UNIVERSIDAD AUTNOMA

METROPOLITANA
UNIDAD IZTAPALAPA
TRIMESTRE 13 P

LABORATORIO DE INGENIERA ENZIMTICA

PRCTICA 5
Efecto de la temperatura en una
reaccin enzimtica.
EQUIPO 3
DOMNGUEZ PEZ JOEL
GUADARRAMA PREZ ROMN
VELZQUEZ MALDONADO DANIEL

PROFESOR SERGIO HUERTA OCHOA


INTRODUCCION.

La temperatura ejerce dos efectos contrapuestos sobre la expresin de la
actividad enzimtica, incrementando por un lado la reactividad del
complejo activo ES y por otro aumentando la velocidad de inactivacin
enzimtica como consecuencia de la alteracin de la estructura
tridimensional activa de la protena enzimtica. Ambos fenmenos pueden
ser convenientemente modelados de acuerdo a relaciones del tipo
Arrhenius, que pueden expresarse en forma generalizada como:

1.

2.

Donde K es la constante cataltica que representa la reactividad del
complejo ES; Ea representa la energa de activacin; Kd es la constante de
inactivacin trmica de la enzima y Ead representa la energa de
activacin del proceso de inactivacin enzimtica, esto es, de la reaccin
de transformacin de la estructura tridimensional activa de la molcula a
una forma desordenada inactiva.
El efecto opuesto genera necesariamente una condicin de temperatura
ptima para cada situacin. Mientras el primer efecto es esencialmente
independiente del tiempo, el segundo es fuertemente dependiente del
tiempo. Una forma usual de modelar el fenmeno de inactivacin trmica
es a travs de una cintica de primer orden:

Donde Kd es la constante de inactivacin trmica de primer orden, que
depende fuertemente de la temperatura (ver ecuacin 2).

OBJETIVOS.

Determinar el efecto de la temperatura en una reaccin enzimtica.
Determinar la energa de activacin (Ea).
Determinar la energa de inactivacin (Ead).

PROCEDIMIENTO


1
Se obtuvieron datos cineticos y se determinarn los parametros V
max
y
K
M
.
2
Con el valor de K
M
y con la relacin [S] = 25 K
M
aseguramos que la
enzima se encuentra en saturacin, con sta [S] se hicieron
experimentos variando la temperatura dentro de un de 20 a 70 C.
3
Con la velocidades obtenidas y la ecuacin de tipo Arrhenius se
determino la energia de activacin.
4
Para determinar la energa de desactivacin se utilizo la ecuacion
diferencial de primer orden.