FACTORES QUE AFECTAN A LA ACTIVIDAD

ENZIMTICA
1. PLANTEAMIENTO DE HIPTESIS
1. Cuanto ms sustrato se aade, la formacin de molculas de producto ser mayor
hasta que se sature la enzima, momento en el que no se formar ms producto. El
proceso de saturacin tiene lugar a partir de 4g de sustrato.

pH3
0,5g
1g
2g
4g
8g

pH5
19
39
82
96
96

pH7
39
81
168
198
198

pH9
72
145
300
350
350

pH11
45
91
189
223
223

24
49
103
121
121

2. La velocidad mxima de la reaccin se produce a un pH ptimo. No necesariamente

tiene que ser proporcional la velocidad de reaccin con el pH.

pH3
pH5
pH7

0,5
19
39
72

1
39
81
145

2
82
168
300

4
96
198
350

8
96
198
350

2. PROTOCOLOS
2.1. PROTOCOLO [S]
Manteniendo el pH constante en cada uno de los 5 tubos de ensayo, variamos la cantidad
de sustrato que aadimos en cada tubo (0,5g; 1,0g; 2,0g; 4,0g; 8,0g), y como suponemos
que la concentracin de enzima es constante, sabemos la cantidad de sustrato que
necesitamos para que se alcance la velocidad mxima de reaccin.
2.2. PROTOCOLO pH
Una vez que conocemos la cantidad de sustrato que nos hace falta para alcanzar la
velocidad mxima de la reaccin, lo que mantendremos constante ahora ser la cantidad
de sustrato, que ser igual en todos los tubos y variamos el pH de cada uno de ellos.

3.Los resultados expresados grficamente.

Como afecta la variacin de pH

n moleculas de productos (10^6)

400
350
300
250

ph3

200

pH5

150

pH7
pH9

100

pH11

50
0
0,5

g sustrato

Determinacin de pH ptimo
400

n moleculas

350
300
250

0.5g

200
150

1g

100

2g

50

4g

0
pH3

pH5

pH7
pH

pH9

pH11

4. Describir la relacin entre la concentracin inicial de sustrato y la

velocidad inicial de una reaccin catalizada.
En la primera etapa de la reaccin, donde se forma el complejo enzima-sustrato, la relacin
entre S0 y V0 es directamente proporcional cuando la [S]0 es pequea, diciendo que la reaccin
es de primer orden (lineal). Cuando la [S]0 es demasiado elevada, la enzima se encuentra
saturada por el sustrato y la velocidad de reaccin ya no depende de [S]0, alcanzando su
velocidad mxima (Vmx).

5. Cul es la velocidad inicial mxima para esta enzima a pH 7?

Podramos obtener un valor mayor? Cmo podras comprobarlo?
Si queremos conocer cul es la velocidad inicial (V0) de la reaccin lo haremos segn la frmula
de la cintica enzimtica de Michaelis-Menten:

Si en cambio lo que queremos es saber la velocidad mxima de la reaccin, debemos mirar en

la grfica que valor es el ms alto para un determinado pH, en nuestro caso pH 7, siendo este
valor 350x106 molculas/min. No podramos obtener un valor mayor puesto que la enzima ya
se encuentra saturada y no sera capaz de seguir formando productos puesto que no habra
enzimas libres disponibles para catalizar el sustrato.
Para comprobarlo aadimos ms sustrato y veramos que la velocidad mxima de la reaccin
enzimtica se mantiene constante, por lo que no se formar ms producto.

6. Explica por qu la velocidad inicial mxima de reaccin no se puede

alcanzar para valores bajos de [S].
No se puede alcanzar porque la enzima tiene poco sustrato para catalizar formando poca
cantidad de productos.

7. Qu indica la forma de cada curva en la grfica del nivel de pH? Qu

indican los datos sobre el nivel de pH ideal para esta reaccin
enzimtica? Qu pasa cuando el valor va por debajo o por arriba del pH
ptimo?
La forma que tienen las curvas en la grfica de pH ptimo nos indica que existe un
determinado pH en el que la velocidad de la reaccin enzimtica es mxima. Si el pH est por
encima o por debajo del pH ptimo, las enzimas no estarn formando la mxima cantidad de
productos que pueden alcanzar, es decir, la velocidad mxima de la reaccin enzimtica no
ser alcanzada.

8. Las enzimas funcionan ms eficientemente a una temperatura de una

clula tpica, supongamos que es de cerca de 37C. El aumento o
disminucin de temperatura respecto de ese valor puede reducir
significativamente la velocidad de reaccin. Trata de relacionar esto con
el fenmeno de la fiebre en los animales homeotermos.

A altas temperaturas las enzimas se desnaturalizan y ya no son capaces de realizar su funcin.

Los sustratos dejan de enlazarse con los centros activos de las enzimas, de modo que la
velocidad de reaccin disminuye notablemente alterando el metabolismo.
Las enzimas tienen un intervalo ptimo de temperaturas en el cual su funcin es la "ideal" y
suele estar en torno a los 37C de temperatura corporal. Segn te alejas por arriba o por abajo,
las enzimas van perdiendo su eficacia, las reacciones qumicas se van desarrollando peor y es
entonces cuando comienza a haber fallos orgnicos, muchas veces en cadena. Si se superan los
42C puede ocasionar la muerte, de ah que se deba vigilar que la fiebre no aumente en
exceso.

9. Fueron tus hiptesis rechazadas?

Las hiptesis fueron aceptadas puesto que en el caso de la primera es cierto que a mayor
cantidad de concentracin de sustrato, la velocidad ser mayor hasta alcanzar el punto de
saturacin de la enzima.
La hiptesis segunda es aceptada puesto que se comprueba que la velocidad de reaccin
mxima ocurre a un pH ptimo, siendo esta velocidad menor o mayor respectivamente si
estamos por debajo o por encima de este valor ptimo.