Recombineria en las bacterias: ingeniera del ADN usando recombinacin homologa.

La recombinera es una poderosa metodologa para modificar el ADN bacteriano, ya sea cromosomal o plasmdico. Esta
novedosa herramienta utiliza las funciones Red del bacterifago parallevar a cabo eventos de recombinacin
homloga. Comparado con tcnicas clsicas de ingeniera gentica, la recombinera no usa enzimas de restriccin ni ADN
ligasas.
La recombinacin homloga se define como el intercambio recproco de informacin gentica entre dos
molculas de ADN idnticas, la recombinacin ha sido ampliamente estudiada en bacterias como
E.coli y la levadura Saccharomyces cerevisiae (Krogh y Symington, 2004).

El trmino recombineering o recombinara en espaol, fue acuado por Ellis y colaboradores
ecientemente (2001) y deriva de las palabras en ingls: Recombination-Mediated Genetic Engineering
(Ingeniera Gentica mediada por Recombinacin). El uso de la recombinera ha sido principalmente
estudiada en la bacteria Escherichia coli, la cual se ha convertido en un modelo de estudio para otras bacterias
(Datta etal.,2006; Sawitzke etal.,2007).

Las aplicaciones de la recombinera son diversas; se puede realizar prcticamente cualquier modificacin en
el genoma bacteriano. Adems, se puede llevar a cabo la clonacin de secuencias de ADN en cualquier vector
sin el uso de enzimas de restriccin y ligasas .

En el articulo ledo se habla especficamente de la bacteria E.coli, en esta bacteria los eventos de
recombinacin homloga pueden iniciar por medio de las siguientes vas de recombinacin;
RecBCD, RecFOR y RecET
El complejo RecBCD inicia la recombinacin con ADN de doble cadena, mientras que el complejo RecFOR
(junto con otras protenas) inicia el evento usando ADN con discontinuidades de cadena sencilla, se sabe que
la va RecBCD es mucho ms eficiente que RecFOR (~100 veces ms).

La funcin final de cada va de recombinacin es generar extremos de ADN 3, los cuales son necesarios para
el evento de invasin y apareamiento de regiones complementarias en el ADN, etapa dependiente de la
protena RecA. Durante esta etapa de la recombinacin se forma una estructura de cuatro cadenas de ADN
conocida como el intermediario de Holliday .



La recombinacin homloga en E. coli depende en un alto grado de la funcin del gen recA sin embargo, la
recombinacin del fago es muy eficiente tanto en una mutante recA, como en la cepa silvestre de E.coli
Esto se debe a que el genoma de contiene los genes de recombinacin Red;exo, bet y gam.