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Université Abou Bekr Belkaid Tlemcen

Enseignants : A.Bedrane & F.Lahfa

Travaux dirigés

Exercice 1 :
1. Un rotor d’ultracentrifugeuse tourne à 40 000 tours par minute.
Calculer l’accélération γ (m s-2) existant à 10 cm de l’axe du rotor.
2. A combien de fois la pesanteur (g = 9,81 m s-2) cette accélération est-elle égale ?

Exercice 2 :
Une solution diluée de tubuline de cerveau de veau (ύ = 0,727 cm 3 g -1 ) est soumise à une ultracentrifugation
(21 300 tours min-1) ,à 20 °C.Une fois atteint l’équilibre de sédimentation, on mesure c pour différentes valeurs
de r.
r(cm) c(gl –1)
7 0,162
7,02 0,251
7,04 0,382
7,06 0,588
7,08 0,912
7,10 1,377
Après avoir porté log c en fonction de r2 et déterminé la pente de la droite obtenue,
Déterminer le poids moléculaire de la tubuline de cerveau de veau.

Exercice :3
Une solution diluée de la protéine«0,62» de la laine ( ύ=0.705 cm3 g-1) est soumise à ultracentrifugation (28 000
tours min-1), à 20°C.Une fois atteint l’équilibre de sédimentation , On mesure l’absorbance A290, à 290 nm, pour
différentes valeurs de r :
r(cm) A290
6,93 0,204
6,95 0,225
6,97 0,248
6,99 0,273
7,01 0,302
7,03 0,333

Déterminer le poids moléculaire de la protéine «0,62».

Exercice 4 :
A l’aide des données du tableau ci –dessus ,indiquez quel principe d’ultracentrifugation vous choisiriez pour
séparer d’une part les ribosomes et des polyribosomes , d’autre part de l’ADN et de l’ARN d’un extrait d’acide
nucléiques ?

QCM 1 : la séparation des ribosomes et des polyribosomes d’une fraction microsomique :


A. Peut être effectuée en recourant à une ultracentrifugation différentielle.
B. Peut être effectuée en recourant à une ultracentrifugation de zone.
C. Peut être effectuée en recourant à une ultracentrifugation de zone isocénitique.
D. Peut être effectuée en recourant à une ultracentrifugation isopycnique.
E. Ne peut pas être effectuée par une technique d’ultracentrifugation.

QCM 2 : la séparation de l’ADN et de l’ARN d’un extrait d’acides nucléiques :


A. Peut être effectuée en recourant à une ultracentrifugation différentielle.
B. Peut être effectuée en recourant à une ultracentrifugation de zone.
C. Peut être effectuée en recourant à une ultracentrifugation de zone isocinétique.
D. Peut être effectuée en recourant à une ultracentrifugation isopycnique.
E. Ne peut être effectuée par une technique d’ultracentrifugation.

Particules ou molécules Densité Coefficient de sédimentation (S)


Membranes plasmiques 1,12 105 à 106
Lyosomes 1.18 2 x 104
Reticulum endoplasmique
granulaire 1,2 10 x 10 000
Mitochondries 1,2 104 à 105
Protéines 1,3 2 à 20
Ribosomes eucaryotes : petite SU 1,57 40
Ribosomes eucaryotes : grande SU 1,57 60
Ribosomes eucaryotes assemblés 1,57 80
Polyribosomes 1,57 160 à 1 000
ADN 1,68 10 à 1 000
ARN 2 2 à 100