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Outubro de 2005
Direitos autorais reservados.
RECOMENDAES DA
SOCIEDADE BRASILEIRA DE
PATOLOGIA CLNICA/MEDICINA
LABORATORIAL PARA COLETA DE
SANGUE VENOSO
Recomendaes da Sociedade Brasileira de Patologia Clnica / ML para
Coleta de Sangue Venoso, 1.ed. / elaborado pelo Comit de Coleta de San-
gue da SBPC/ML e BD Diagnostics - Preanalytical Systems. So Paulo, 2005
76 p.
1. Sangue. 2. Tcnicas de Laboratrio Clnico. 3. Tcnicas e Procedi-
mentos de Laboratrio. I. SBPC/ML. II. BD Diagnostics - Preanalytical
Systems. III. Ttulo
PRESIDENTE:
Dr. Nairo Massakazu Sumita
Professor Assistente Doutor da Disciplina de Patologia Clnica da Faculdade de Medicina Universidade de So
Paulo (FMUSP), Diretor do Servio de Bioqumica Clnica da Diviso de Laboratrio Central HCFMUSP, Coorde-
nador do Servio de Qumica Clnica Departamento de Patologia Clnica do Hospital Israelita Albert Einstein.
VICE-PRESIDENTE:
Dr. Ismar Barbosa
Mdico Patologista Clnico, Gerente Tcnico do Programa para Acreditao de Laboratrios Clnicos (PALC) da
Sociedade Brasileira de Patologia Clnica/Medicina Laboratorial (SBPC/ML).
PARTICIPANTES:
Dr. Adagmar Andriolo
Professor Livre-Docente de Patologia Clnica/Medicina Laboratorial da Escola Paulista de Medicina UNIFESP,
Assessor Mdico do Fleury Centro de Medicina Diagnstica.
Dra. urea Lacerda Canado
Mdica Patologista Clnica do Laboratrio Central do Hospital das Clnicas Universidade Federal de Minas
Gerais (HC-UFMG).
Dra. Luisane Maria Falci Vieira
Mdica Patologista Clnica, Diretora Cientfica da Sociedade Brasileira de Patologia Clnica/Medicina Laboratorial.
Dra. Maria Elizabete Mendes
Doutora em Patologia pela Faculdade de Medicina da Universidade de So Paulo
Mdica Patologista Clnica, Chefe da Seo Tcnica de Bioqumica de Sangue da Diviso de Laboratrio Central
do Hospital das Clnicas da Faculdade de Medicina da Universidade de So Paulo.
Dra. Patrcia Romano
Biomdica, Ps-Graduada em Sade Pblica, Especialista em Aplicao de Produtos da rea de BD Diagnostics
- Preanalytical Systems.
Dra. Rita de Cssia Castro
Mdica Clnica Geral e Endocrinologista, Ps-Graduo (nvel mestrado) em Neuroendocrinologia, executiva
com experincia nas reas de Diagnstico, Indstria Farmacutica, Consumo, Comunicao e Relacionamento
com Clientes, Gerente de Assuntos Mdicos BD Regio Amrica Latina Sul.
Dr. Ulysses Moraes Oliveira
Diretor Cientfico do Laboratrio Franceschi. Presidente da Sociedade Brasileira de Patologia Clnica/ Medicina
Laboratorial, Binio 2004/2005.
SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOLOGIA
CLNICA/MEDICINA LABORATORIAL
COMISSO DE COLETA DE SANGUE VENOSO
Este documento prope recomendaes da Sociedade Brasileira de Patologia Clnica/Medi-
cina Laboratorial (SBPC/ML) para a coleta de sangue venoso.
Representa o resultado do esforo de profissionais reunidos, com o propsito de coletar,
analisar e selecionar procedimentos que abrangessem, de forma clara e objetiva, itens impor-
tantes para a coleta de sangue venoso.
Neste projeto, estiveram reunidas por seis meses consecutivos, pessoas que dedicaram tem-
po e energia a este tema de trabalho. A fora-tarefa constituiu-se de professores associados da
SBPC/ML, em parceira com experientes profissionais da BD (Becton, Dickinson and Company).
O esforo resultou neste Documento, estruturado em aspectos tcnicos, profundamente ana-
lisados, baseados na prtica, na moderna literatura cientfica nacional e internacional, e nos
aspectos do relacionamento humano durante o ato da coleta de sangue venoso.
Estas recomendaes envolvem as referncias normativas complementadas por bibliografia
recomendada pelo grupo de trabalho.
Orgulhosamente, ento, apresentamos este texto, no desejo de que ele no se encerre em si
mesmo, mas que sirva de estmulo para discusses e para a busca de novos desafios.
PREFCIO
So Paulo, outubro de 2005.
Boa leitura!
INTRODUO......... ............................................................................................................................. 8
I. Recomendaes da Sociedade Brasileira de Patologia Clnica / Medicina Laboratorial
para Coleta de Sangue Venoso. .................................................................................................... 9
1. Causas Pr-Analticas de Variaes dos Resultados de Exames Laboratoriais....................... 9
1.1 Variao Cronobiolgica................................................................................................... 9
1.2 Gnero ............................................................................................................................... 9
1.3 Idade ................................................................................................................................. 9
1.4 Posio ............................................................................................................................ 10
1.5 Atividade Fsica ............................................................................................................... 10
1.6 Jejum ............................................................................................................................... 10
1.7 Dieta ............................................................................................................................... 10
1.8 Uso de Frmacos e Drogas de Abuso ........................................................................... 11
1.9 Aplicao do Torniquete ................................................................................................. 11
1.10 Procedimentos Diagnsticos e/ou Teraputicos ........................................................... 11
1.11 Infuso de Frmacos ...................................................................................................... 11
1.12 Gel Separador ................................................................................................................. 12
1.13 Hemlise .......................................................................................................................... 12
1.14 Lipemia ............................................................................................................................ 12
2. Instalaes e Infra-Estrutura Fsica do Local de Coleta .......................................................... 13
2.1 Recepo e Sala de Espera ........................................................................................... 13
2.2 rea Fsica da Cabine de Coleta .................................................................................... 13
2.3 Infra-Estrutura .................................................................................................................. 13
2.4 Equipamentos e Acessrios ........................................................................................... 13
2.5 Conservao e Limpeza das Instalaes ....................................................................... 13
3. Fase Pr-Analtica para Exames de Sangue ............................................................................ 14
3.1 Procedimentos Bsicos para Minimizar Ocorrncias de Erro ....................................... 14
3.1.1 Para um paciente adulto e consciente ............................................................... 14
3.1.2 Para pacientes internados .................................................................................. 14
3.1.3 Para pacientes muito jovens, ou inconscientes ou com algum tipo de
dificuldade de comunicao............................................................................... 14
3.2 Definio de Estabilidade da Amostra ........................................................................... 16
3.3 Transporte de Amostra como Fator de Interferncia Pr-Analtica ............................... 17
4. Procedimento de Coleta de Sangue Venoso........................................................................... 18
4.1 Locais de Escolha para Venopuno ............................................................................. 18
4.2 Posio do Paciente........................................................................................................ 20
4.3 Procedimento para Antissepsia e Higienizao das Mos em Coleta de Sangue
Venoso ............................................................................................................................. 20
4.4 Critrios para a Escolha da Tcnica da Coleta de Sangue Venoso a Vcuo ou por
Seringa e Agulha ............................................................................................................. 22
4.4.1 Consideraes sobre coleta de sangue venoso a vcuo ................................. 22
4.4.2 Consideraes sobre coleta de sangue venoso com seringa e agulha........... 23
4.5 Consideraes Importantes sobre Hemlise................................................................. 24
4.5.1 Boas prticas pr-coleta para evitar hemlise ................................................... 25
4.5.2 Boas prticas ps-coleta para evitar hemlise .................................................. 25
4.6 Recomendaes para Tempo de Retrao do Cogulo .............................................. 26
4.7 Centrifugao dos Tubos de Coleta ............................................................................... 26
4.8 Recomendao da Seqncia dos Tubos a Vcuo na Coleta de Sangue Venoso de
Acordo com a NCCLS..................................................................................................... 29
4.8.1 Seqncia de coleta para tubos de plstico de coleta de sangue ................... 30
4.8.2 Seqncia de coleta para tubos de vidro de coleta de sangue........................ 30
NDICE
4.8.3 Homogeneizao para tubos de coleta de sangue.......................................... 30
4.9 Procedimento de Coleta de Sangue a Vcuo................................................................ 31
4.10 Procedimento de Coleta de Sangue com Seringa e Agulha......................................... 33
4.11 Cuidados para uma Puno Bem Sucedida.................................................................. 36
4.12 Coletas em Condies Particulares ............................................................................... 38
4.12.1 Coleta de sangue via cateter de infuso ........................................................... 38
4.12.2 Coleta de sangue via cateter de infuso com heparina ................................... 39
4.12.3 Fstula artrio-venosa ......................................................................................... 41
4.12.4 Fludos intravenosos .......................................................................................... 41
4.13 Hemocultura .................................................................................................................... 41
4.14 Coleta de Sangue para Provas Funcionais .................................................................... 43
4.15 Coleta de Sangue em Pediatria e Geriatria .................................................................... 44
4.16 Coleta de Sangue em Queimados ................................................................................. 45
4.17 Gasometria ...................................................................................................................... 45
5. Garantia da Qualidade .............................................................................................................. 46
5.1 Qualificao dos Fornecedores e Materiais ................................................................... 46
5.2 Especificao dos Materiais para Coleta de Sangue a Vcuo...................................... 46
5.2.1 Agulhas para coleta mltipla ............................................................................. 46
5.2.2 Adaptadores para coleta de sangue a vcuo ................................................... 47
5.2.3 Escalpes para coleta mltipla de sangue a vcuo ........................................... 47
5.2.4 Tubos para coleta de sangue a vcuo .............................................................. 48
5.3 Comentrios sobre a ISO 6710.2 - Single-use Containers for Human Venous Blood
Specimen Collection ....................................................................................................... 48
5.3.1 Informaes que o tubo a vcuo deve conter descritas no rtulo ou mesmo no
tubo.................................................................................................................... 50
5.3.2 Concentrao e volume dos anticoagulantes ................................................. 50
5.4 Requisio de Exames.................................................................................................... 51
5.5 Identificao e Rastreabilidade....................................................................................... 51
5.6 Documentao ................................................................................................................ 52
5.7 Capacitao e Treinamento do Pessoal ......................................................................... 52
6. Aspectos de Segurana na Fase de Coleta............................................................................. 53
6.1 Segurana do Paciente ................................................................................................... 53
6.2 Riscos e Complicaes da Coleta.................................................................................. 53
6.3 Formao de Hematoma ................................................................................................ 53
6.4 Puno Acidental de uma Artria ................................................................................... 53
6.5 Anemia Iatrognica ......................................................................................................... 54
6.6 Infeco ........................................................................................................................... 54
6.7 Leso Nervosa................................................................................................................. 54
6.8 Dor ............................................................................................................................... 54
6.9 Segurana do Flebotomista............................................................................................ 54
6.10 Boas Prticas Individuais ................................................................................................ 55
6.11 Equipamentos de Proteo Individual ........................................................................... 55
6.12 Cuidados na Sala de Coleta ........................................................................................... 55
6.13 Descarte Seguro de Resduos ........................................................................................ 55
6.13.1 Classificao dos resduos de sade................................................................ 56
6.13.2 Identificao dos resduos ................................................................................. 57
6.13.3 Manejo dos RSS (Resduos de Servios de Sade) ........................................ 57
6.13.4 Transporte interno de RSS ................................................................................ 58
6.13.5 Armazenamento dos resduos slidos de sade ............................................. 58
Referncias Normativas Consultadas. ........................................................................................... 59
Referncias Bibliogrficas Consultadas e Recomendadas. ....................................................... 61
Seqncia de Coleta dos Tubos para Coleta de Sangue a Vcuo. ............................................. 63
II. Aspectos Humansticos da Coleta de Sangue. ......................................................................... 64
RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOLOGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO
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A melhoria da qualidade na prestao de servios de sade tem sido uma busca constante e
cada vez mais crescente no pas.
A qualidade dos resultados dos exames laboratoriais est intimamente relacionada fase
pr-analtica e, principalmente, s condies de coleta de sangue venoso.
Inmeras variveis podem interferir no desempenho da fase analtica e, conseqentemente,
na exatido e preciso dos resultados dos exames, vitais para a conduta mdica e, em ltima
instncia, para o bem-estar do paciente.
Todos os laboratrios querem atender melhor e encantar o cliente. Ser atendido com excelncia
tambm um desejo de todos. A difuso do conhecimento a premissa bsica para se alcanar
estes objetivos.
A Sociedade Brasileira de Patologia Clnica/Medicina Laboratorial e a BD criaram este
Documento de Recomendao de Coleta de Sangue Venoso que representa uma verdadeira
prestao de servios para os profissionais de sade, pacientes e a populao em geral,
objetivando orientar e educar.
Este Documento no pretende esgotar todos os aspectos sobre os assuntos abordados,
mas abre uma discusso focada e atualizada, sendo parte da sua proposta, futuras contribui-
es, revises e complementaes.
Esperamos que este Documento permita ao leitor aprimorar seus conhecimentos, e aplic-los
no dia-a-dia, promovendo mudanas que resultem em melhorias na ateno ao paciente.
INTRODUO
RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOLOGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO
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I. RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA
DE PATOLOGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL
PARA COLETA DE SANGUE VENOSO
1. Causas Pr-Analticas de Variaes dos Resultados de Exames Laboratoriais
Uma das principais finalidades dos resultados dos exames laboratoriais reduzir as dvidas que a
histria clnica e o exame fsico fazem surgir no raciocnio mdico. Para que o laboratrio clnico possa
atender, adequadamente, a este propsito, indispensvel que o preparo do paciente, a coleta, o
transporte e a manipulao dos materiais a serem examinados obedeam a determinadas regras.
Antes da coleta de sangue para a realizao de exames laboratoriais, importante conhecer, controlar
e, se possvel, evitar algumas variveis que possam interferir com a exatido dos resultados. Classica-
mente, so referidas como condies pr-analticas variao cronobiolgica, gnero, idade, posio,
atividade fsica, jejum, dieta, uso de drogas para fins teraputicos ou no, e a aplicao de torniquete.
Numa abordagem mais ampla, outras condies devem ser consideradas, como procedimentos
teraputicos ou diagnsticos, cirurgias, transfuso de sangue e infuso de solues. Alguns aspectos
do tubo de coleta, como o uso de gel separador, anticoagulantes e conservantes e caractersticas da
amostra, como hemlise e lipemia, tambm podem ser causa de variao dos resultados.
1.1 Variao Cronobiolgica: corresponde s alteraes cclicas da concentrao de um determi-
nado parmetro em funo do tempo. O ciclo de variao pode ser dirio, mensal, sazonal,
anual, etc. Variao circadiana acontece, por exemplo, nas concentraes do ferro e do cortisol
no soro, onde as coletas realizadas tarde fornecem resultados at 50% mais baixos do que os
obtidos nas amostras coletadas pela manh. As alteraes hormonais tpicas do ciclo menstrual
tambm podem ser acompanhadas de variaes em outras substncias. Por exemplo, a con-
centrao de aldosterona cerca de 100% mais elevada na fase pr-ovulatria do que na fase
folicular. Alm das variaes circadianas, propriamente ditas, h que se considerar variaes nas
concentraes de algumas substncias, em razo de alteraes do meio ambiente. Em dias
quentes, por exemplo, a concentrao srica das protenas significativamente mais elevada
em amostras colhidas tarde, quando comparadas s obtidas pela manh, em razo da
hemoconcentrao.
A coleta de sangue para realizao de exames de rotina pode ser efetuada no perodo
da tarde?
Classicamente, a melhor condio para coleta de sangue para realizao de exames de rotina
o perodo da manh, embora no exista contra-indicao formal de coleta no perodo da
tarde, salvo aqueles parmetros que sofrem modificaes significativas no decorrer do dia
(exemplo: cortisol, TSH, etc.). recomendvel que exista uma indicao no laudo, do horrio
em que foi realizada a coleta, evitando interpretao equivocada do resultado.
1.2 Gnero: alm das diferenas hormonais especficas e caractersticas de cada sexo, alguns outros
parmetros sangneos e urinrios se apresentam em concentraes significativamente distintas
entre homens e mulheres, em decorrncia das diferenas metablicas e da massa muscular,
entre outros fatores. Em geral, os intervalos de referncia para estes parmetros so especficos
para cada gnero.
1.3 Idade: alguns parmetros bioqumicos possuem concentrao srica dependente da idade do
indivduo. Esta dependncia resultante de diversos fatores, como maturidade funcional dos
rgos e sistemas, contedo hdrico e massa corporal. Em situaes especficas, at os intervalos
de referncia devem considerar essas diferenas. importante lembrar que as mesmas causas de
variaes pr-analticas, que afetam os resultados laboratoriais em indivduos jovens, interferem
nos resultados dos exames realizados em indivduos idosos, mas a intensidade da variao
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1.5 Atividade Fsica: o efeito da atividade fsica sobre alguns componentes sangneos, em geral,
transitrio e decorre da mobilizao de gua e outras substncias entre os diferentes
compartimentos corporais, das variaes nas necessidades energticas do metabolismo e da
eventual modificao fisiolgica que a prpria atividade fsica condiciona. Esta a razo pela
qual se prefere a coleta de amostras com o paciente em condies basais, mais facilmente
reprodutveis e padronizveis. O esforo fsico pode causar aumento da atividade srica de
algumas enzimas, como a creatinoquinase, a aldolase e a aspartato aminotransferase, pelo
aumento da liberao celular. Esse aumento pode persistir por 12 a 24 horas aps a realizao
de um exerccio. Alteraes significativas no grau de atividade fsica, como ocorrem, por exemplo,
nos primeiros dias de uma internao hospitalar ou de imobilizao, causam variaes importantes
na concentrao de alguns parmetros sangneos. O uso concomitante de alguns medicamentos,
como as estatinas, por exemplo, pode potencializar estas alteraes.
1.6 Jejum: habitualmente, preconizado um perodo de jejum para a coleta de sangue para exames
laboratoriais. Os estados ps-prandiais, em geral, causam turbidez do soro, o que pode interferir
em algumas metodologias. Nas populaes peditrica e de idosos, o tempo de jejum deve
guardar relao com os intervalos de alimentao. Devem ser evitadas coletas de sangue aps
perodos muito prolongados de jejum, acima de 16 horas. O perodo de jejum habitual para a
coleta de sangue de rotina de 8 horas, podendo ser reduzido a 4 horas, para a maioria dos
exames e, em situaes especiais, tratando-se de crianas na primeira infncia ou lactentes,
pode ser de 1 ou 2 horas apenas.
Aps uma coleta de sangue de rotina, qual o intervalo de tempo recomendado para iniciar
a prtica de um exerccio fsico ou retorno s atividades habituais?
A coleta de sangue no procedimento impeditivo ou limitante para a prtica de exerccio fsico.
Importante ressaltar que cada caso deve ser avaliado individualmente, ficando a deciso final
para o prprio paciente, ou a critrio e orientao mdica. A ingesto de alimento necessria
para encerrar o estado de jejum, antes da prtica esportiva, sob o risco de hipoglicemia durante
esta atividade.
tende a ser maior neste grupo etrio. Doenas sub-clnicas tambm so mais comuns nos ido-
sos e precisam ser consideradas na avaliao da variabilidade dos resultados, ainda que as
prprias variaes biolgicas e ambientais no devam ser subestimadas.
1.4 Posio: mudana rpida na postura corporal pode causar variaes na concentrao de alguns
componentes sricos. Quando o indivduo se move da posio supina para a posio ereta, por
exemplo, ocorre um afluxo de gua e substncias filtrveis do espao intravascular para o
intersticial. Substncias no filtrveis, tais como as protenas de alto peso molecular e os ele-
mentos celulares tero sua concentrao relativa elevada at que o equilbrio hdrico se restabe-
lea. Por essa razo, nveis de albumina, colesterol, triglicrides, hematcrito, hemoglobina, de
drogas que se ligam s protenas e o nmero de leuccitos, podem ser superestimados. Este
aumento pode ser de 8 a 10% da concentrao inicial.
1.7 Dieta: a dieta a que o indivduo est submetido, mesmo respeitado o perodo regulamentar de
jejum, pode interferir na concentrao de alguns componentes, na dependncia das caracters-
ticas orgnicas do prprio paciente. Alteraes bruscas na dieta, como ocorrem, em geral, nos
primeiros dias de uma internao hospitalar, exigem certo tempo para que alguns parmetros
retornem aos nveis basais.
A ingesto de caf permitida antes da coleta?
No. A cafena pode induzir a liberao de epinefrina, que estimula a neoglicognese, com
conseqente elevao da glicose no sangue. Alm disto pode elevar a atividade da renina
plasmtica e a concentrao de catecolaminas.
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1.9 Aplicao do Torniquete: ao se aplicar o torniquete por um tempo de 1 a 2 minutos, ocorre
aumento da presso intravascular no territrio venoso, facilitando a sada de lquido e de molcu-
las pequenas para o espao intersticial, resultando em hemoconcentrao relativa. Se o torni-
quete permanecer por mais tempo, a estase venosa far com que alteraes metablicas, tais
como gliclise anaerbica elevem a concentrao de lactato, com reduo do pH.
1.10 Procedimentos Diagnsticos e/ou Teraputicos: como outras causas de variaes dos resul-
tados dos exames laboratoriais, devem ser lembrados alguns procedimentos diagnsticos (a
administrao de contrastes para exames radiolgicos ou tomogrficos, a realizao de toque
retal, de eletroneuromiografia) e alguns procedimentos teraputicos, como: hemodilise, dilise
peritoneal, cirurgias, transfuso sangnea e infuso de frmacos.
O fumo permitido antes da coleta?
No. O fumo pode elevar a concentrao dos cidos graxos, da adrenalina, do glicerol livre, da
aldosterona, do cortisol, entre outros.
1.8 Uso de Frmacos e Drogas de Abuso: este um item amplo e inclui tanto a administrao de
substncias com finalidades teraputicas como as utilizadas para fins recreacionais. Ambos po-
dem causar variaes nos resultados de exames laboratoriais, seja pelo prprio efeito fisiolgico
in vivo ou por interferncia analtica, in vitro. Dentre os efeitos fisiolgicos devem ser citados a
induo e a inibio enzimticas, a competio metablica e a ao farmacolgica. Dos efeitos
analticos so importantes a possibilidade de ligao preferencial s protenas e eventuais rea-
es cruzadas. Alguns exemplos so mostrados no quadro 1.
Pela freqncia, vale referir o lcool e o fumo. Mesmo o consumo espordico de etanol pode
causar alteraes significativas e quase imediatas na concentrao plasmtica de glicose, de
cido lctico e de triglicrides, por exemplo. O uso crnico responsvel pela elevao da
atividade da gama glutamiltransferase, entre outras alteraes.
O tabagismo causa de elevao na concentrao de hemoglobina, no nmero de leuccitos e de
hemcias e no volume corpuscular mdio; reduo na concentrao de HDL-colesterol e elevao
de outras substncias como adrenalina, aldosterona, antgeno carcinoembrinico e cortisol.
Induo enzimtica Fenitona Gama-GT Eleva
Inibio enzimtica Alopurinol cido rico Reduz
Inibio enzimtica Ciclofosfamida Colinesterase Reduz
Competio Novobiocina Bilirrubina indireta Eleva
Aumento do transportador Anticoncepcional oral Ceruloplasmina cobre Eleva
Reao cruzada Espironolactona Digoxina Elevao aparente
Reao qumica Cefalotina Creatinina Elevao aparente
Hemoglobina atpica Salicilato Hemoglobina glicada Elevao aparente
Metabolismo 4-OH- propranolol Bilirrubina Elevao aparente
MECANISMO FRMACO PARMETRO EFEITO
EXEMPLOS DE INTERFERNCIAS LABORATORIAIS GERADAS POR ALGUNS FRMACOS
QUADRO 1:
1.11 Infuso de Frmacos: importante lembrar que a coleta de sangue deve ser realizada sempre
em local distante da instalao do cateter. Mesmo realizando a coleta noutro local, se possvel,
deve-se aguardar pelo menos uma hora aps o final da infuso para a realizao da coleta.
RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOLOGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO
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1.13 Hemlise: hemlise leve tem pouco efeito sobre a maioria dos exames, mas se for de intensidade
significativa causa aumento na atividade plasmtica de algumas enzimas, como aldolase, aspartato
aminotransferase, fosfatase alcalina, desidrogenase lctica e nas dosagens de potssio, magnsio
e fosfato. A hemlise pode ser responsvel por resultados falsamente reduzidos de insulina,
dentre outros.
1.14 Lipemia: tambm pode interferir na realizao de exames que usam metodologias colorimtricas
ou turbidimtricas. A elevao significativa dos nveis de triglicrides pode ocorrer apenas no
perodo ps-prandial ou de forma contnua, nos pacientes portadores de algumas dislipidemias
e faz com que o aspecto do soro ou do plasma se altere, de lmpido para algum grau variado de
turbidez, podendo chegar a ser leitoso. Uma vez que amostras normais colhidas dentro das
especificaes de jejum apresentam-se sem turvao, a observao de turbidez tem relevncia
clnica e deve ser avaliada e relatada pelo laboratrio. Ela pode ser resultado da presena de
hipertrigliceridemia, ou do aumento nos quilomcrons, nas lipoprotenas (VLDL- colesterol), ou
de ambos.
Diferentes
graus de
Hemlise
1.12 Gel Separador: algumas vezes, o sangue colhido em tubos contendo uma substncia gelati-
nosa com a finalidade de funcionar como barreira fsica entre as hemcias e o plasma ou soro,
aps a centrifugao. Este gel um polmero com densidade especfica de 1,040 contendo um
acelerador da coagulao e pode, eventualmente, liberar partculas que interferem com eletro-
dos seletivos e membranas de dilise. Em alguns casos, pode causar variao no volume da
amostra e interferir em determinadas dosagens.
Considerando que a composio deste gel varia entre os diferentes fornecedores, recomendvel
consultar o fabricante sobre a existncia de estudos bem conduzidos demonstrando ou excluindo
possveis limitaes e interferncias.
Diferentes
graus de
Lipemia
1
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2.4 Equipamentos e Acessrios
Recomenda-se que o paciente seja acomodado numa cadeira ou poltrona confortvel, que per-
mita a regulagem da altura do brao, evitando o desconforto do flebotomista.
Armrios fixos ou mveis so teis para organizar o armazenamento dos materiais de coleta e
facilitar o acesso.
recomendvel disponibilizar equipamentos e medicamentos para eventuais situaes de
emergncia. Os procedimentos intervencionistas de emergncia, o manuseio de equipamentos
mdico-hospitalares e o uso de medicamentos, necessariamente devem ser realizados por
profissional devidamente habilitado.
2.2 rea Fsica da Cabine de Coleta
A cabine de coleta adequada, tambm denominada box de coleta, necessita de espao sufici-
ente para instalao de uma cadeira ou poltrona, um local para armazenamento dos materiais de
coleta e um dispositivo para a higienizao das mos (lcool gel, lavatrio ou similares) interna-
mente ou prximo cabine. As dimenses da cabine de coleta necessitam garantir a livre movi-
mentao do paciente e do flebotomista, possibilitando um bom atendimento.
recomendvel ter um local com uma maca disponvel, para caso de necessidade.
2.3 Infra-Estrutura
Recomendam-se alguns itens referentes infra-estrutura da cabine de coleta:
Pisos impermeveis, lavveis e resistentes s solues desinfetantes.
Paredes lisas e resistentes ou divisrias constitudas de materiais lisos, durveis, impermeveis,
lavveis e resistentes s solues desinfetantes.
Dispositivos de ventilao ambiental eficazes, naturais ou artificiais, de modo a garantir conforto
ao paciente e ao flebotomista.
Iluminao que propicie a perfeita visualizao e manuseio seguro dos dispositivos de coleta.
Janelas com telas milimtricas, caso estas cumpram a funo de propiciar a aerao ambiental.
Portas e corredores com dimenses que permitam a passagem de cadeiras de rodas, macas
e o livre trnsito dos portadores de necessidades especiais.
2. Instalaes e Infra-Estrutura Fsica do Local de Coleta
As recomendaes aqui descritas tm por finalidade caracterizar os requisitos mnimos de instalao
e infra-estrutura, visando a garantia do conforto e segurana dos clientes e da equipe do laboratrio.
Eventualmente, as descries podem no contemplar na ntegra, todos os requisitos legais exigidos
pelos rgos competentes de sua cidade ou estado.
fundamental uma consulta legislao local aplicvel para o cumprimento das exigncias previstas
pela vigilncia sanitria local.
2.1 Recepo e Sala de Espera
recomendvel que o laboratrio clnico possua, pelo menos, uma sala de espera para pacientes
e acompanhantes. Esta rea pode ser compartilhada com as outras unidades diagnsticas, sendo
necessria a instalao de sanitrios para clientes e acompanhantes.
2.5 Conservao e Limpeza das Instalaes
Recomendam-se que as rotinas de limpeza e higienizao das instalaes sejam orientadas por
profissional capacitado para esta atividade ou por uma Comisso de Controle de Infeco Hos-
pitalar, quando aplicvel. indispensvel que sejam tomadas medidas preventivas para elimina-
o de insetos e roedores.
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3.1.1 Para um paciente adulto e consciente
- pedir que fornea nome completo, documento de identidade, ou data de nascimento.
- comparar estas informaes com as constantes na requisio de exames.
3.1.2 Para pacientes internados
- em geral, os hospitais disponibilizam etiquetas pr-impressas com os dados de identi-
ficao necessrios. Mesmo assim, o flebotomista deve verificar a identificao no brace-
lete ou a identificao postada na entrada do quarto, quando disponvel. O nmero do
leito nunca deve ser utilizado como critrio de identificao.
- relatar ao supervisor do laboratrio qualquer discrepncia de informao, antes de
efetuar a coleta.
3.1.3 Para pacientes muito jovens, inconscientes ou com algum tipo de dificuldade de
comunicao
- o flebotomista deve valer-se de informaes de algum acompanhante ou da enfermagem.
- pacientes atendidos no pronto-socorro ou em salas de emergncia podem ser
identificados pelo seu nome e nmero de entrada no cadastro da unidade de emergncia.
indispensvel que a identificao possa ser rastreada a qualquer instante do processo.
O material colhido deve ser identificado na presena do paciente. Nos sistemas manuais,
isto pode ser feito pela colocao, nos tubos de coleta, de etiquetas com o nome do
paciente, a data da coleta e o nmero seqencial de atendimento. Este nmero deve
constar em todos os documentos, amostras, mapas de trabalho, relatrios e laudo final.
Existem processos informatizados simples que geram um nmero pr-determinado de
etiquetas, de acordo com a quantidade e tipo de exame a serem realizados.
Servios mais complexos fazem uso de etiquetas com cdigo de barras que vinculam, de
forma segura, a amostra em todas as fases do processo, uma vez que muitos dos equipa-
mentos analticos atualmente disponveis conseguem identificar o paciente e reconhecer
quais exames devem ser realizados naquela amostra.
O sistema de identificao adotado deve contemplar a possibilidade de gerao de eti-
quetas adicionais, para os casos em que seja necessrio aliquotar a amostra original para
ser enviada a diferentes reas do laboratrio, para outro laboratrio ou para armazenamento.
Recomenda-se que materiais no colhidos no laboratrio sejam identificados como amos-
tra enviada ao laboratrio, e que o laudo contenha esta informao.
importante verificar se o paciente est em condies adequadas para a coleta,
especialmente no que se refere ao jejum e ao uso de eventuais medicaes. Para a maioria
dos exames de sangue, necessrio apenas um curto perodo de tempo em jejum, de 3 a
4 horas. Outros requerem cuidados especficos quanto a dietas especiais, condies
peculiares, como por exemplo, a necessidade de repouso por, pelo menos, 30 minutos
antes da coleta de sangue para a dosagem de prolactina ou de catecolaminas plasmticas.
3. Fase Pr-Analtica para Exames de Sangue
A fase imediatamente anterior coleta de sangue para exames laboratoriais deve ser objeto de ateno
por parte de todas as pessoas envolvidas no atendimento dos pacientes, com a finalidade de se
prevenir a ocorrncia de enganos ou a introduo de variveis no controladas que podero
comprometer a exatido dos resultados.
Quaisquer que sejam os exames a serem realizados, muito importante a identificao positiva do
paciente e dos tubos nos quais ser colocado o sangue. Deve-se buscar uma forma de estabelecer
um vnculo seguro e indissocivel entre o paciente e o material colhido para que, ao final, seja garan-
tida a rastreabilidade de todo o processo.
3.1 Procedimentos Bsicos para Minimizar Ocorrncias de Erro
O flebotomista deve se assegurar de que a amostra ser colhida do paciente especificado na
requisio de exames. Para isto, recomendam-se:
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So aspectos relevantes, dentre outros, o tempo de jejum, a necessidade de absteno
de fumo e/ou lcool, o registro do uso contnuo de alguma medicao, a realizao de
algum procedimento diagnstico ou teraputico prvio. Objetivando evitar desconforto
desnecessrio, convm sempre informar ao paciente que a ingesto de gua no interfe-
re, ou seja, no quebra o jejum, exceto em exames muito especficos.
Algumas substncias podem ser dosadas tanto no soro quanto no plasma, ainda que
existam diferenas entre os resultados obtidos, como mostrado no quadro 2.
O paciente deve suspender os medicamentos antes da coleta de sangue?
No. A suspenso de medicamentos somente pode ser autorizada pelo mdico do paciente. Na
monitorizao de drogas teraputicas importante o laboratrio anotar o horrio da ltima dose e
registrar esta informao no laudo. conveniente orientar o paciente para que traga consigo o
medicamento em uso, ingerindo-o aps a coleta de sangue, evitando ultrapassar o horrio pro-
gramado para a prxima tomada.
Nos exames de monitorao de drogas teraputicas, para permitir a adequada interpreta-
o dos resultados, algumas informaes mais especficas devem ser obtidas, como os
horrios da ltima tomada de medicao e da coleta do sangue, a dosagem e via de
administrao do medicamento. Dessa forma, o paciente no deve ser considerado como
agente passivo do processo, mas um dos integrantes da equipe. Para que possa desem-
penhar adequadamente esta funo, ele deve receber, previamente, algumas informa-
es referentes aos procedimentos da coleta de sangue, ao exame que ser realizado e
das condies nas quais ele deve se apresentar ao laboratrio. De uma forma ideal, estas
informaes e instrues devem ser fornecidas por escrito e o paciente deve ter a oportu-
nidade de esclarecer suas eventuais dvidas.
A ingesto de gua quebra o jejum?
No. A ingesto de pequena quantidade de gua, antes da coleta, no quebra o jejum.
Para a obteno de soro, o sangue colhido em tubo sem anticoagulante e deixado coagular
por um perodo de 30 a 60 minutos, temperatura ambiente. Quando o tubo contiver gel
separador, com ativador da coagulao, a espera pode ser de 30 a 45 minutos. Aps este
tempo, o tubo centrifugado e a parte lquida, correspondente ao soro, separada. O plasma
obtido pela centrifugao do sangue total anticoagulado. Quando for necessrio o uso de
sangue total ou plasma, so utilizados anticoagulantes especficos, dependendo do exame a
ser realizado. Para alguns exames, alm do anticoagulante, pode ser necessria a adio de
um conservante. Cada uma destas fraes do sangue se constitui na matriz ideal para a reali-
zao de exames especficos. Assim, por exemplo, para o hemograma, utilizado sangue
total, anticoagulado pela adio de cido etilenodiaminotetractico - EDTA; a dosagem de
glicose realizada no plasma obtido pela adio de EDTA e fluoreto de sdio e, para a dosa-
gem de creatinina utiliza-se, em geral, soro.
SUBSTNCIA
% DE VARIAO EM
COMPARAO SUA
MEDIDA NO PLASMA
PRINCIPAL CAUSA DA
DIFERENA NO
SORO/PLASMA
Guder, W. G.; Narayanan, S.; Wisser, H. et al Samples: from the patient to the
laboratory. 2
nd
edition, Darmstadt, Git Verlag, 2001, pg 32.
Potssio
Fosfato inorgnico
Protenas totais
Amnia
+ 6,2
+ 10,7
- 5,2
+ 38
+ 22
Lise das clulas
Liberao de elementos
celulares
Efeito do fibrinognio
Trombocitlises, hidrlises
Liberao de elementos
celulares
QUADRO 2:
Lactato
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As vantagens da utilizao de plasma sobre o soro incluem: reduo do tempo de espera para a
coagulao, obteno de maior volume de plasma em relao ao soro e da no interferncia
advinda do processo de coagulao. Os resultados so mais representativos do estudo in vivo,
quando comparados aos do soro.
H menor risco de interferncia por hemlise, visto que a hemoglobina livre, em geral, est em
mais baixa concentrao no plasma do que no soro. As plaquetas permanecem intactas, no
proporcionando pseudo-hipercalemia, como pode ocorrer no soro. Por outro lado, o plasma
apresenta algumas desvantagens, como alterar a eletroforese das protenas, uma vez que con-
tm fibrinognio, que se revela como um componente na regio das gama-globulinas, podendo
mascarar ou simular um componente monoclonal; potencial interferncia mtodo-dependente
por serem os anticoagulantes agentes complexantes e inibidores enzimticos e, por fim, ction-
interferncia quando sais de heparina so usados, interferindo em alguns dos mtodos de dosa-
gem de ltio e amnia, por exemplo.
3.2 Definio de Estabilidade da Amostra
As amostras, para serem representativas, devem ter sua composio e integridade mantidas
durante as fases pr-analticas de coleta, manuseio, transporte e eventual armazenagem.
A estabilidade de uma amostra sangnea definida pela capacidade de seus elementos se
manterem nos valores iniciais, dentro de limites aceitveis de variao, por um determinado
perodo de tempo. Portanto, a medida da instabilidade pode ser definida como sendo a diferen-
a absoluta (variao dos valores inicial e final, expressa na unidade em que o determinado
parmetro medido); como um quociente (razo entre o valor obtido aps um determinado
tempo e o valor obtido no momento em que a amostra foi coletada), ou ainda como uma porcen-
tagem de desvio.
Por exemplo, se durante o transporte de uma amostra de sangue por 3 a 4 horas, em temperatu-
ra ambiente, a concentrao do potssio variar de 4,2 mmol/L para 4,6 mmol/L, a diferena
absoluta ser 0,4 mmol/L; o quociente 1,095 e o desvio ser igual a + 9,5%.
O Conselho Mdico Federal da Alemanha definiu que a instabilidade mxima permitida equivale
geralmente a 1/12 do intervalo de referncia biolgico.
A estabilidade pr-analtica depende de vrios fatores, incluindo-se temperatura, carga mecni-
ca e tempo, sendo este o fator que causa maior impacto. A estabilidade de uma amostra pode
ser muito afetada na presena de distrbios especficos. O tempo mximo de estabilidade de
uma amostra deveria ser o que permite 95% de estabilidade de seus componentes.
Em geral, os tempos referidos de armazenagem das amostras primrias consideram os seguin-
tes limites para a temperatura: ambiente de 18 a 22
o
C, refrigeradas de 2 a 8
o
C e congeladas,
abaixo de 20
o
C negativos.
Na prtica, utiliza-se a regra de que quando no houver especificao de tratamento especial
para o acondicionamento ou transporte do material, este poder ser deslocado para postos ou
outras unidades em caixa de isopor com gelo reciclvel, apoiado por flocos de isopor ou papel
jornal. Assim, conserva-se mais a temperatura das amostras, que podem ser recebidas tem-
peratura ambiente.
A condio de congelamento recomenda o uso de gelo seco no transporte ou o chamado trans-
porte picol (congelar previamente o soro, colocar gua em um frasco plstico, colocar o tubo
congelado dentro desse frasco, levar ao freezer por 24 horas. Envolver o pote em dois gelos
reciclveis no momento do transporte). importante lembrar que a recomendao do transpor-
te picol somente se aplica em regies onde a utilizao do gelo seco no est disponvel e
para transporte entre pequenas distncias (postos de coleta, regies circunvizinhas, etc.) no
sendo aplicvel no transporte areo.
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Durante o processo de estocagem, os constituintes do sangue podem sofrer alteraes que
incluem adsoro no vidro ou tubo plstico, desnaturao da protena, bem como atividades
metablicas celulares que continuam a ocorrer. Mesmo amostras congeladas so passveis de
alteraes em certos constituintes metablicos ou celulares. Congelar e descongelar amostras
, particularmente, uma condio importante a ser considerada. Assim, amostras de plasma ou
soro congeladas e descongeladas tm rupturas de algumas estruturas moleculares, sobretudo
as molculas de grandes protenas. Congelamentos lentos tambm causam a degradao de
alguns componentes.
Com relao ao envio de amostras entre laboratrios, vale lembrar a existncia de regras e
diretrizes da terceirizao, definidas nas leis federais 6.019, de 3 de janeiro de 1974, e 7.102,
de 20 de julho de 1983.
Outro ponto importante a logstica de transporte do material biolgico objetivando que as
amostras se mantenham viveis at o momento do processo analtico. Esse transporte deve
seguir as recomendaes da Organizao das Naes Unidas ONU, documento Transporte
de Substncias Infecciosas, em sua 13 reviso, publicada em 2004. No Brasil, o transporte de
substncias infecciosas considerado como transporte de produtos perigosos, desde que se
enquadrem na Portaria n 204, de 20 de maio de 1997, do Ministrio dos Transportes, e que
corresponde 7 Edio das Recomendaes da Organizao Mundial de SadeOMS, edita-
das em 1991 e revisadas em 2004.
3.3 Transporte de Amostra como Fator de Interferncia Pr-Analtica
Uma vez coletada e identificada adequadamente, a amostra dever ser encaminhada para o
setor de processamento, que poder estar na mesma estrutura fsica onde foi realizada a coleta,
ou afastado a distncias variadas.
H diversas maneiras de transportar amostras entre unidades de um mesmo laboratrio, entre
unidades diferentes na mesma cidade ou at mesmo para o exterior. Em geral, o tempo de
transporte curto quando o laboratrio est prximo e no apresenta grandes dificuldades,
desde que as amostras sejam acondicionadas em maletas que ofeream garantias de
biossegurana no transporte.
O processamento inicial da amostra inclui etapas que vo desde a coleta at a realizao do
exame, compreendendo em trs fases distintas: pr-centrifugao, centrifugao e ps-
centrifugao. Quando os exames no forem realizados logo aps a coleta, as amostras devem
ser processadas at o ponto em que possam aguardar as dosagens, em condies para que
no haja interferncia significativa em seus constituintes.
O tempo entre a coleta e centrifugao do sangue no deve exceder uma hora; amostras colhi-
das com anticoagulante, nas quais o exame ser realizado em sangue total, devem ser mantidas
refrigeradas at o procedimento, em temperatura de 2 a 8
o
C. Plasma, soro e sangue total podem
ser usados para a realizao de alguns exames, embora os constituintes estejam distribudos
em concentraes diferentes entre estas matrizes. Assim, resultados no sangue total so dife-
rentes daqueles obtidos no plasma ou soro, em funo da distribuio de gua nas hemcias;
um determinado volume de plasma ou de soro contm 93% de gua, enquanto o mesmo volume
de sangue total possui apenas 81% de gua.
Qual o volume mximo recomendado de sangue a ser coletado numa puno venosa?
Recomenda-se que cada laboratrio estabelea critrios visando coletar o mnimo de sangue
necessrio para a execuo dos parmetros solicitados pelo mdico. As metodologias mais
recentes exigem volumes cada vez menores de amostra.
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J no dorso da mo, o arco venoso dorsal o mais recomendado por ser mais calibroso, porm
a veia dorsal do metacarpo tambm poder ser puncionada.
reas a evitar:
reas com terapia ou hidratao intravenosa de qualquer espcie.
Locais com cicatrizes de queimadura.
Membro superior prximo ao local onde foi realizada mastectomia, cateterismo ou qualquer
outro procedimento cirrgico.
reas com hematomas.
Nas situaes em que o paciente necessita de coletas venosas repetidas, qual o nmero de
punes que se poderia realizar no mesmo ponto?
Recomenda-se que o nmero de punes no mesmo stio limite-se ao mnimo necessrio. Cabe
equipe mdica e ao pessoal do laboratrio a responsabilidade de racionalizar este tipo de coleta.
Sugere-se, nestas situaes, a manuteno de uma veia cateterizada (exemplo: uso de escalpe).
4. Procedimento de Coleta de Sangue Venoso
As recomendaes adotadas a seguir baseiam-se nas normas da NCCLS (National Committee for
Clinical Laboratory Standards), atualmente denominada CLSI, bem como na experincia dos autores.
O CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) - uma instituio sem fins lucrativos, reconhecida
mundialmente por promover o desenvolvimento e o uso de padres e diretrizes dentro da comunida-
de de clnica mdica. A instituio fornece, mundialmente, diretrizes de boas prticas de manufatura
de produtos, procedimentos tcnicos laboratoriais e mdicos que envolvem estes produtos,
biossegurana laboratorial e mdica, anlises laboratoriais, equipamentos para diagnstico. Por ser
ainda usualmente chamada de NCCLS, esta ser a abreviao usada neste texto quando fizermos
referncia s normas desta instituio.
Veia do
membro
superior
3
Veia do
dorso da mo
4
4.1 Locais de Escolha para Venopuno
A escolha do local de puno representa uma parte vital do diagnstico. Existem diversos locais
que podem ser escolhidos para a venopuno, apontados abaixo nas figuras 3 e 4.
Embora qualquer veia do membro superior que apresente condies para coleta possa ser
puncionada, as veias baslica mediana e ceflica so as mais freqentemente utilizadas. A veia
baslica mediana costuma ser a melhor opo, pois a ceflica mais propensa formao de
hematomas.
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Tcnicas para evidenciao da veia:
Pedir para o paciente abaixar o brao e fazer movimentos suaves de abrir e fechar a mo.
Massagear delicadamente o brao do paciente (do punho para o cotovelo).
Fixao das veias com os dedos nos casos de flacidez.
Equipamentos ou dispositivos que facilitam a visualizao de veias ainda no so de uso rotinei-
ro e so pouco difundidos.
Uso adequado do torniquete:
importante que se utilize adequadamente o torniquete, evitando-se situaes que induzam ao erro
diagnstico (como hemlise, que pode elevar o nvel de potssio, hemoconcentrao, alteraes na
dosagem de clcio, por exemplo), bem como complicaes de coleta (hematomas, parestesias). Por-
tanto, recomenda-se:
No usar o torniquete continuamente por mais de 1 minuto, j que poderia levar hemoconcentrao
e falsos resultados em certos analitos.
Ao garrotear, pedir ao paciente que feche a mo para evidenciar a veia.
No apertar intensamente o torniquete, pois o fluxo arterial no deve ser interrompido. O pulso deve
permanecer palpvel.
Posicionar o brao do paciente, inclinado-o para baixo a partir da altura do ombro.
Posicionar o torniquete com o lao para cima, a fim de evitar a contaminao da rea de puno.
No aplicar o procedimento de bater na veia com dois dedos, no momento de seleo venosa.
Este tipo de procedimento provoca hemlise capilar e portanto, altera o resultado de certos analitos.
Se o torniquete for usado para seleo preliminar da veia, faz-lo apenas por um breve momento,
pedindo ao paciente para abrir e fechar a mo. Localizar a veia e, em seguida, afrouxar o tornique-
te. Esperar 2 minutos para us-lo novamente.
O torniquete no recomendado para alguns testes como lactato ou clcio, para evitar alterao
do resultado.
Aplicar o torniquete cerca de 8 cm acima do local da puno para evitar a contaminao do local.
Posicionamento
correto do
torniquete
Fstulas artrio-venosas.
Veias que j sofreram trombose porque so pouco elsticas, podem parecer um cordo e tm
paredes endurecidas.
Aplicao do
toniquete
5 6
7
8 cm
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Trocar o torniquete sempre que houver suspeita de contaminao.
Caso o torniquete tenha ltex em sua composio, deve-se perguntar ao paciente se ele tem
alergia a este componente. Caso o paciente seja alrgico ao ltex, no se deve usar este material
para o garroteamento.
O laboratrio pode questionar o paciente se ele portador de alguma molstia que tenha
risco de contgio ao coletador?
Do ponto de vista tcnico, todo paciente necessita ser considerado como potencial portador de
doena, reforando assim a necessidade dos cuidados universais de proteo.
- Procedimento com o paciente sentado:
Pedir ao paciente que se sente confortavelmente numa cadeira prpria para coleta de sangue. Reco-
menda-se que a cadeira tenha apoio para os braos e evite quedas, caso o paciente venha a perder a
conscincia. Cadeiras sem braos no fornecem o apoio adequado para o brao, nem protegem
pacientes nestes casos.
Recomenda-se que a posio do brao do paciente no descanso da cadeira, seja inclinado levemente
para baixo e estendido, formando uma linha direta do ombro para o pulso. O brao deve estar apoiado
firmemente pelo descanso e o cotovelo no deve estar dobrado. Uma leve curva pode ser importante
para evitar hiperextenso do brao.
- Procedimento para paciente acomodado em leito:
Solicitar ao paciente que se coloque em posio confortvel.
Caso esteja em posio supina e seja necessrio um apoio adicional, coloque um travesseiro debaixo
do brao do qual ser coletada a amostra.
Posicione o brao do paciente inclinando levemente para baixo e estendido, formando uma linha
direta do ombro para o pulso. Caso esteja em posio semi-sentado, o posicionamento do brao para
coleta torna-se relativamente mais fcil.
4.3 Procedimento para Antissepsia e Higienizao das Mos em Coleta de Sangue Venoso
Algumas consideraes so importantes sobre o uso de solues de lcool, tanto na antissepsia
do local da puno, como na higienizao das mos.
Segundo Rotter, quando se compara a eficcia dos vrios mtodos de higiene das mos na
reduo da flora permanente, a frico de lcool apresentou os melhores resultados tanto na
ao imediata, quanto na manuteno da eficcia aps trs horas da aplicao.
O lcool apresenta um amplo espectro de ao envolvendo micobactrias, fungos e vrus, com
menor atividade sobre os vrus hidroflicos no envelopados, particularmente os enterovrus.
Durante o tempo usual de aplicao para antissepsia das mos, ele no apresenta ao esporicida.
Em concentraes apropriadas, os lcoois possuem rpida e maior reduo nas contagens
microbianas. Quanto maior o peso molecular do lcool, maior ao bactericida. Dados da litera-
tura orientam que as solues alcolicas fossem preparadas com base no peso molecular e no
no volume a ser aplicado, afirmando que o lcool a 70% era o que possua, dentre outras
concentraes, a maior eficcia germicida in vitro.
4.2 Posio do Paciente
A posio do paciente pode tambm acarretar erros em resultados.
O desconforto do paciente, agregado ansiedade podem levar liberao indevida de alguns
analitos na corrente sangnea.
Algumas recomendaes que permitem facilitar a coleta de sangue e promovem um perfeito
atendimento ao paciente, neste momento, so indicadas e comentadas a seguir.
RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOL RECOMENDAES DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE PATOLOGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO OGIA CLNICA / MEDICINA LABORATORIAL PARA COLETA DE SANGUE VENOSO
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Com relao antissepsia da pele no local da puno, usada para prevenir a contaminao
direta do paciente e da amostra, o antissptico escolhido deve ser eficaz, ter ao rpida, ser de
baixa causticidade e hipoalergncia na pele e mucosa.
Os lcoois etlico e isoproplico so os que possuem efeito antissptico na concentrao de 70%,
contudo o etanol o mais usado pois, nesta composio, preserva sua ao antissptica, e diminui
a inflamabilidade. Nesta diluio, tem excelente atividade contra bactrias Gram-positivas e Gram-
negativas, boa atividade contra Mycobacterium tuberculosis, fungos e vrus, alm de ter menor custo.
Hoje, alguns pases da Amrica do Norte aboliram o uso de lcool etlico, devido a sua inflamabilidade,
utilizando o lcool isoproplico nos laboratrios e hospitais.
Higienizao das mos:
As mos devem ser higienizadas aps o contato com cada paciente, evitando assim contaminao
cruzada. Esta higienizao pode ser feita com gua e sabo como o procedimento ilustrado abaixo,
ou usando lcool gel.
A frico com lcool reduz em 1/3 o tempo despendido pelos profissionais de sade para a higiene
das mos, aumentando a preferncia por esta ao bsica de controle. Quanto s desvantagens,
citado o odor que fica nas mos e a inflamabilidade, que observada apenas com as solues de
etanol acima de 70%.
A higienizao das mos deve ser feita aps o contato com cada paciente. A ilustrao
mostra o procedimento feito por meio da lavagem das mos com gua e sabo.
Colocando as luvas
As luvas devem ser caladas com cuidado para que no rasguem, e devem ficar bem aderidas pele
para que o flebotomista no perca a sensibilidade na hora da puno.
Antissepsia do local da puno:
Recomenda-se usar uma gaze com soluo de lcool isoproplico ou etlico 70%, comercialmen-
te preparado.
Limpar o local com um movimento circular do centro para a periferia.
Calando as
luvas
9 10
1
2
3 4
6 7 8 5
8
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Permitir a secagem da rea por 30 segundos, para evitar hemlise da amostra, e tambm a
sensao de ardncia quando o brao do paciente for puncionado.
No assoprar, no abanar e no colocar nada no local.
No tocar novamente na regio aps a antissepsia.
Nota: Quando houver solicitao de dosagem de lcool no sangue, um antissptico isento de lcool em sua
formulao deve ser usado no local da puno (por exemplo, sabo). Conforme recomendao do docu-
mento NCCLS T/DM6 - Blood Alcohol Testing in the Clinical Laboratory.
4.4 Critrios para Escolha da Tcnica de Coleta de Sangue Venoso a Vcuo ou por Seringa
e Agulha
Recomenda-se que o hospital e laboratrio estabeleam uma poltica institucional para a esco-
lha da tcnica de coleta de sangue.
Estes critrios de escolha da metodologia a ser utilizada na coleta de sangue vo alm do custo
do material, devendo-se observar a finalidade do procedimento, o tipo de clientela, as habilida-
des dos flebotomistas e as caractersticas da instituio.
O flebotomista desempenha um papel importante na garantia da qualidade neste processo.
Alguns pontos relevantes na escolha da tcnica e do material de coleta de sangue so aponta-
dos a seguir.
4.4.1 Consideraes sobre coleta de sangue venoso a vcuo
Aspectos histricos
Em 1943 a Cruz Vermelha Americana fez um pedido a uma empresa de materiais hospitalares para
que desenvolvesse um jogo descartvel e estril para coleta de sangue. Deveria ser esterilizado e
embalado para manter a esterilidade de modo a ser usado em campo, nas reas de emergncia e
nas guerras.
Sistema para
coleta de sangue
a vcuo
Antissepsia
do centro
para fora
12
13
Abrindo a
embalagem de
lcool swab
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Foi desenvolvido, ento, um dispositivo que aspirava o sangue diretamente da veia por meio de vcuo,
por uma agulha de duas pontas para um tubo de anlise, constituindo o sistema para coleta de san-
gue a vcuo. Desde ento, tecnologias e inovaes foram aprimorando estes dispositivos para tornar
este sistema para coleta de sangue mais seguro, prtico e que proporcione maior qualidade da amos-
tra a ser analisada.
Coleta de Sangue Venoso a Vcuo
A coleta de sangue a vcuo a tcnica de coleta de sangue venoso recomendada pelas normas
NCCLS atualmente, usada mundialmente e em boa parte dos laboratrios brasileiros, pois pro-
porciona ao usurio inmeras vantagens:
a facilidade no manuseio um destes pontos, pois o tubo para coleta de sangue a vcuo tem,
em seu interior, quantidade de vcuo calibrado proporcional ao volume de sangue em sua eti-
queta externa, o que significa que, quando o sangue parar de fluir para dentro do tubo, o
flebotomista ter a certeza de que o volume de sangue correto foi colhido. A quantidade de
anticoagulante/ativador de cogulo proporcional ao volume de sangue a ser coletado, propor-
cionando, ao final da coleta, uma amostra de qualidade para ser processada ou analisada.
o conforto ao paciente essencial, pois com uma nica puno venosa pode-se, rapidamente,
colher vrios tubos, abrangendo todos os exames solicitados pelo mdico.
pacientes com acessos venosos difceis, crianas, pacientes em terapia medicamentosa,
quimioterpicos etc. tambm so beneficiados, pois existem produtos que facilitam tais coletas
(escalpes para coleta mltipla de sangue a vcuo em diversos calibres de agulha e tubos para
coleta de sangue a vcuo com menores volumes de aspirao). Outro ponto relevante a ser
observado o avano da tecnologia em equipamentos para diagnstico e kits com maior
especificidade e sensibilidade, que hoje requerem um menor volume de amostra do paciente.
garantia da qualidade nos resultados dos exames, fator este relevante e primordial em um
laboratrio.
segurana do profissional de sade e do paciente, uma vez que a coleta a vcuo um sistema
fechado de coleta de sangue; ao puncionar a veia do paciente, o sangue flui diretamente para o
tubo de coleta a vcuo. Isto proporciona ao flebotomista maior segurana, pois no h necessi-
dade do manuseio da amostra de sangue. Por estes e outros fatores, como a diferena do
acesso venoso de um paciente para outro, recomendamos que sejam observados alguns pon-
tos relevantes para uma coleta adequada.
4.4.2 Consideraes sobre coleta de sangue venoso com seringa e agulha
A coleta de sangue com seringa e agulha usada h muitos anos e enraizou-se em algumas
reas de sade, pois o mesmo produto usado para infundir medicamentos. a tcnica mais
Seringa e
Agulha estreis
Quais os principais fatores que levam o laboratrio a optar pela tcnica de coleta de sangue
a vcuo?
Facilidade na coleta, segurana do paciente e do profissional de sade, proporo correta sangue/
aditivo elevando a qualidade da amostra, coletas em pacientes com acessos venosos difceis, numa
nica puno pode-se colher vrios tubos, qualidade nos resultados dos exames,entre outros.
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antiga desenvolvida para coleta de sangue venoso. Embora no seja mais o procedimento reco-
mendado pelas normas NCCLS, ainda hoje, em algumas regies do mundo, este procedimento
bastante utilizado em laboratrios clnicos e hospitais.
A coleta com seringa e agulha ainda muito usada, seja por sua disponibilidade, uma vez que
seringas e agulhas hipodrmicas so materiais essenciais para o funcionamento de uma institui-
o de sade, seja pelo menor custo do produto. Porm, poder trazer impacto em maior escala
na qualidade da amostra obtida, bem como nos riscos de acidente com materiais perfurocortantes.
Em funo deste sistema de coleta ser aberto, e por existir a etapa de transferncia do sangue
para os tubos acima ou abaixo da capacidade dos mesmos, que altera a proporo correta de
sangue/aditivo, a qualidade da amostra pode ser comprometida pela ocorrncia de hemlise,
formao de microcogulos e fibrina, que provocam resultados incompatveis com o real estado
do paciente. Alm disso causa um aumento de custo em todo o processo, pois uma amostra
comprometida leva o laboratrio ao reprocessamento de amostras, causando situaes
incmodas, como descritos a seguir:
Novas coletas, ocasionando transtornos na reconvocao ao paciente e para os profissionais
do laboratrio.
Gasto de tempo desnecessrio para o flebotomista e laboratrio.
Possibilidade de problemas nos equipamentos dos setores tcnicos, (entupimento da probe).
Utilizao desnecessria de materiais de coleta e reagentes, envolvendo custos para o setor.
Custos desnecessrios para os setores administrativos e tcnicos do laboratrio.
O que significa manter a proporo sangue/anticoagulante?
Para que o sangue fique totalmente anticoagulado dentro do tubo necessrio que se mante-
nha a proporo correta de anticoagulante correspondente ao volume de sangue colhido do
paciente, assim evita-se a formao de microcogulos e resultados inexatos.
4.5 Consideraes Importantes sobre Hemlise
Hemlise tem sido definida como a liberao dos constituintes intracelulares para o plasma ou
soro, quando ocorre a ruptura das clulas do sangue; estes componentes podem interferir nos
resultados das dosagens de alguns analitos. Ela geralmente reconhecida pela aparncia
avermelhada do soro ou plasma, aps a centrifugao ou sedimentao, causada pela
hemoglobina liberada quando da ruptura dos eritrcitos. Desse modo, a interferncia pode ocor-
rer mesmo em baixas concentraes de hemoglobina liberada (invisveis a olho nu).
Diferentes
graus de
hemlise
No entanto, a hemlise nem sempre se refere ruptura de hemcias; fatores interferentes podem
tambm ser originados da lise de plaquetas e granulcitos, que pode ocorrer, por exemplo, quan-
do o sangue armazenado em baixa temperatura, mas no em temperatura de congelamento.
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No caso do uso desta tcnica, o laboratrio deve se certificar da utilizao de meios que pre-
servem a qualidade final da amostra a ser analisada, bem como de procedimentos que evitem
riscos biolgicos.
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4.5.1 Boas prticas pr-coleta para preveno da hemlise
Antes de iniciar a puno, deixar o lcool usado na antissepsia secar.
Evitar usar agulhas de menor calibre; usar este tipo de material somente quando a veia
do paciente for fina, ou em casos especiais.
Evitar colher sangue de rea com hematoma ou equimose.
Em coletas a vcuo, puncionar a veia do paciente com o bisel voltado para cima. Perfurar
a veia com a agulha em um ngulo oblquo de insero de 30 graus ou menos. Este
procedimento visa prevenir o choque direto do sangue na parede do tubo, que pode
hemolisar a amostra, e tambm evita o refluxo do sangue do tubo para a veia do paciente.
Tubos com volume insuficiente ou com excesso de sangue, alteram a proporo correta
de sangue/aditivo, podendo levar a hemlise e resultados incorretos.
Recomenda-se, em coletas de sangue a vcuo, aguardar o sangue parar de fluir para
dentro do tubo, antes de troc-lo por outro, assegurando a devida proporo sangue/
anticoagulante. Observar que, tubos com menor volume de aspirao (peditricos), tm
menor quantidade de vcuo, portanto o sangue flui lentamente para dentro deste tubo.
Em coletas com seringa e agulha, verificar se a agulha est bem adaptada seringa
para evitar a formao de espuma.
No puxar o mbolo da seringa com muita fora.
Ainda em coletas com seringa, descartar a agulha, passar o sangue deslizando cuida-
dosamente pela parede do tubo, cuidando para que no haja contaminao do bico da
seringa com o anticoagulante ou ativador de cogulo contido no tubo.
No executar o procedimento de espetar a agulha no tubo, para transferncia do san-
gue da seringa para o tubo, porque pode ocorrer a criao de uma presso positiva, o
que provoca, alm da hemlise, o deslocamento da rolha do tubo, levando quebra da
probe de equipamentos na rea analtica.
4.5.2 Boas prticas ps-coleta para preveno da hemlise
Homogeneizar a amostra suavemente por inverso de 5 a 10 vezes (veja item 4.8.3), no
chacoalhar o tubo.
No deixar o sangue em contato direto com gelo, quando o analito a ser dosado neces-
sitar desta conservao.
Embalar e transportar o material de acordo com a Vigilncia Sanitria local, instrues de
uso do fabricante de tubos e do fabricante do teste diagnstico a ser analisado.
Usar, de preferncia, um tubo primrio e evitar a transferncia de um tubo para outro.
O material coletado no deve ficar exposto a temperaturas muito elevadas ou mesmo
exposio direta luz, para evitar hemlise e/ou degradao.
No deixar o sangue armazenado por muito tempo refrigerado, antes de fazer os exa-
mes. Verificar as recomendaes do fabricante dos insumos para a realizao do teste.
No centrifugar a amostra de sangue em tubo, para obteno de soro, antes do trmino
da retrao do cogulo, pois a formao do cogulo ainda no est completa, podendo
levar ruptura celular.
Quando utilizar um tubo primrio (com gel separador), a separao do soro deve ser
efetuada dentro de, no mnimo, 30 minutos e, no mximo, 2 horas aps a coleta,
evitandose, assim, resultados incorretos.
No usar o freio da centrfuga com o intuito de interromper subitamente a centrifugao
dos tubos, esta brusca interrupo pode provocar hemlise.
Boas prticas - lembrete
Tubos com menor volume de aspirao (peditricos), tm menor quantidade de vcuo, portanto
o sangue flui lentamente para dentro dele. No momento da coleta, aguardar que o sangue
pare de fluir para dentro do tubo, para retir-lo da agulha e inserir o segundo tubo.
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4.6 Recomendao para os Tempos de Retrao do Cogulo
4.7 Centrifugao dos Tubos de Coleta
Recomenda-se que as centrfugas do laboratrio sejam submetidas periodicamente manuten-
o preventiva, com calibrao e verificao das condies metrolgicas para garantir seu corre-
to funcionamento. Para tubos de coleta a vcuo, recomenda-se o uso de centrfugas balancea-
das de ngulo mvel (tipo swing-bucket).
Utilizar sempre caambas ou cubetas apropriadas. As caambas e cubetas da centrfuga devem
ser do tamanho especfico para os tubos usados. Cubetas muito grandes ou muito pequenas
podem causar a quebra ou o deslocamento dos tubos, levando m separao da amostra.
Certificar-se de que os tubos estejam corretamente encaixados na caamba da centrfuga. Um
encaixe incompleto pode fazer com que a tampa de proteo do tubo se desprenda, ou que a
parte superior do tubo fique fora da caamba. Tubos de vidro ou plstico acima da caamba
podem chocar-se com a cabea da centrfuga e quebrar-se.
Balancear os tubos para minimizar o risco de quebra. Os tubos devem ser agrupados de acordo
com o tipo, por exemplo: tubos com o mesmo volume de aspirao, tubos de tamanhos iguais,
tubos de vidro com tubos de vidro, tubos com o mesmo tipo de tampa ou rolha de proteo,
tubos com gel com outros do mesmo tipo, e tubos de plstico com tubos de plstico.
A RCF (Fora Centrfuga Relativa) refere-se regulagem da acelerao da centrfuga (rpm),
usando-se qualquer uma das seguintes equaes:
Os tempos recomendados baseiam-se em processos normais de coagulao. Pacientes
portadores de coagulopatias ou submetidos terapia com anticoagulantes requerem um tempo
maior para esta etapa da fase pr-analtica.
Tubos coletados com volume de sangue inferior ao preconizado alteram a relao san-
gue/ativador de cogulo, resultando na formao de fibrina.
O intervalo necessrio para a retrao do cogulo deve ser respeitado antes da centrifugao,
para evitar a potencial formao de fibrina.
Onde r, expressa em cm, a distncia radial do centro do rotor da centrfuga base do tubo
(raio). O quadro 4 fornece a velocidade e tempo de centrifugao recomendados:
Tubo contendo
fibrina
TEMPOS MNIMOS DE RETRAO DE COGULO
RECOMENDADOS ANTES DA CENTRIFUGAO
TIPOS
(Tubos para obteno de soro)
TEMPO DE COAGULAO
(minutos)
Sem ativador de cogulo
(tampa vermelha*)
60
Com ativador de cogulo
(tampa vermelha*)
30
Com gel separador e ativador de cogulo
(tampa amarela)
30
* Cores de tampas dos tubos de coleta a vcuo conforme ISO 6710.2
QUADRO 3:
rpm = RCF x 10
5
1,12 x r
16
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Tempo e Rotao para Centrifugao da Amostra
* Valores referentes aos tubos BD Vacutainer