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CARATULA





























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DETERMINACION DE ACIDO ASCORBICO




I. OBJETIVOS






II. FUNDAMENTO


Se basa en la fuerte capacidad reductora de la vitamina C por
titulacin con el 2,6 dicloroindofenol, cambiando el color azul inicial a
incoloro al ser reducido por el cido ascrbico. Cuando todo el cido
ascrbico se ha oxidado, el dicloroindofenol en exceso colorear la
solucin de rosa, lo que indica el punto final de la titulacin.



III. MARCO TEORICO


3.1. cido Ascrbico : Definicin

El cido ascrbico o vitamina C es una estructura ano diol en los
carbonos 2 y 3. Es un compuesto muy inestable y se oxida fcilmente a
cido dehidroxiascorbico. La falta de la dieta de cido ascrbico en la
especie humana ocasiona la enfermedad carencial denominada
escorbutos.


3.2. (Sinonimia)

Primitivamente el cido ascrbico o vitamina C se le conoci tambin
con el nombre de cido hexuronico, y as mismo con el de cido
cevitaminicos.






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3.3. Formas de presentacin y su relacin con la actividad vitamnica
C


La vitamina C puede presentarse en distintas formas:


a) cido L-ascrbico que es el de ms clara actividad antiescorbtica.
El aspecto es el de cristales blancos , con sabor acido, propiedades
fuertemente reductoras, sensible a la luz y a ciertos metales
pesados y soluble en agua










b) cido dehidroascorbico y tambin con actividad antiescorbtica. Por
reduccin se transforma en cido ascrbico. Se presenta en forma
de cristales blancos, solubles en agua.











c) De cido 2-ceto-Lgulonico. Es un precursor del cido ascrbico. No
tiene actividad antiescorbtica. Se presenta en forma de cristales
blancos









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3.4. Localizacin

El descubrimiento del cido ascrbico se debe a SZENT- GYORGYI (7),
en 1928, quien lo extrajo de las capsulas suprarrenales. Cuatro aos
ms tarde TILLMANS, J. y col. (46), observaron la relacin entre el
contenido de las plantas en esta sustancia reductora y su actividad
antiescorbtica.

El cido ascrbico es sintetizado por las plantas superiores y todos los
animales, con excepcin de los primates (hombre), cobaya, un ave
tropical (Pycnototus caer), y un roedor de la India (Pteropus medius).

Al parecer los microorganismos no forman cido ascrbico pero
tampoco lo necesitan para su crecimiento. Por tanto el cido ascrbico
se encuentra en la naturaleza en las frutas y verduras frescas, y en
algunas glndulas animales (suprarrenales, hipfisis y cuerpo lteo).


3.5. Contenido en vitamina C de las frutas

El contenido en las frutas es distinto segn los autores, su variacin la
vemos en las tablas adjuntas. Tablas nm. 1 y 2.

3.6. Funciones fisiolgicas.

Los cidos ascrbicos y dehidroascorbico forman un sistema redox en el
que el cido semidehidroascorbico acta como intermediario muy
reactivo, este se forma al ceder un solo electrn al cido ascrbico o al
adicionarlo al cido dehidroascorbico. Algunos procesos metablicos
cuya perturbacin produce los sntomas del escorbuto son reacciones
en las que el cido ascrbico es oxidado.

Tabla N 1
Fuente: Tablas cientficas. GEYGI.-1975
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Las alteraciones en la formacin de tejido conectivo cuando existe
hipovitaminosis C son debidas a que la prolina no se hidroliza bajo la
accin del cido ascrbico a hidroxiprolina que es un componente
mayoritario del colgeno. La formacin y el mantenimiento del
colgeno requieren un nivel normal de cido ascrbico que acelera la
sntesis del colgeno

Como agente reductor el cido ascrbico interviene en el metabolismo
de la tirosina, aunque en este caso no se trata de una reaccin de
hidroxilacion. Probablemente protege al enzima acido Para-
Hidroxifenil-Pirubico-Hidrolasa de la inhibicin por sustrato

El cido ascrbico acta tambin como donador de electrones en la
transformacin del cido flico en cido tetrahidrofolico, A esta
relacin entre los cidos ascrbico y tetrahidrofolico puede deberse a
la aparicin de la anemia macrocitica en el escorbuto.

En cambio la anemia hipocromica que acompaa al escorbuto se
explica por la accin del cido ascrbico sobre el metabolismo del
hierro, ya que la vitamina C es necesaria para incorporar el hierro a la
ferritina.

El cido ascrbico ejerce en el organismo animal una accin protectora
contra la deficiencia de otras vitaminas (tiamina, rivoflamina, acido
pantotnico, biotina, cido flico, vit.E, vit. A). Sin embargo no estn
claras aun las relaciones entre la vitamina C y las dems vitaminas.

Contenido en VITAMINA C de distintas frutas. Expresado en mg/100 g. de sustancia
comestible
Albaricoque fresco 7
Cereza fresca 10
Ciruela fresca 6
Fresa fresca 60
Limn fresco (jugo) 50
Limn fresco 45
Mandarina fresca (Citrus nobilis) 31
Manzana fresca (Malus pumija) 5
Melocotn fresco 33
Sandia 7
Naranja 50
Pera fresca 4
Contenido en VITAMINA C de frutas segn varios autores
Frutas STEEP.W
(1942)
MAR-GARET, S.CH.
(1954)
F.A.O
(1955)
CABALLERO,F.
(1959)
GRAN- DE,F.
(1944)
CHANEY
Cerezas negras -------- -------- -------- -------- 15 --------
Grosellas -------- -------- -------- -------- 100 --------
Tabla N2
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3.7. Biosntesis

La biosntesis del cido ascrbico se realiza a partir del cido UDP-
D-Glucoronico que procede do la glucosa, por la va de los Nucleosido
Difosfo Hexosas formadas por la accin de las fosforilasas. Una de las
ms importantes es la conversin de los restos D - glucosilicos en D-
galactosilicos, que tienen efecto en la epimerizacion enzimtica de la
UDP Glucosa para formar el Uridin Difosfato de Galactosa. La enzima
que cataliza esta reaccin es el Uridin Difosfato -Glucosa - Epimeraza
requiriendo NAD de modo absoluto.
La Galactosa 1 Fosfato resultante puede convertirse en UDP-Galactosa
Por una de las dos reacciones posibles:

a. La primera es la catalizada por Fosfato Uridil Transferasa
b. La segunda enzima capaz de utilizar la galactosa 1 Fosfato es el
Uridin Difosfato Galactosa Pirofosforilasa.

L
a

UDF-Glucosa puede experimentar su oxidacin a acido UD - D
Glucoronico.

3.8. Mtodos de valoracin

Son variadas las clasificaciones de los distintos mtodos empleados
para la determinacin de la vitamina C.

Podemos agruparlos por los siguientes conceptos:

Biolgicos :

Limn -------- -------- 50 50.93 50-100 49
Naranja -------- -------- 50 65.37 50-100 49
Toronja -------- -------- -------- 50-100 49
Fresas -------- -------- 60 63.52 50 --------
Mandarinas -------- -------- -------- -------- 25 --------
Arndanos
Rojos
-------- -------- -------- -------- 15 --------
Albaricoques -------- -------- 6 11.54 12 7
Melocotn -------- -------- -------- -------- 8 --------
Meln -------- -------- -------- -------- 8 --------
Pia -------- -------- -------- -------- 8 --------
Ciruela 8 5 5 4.51 4 5
Manzanas -------- -------- 5 1.75 2-15 4
Peras 5 3 4 4.00 1-3 --------
Fuente: Dialnet-VitaminaCAcidosAscorbicosYDehidroascorbicosAzucare-61645.pdf
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a. Fisiolgicos
b. Bioqumicos
c. Enzimticos

Los mtodos fisiolgicos y bioqumicos son poco utilizados debido, a
veces a su coste y otras a su lentitud.

Oxidomtricos:

Estn basados en la medida de la capacidad reductora del cido
ascrbico frente a los agentes reductores adecuados. El inconveniente
de estos mtodos es su escasa especificidad.

Una de las valoraciones ms sencillas es la iodomtrica.

Dentro de este grupo una de las tcnicas ms empleadas es la de
TILLMANS, J (46), se basa en la reduccin del 2 6 Dicloro Fenol
Indofenol.

Existen modificaciones a este mtodo. FUJITA, IWATKE, MARTINI
BONSTGNORE, W; Cuyo fundamento es la decoloracin que
experimenta una solucin de azul de metileno, cuando se ilumina en
presencia de vitamina C

Otros mtodos dentro del grupo son los basados en la transformacin
del cido ascrbico en otros compuestos

Fsicos:

Dentro de los mtodos fsicos podemos incluir, en primer lugar los
polarograficos, basados en la determinacin del potencial de
oxidacin del acido ascrbico en soluciones acidas. Son mtodos que
parecen ofrecer, una mayor especificidad.

Cromatgraficos:

Estos mtodos no son precisamente los ms satisfactorios para zumos
de frutas naturales, debido a las interferencias de materias colorantes
presentes en aquellos

Fluoromtricos:

Se basan en la medida de la fluorescencia a 430 nm, tras la oxidacin
del cido ascrbico y su reaccin posterior con la ortofenilendamina


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IV. MATERIALES Y MTODO


4.1. Materiales:

4.1.1. Muestra

Zumo de Naranja


4.1.2. Instrumentos

Bureta
Beaker
Matraz de erlenmeyer
Fiolas
Pipeta de 20 ml
Rejilla
Trpode



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4.1.3. Reactivos:

Solucin 2,6 dicloroindofenol (DIP)
Solucin de cido actico 10%


4.2. Mtodo:





V. RESULTADOS


VI. CONCLUSIONES


VII. DISCUSIONES

VIII. OBSERVACIONES


IX. RECOMENDACIONES

X. BIBLIOGRAFIA

XI. ANEXOS

11.1. Cuestionario