DIAGNOSTIC SEROLOGIC

IN INFECTIA HIV/SIDA



1. DIAGNOSTIC SEROLOGIC

TESTE DE TRIAJ- sensibilitate inalta
ELISA
TESTE RAPIDE

TESTE DE CONFIRMARE- specificitate inalta
WESTERN BLOT
RADIOIMUNOPRECIPITAREA (RIPA)
IMUNOFLUORESCENTA INDIRECTA

2. DETECTIA DIRECTA A VIRUSULUI
SAU A PRODUSELOR VIRALE
IZOLARE VIRALA
DETECTIA ANTIGENEMIEI p24 ELISA de detectie a Ag virale
DETECTIA ACIDULUI NUCLEIC VIRAL (ARN HIV PLASMATIC)
TESTE DE TRIAJ
ELISA de detectie a Ac antivirali






ELISA de detectie a anticorpilor antivirali
TEHNICA INDIRECTA

ETAPE
1. Incubare ser pacient 1h la 37C
2. Spalare
3. Incubare conjugat (Ac anti IgG uman x enzima)- 1h la 37C
4. Spalare
5. Incubare substrat 20 30 min la temp camerei
6. Citire la spectrofotometru DO probe, martori, cut off, zona gri
Spalator
automat
Distribuirea probelor cu
pipeta automata
Spectrofotometru

WESTERN BLOT
TESTE DE CONFIRMARE
Tehnica
WESTERN BLOT

1. SDS-PAGE
2. BLOT (transfer)
3. DETECTIA
ANTICORPILOR

WESTERN BLOT detectia Ac serici




Substrate
Stop
color
Antiviral antibody
Western blot
in infectia HIV
gp160
gp120
gp41
p66
p31
p24
p17
p10/11
p7/9
p51
p55
Criteriul minim de
pozitivitate

2 env
+
1 gag



ELISA
POZITIV IN DUPLICAT



WESTERN BLOT
NEGATIV=

ABSENTA
INFECTIEI HIV





! Ferestra
serologica
risc rezidual al
transfuziei = 2/1 milion
NEGATIV
INDETERMINAT
- repeta la 6-8 saptamini
- alt test de confirmare
POZITIV=

INFECTIE HIV
Ag p24- 1.48/1 milion
ADN proviral1.48/1 milion
ARN HIV 1.01/1 milion
DIAGNOSTIC SEROLOGIC HIV