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DETERMINACIN DEL HEMATROCITO
Imagen 1. Centrifugacin del capilar.
Imagen 2. Midiendo el hematrocito
Colocar en un tubo 5 ml
de solucin diluyente de
Drabkin
Mezclar bien la muestra
y posteriormente tomar
20 microlitros
Dejar en reposo durante
10 minutos
Leer a 540 nm
empleando como blanco
el agua destilada o
solucin diluyente
Leer densidad ptica y
emplear frmula
RESULTADO:
Resultado Valor de referencia
52% 44 a 54%
CLCULO DE LOS NDICES ERITROCTICOS
1.- VCM (Volumen Corpuscular Medio)=
VCM=
2.- HCM (Hemoglobina Corpuscular Media)=
34.71 pg
3.- CCMH (Concentracin Corpuscular Media de
Hemoglobina)=
(
OBSERVACIN DE ANORMALIDADES DE LOS ERITROCITOS
FUNDAMENTO:
Se basa en la elaboracin de extendidos sanguneos y su tincin con un
colorante policromo, lo cual permite la observacin de la morfologa de sus
elementos formes.
Los colorante policromos de azul de metileno y eosina derivados del mtodo
original de Romanowsky sirven para la tincin deferencial de la mayora de las
estructuras normales y anormales de la sangre. La mayor parte se disuelve en
alcohol metlico y combinan la fijacin y la tincin. Se han ideado numerosos
mtodos para la preparacion y aplicacin de estos colorantes siendo los ms
conocidos los de Giemsa y Wright.
Colorante de Wright: este colorante se llama policromtico porque produce
varios colores, de acuerdo a la composicin qumica de los componentes
celulares. Es una solucin en alcohol metlico de un colorante cido y otro
bsico. El citoplasma de los eritrocitos es acidfilo por lo que toma el colorante
cido, tindose de color rosado. Los ncleos en caso de encontrarse
eritroblastos y algunas otras estructuras se tien con el colorante bsico, por
lo que se denominan basfilas. El colorante de Wright es uno de los mejores y
ms empleados, permitiendo la observacin de la morfologa de los glbulos
rojos.
PREGUNTAS GUA:
1. Menciona las distintas anormalidades morfolgicas que pueden
presentarse en los eritrocitos
1. ANISOCITOSIS. Anormalidades en el tamao.
Macrocitos: Son eritrocitos con dimetro superior a 8.5 micras. La
macrocitosis est usualmente acompaada de un PVC por encima de 100 fL. Su
aparicin puede estar asociada a: Deficiencia de vitamina B12 y/o cido flico.
Microcitos. Recibe este nombre el glbulo rojo que presenta un dimetro
inferior a 6.0 micras, la microcitosis est usualmente acompaada de un PVC
por debajo de 75 fL.
Megalocitos. Son los grandes macrocitos ovales, clulas donde se combina una
alteracin del tamao y de la forma, pueden llegar hasta tener 12 micras de
dimetro. Caractersticamente se observan en anemias megaloblsticas.
2. POIKILOCITOSIS. Anormalidades en la forma.
Equinocito: Caractersticamente aparece como una clula dentada que presenta
sobre su superficie pequeas progresiones redondeadas a manera de bombas o
vesculas de tamao uniforme y simtricamente distribuidas que con el MEB,
semejan un erizo de mar. Son comunes en neonatos y se observan
transitoriamente despus de transfusiones masivas de sangre almacenada
(lesin de almacenamiento) y caracterizan el agotamiento metablico de la
clula roja senil.
Acantocito: Al microscopio electrnico esta clula se observa como una
estructura densa e irregularmente contrada. Bajo el microscopio de luz es un
hemate con escasas proyecciones espiculadas que no presentan una
distribucin homognea y varan en longitud y nmero. Los acantocitos se
generan cuando las clulas rojas normales se exponen a condiciones que
modifican el contenido lipdico de su membrana, alterando la relacin colesterol
libre / fosfolpidos en ciertas zonas de membrana.
Los acantocitos tambin puede observarse en cirrosis alcohlica con anemia
hemoltica, en algunos casos de deficiencias de PiruvatoKinasa.
Estomatocito: El estomatocito se define como una clula unicncava que en los
extendidos coloreados con Wright presenta una depresin central elongada
con apariencia de boca o estoma (de all su nombre) que sustituye el rea de
palidez central redondeada de los discos bicncavos.
DEGMACITOS
Tambin llamadas por su aspecto clulas mordidas, son hemates en los que la
hemoglobina ha sido desnaturalizada y precipitada, con lo que las clulas
muestran diferentes defectos. Estas clulas suelen ser eliminadas por el bazo.
Se presentan en: anemia inducida por frmacos- deficiencia en glucosa-6-
fosfato deshidrogenasa - talasemia- hemoglobinopatas inestables
Esferocito: Hemates maduros de un dimetro entre 6.1 y 7 mm, esfricos y
uniformemente coloreados. Tienen un volumen algo ms pequeo que las clulas
normales y una concentracin mayor de hemoglobina Se presentan en las
siguientes condiciones: Esferocitosis hereditaria (Enfermedad de Minkowsky-
Chauffard)- Anemias inmunohemolticas- Hiperesplenismo - Quemaduras
graves- Hipofosfatemia- Septicemia por ClostridiumWelchii.
Eliptocito u ovalocito. Es bsicamente un disco bicncavo oval con extremos
redondeados, su forma vara desde una simple distorsin ligeramente oval
hasta casi cilndrica elongada con polarizacin de la hemoglobina. En los
extendidos de sangre de individuos normales, las clulas elpticas u ovales
usualmente constituyen menos del 1% de los eritrocitos. Proporciones un poco
ms altas se observan en pacientes con anemias, particularmente
megaloblsticas y microcticashipocrmicas. La presencia de un nmero
significativo de clulas elpticas (20% - 75%) en sangre perifrica se asocia
con un desorden clnico y genticamente heterogneo conocido como
ELIPTOCITOSIS HEREDITARIA (EH). El defecto bioqumico de los
eliptocitos hereditarios involucra las protenas de esqueleto de membrana.
Se encuentran las siguientes condiciones: eliptocitosis hereditaria- anemia
ferropnica-anemia mieloptsica- anemia megaloblstica- talasemia - anemia
sideroblstica - anemia congnita diseritropoytica
Clula falciforme o drepanocito. Es una clula elongada con extremos
puntiagudos o espiculados que semejan una hoz o media luna. La patologa
bsica de la transformacin falciforme est directamente ligada con la
concentracin de hemoglobina S (B6 Glu Val), que tiene la propiedad de
polimerizarse en condiciones de hipoxemia, acidosis, altos niveles de 2-3 DPG y
deshidratacin del glbulo rojo.
Dacriocito o clula en gotera. Se refiere este trmino a la clula roja
caracterizada por una elongacin nica asumiendo una forma periforme o
gotera rasgada. Su gnesis permanece oscura. Constituye un hallazgo ocasional
en anemias megaloblsticas, talasemias y mielofibrosis. Tambin aparecen
estos hemates en la hematopoysisextamedular (mielofibrosis, anemia
mieloptsica).
ESQUISTOCITO
Hemates maduros, de tamao y formas irregulares o fragmentos celulares,
debidos a roturas de la membrana. Se presentan en:- anemias hemolticas por
fragmentacin mecnica - sndrome hemoltico urmico- prpura
trombticatrombocitopnica- microangiopatas del embarazo y puerperio.-
Coagulacin intravascular diseminada
Queratocito o clula mordida. Son los hemates parcialmente fragmentados,
producto de la funcin pitting del bazo, en la que la clula pierde una porcin
de la membrana sin alterar el contenido intracelular de la hemoglobina. Al
observarlos coloreados con Wright, en los extendidos de sangre perifrica,
presentan proyecciones que semejan cuernos, resultantes de la ruptura de la
vacuola que se forma alrededor del cuerpo de inclusin. Aparecen en entidades
que cursan con la formacin de cuerpos de Heinz, particularmente en la
deficiencia de glucosa 6 fosfato deshidrogenasa y talasemias.
Se presentan estos hematis en: glomerulonefritis - deficiencia de
piruvatokinasa- hemlisis por fragmentacin mecnica intravascular asociada a
anormalidades valvulares - anemia hemoltica microangioptica
3. INCLUSIONES CITOPLASMTICAS. Anormalidades citoplasmticas.
Punteado basfilo. Agregados anormales de ribosomas. En sndromes
talasmicos, intoxicacin por plomo, deficiencia de hierro, sndromes que se
acompaen de eritropoysis ineficaz. Coloracin Wright. Cuerpos de Howell
Jolly. Remanentes nucleares. En asplenia y estados hipoesplnicos, anemia
perniciosa y anemias severas por dficit de hierro. Coloracin Wright.
Anillos de Cabot. Remanentes nucleares en forma de anillos circulares doblados
sobre si mismos o en figura de ocho. En intoxicacin por plomo, anemia
perniciosa y anemias hemolticas. ColoracinWright.
Cuerpos de Heinz. Hemoglobina agregada o desnaturalizada. En pacientes con
sndromes talasmicos o de hemoglobinas inestables, en el estrs oxidante
cuando hay deficiencias enzimticas de la va de pentosas principalmente y
pacientes con asplenia. Coloracin azul de cresil brillante.
Siderocitos. Representan hierro no hemoglobnico dentro de los eritrocitos. Se
observan aumentados en pacientes esplenectomizados y en pacientes con
infecciones crnicas, anemia aplstica o en anemias hemolticas.
4. CROMASIA. Variaciones en el contenido de hemoglobina (color). Los
eritrocitos normales tienen un PCH de aproximadamente 30 pg. En frotis
teidos, el eritrocito tiene un rea central de palidez de ms o menos la
tercera parte del dimetro de la clula. En ciertos trastornos las clulas llegan
a contener menos hemoglobina de lo normal. El nico eritrocito que dispone de
ms hemoglobina de lo normal en relacin con su volumen es el esferocito, el
que carece de un rea central de palidez y se tie en forma uniformemente
densa.
Normocroma. Trmino utilizado para indicar que el eritrocito contiene una
cantidad de hemoglobina igual al nivel normal determinado por la concentracin
de hemoglobina corpuscular media (PCHC).
Hipocroma. Se origina por una sntesis anormal de hemoglobina, asociada a
deficiencia de hierro, anemia sideroblstica, talasemia y anemia de las
enfermedades crnicas. Se observa el eritrocito con una mayor palidez central.
Hipercroma. Trmino que no representa una situacin real y que por lo tanto
no se acoge.
Policromatoflia. Los eritrocitos policromatfilos (reticulocitos), suelen ser ms
grandes que las clulas normales en los frotis de sangre teidos con
Romanowsky. El tinte azuloso es producido por la presencia de RNA residual en
el citoplasma. Cantidades abundantes de estas clulas se presentan cuando hay
disminucin en la supervivencia del eritrocito o hemorragia, y una mdula sea
hiperplsicaeritroide.
Knizocito.
Deriva su nombre de la similitud con una canasta, presenta una distribucin de
la hemoglobina a manera de banda central que deja espacios no coloreados a
ambos lados. Se observa asociado a anemias hemolticas. Su gnesis no es clara.
Se observan en la sangre de los astronautas a los 20-30 das despus del
lanzamiento, desapareciendo hacia los 3 meses.
LEPTOCITOS LEPTOCITOSIS
Hematis maduros con un rea en la que se concentra una mayor cantidad de
hemoglobina en una zona central clara, lo que les confiere el aspecto de diana.
Tambin reciben el nombre de codocitos o de hematis en diana.
Se presentan en las condiciones siguientes: Talasemia (enfermedad de Cooley)-
Hepatopatas con dficit de lecintincolesterol-aciltransferasa -
Hemoglobinopatas de tipo C - Postesplenectoma y anemias ferropnicas muy
graves
PICNOCITOS: Hemates maduros con un rea lateral clara, concentrndose la
hemoglobina en el otro lado. Se observan en pequea cantidad en los nios
pequeos, siendo ms abundantes en las viremias infantiles y otros desrdenes
hemolticos.
MATERIAL:
Portaobjetos y cubreobjetos
Puente de tincin
REACTIVOS:
Colorante de Wright
Solucin amortiguadora de fosfatos
Aceite de inmersin
TCNICA:
RESULTADOS:
No se observaron anormalidades morfolgicas de los eritrocitos
OBSERVACIONES:
Preparar frotis sanguneo
Colocar la placa con la
extencin secada al aire en
un puente de tincin
Cubrir la extencin con
lquido colorante
Dejar reposar durante 3
minutos
Aadir la solucin
amortiguadora , para
mezclar , se sopla con
suavidad en varios puntos
de la placa
Dejar reposar durante 8 a
10 minutos esperando la
paricin de una capa
metlica verdosa
Quitar colorante con agua
destilada y quitar el
exceso de aquel,
manteniendo horizontal la
placa
Secar la preparacin al aire
Observar con objetivo de
inmersin en aceite
Clasificar y anotar las
anormalidades que se
observen en los
eritrocitos.
Observacin en objetivo de
inmersin con aceite,
eritrocitos sanos.
CONCLUSIN:
En esta prctica aprendimos a identificar las anormalidades morfolgicas que
pueden presentar las clulas sanguneas. Las anormalidades morfolgicas de los
eritrocitos se presentan en tres categoras: Anormalidades en el tamao,
anormalidades en la forma y anormalidades citoplasmticas.
RESULTADOS FINALES DE LA PRCTICA:
Nombre del paciente: Marco Antonio Prez
Edad: 21 aos
PRUEBA REALIZADA RESULTADOS VALORES DE
REFERENCIA
Recuento de glbulos
rojos
3,920000 millones/mm
3
Hombre adulto:
5 a 6 millones/mm
3
Concentracin de Hb 13.61 g/dl Hombre adulto:
14.5 a 18 gr/dl
Hematrocito 52% Hombre adulto:
44 a 54%
V.C.M. 132.65 fl 82 a 98 fl
H.C.M. 34.71 pg 27 a 22 pg
C.C.M.H. 26 % 31 a 35 %
BIBLIOGRAFA:
- http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-2010/myl101-2b.pdf
- Fuentes Arderiu X. Castieiras Lacambra M.J. Queralt Compa J. M.
BIOQUMICA CLNICA Y PATOLOGA MOLECULAR. Vol. I. 2 Ed.
Editorial Revert, S. A. 1998. Pg. 461.
- http://www.clinicadam.com/salud/5/003644.html
- http://www.iqb.es/hematologia/atlas/ovalocito/ovalocito.htm
- Hematologa: fundamentos y aplicaciones clnicas Bernadette F. Rodak
Ed. Mdica Panamericana, 2005 - 838 pginas.
- http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003489.htm