PRACTICA # 4

IMPACTO DE LOS AGENTES FSICO Y

AMBIENTES SOBRE EL DESARROLLO DE LOS
MICROORGANISMOS
Ma. En A. Luz Carmen Castillo Martnez
QUI02SV-13
Bocanegra Hernndez Pablo Daniel
Cano Cuevas Diana
Hernndez Huerta Alexis Alain
Santiago Pantoja Yetlanezi Atzimba
Villarruel Garduo Miguel Ivan


CONTENIDO

OBJETIVO ...................................................................................................................... 2

INTRODUCCIN ............................................................................................................. 2

MATERIALES .................................................................................................................. 5

REACTIVOS .................................................................................................................... 5

PROCEDIMIENTO ........................................................................................................... 5

DIAGRAMA DE FLUJO .................................................................................................... 6

RESULTADOS ................................................................................................................. 7

CUESTIONARIO ............................................................................................................ 11

OBSERVACIONES ......................................................................................................... 12

CONCLUSIONES ........................................................................................................... 13

BIBLIOGRAFA ............................................................................................................. 18

MSDS .......................................................................................................................... 19


OBJETIVO

Que el alumno recuerde la importancia y el impacto de los agentes fsico y ambientes de manera
que los microorganismos cuenten con los elementos necesarios para su desarrollo.
INTRODUCCIN

EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE EL CRECIMIENTO
La temperatura es uno de los parmetros ambientales ms importantes que condicionan el
crecimiento y la supervivencia de los microorganismos.
La temperatura afecta a la velocidad de crecimiento (y, por lo tanto al tiempo de
generacin, g). Cada bacteria (y suponiendo que el resto de condiciones ambientales se mantienen
constantes) muestra una curva caracterstica de tasa de crecimiento en funcin de la temperatura,
donde podemos distinguir tres puntos caractersticos llamados temperaturas cardinales:


Temperatura mnima: por debajo de ella no hay crecimiento;
Temperatura mxima: por encima de ella tampoco existe crecimiento;
Temperatura ptima: permite la mxima tasa de crecimiento (o sea, g mnimo).

El margen entre la temperatura mnima y la mxima se suele llamar margen de crecimiento, y en
muchas bacterias suele comprender unos 40 grados.
La temperatura mnima se puede explicar en funcin de un descenso de la fluidez de la
membrana, de modo que se detienen los procesos de transporte de nutrientes y el gradiente de
protones.
Por encima de la temperatura mnima la tasa de crecimiento va aumentando
proporcionalmente hasta alcanzar la temperatura ptima, debido a que las reacciones metablicas
catalizadas por enzimas se van aproximando a su ptimo. En dicha temperatura ptima las
enzimas y reacciones se dan a su mxima tasa posible.
A partir de la temperatura ptima, si seguimos subiendo la temperatura se produce un
descenso acusado de la tasa de crecimiento hasta alcanzar la temperatura mxima. Dicha
temperatura refleja desnaturalizacin e inactivacin de protenas enzimticas
esenciales, colapsamiento de la membrana citoplsmica y a veces lisis trmica de la bacteria.
Obsrvese en el grfico que la temperatura ptima est ms cerca de la mxima que de la mnima.

EFECTO LETAL DEL CALOR
Al subir la temperatura por encima de la temperatura mxima de crecimiento, se dejan
sentir los efectos sobre la viabilidad: la prdida de viabilidad significa que las bacterias dejan de ser
capaces de crecer y dividirse, aun cuando las transfiramos a un medio idneo. La muerte por calor
es una funcin exponencial de primer orden:
dN/dt = -K
T
N
O sea, y como se puede constatar en el grfico adjunto, la accin del calor supone la muerte de
una fraccin constante (K
T
) de la poblacin sobreviviente en cada momento.
La cintica de primer orden sugiere que no existen efectos acumulativos, sino que la muerte se
debe a la destruccin o inactivacin irreversible de una molcula o estructura esencial (como p. ej.
el ADN cromosmico o por creacin de un dao irreparable en la membrana).
Cmo podemos caracterizar o medir en la prctica la inactivacin por calor de una
suspensin bacteriana? He aqu algunos parmetros utilizados:
tiempo trmico mortal: es el tiempo mnimo requerido para que mueran todas las bacterias de
una determinada suspensin a una determinada temperatura;
tiempo de reduccin decimal: es el tiempo requerido para reducir al 10% la densidad de la
suspensin, a una determinada temperatura (tambin llamado valor D);
Punto trmico mortal: es la temperatura mnima que mata a todas las bacterias en un tiempo
determinado (normalmente el tiempo de referencia empleado es de 10 min).

EFECTOS DE LA LUZ VISIBLE
A diferencia de la UV, la luz visible es de baja energa, y adems, sus cuantos no tienen
efectos selectivos sobre el ADN, por lo que no sera de esperar, en principio, que este tipo de
radiacin tuviera efectos negativos sobre las bacterias. Sin embargo, la luz visible puede ejercer un
efecto negativo indirecto, en el fenmeno de sensibilizacin fotodinmica.
La luz visible de fuerte intensidad (p. ej., exposicin a pleno sol) es capaz de matar las
bacterias, debido a que ciertas molculas de stas (riboflavinas, porfirinas, citocromos) absorben
la energa de los cuantos y se excitan durante 10
-6
-10
-8
seg, tras lo cual reemiten la energa a otras
molculas, originando fotooxidaciones en residuos His y Trp de las protenas y en las bases de los
cidos nucleicos. Tambin se puede generar oxgeno singlete (
1
O
2
), que es un radical muy reactivo,
oxidante, que puede destruir la clula con rapidez.
As pues, la moraleja prctica es: no dejarse los cultivos bacterianos expuestos a la luz solar,
sino que habrn de cultivarse en oscuridad (salvo el cultivo de las bacterias fototrofas).
Ciertas bacterias (entre ellas las fotosintticas, y las que se propagan va area) poseen
abundantes pigmentos de tipo carotenoide que las protegen de estos efectos fotosensibilizadores.
(Los carotenoides captan la energa del oxgeno singlete y la reenvan al estado basal, no excitado).

EFECTO DEL pH
La mayora de las bacterias pueden crecer dentro de un margen de pH de su medio, manteniendo
al mismo tiempo su pH interno ptimo prcticamente constante.
Por ejemplo, Escherichia coli puede crecer bien entre pH 6 y pH 8, pero su pH interno es siempre
7.6 o muy cercano a ese valor.
Respecto del margen normal de pH a los que crecen las bacterias, stas se pueden clasificar en:
Neutrfilas, si crecen de modo ptimo en torno a la neutralidad (entre pH 5.5 y 8).
Acidfilas, si crecen normalmente entre pH 0 y pH 5.
Alcalfilas, si crecen entre pH 8.5 y pH 11.5.
La mayor parte de las bacterias son neutrfilas. Muchas bacterias neutrfilas modifican el pH
del medio, y resisten entornos relativamente cidos o alcalinos. Por ejemplo, algunas bacterias
fermentativas excretan cidos, mientras otras alcalinizan el medio, p. ej., produciendo amonio a
partir de desaminacin de aminocidos. Por otro lado, la mayor parte de los hongos y levaduras
requieren pHs ligeramente cidos (en torno a 4-5).
Aunque los microorganismos pueden crecer en un margen ms o menos amplio de pH (alrededor
de un ptimo), los cambios bruscos pueden ser lesivos (afectando a la membrana y al transporte
de solutos, e inhibiendo enzimas). Si el pH citoplsmico cae rpidamente hasta 5 o menos, la
bacteria puede morir.

MATERIALES

1 Vidrio de reloj grande
1 Mechero
1 Porta asa con asa
1 Gradilla
Pipeta graduada de 10, 5, 2, mL
estriles
Bao Mara a 61C y 100C
Autoclave
10 Tubos de ensayo medianos con
tapa y estriles
Tiras de pH
Pipetas Pasteur estriles


REACTIVOS

2 Cajas Petri con agar nutritivo
Cultivo de 10 mL por equipo joven de
18 a 24 horas de E. Coli y
Saccharomyces cereviceae
14 tubos por equipo de caldo
lactosado o caldo nutritivo
HCL 1N estril
NaOH estril

PROCEDIMIENTO

EXPERIMENTO 1.
Colocar 1 ml de cultivo E coli en un tubo estril
Hacer lo mismo con los siguientes 4 tubos (total 5)
Marcar los tubos perfectamente y calentar de la siguiente manera:
Tubo 1: 61 C por 10 min.
Tubo 2: 61 C por 20 min.
Tubo 3: 100 C por 10 min.
Tubo 4: 121 C por 15 min.
Tubo 5: no calentar (control)

Dividir la caja de Petri con agar nutritivo en 6 partes y sembrar cada uno de los tubos con
una azada. Dejar un blanco de medio de cultivo como testigo.
Incubar a 35 C por 24 horas.
EXPERIMENTO 2.
EFECTO DE pH SOBRE LOS MICROORGANISMOS.
Ajustar cada tubo de caldo a un pH
Tubo 1: pH 3.0
Tubo 2: pH 5.0
Tubo 3: pH 7.0
Tubo 4: pH 9.0
Tubo 5: pH 11.0

Sembrar cada uno de los tubos con dos o tres azadas del inoculo de E coli.
Incubar a 35 C por 24 horas.
DIAGRAMA DE FLUJO

EXPERIMENTO
1
Colocar 1ml de E coli es
tubo esteril (5)
calentar los tubos a las
temperaturas indicadas
dividir la caja con agar
nutritivo en 6 partes y
sembrar cada uno de los
tubos
incubar: 35 C /24
horas.
observar y anotar
resultados
EXPERIMENTO
2
ajustar cada tubo de
caldo a los pH indicados.

tubo 1: pH 3.0
tubo 2: pH 5.0
tubo 3: pH 7.0
tubo 4: pH 9.0
tubo 5: pH 11.0


sembrar cada tubo con
2 o 3 asadas del inoculo
de E coli
incubar 35 C/24 horas.
observar y anotar
resultados.
RESULTADOS
Experimento #1
Bacteria Control
Blanco
Control
T Ambiente
61C
10 min
61C
20 min
100C
10 min
121C
15 min
E. Coli - 4+ 2+ 2+ - -
S. Cereviceae - 4+ 1+ 2+ - -

En base a los resultados se puede observar que ambas bacterias se desarrollaron adecuadamente
en el control a temperatura ambiente, as mismo, presentaron un considerable crecimiento en los
cuadrantes que fueron sembrados con los tubos tratados a 61C por 10 y 20 minutos
respectivamente, por lo cual se determina que estas temperaturas entran es su rango de
crecimiento. Finalmente no se observo crecimiento alguno en los cuadrantes con bacterias
tratadas a 100C por 10 min y en las tratadas a 121C por 15 min, lo que determina que estas
temperaturas claramente destruyen a las bacterias.

Imgenes Experimento 1

Ilustracin 1- Experimento #1 S. Cereviceae

Ilustracin 2 Experimento #1 E. Coli

Experimento 2
Bacteria Control pH 3.0 pH 5.0 pH 7.0 pH 9.0 pH 11.0
E. Coli - 4+ 4+ 4+ 4+ 4+
S. Cereviceae 3+ 2+ 2+ 3+ 1+ -

En base a los resultados obtenidos se observa que la bacteria E. coli es mas adaptable a los
cambios en el pH del medio en el que se cultiva, ya que presento un crecimiento favorable en los
cuadrantes con pH del rango 3.0 a 11.0, observando que el pH alcalino o acido no son
condicionantes para su desarrollo.
En el caso de la levadura S. Cereviceae su desarrollo fue en el rango de pH de 3.0 a 9.0, por lo cual
este se determina como su rango de pH al que puede crecer, siendo el pH inferior a 7.0 (acido) el
que mayor desarrollo presento. En el pH de 11.0 no se encontr desarrollo alguno de UFC, por lo
cual se determina que es incapaz de desarrollarse en pH alcalinos superiores a 9.0.



Imgenes Experimento 2

Ilustracin 3 - Experimento #2 S. Cereviceae


Ilustracin 4 - Experimento #2 E. Coli

Finalmente, se procedi a realizar la tincin de Gram de una de las UFC de las cepas de E. Coli y S.
Cereviceae con el fin de determinar de qu tipo son:


Ilustracin 5 - Tincin de Gram E. Coli: Gram negativa



Ilustracin 6 - Tincin de Gram S. Cereviceae: Gram positiva
CUESTIONARIO

1.- Cules son los intervalos de temperatura as como la ptima de los siguientes
microorganismos?

a) Psicrfilos: ptima de 15-18 C, Rango de 0 a 20 C
b) Mesfilos: Temperatura ptima de crecimiento de entre 15 y 35 C
c) Termfilos: ptima por arriba de 45 C, Crecen a temperaturas mayores de 50 C

2.- Cules son los intervalos de la pasteurizacin y ultra pasteurizacin?

Pasteurizacin; 72 C durante 15 segundos.
Ultra pasteurizacin; Puede rondar los 138 C durante un perodo de al menos dos segundos.

3.- Qu diferencia existe entre la esterilizacin por calor hmedo y calor seco?

El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas. Estos efectos se deben
principalmente a dos razones:
El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras biolgicas (DNA, RNA,
protenas, etc.) son producidas por reacciones que eliminan agua.
El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho ms elevado que el
aire. Por lo que, los materiales hmedos conducen el calor mucho ms rpidamente que
los materiales secos debido a la energa liberada durante la condensacin.
Una temperatura de 121 C (una atmsfera de sobrepresin) con un tiempo de exposicin mayor a
15 minutos sirve para destruir organismos formadores de esporas.

El calor seco produce desecacin de la clula, efectos txicos por niveles elevados de electrolitos,
procesos oxidativos y fusin de membranas. Estos efectos se deben a la transferencia de calor
desde los materiales a los microorganismos que estn en contacto con stos. El aire es mal
conductor del calor, y el aire caliente penetra ms lentamente que el vapor de agua en materiales
porosos.
La estufa de esterilizacin es el artefacto utilizado en los laboratorios para esterilizar por calor
seco. Se requiere mayor temperatura y tiempo de exposicin que en autoclave. La temperatura
vara entre 120 y 180C, requirindose distintos tiempos de exposicin. A 140C se necesitan por
lo menos 5 horas de exposicin, mientras que a 160C se requieren al menos 2 horas de
exposicin.

4.- Cul es el efecto del agua en la esterilizacin?

El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas. Estos efectos se deben
principalmente a dos razones: El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras
biolgicas, El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho ms elevado
que el aire. Por lo que, los materiales hmedos conducen el calor mucho ms rpidamente que los
materiales secos debido a la energa liberada durante la condensacin.

5.- Qu efectos tiene la congelacin en las bacterias?

La congelacin en condiciones adecuadas permite no slo inactiva microorganismos sino tambin
destruirlos totalmente.
La congelacin no es slo una buena forma de conservar alimentos, sino que tambin es una
excelente manera de conservar microorganismos.

OBSERVACIONES

La realizacin de esta prctica se llev a cabo, como en todas las anteriores, en condiciones
estriles, con material previamente esterilizado y con equipo de proteccin que nos garantizaba
nuestra salud as como una buena prctica de laboratorio cuidando la inocuidad de los
microorganismos utilizados.

El procedimiento experimental consista en elevar las temperaturas de las cepas utilizadas
(saccharomyces cerevisiae y e. coli) y dependiendo de los resultados despus de la incubacin, as
como con la comparacin de la literatura podramos saber a qu tipo de categora pertenecan las
cepas, la segunda parte del experimento es conocer su capacidad de resistencia al cambio de pH,
donde se sembr a diferentes concentraciones del mismo.

La prctica se llev a cabo sin mayores dificultades, con apoyo de todo el grupo, ya que por falta
de un medio de cultivo solido se dividieron las siembras por mesa en cuanto a pH y temperatura,
es decir un equipo de la mesa sembraba a diferentes temperaturas y el otro equipo a pH distintos.
Como se mencion la realizacin de dicha prctica no tuvo mayor dificultad, se tuvieron las
medidas adecuadas, y se sigui el procedimiento al pie de la letra.

CONCLUSIONES

En esta prctica fue posible determinar los resultados que se producen en el crecimiento de los
microorganismos cuando se modifican las propiedades de su medio de cultivo como el pH o
cuando se cambian las condiciones a las que el microorganismo se expone como la temperatura
En el caso de la S. Cereviceae, al modificar el pH, observamos que su rango optimo de crecimiento
se encuentra entre el pH de 7.0 y 5.0, aunque mostro la capacidad de crecer, en menor
proporcin, a rangos de pH mas acidos como el de pH 3.0, pero no asi a rangos mas alcalinos,
como a pH de 9.0 y 11.0. En base a la bibliografa consultada se obtuvo que el rango ptimo de
crecimiento de esta levadura es de pH 3.0 a 7.0, por lo que se constata la fiabilidad del
experimento.
Para el caso de la temperatura para la S. Cereviceae, su rango de temperatura optima de
crecimiento es de 0 a 40 C, pero observamos crecimiento aun cuando fue tratada a 60C, aunque
este fue muy poco, pudindose deber a que el tiempo de exposicin fue corto y no alcanzo a
destruir por completo a la levadura en el inoculo y pudo volver a crecer al ser cultivada
Para la bacteria E. coli, el rango de pH de crecimiento es de 0 a 10, esto en base a la informacin
consultada, esto explica que pudiera crecer en todos los cuadrantes de pH en l que fue cultivada
sin dificultad alguna, e inclusive en el pH de 11.
En relacin a la temperatura, su rango de crecimiento es de 7 a 50C , por lo cual se explica asi su
crecimiento en los cuadrantes que fueron tratados a 60C, siendo el tiempo de exposicin corto
como el posible responsable de que sobrevivieran bacterias que pudieron crecer de forma
moderada en el medio de cultivo.

PABLO DANIEL BOCANEGRA HERNNDEZ

La temperatura es uno de los parmetros ambientales ms importantes que condicionan el
crecimiento y la supervivencia de los microorganismos. Durante la presente prctica se hizo uso de
los diferentes cambios de temperatura y la forma en como afectan a dos cepas de E. Coli y
Saccharomyces Cereviceae, en cuanto a su desarrollo, como a su forma de supervivencia. La
temperatura mnima se puede explicar en funcin de un descenso de la fluidez de la membrana,
de modo que se detienen los procesos de transporte de nutrientes y el gradiente de protones, en
nuestro caso 61C/10 min.
Por encima de la temperatura mnima la tasa de crecimiento va aumentando proporcionalmente
hasta alcanzar la temperatura ptima, debido a que las reacciones metablicas catalizadas por
enzimas se van aproximando a su ptimo. En dicha temperatura ptima las enzimas y reacciones
se dan a su mxima tasa posible, en este caso de 61C/10 min a 100C/10 min. Donde se observ
que el crecimiento microbiano fue bastante significativo, ya que la E. Coli es una bacteria termfila
y su principal desarrollo se lleva a cabo a estas temperaturas; mientras que la Saccharomyces
necesita entre 22 y 29C para su crecimiento ptimo
A partir de la temperatura ptima, si seguimos subiendo la temperatura se produce un descenso
acusado de la tasa de crecimiento hasta alcanzar la temperatura mxima. Dicha temperatura
refleja desnaturalizacin e inactivacin de protenas enzimticas esenciales, colapsamiento de la
membrana citoplsmica y a veces lisis trmica de la bacteria. En la prctica se llev el crecimiento
bacteriano a 121C/15 min, pero como haba de suponerse y segn la literatura, se report un
crecimiento nulo, ya que las bacterias murieron a tan elevada temperatura.
Al momento de la lectura al microscopio fue imposible llegar a un conteo definido, pues el
crecimiento de las bacterias era excesivo, por lo que podemos determinar que se lleve a cabo una
dilucin de los medios, para un conteo ms adecuado.
En lo que respecta al manejo de pH y sus diferentes formas de afectar a los microorganismos,
sabemos que la mayora de las bacterias pueden crecer dentro de un margen de pH de su medio,
manteniendo al mismo tiempo su pH interno ptimo prcticamente constante. Por ejemplo,
Escherichia Coli puede crecer bien entre pH 6 y pH 8, pero su pH interno es siempre 7.6 o muy
cercano a ese valor. Aunque los microorganismos pueden crecer en un margen ms o menos
amplio de pH (alrededor de un ptimo), los cambios bruscos pueden ser lesivos (afectando a la
membrana y al transporte de solutos, e inhibiendo enzimas). Si el pH citoplsmico cae
rpidamente hasta 5 o menos, la bacteria puede morir. Es por ello que las bacterias se
desarrollaron en todos los pH que se les presentaron, de igual manera, el conteo de bacterias fue
muy difcil.
El objetivo propuesto se cumpli, ya que se conoci el efecto de cambio de temperatura y pH en
las bacterias y como puede afectar en su desarrollo y crecimiento.
CANO CUEVAS DIANA

Se obtuvieron resultados favorables en esta practica ya que la saccharomyces cerevisiae en la
prueba a la resistencia de diferentes pH, se puedo obtener que a pH 3 la levadura muestra poco
crecimiento, ligeras masas se podan ver, esto es debido a que a un un pH bajo la levadura
muestra un poca adaptacin que permite un bajo crecimiento colonial.
A pH 5, 7 y 9 el crecimiento es muy similar considerablemente, ya que masas ms abundantes de
colonias se pudieron observar debido a que el pH ptimo de la Saccharomyces cerevisiae es de 5,
aunque puede crecer en un rango de 3 a de pH.
Mientras que en el efecto de la temperatura la levadura mostro un crecimiento considerable a 61
C durante 10 minutos, a temperaturas mayores la levadura no resisti y no hubo seales de
crecimiento, esto es debido a que la Saccharomyces debe adaptarse a su medio y a la condicin de
cultivo, principalmente en la composicin y estructura de la pared celular.

La Escherichia Coli es un tipo de bacteria neutrfilo, por lo que el rango de crecimiento ptimo de
pH debe de ser de 6 a 8, como se obtuvieron los resultados, el pH optimo debe de ser de 3 a 9, en
cuanto a la temperatura a pesar de la elevada temperatura usada y el tiempo no lograron crecer
colonias en temperaturas de 100 C a 121 C.

Todos los microorganismos tienen una temperatura ptima de crecimiento. Esto significa que a
determinada temperatura la velocidad de duplicacin (o la velocidad de crecimiento poblacional)
de los microorganismos es mayor. Adems presentan una temperatura mnima y mxima de
crecimiento.
Hay que tener en cuenta que no todos los microorganismos crecen en el mismo rango de
temperaturas ya conocidas.

La mayora de los microorganismos crecen en pH cercanos a la neutralidad, entre 5 y 9, cosa que
no excluye que existan microorganismos que puedan soportar pH extremos y se desarrollen.

As que no debemos olvidar que es importante saber en qu condiciones crece la bacteria para
tener un desarrollo ptimo como en la prctica.

pH

Acidfilos
1.0 5.0
6.5

Neutrfilos
5.5 8.5
7.5

Alcalfilos
9.0 10.0
9.5

Temperatura

Termfilos
25 80 C
50 60 C

Mesfilos
10 45 C
20 40 C

Psicrfilo
-5 30 C
10-20 C
HERNNDEZ HUERTA ALEXIS ALAIN

Todos los microorganismos tienen una temperatura ptima de crecimiento. Esto quiere decir que
a determinada temperatura la velocidad en la que se duplican o crecen los microorganismos es
mayor, adems presentan una temperatura mnima y mxima de crecimiento y por eso debemos
tener en cuenta que no todos los organismos crecen en el mismo rango de temperatura.
Ocurre de forma similar con el Ph aunque la mayora de los microorganismos crecen en pH
cercanos a la neutralidad existen microorganismos que pueden soportar condiciones extremas y
puedan desarrollarse, pero en este caso el rango de Ph optimo es estrecho debido a que como se
muestra en la literatura los mismos microorganismos controlan su Ph interno mediante el
transporte de protones que se encuentran en sus membranas y cuando se enfrentan a un Ph
externo muy desfavorable requieren un gran consumo de energa para mantener su pH interno.
En la prctica se trabaj nicamente con la bacteria E coli con el fin de observar cual eran sus
condiciones ptimas de temperatura y pH utilizndose 2 cajas de Petri, una para cada condicin.
En la caja de temperatura se pudo observar que nuestra bacteria creci en la mayora de las
variantes de temperatura excepto en la seccin del tubo 4 debido a que era una temperatura de
121C lo cual nos indic que esta temperatura es muy extrema para este tipo de bacteria por lo
que se puede concluir que la E coli es termfila facultativa debido a los rangos observados de su
crecimiento.
Dentro de la otra caja (Ph) se observ que este tipo de microorganismos crecen de mejor manera
en medios alcalinos pero sin embargo tambin lo pueden hacer en medios relativamente cidos y
se puede comprobar ya que esta bacteria suele encontrarse en el estmago de las personas y
segn a la clasificacin del Ph puede ser neutrfilo (7.5) Alcalofila (9.5) pero tambin acidofila
(6.5).
Al momento de contar las colonias en el microscopio resulto un poco complicado debido a que el
crecimiento de las colonias fue extenso y no se podan contar.
Es importante mencionar que estas dos condiciones que se trabajaron en la prctica contribuyen
un papel importante en el crecimiento de las bacterias y si no sabemos con qu bacteria estamos
tratando estas seran unas buenas pistas para identificarlas.

YETLANEZI ATZIMBA SANTIAGO PANTOJA

Los agentes fsico-ambientales que rodean y estn en contacto con las bacterias y
microorganismos juegan un papel importante es su desarrollo, crecimiento y reproduccin, ya que
no hay que olvidar que son estas variables las determinantes para nombrar sus caractersticas,
conocer su comportamiento y predecir el mismo, en un trascurso de tiempo en un estudio
especfico.
Fue as el motivo principal de la realizacin de esta prctica, conocer dichos factores que
afectaran el crecimiento de determinados microorganismos, para el desarrollo de dicho
experimento se utilizaron dos cepas distintas de bacterias (saccharomyces cerevisiae y escherichia
coli), sometindolas a cambios de temperatura y pH.
Teniendo el control sobre estas variables podemos manipularlas para que las distintas cepas se
expongan a estas condiciones, siendo en temperatura los siguientes intervalos; 61 C, 100 C, 121
C y en pH 3, 5, 7, 9 y 11.
Como se mencion ambas cepas fueron sometidas a distintas condiciones fsicas que nos darn
mayor informacin de su naturaleza y comportamiento obteniendo la siguiente interpretacin de
los resultados.

En saccharomyces cerevisiae el resultado obtenido de la prueba de resistencia a diferentes pH, se
puede observar que a pH 3 la levadura muestra crecimiento muy leve, ligeras masas son apenas
visibles, siendo an un pH bajo la levadura muestra un mecanismo de adaptacin que permite un
muy pequeo crecimiento colonial. A pH 5, 7 y 9 el crecimiento es muy similar, con masas ms
abundantes de colonias ya que el pH ptimo de la Saccharomyces cerevisiae es de 5, sin embargo
esta puede crecer en un rango de pH de 3 hasta de 6.
En cuanto a la temperatura la levadura mostro un crecimiento considerable a 61 C durante 10
minutos, a temperaturas mayores sencillamente la levadura no resisti y no hubo seales de
crecimiento de la misma. Lo que nos indica que la Saccharomyces debe adaptarse a su medio y a la
condicin de cultivo, adoptando cambios durante la fase de crecimiento principalmente en la
composicin y estructura de la pared celular.

En escherichia coli, es un tipo de bacteria neutrfilo, por lo tanto su rango de crecimiento ptimo
de pH es de 6 8, como se observ en los resultados, tambin crece a pH bajos (3) y altos (9) en
cuanto a la temperatura a pesar de las altos rangos de exposicin y tiempo lograron crecer
pequeas colonias en temperaturas de hasta 100 C a 121 C era y fue imposible el crecimiento.

De forma general, como ya se mencion los agentes fsico ambientales juegan un papel
fundamental en el crecimiento bacteriano, al controlar estas variables se determin cmo se
comportan estos microrganismos, cualquiera pensara que a pH bajos (3) y temperaturas elevadas
mayores a 100 C no crecera nada, sin embargo se trata de microrganismo que presentan una
adaptacin excepcional, en especial la escherichia coli, que prcticamente en cualquier pH y
temperatura se logra adaptar a crecer, por otro lado la levadura es un poco ms especial y solo
creci de forma representativa en sus intervalos ptimos ya mencionados. El incremento de
temperatura puede acelerar o alentar el crecimiento bacteriano, as como la modificacin del pH,
es as como a travs de la prctica se logr ilustrar de forma representativa los efectos que estos
agentes causan en los microrganismos.


VILLARRUEL GARDUO MIGUEL IVAN

BIBLIOGRAFA




http://www.consumer.es/seguridad-alimentaria/ciencia-y-
tecnologia/2004/03/04/11171.php
http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/Seminarioesterilizacion.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/Pasteurizacin
http://es.wikipedia.org/wiki/Mesfilo
http://es.wikipedia.org/wiki/Termfilo
http://enciclopedia_universal.esacademic.com/70802/Psicrfilo

MSDS

NaOH:

NOMBRE DEL REACTIVO: HIDRXIDO DE SODIO
FRMULA: SINNIMOS:

NM. CAS:

NFPA:
NAOH SOSA CASTICA, LEJA,
HIDRATO DE SODIO.
1310-73-2

INFORMACIN GENERAL

RIESGOS A LA SALUD
INHALACIN: INGESTIN: PIEL: OJOS:
Irritante severo Corrosivo Corrosivo Irritacin con dolor, irritacin y
lagrimeo constante
PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS

MANEJO Y ALMACENAJE




HCl:
NOMBRE DEL REACTIVO: CIDO CLORHDRICO
FRMULA: SINNIMOS:

NM. CAS:

NFPA:
HCl CIDO MURITICO,
CLORURO DE HIDRGENO
7647-01-0

INFORMACIN GENERAL
Mortalidad por cncer de pulmn en ratas.
RIESGOS A LA SALUD
INHALACION: INGESTIN: PIEL: OJOS:
Dificultad respiratoria, tos e
inflamacin, espasmo,
gastritis, bronquitis crnica,
etc.

Corrosivo de membranas
mucosas de la boca, esfago
y estmago.
Quemaduras serias,
dermatitis,
fotosensibilizacin.
Quemaduras, reduccin o
prdida total de vista.
PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS


MANEJO Y ALMACENAJE
Utilizar siempre EPP; Almacenar en lugares secos, ventilados, lejos de materiales oxidantes y protegido de daos fsicos.
Lquido amarillo o incoloro con olor penetrante.