufre, que son otros elementos que se absorben en
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forma aninica, el fsforo es un elemento poco mvil. Por su tendencia a reaccionar dando formas fosforadas
no disponibles para las plantas es que debe ser considerado uno de los elementos ms crticos.
El fsforo total del suelo se divide en fsforo orgnico y fsforo inorgnico, aproximadamente el 50% a cada
uno.
El fsforo soluble, que es el que est inmediatamente a disposicin de los cultivos, constituye solamente una
pequea fraccin del fsforo total. Las diferentes formas de fsforo en el suelo tienden a un equilibrio,
renovndose en la solucin del suelo lo que fe extrado por los vegetales. Es una caracterstica propia de cada
suelo la cantidad de fsforo total que es soluble y la velocidad con que ste se renueva ante la extraccin.
Muchos suelos tienen una gran cantidad de fijacin de fosfatos, llegando a inmovilizar gran parte del que se
aporta en una fertilizacin, razn por la cual en algunos casos existen grandes diferencias a favor de las
aplicaciones en bandas.
Entre los organismos y microorganismos solubilizadores del fsforo del suelo, podemos mencionar varios
grupos como los hongos (Penicillium, Sclerotium y Fusarium) todos ellos con una gran capacidad
solubilizadora. Otro grupo de microorganismos solubilizadores es el de los Actinomicetes (Streptomices) que
presentan como caracterstica distintiva la produccin de antibiticos y su difcil cultivo y multiplicacin a nivel
industrial. Finalmente encontramos numerosos grupos bacterianos y entre ellos el gnero Pseudomonas sp es
el que ha manifestado mayor capacidad solubilizadora del mineral y mayor produccin de fitohormonas que
inducen a un gran desarrollo radicular.
Esta alta capacidad solubilizadora es llevada adelante a travs de diferentes estrategias segn se trate del
fsforo orgnico o del fsforo inorgnico del suelo. En el primer caso las bacterias generan enzimas del tipo
fosfatasa que hidrolizan los enlaces orgnicos fosfatados liberando aniones fosfato a la solucin del suelo de
donde los microorganismos y las races de las plantas se nutren. En el caso del fsforo inorgnico su
solubilizacin es lograda por las bacterias a travs de la produccin de cidos orgnicos como el cido
glucnico que libera fosfatos y cationes de Ca++, Fe++ y Al++ a la solucin del suelo.

Para el suelo erosionado obtuvimos una cantidad considerable de microorganismos solubilizadores del fsforo
a pesar de que esperbamos que esto no fuera as, esto puede deberse a que a pesar de que es un suelo
erosionado, est en proceso de recuperacin, por lo que los requerimientos de fsforo asimilable son
mayores.

Bibliografa:

DANIELS, L. & GALBRAITH, J. (2007), Advanced Wetland Soils and Mitigation, Virginia Tech.
AGUILAR, J.; MARTINEZ, A.; ROCA, A. Evaluacin y manejo de suelos. Univ. de Granada. 1996.
ALBADALEJO, J.; STOCKING, M. A.; DIAZ, E. Degradacin y regeneracin del suelo en condiciones
ambientales mediterrneas. Cons. Sup. Investig. Cientficas. Murcia. 1990.
ALMOROX, J.; DE ANTONIO, R.; SAA, A.; DIAZ, M. C.; GASCO, J. M. Mtodos de estimacin de la erosin
hdrica. Agrcola Espaola. Madrid. 1994.
http://www.oni.escuelas.edu.ar/2005/ENTRE_RIOS/980/fosforo.html (consultado el 10/Abril/2014 1:45 am)
http://www.engormix.com/MA-agricultura/maiz/articulos/bacterias-solubilizadoras-fosforo-t2073/417-p0.htm
(consultado el 9/abril/2014 11:40 pm)