ASPERGILLUS

INTRODUCCION
En 1729 el Aspergillus fue catalogado por primera vez por el bilogo italiano Pier
Antonio Micheli. Micheli us el nombre "Aspergillum" por parecerse el hongo al
instrumento usado para dispersar agua bendita. La descripcin hecha por Micheli
de este gnero de hongo en su obra Nova Plantarum Genera tiene importancia
histrica, al ser reconocido como el punto inicial de la ciencia de la micologa.
El Aspergillus es un gnero de alrededor de 200 hongos (mohos), y es ubicuo. Los
hongos se pueden clasificar en dos formas morfolgicas bsicas: las levaduras y
lashifas. El Aspergillus es un hongo filamentoso (compuesto de cadenas
de clulas, llamadas hifas). El hbitat natural del Aspergillus son el heno y
el compostaje. Dentro del tipo de hifas se encuentra en las no pigmentadas que
reciben el nombre de hialohifomicetos. A su vez tiene 2 formas de presentacin:
Una saproftica en que aparece como un hongo con hifas septadas del que surgen
los conidioforos que a su vez tienen una ampliacin que es la cabezaaspergilar de
la que surgen unas estructuras de forma ampular que son las filides, de las que
surgirn las estructuras reproductivas (tambin llamados propgulos) que reciben
el nombre de fialoconidias.
MORFOLOGIA
El color es la principal caracterstica macroscpica para la identificacin de los
grupos de aspergilos. Poseen distintos tonos de verde, pardo, amarillo, blanco,
gris y negro. Las cabezas conidiales presentan bajo el microscopio cuatro formas
bsicas: globosa, radiada, columnar o claviforme y a simple vista las ms grandes
suelen parecer diminutas alfileres sobre el substrato En los aspergilos, los conidios
constituyen cadenas que se originan en la clula conidigena o filide. En algunos
aspergilos hay clulas adyacentes a las filides denominadas mtulas o clulas
de soporte. Los Aspergillus poseen una o dos series de clulas sobre la vescula,
o bien presentan simultneamente cabezas de ambos tipos
Las caractersticas macro y micromorfolgicas, tales como el color de los conidios,
la forma de la cabeza, la superficie y dimensiones del conidiforo, la forma y
textura de las esporas, han permitido agrupar los aspergilos en secciones o
grupos
Los teleomorfos poseen meiosporos en ascos que pueden producirse en racimos
desnudos o dentro de ascomas. stos tienen una pared formada por hifas
sueltas, un plectnquima o un tejido estromtico. la ornamentacin superficial de
las ascosporas que se observa con el microscopio electrnico de barrido, es una
de las caractersticas ms fidedignas para la identificacin de las especies.

IDENTIFICACION
Tradicionalmente se hace en base a las caractersticas macro y micromorfolgicas
en diversosmedios de cultivo incubados a distintas temperaturas debido a la
necesidad de conocer el contaminante para orientar la bsqueda de micotoxinas
en un producto. Se han desarrollado mtodos inmunolgicos rpidos para la
identificacin de los hongos contaminantes de granos y otros productos vegetales
y tcnicas moleculares en base al polimorfismo del ADN nuclear y mitocondrial, el
polimorfismo de tramos de fragmentos amplificados (AFLP), el polimorfismo de
tramos de fragmentos de restriccin (RFLP) y el polimorfismo del ADN amplificado
al azar para estudios a nivel intra- e inter-especfico.
CULTIVOS
La mayora de las especies crecen sobre Czapek-Levadura pero los
aspergilososmfilos,particularmente los miembros de las secciones Aspergilli y
Restricti, se desarrollan sobre Czapek-20% Sacarosa. La temperatura de
incubacin corriente es de 25C pero para otros investigadores la temperatura
conveniente es 37C. La ornamentacin de los conidios cambia con la edad y en
unas dos semanas las esporas estn totalmente maduras.
Para el aislamiento se usan medios selectivos con inhibidores de la proliferacin
bacteriana y del desarrollo exuberante de algunos mohos dandooportunidad a
todas las esporas de originar una colonia aunque restringida, si el nmero no
esdemasiado grande. Si solamente interesa determinar la presencia de A. flavus y
A. parasiticus se suele sembrar sobre el medio AFAP que es selectivo para dichas
especies. Con el fin de identificar los aspergilos se suele sembrar en placas de
Malta-Glucosa, Czapek-Levadura, CzapekGlicerol o Czapek-20% Sacarosa
incubando a 5, 25 y 37C registrando las caractersticas macro y micro-
morfolgicas para acceder a la clave.
El volumen de medio vaciado en la caja de Petri influye sobre el dimetro de las
colonias y otras caractersticas macroscpicas por ejemplo, en Czapek-Levadura,
un espesor mayor hace que A. flavus produzca ms esclerocios y el reverso de la
colonia sea ms obscuro mientras A. terreusesporula menos.
Un volumen mayor de Malta-Glucosa mejora el crecimiento micelial de A. terreus y
A. versicolor en detrimento de la esporulacin. Algunas de las razones para tal
comportamiento son una mayordisponibilidad de nutrientes y un cambio ms lento
en la actividad del agua o el pH.
Con el fin de comprobar que los medios utilizados son adecuados para observar la
velocidad de crecimiento y las caractersticas macro y microscpicas, es
conveniente sembrar cepas obtenidas de una coleccin de referencia. La
degeneracin de las cepas (pleomorfismo) es un problema de muchos hongos, los
cuales sufren cambios morfolgicos como colonias algodonosas, reduccin de la
esporulacin y modificaciones de los conidiforos, asociado a la prdida de la
capacidad de producir toxinas cuando se los mantiene durante mucho tiempo
mediante sucesivos repiques. Una manera de recuperarlos es cultivarlos en trozos
de cayote estriles u otros frutos.
La temperatura, a la cual el material amohosado es transportado al laboratorio y
mantenido antes de su anlisis, puede influir en la flora aislada a continuacin. Si
unos granos con alta humedad se mantienen a 12C se facilitar el aislamiento de
los penicilios aunque anteriormente hayan predominado los aspergilos. Por otra
parte, sobre los materiales con baja actividad de agua ser ms frecuente el
aislamiento de Aspergillus.
AMBIENTE
La ubicuidad de los aspergilos es debida a su capacidad para crecer a diferentes
temperaturas sobre substratos con diverso contenido dehumedad. La colonizacin
de los granos durante el almacenamiento, por Aspergillus y otros mohos, se
produce de forma explosiva cuando lahumedad relativa ambiente intergranular se
eleva por sobre el 70%, sin que se desencadene an el fenmeno de brotacin.
El rango de temperatura para el crecimiento va desde 0-5C para A. glaucus hasta
50-55C para A. fumigatus, estando el ptimo entre 30-33C para la mayora de
las especies. Si unos granos con un contenido de humedad del 15% no fueron
afectados por los aspergilos durante un ao es porque la temperatura de
almacenamiento estuvo por debajo de 5-10C.
MICOTOXINAS
Son varios los metabolitos secundarios de los aspergilos que son considerados
micotoxinas:aflatoxinas, esterigmatocistina y otros algunos de los cuales tambin
son producidos por especies de penicilios, por ejemplo cido ciclopiaznico y
ocratoxinas.
Es comn que las condiciones ptimas para el crecimiento de las especies
toxingenas no coincidan con las que facilitan la produccin de micotoxinas. As,
mientras el desarrollo ptimo de A. flavus ocurre a 36C con una actividad del
agua de 0,95, la produccin de aflatoxinas es favorecida por una temperatura de
33C a una actividad de 0,99, aunque pueda ser formada an a 15C con una
actividad del agua de 0,95. Por otra parte, con una actividad del agua ptima A.
versicolor produce la mayor cantidad de esterigmatocistina a pH 5,6 (Moss 1991).
Aunque el pH sea fcil de medir es difcil de controlar porque a medida que crece
el hongo cambia el pH del substrato.
Las interacciones con otros microorganismos pueden afectar la produccin de
micotoxinas. Brevibacterium linens y Streptococcus lactis inhiben la sntesis de
aflatoxinas pero la estimulan Lactobacillus plantarum y Acetobacter aceti. Se
observa una disminucin de la cantidad de aflatoxinas cuando A. flavus crece en
un cultivo mixto con Penicillium oxalicum u otros hongos, y una alteracin de la
relacin G1/ B1 en el caso de A. parasiticus. Por su parte A. flavus afecta a la
capacidad de formacin de toxinas de A. ochraceus o A. versicolor. Adems los
Aspergillus inhiben la produccin de toxinas por otros gneros en cultivos mixtos
mientras que Trichoderma viride impide la formacin de aflatoxinas.
AFLATOXINAS
Estas toxinas contienen un ncleo cumarina fusionado a un bifurano y a una
estructura pentanona en el caso de aflatoxinas B, que est sustituda por una
lactona de seis miembros en aflatoxinas G. Estos metabolitos secundarios cuyas
frmulas se observan en la figura 4.3, son producidos por una ruta biosinttica
comn con la esterigmatocistina, a partir de un precursor policetnico. A.flavus, A.
pseudotamarii y algunas cepas de A. caelatus producen aflatoxinas B1 y B2
mientras que A. parasiticus y A. nomius forman adems aflatoxinas G1 y las
cepas africanas y argentinas de A. flavusvar. parvisclerotigenus producen tambin
aflatoxina G1. El porcentaje de cepas productoras de toxinas es mayor en A.
parasiticus que en A. flavus, A. flavus, A. parasiticus y A. nomius crecen
moderadamente a 42C pero no desarrollan A. pseudotamarii ni A. caelatus Las
letras B y G se refieren al color de la fluorescencia (celeste y verdosa) observada
bajo luz UV mientras que los subndices 1 y 2 indican componente mayor y menor
respectivamente. En estado puro son polvos cristalinos que se descomponen al
alcanzar el punto de fusin (B1 268-269C, B2 286-289C, G1 244-246, G2 237-
240, M1 299C, M2 330C).Estas toxinas se encuentran con ms frecuencia sobre
oleaginosas aunque tambin en cereales,especialmente los de zonas clidas. Las
aflatoxinas M1 y M2 son el producto metablico hidroxilado de las B1 y B2.
Alrededor del 1% de la aflatoxina B1 consumida con el forraje es excretada en
leche como M1.
El rango de temperatura para la produccin de aflatoxinas va de 7,5-12 a 40-41C
segn los hongos y las condiciones experimentales. Una humedad relativa menor
del 85 % detiene el crecimiento de los hongos productores de estas toxinas, lo que
corresponde a un contenido de humedad del mz de 16 % y una actividad del
agua igual a 0,85. La elaboracin de las toxinas se produce poco despus de la
infeccin de las mazorcas a la temperatura ambiente y en dos das puede alcanzar
una concentracin de 200 ng/g, llegando a 2.000 ng/g luego de nueve das a 26-
34C. Se observa una gran variacin de la contaminacin fngica, transmitida por
insectos, entre los granos de una misma mazorca y entre las mazorcas de un
mismo cultivo. El estrs hdrico de la planta asociado con altas temperaturas es la
principal causa de contaminacin, tambin.
La exposicin a las aflatoxinas es difcil de evitar porque no es sencillo prevenir el
crecimiento fngico en los granos y otros productos. Los lmites a la concentracin
de aflatoxinas para proteger la salud humana y animal establecida por distintos
pases e instituciones son variables. Un ng/kg de peso corporal/da de aflatoxina
B1 o an menos contribuye al riesgo de contraer cncer heptico. La
Administracin de Alimentos y Medicamentos (FDA) de Estados Unidos estableci
como lmites mximos la concentracin de 20 mg/kg para granos y otros forrajes
destinados a la crianza animal y vacas lecheras, 100 mg/kg para granos
destinados a ganado y cerdos reproductores as como gallinas ponedoras, 200
mg/kg para granos empleados en el engorde de cerdos y 300 mg/kg para los
destinados al engorde de la hacienda.
El uso de un nivel mximo de contaminacin reduce la ingesta promedio de
toxinas por la poblacin, aunque la aplicacin de un lmite de 20 mg de
aflatoxinas/kg resulta en el rechazo de un 4% 50 de las muestras con un nivel de
0,9 mg/kg mientras que un lmite de 10 mg/kg impide la aceptacin del 6,2% de las
muestras con valores entre 0,3 y 0,6 mg/kg. Si todos los lotes con una
contaminacin superior a 20 mg/kg se eliminaran de una dieta europea la ingesta
diaria estimada promedio sera 19 ng/persona por da, mientras que con una dieta
oriental sera 125 ng/persona por da. Las aflatoxinas se consideran
cancergenos hepticos humanos. La ms potente es la toxina B1 y mientras que
la M1 tiene una potencia diez veces menor. Las aflatoxinas tienen accin sinrgica
con el virus de la hepatitis B, por lo que la reduccin de la ingesta de estas toxinas
disminuye la tasa de cncer de hgado en individuos portadores del virus.
La deteccin de las toxinas se pueden llevar a cabo por cromatografa en capa
fina uni o bidireccional haciendo la valoracin por fluorodensitometra, o luego de
fotografiar con un filtro que elimine la luz UV analizar las imgenes en la
computadora mediante un programa adecuado. La tcnica de cromatografa
lquida de alta resolucin da resultados ms exactos midiendo laabsorbancia a
366 nm o la fluorescencia
ASPERGILLUS NIGER
Aspergillus niger es un hongo que produce un moho negro en vegetales -muy
comn en la lechuga, el tomate o la acelga-. Es una de las especies ms
corrientes del nero Aspergillus. En 1729 los catalog por primera vez
el bilogo italiano Micheli. Y su hbitat natural es el heno y el compostaje.
Aspergillus niger no causa tantas enfermedades como otras especies
de Aspergillus, pero en altas concentraciones puede producir aspergilosis, que
provoca alteraciones pulmonares. Esta enfermedad aparece con ms frecuencia
en horticultores, ya que inhalan el polvo del hongo con ms facilidad.
Aspergillus niger se cultiva para varios productos qumicos: cido
ctrico (E330), en la cual El Aspergillus Niger una vez que el hongo ha madurado y
el moho se ha filtrado. El hidrxido de calcio y el cido sulfrico se combinan con
la solucin restante para producir cido ctrico.cidoglucnico (E574)
enzimas: glucoamilasa, galactosidasa, fitasa (A. nigervar. ficuum), etc.
Cientficos de la (UNLP) hallaron y demostraron- que un hongo encontrado en los
suelos puede emplearse para favorecer el desarrollo de distintos cultivos. A travs
de una pequea porcin del fsforo que contiene.
El hongo estudiado por el Instituto de Investigaciones Fisicoqumicas Tericas y
Aplicadas (INIFTA) de la UNLP es el Aspergillus niger, una especie inocua para
los seres humanos y tambin para la mayora de los cultivos. Los compuestos
qumicos naturales del fsforo son poco saludables. Sin embargo, en el caso de
los vegetales, son un nutriente esencial.
Para comprobar si los vegetales pueden absorber el fsforo que libera, se hicieron
ensayos con plantas de tomate. Y los resultados fueron concluyentes: las plantas
cultivadas en macetas en las que se aadi hidroxiapatita y esporas del hongo
crecieron tanto como las testigo que haban recibido fsforo con el riego. Por el
contrario, en los lotes restantes (a uno de los cuales se haba agregado solamente
el fosfato y al otro nicamente el hongo), las plantas tuvieron un desarrollo
apreciablemente menor. Estas pruebas de laboratorio demostraron que podra
emplearse el Aspergillus niger como fertilizante biolgico en huertas y
plantaciones de tamao relativamente reducido. Adems, actualmente se investiga
si el hongo puede solubilizar tambin compuestos de hierro, otro
importantemicronutriente vegetal.
Hasta antes del hallazgo de los investigadores de la UNLP, a los Aspergillus se los
consideraba peligrosos. Esto se debe a que se trata de un hongo ampliamente
difundido en la naturaleza, que se desarrolla en vegetales en descomposicin,
granos de cereal, heno, tejidos de algodn y lana y en plumas, siendo su medio
ideal los ambientes oscuros, hmedos y cerrados.
Las esporas pueden sobrevivir, en las condiciones adecuadas, durante miles de
aos. Estudios recientes demostraron que las esporas de Aspergillus mantienen
intacta su capacidad invasiva, e incluso parece aumentar su
potencial alergnico despus de miles de aos.
La propagacin rpida del Aspergillus en ambientes llenos de polvo y a travs de
los sistemas de aire acondicionado puede ser el origen de los brotes de alergia.
Debido a su color oscuro caracterstico y su resistencia a los tratamientos
antifngicos, el Aspergillus niger es utilizado comnmente tambin, en su forma
natural no fermentada, para evaluar la efectividad de los conservantes
alimentarios en la prevencin de la formacin de mohos. Adems, los agricultores
a veces lo utilizan para probar los suelos, ya que es sensible hasta a las ms
pequeas deficiencias de micronutrientes de los mismos.
La produccin de cido ctrico
El Aspergillus Niger puede usarse para producir cido ctrico una vez que el hongo
ha madurado y el moho se ha filtrado. El hidrxido de calcio y el cido sulfrico se
combinan con la solucin restante para producir cido ctrico. Este es un proceso
industrial y no debe hacerse en casa como un experimento.
La conservacin de los alimentos
La produccin industrial principal del Aspergillus Niger est enfocada a la
conservacin dealimentos. Debido a que es un agente de fermentacin, puede
someterse a un proceso qumico que lo hace un polvo que se usa en la
conservacin de alimentos. Al igual que el jugo de limn o de lima pueden evitar
que una manzana o un aguacate se oscurezcan en la presencia del oxgeno, el
Aspergillus Niger, que se encuentra en el jugo ctrico, puede ayudar a preservar la
comida embotellada y enlatada.
La produccin de t
Las propiedades de fermentacin del Aspergillus Niger se utilizan en ciertos tipos
de produccin de t. Un t chino llamado Pu-erh usa el Aspergillus Niger para
fermentar las diferentes hojas que se usan en l.
El Aspergillus niger es conocido por producir reacciones alrgicas cuando es
inhalado, segn la Agencia de Proteccin Ambiental en epa.gov. Sin embargo, el
antgeno que causa hipersensibilidad pulmonar y produce estas reacciones se
encuentra principalmente en las cepas del hongo utilizadas en aplicaciones
industriales (por lo tanto, no te preocupes por las frutas y vegetales). En los casos
graves de exposicin al Aspergillus niger, se han visto casos de asma y alveolitis
(inflamacin de los sacos areos de los pulmones o alvolos).
El Aspergillus niger, a pesar de su reputacin de producir reacciones alrgicas y
enfermedades, es utilizado comnmente en la industria alimentaria para producir
enzimas. Segn epa.gov, este hongo es fermentado en recipientes increblemente
grandes (a veces de un tamao que llega a los 100.000 litros, o aproximadamente
26.000 galones) y luego es procesado para obtener celulasa, invertasa,
amiloglucosidasa, amilasa, lactasa, proteasa cida y pectinasa. El Aspergillus
niger tambin es utilizado para preparar Pu-erh, un t de hoja chino.
ASPERGILLUS ORYZAE
Aspergillus oryzae es un hongo usado en cocina japonesa, Fermenta soja para
roducir miso y salsa de soja. Se usa para preparar el arroz para la fermentacin,
para el sake y para shochu.
Llamado tradicionalmente KOJI-KIN procedente de la ancestral cultura china y
japonesa, se utiliza para procesar los alimentos de forma natural, de manera que
resulten ms asimilables y nutritivos y se conserven mucho tiempo. El cultivo
madre es usado para elaborar bebidas y productos predigeridos a partir de
legumbres y cereales. Por ejemplo el miso Hatchoo Amazake.
El koji se cultiva sobre arroz cocido al vapor, refrescado e inoculado con las
esporas del aspergillus oryzae, entonces es incubado de 3 a 4 das a 42 C. Una
lana blanca como de algodn se observa cubriendo completamente el arroz
cuando el koji est listo para la cosecha. Es el micelio de la nueva cepa de
Aspergillus oryzae. Las esporas de este hongo cuando estn maduras son de un
color verde plido. El koji es de alto contenido en enzimas catalticas incluyendo la
amilasa, que convierte el almidn en azcares simples.
ENFERMEDADES PRODUCIDAS POR OTRAS ESPECIES DE ASPERGILLUS
La aspergilosis es causada por un hongo Aspergillus fumigatus que comnmente
crece en hojas muertas, granos almacenados, pilas de estircol o abono u otra
vegetacin en descomposicin. Tambin se puede encontrar en las hojas de
marihuana.
Aunque la mayora de las personas frecuentemente estn expuestas
al aspergillus, las infecciones causadas por el hongo rara vez ocurren en personas
con un sistema inmunitario normal. Las infecciones raras causadas por
el aspergillus abarcan neumona y bola fngica (aspergiloma).
Existen varias formas de aspergilosis:
Aspergilosis pulmonar de tipo broncopulmonar alrgica: es una reaccin
alrgica al hongo que generalmente se desarrolla en personas que ya
tuvieron problemas pulmonares, como asma o fibrosis qustica.
Aspergiloma: es un tumor (bola fngica) que se desarrolla en un rea de
enfermedad pulmonar o cicatrizacin pulmonar previas, como
una tuberculosis o un absceso pulmonar.
Aspergilosis pulmonar de tipo invasivo: es una infeccin grave con
neumona que se puede diseminar a otras partes del cuerpo. La infeccin
ocurre casi exclusivamente en personas con sistemas inmunitarios
debilitados debido al cncer, SIDA, leucemia, trasplante de rganos,
quimioterapia u otras afecciones o medicamentos que reducen el nmero
de glbulos blancos normales o debilitan el sistema inmunitario.
Sntomas
Los sntomas dependen del tipo de infeccin.
Los sntomas de la aspergilosis alrgica broncopulmonar pueden abarcar:
Tos
Tos con sangre o tapones mucosos de color castao
Fiebre
Indisposicin general (malestar)
Sibilancias
Prdida de peso
Otros sntomas dependen de la parte del cuerpo afectada y pueden abarcar:
Sangre en la orina
Dolor de huesos
Dolor torcico
Escalofros
Disminucin del gasto urinario
Dolores de cabeza
Aumento en la produccin de esputo que puede tener sangre
Insuficiencia respiratoria
Ulceras (lesiones) cutneas
Problemas de visin
Pruebas y exmenes
Los exmenes para diagnosticar la infeccin por Aspergillus abarcan:
Prueba de anticuerpos para aspergilosis
Radiografa de trax
Conteo sanguneo completo (hemograma)
Tomografa computarizada
Galactomanan (una molcula del hongo que algunas veces se encuentra en
la sangre)
Nivel de inmunoglobulina E (IgE) en la sangre
Pruebas de la funcin pulmonar
Tincin y cultivo de esputo para Aspergillus
Biopsia de tejidos