Ao de la Industria Responsable y del Compromiso Climtico

UNIVERSIDAD NORBERT WIENER

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

EPEX
Practica N 13: Identificacin de Lactonas en las
Hojas de Matricaria Chamomilla L. por Mtodos
Cromatogrficos
DOCENTE:

Flix Veliz, Luis Miguel

ALUMNOS:

GUTIERREZ CACHIQUE, Pierina

ROJAS CAPCHA, Katherine
ROMAN CARBAJAL, Jorge
RUMICHE PINGO, Lesli
SALAZAR BARRIOS, Evelin
SERVAN MELENDEZ, Janet

CURSO:

Qumica Orgnica II

CICLO:

FBX4N1
2

014

I.

En el presente informe se

INTRODUCCION

realiza la Identificacin de Lactonas por Mtodos

Cromatogrficos las cuales pueden separarse y analizarse bien sea por cromatografa
en columna o cromatografa en capa fina.

Asimismo conforme se revise este informe se reconocern algunas caractersticas sobre

la coloracin, la fluorescencia, el cambio de color, por medio de los mtodos
cromatogrficos aplicados en el laboratorio, adems de otras tcnicas para reconocer
esteroides y flavonoides tanto en las hojas de manzanilla como en nuestra planta de
investigacin, que es la Mua.

A continuacin se explica y conoce las tcnicas por cromatografa en capa fina para la
identificacin de lactonas en las Hojas de Matricaria Chamomilla L. (Manzanilla) por
mtodos cromatogrficos; esto debido a que en la prctica anterior de las hojas y flores de
manzanilla, solo las hojas dieron positivo (aunque o se observo el espejo de plata, si se
formo un precipitado negro) con el reactivo de Tollens en las Pruebas generales para
lactonas sesquiterpnicas y a esteroides con el Reactivo de Liberman-Bouchardt.

II.

MARCO TEORICO:

Una lactona es un compuesto orgnico del tipo ster cclico. Se forma como producto
de la condensacin de un grupo alcohol con un grupo cido carboxlico en una misma
molcula. Las estructuras ms estables de las lactonas son los miembros con 5 anillos
(gama-lactonas) y los de 6 anillos (los delta-lactonas), por razn de la menor tensin
en los ngulos del compuesto. Las gama-lactonas son tan estables que en la
presencia de cidos diluidos a temperatura ambiente, stos de inmediato sufren
esterificacin espontnea y ciclizacin sobre la lactona. Las beta-lactonas existen en
la qumica orgnica, pero tienen que ser preparados por mtodos especiales.

Las lactonas se pueden considerar como esteres internos de los cidos

hidroxicarboxilicos y se distingue entre lactonas alfa, beta, gama y delta de anillos
mayores. Las lactonas derivados de los cidos carboxlicos alifticos se nombran
aadiendo el sufijo lido al nombre del hidrocarburo no hidroxilado del mismo nmero
de tomos de carbonos.

Nomenclatura:

Se nombran agregando el sufijo lactona al hidrocarburo del cual proviene el cido

carboxlico.
El tamao del ciclo suele indicarse con una letra griega (-, -, -, -lactonas) que le
corresponde en la nomenclatura de la Mientras que, en general, las -lactonas
se pueden detectar en disolucin y las -lactonas solo se pueden

obtener

medio de procesos especiales, y -lactonas se obtienen fcilmente a

partir

los correspondientes hidroxicidos. Los representantes ms importantes son

solo
por
de
la

-butilactona y las y -valerolactona.

Sntesis de Lactonas:

Obtencin; adems de por los mtodos generales, algunas lactonas se obtienen

industrialmente como sigue:

1. La beta-propiolactona se obtiene por cicloadicin de ceteno y formaldehido en

medio anhidro y en presencia de cloruro de cinc (rendimiento 90%)

2. La gama butirolactona resulta por dehidrogenacion del 1,4-butanodiol a 200C, en

presencia de cobre.

Adems las lactonas por ser steres cclicos se pueden obtener mediante
esterificacin intramolecular a partir de molculas que contienen grupos cido y
alcohol. Esta ciclacin forma ciclos de 5 o 6 miembros.

El mecanismo de esta reaccin transcurre en los siguientes pasos:

Etapa 1. Protonacin del grupo carboxlico

Etapa 2. Adicin nuclefila del alcohol al grupo carboxlico (etapa de ciclacin)

Etapa 3. Equilibrio cido-base

Etapa 4. Eliminacin de agua

Es extraordinariamente reactiva y se utiliza ampliamente en sntesis. Es un potente

cancergeno. La reactividad de las lactonas se limita especialmente al grupo lactona.

En la reduccin con amalgama de sodio en medio acido resulta el correspondiente

acido carboxlico.

Por lo contrario, la misma reaccin de las polihidroxilactonas, en medio acido dbil,

conduce a las aldosas.

Una ruptura del enlace de lactona, con formacin del correspondiente acido
carboxlico sustituido, se produce con cidos halogenados concentrados, cianuros
alcalinos o hidrogenosulfito de sodio; con amoniaco resulta las hidroxiamidas, que se
transforman

fcilmente

en

lactamas

por

prdida

del

agua;

por

ejemplo:

Lactonizaciones promovidas por el mtodo de Keck y col.4 consiguen la lactonizacin

de

hidroxicidos

por

activacin

con

diciclohexilcarbodiimida

N,N-

dimetilaminopiridina, obtenindose buenos resultados en el caso de macrolactonas

de 16 y 17 miembros. Sin embargo, el rendimiento disminuye en el caso de las de 14
y 15 miembros.

En el transcurso de la reaccin se forma tambin urea, la cual es

separable

por

mtodos

convencionales,

como

fcilmente

cristalizacin

separacin

cromatogrfica.

Las lactonas de anillos superiores son accesibles por oxidacin de cetonas

con

cido

persulfurico,

H2SO5,

(Ruzicka).Reaccin

de

cclicas

Mitsunobu.

El

hidroxicido se hace reaccionar con una combinacin de azodicarboxilato de dietilo y

trifenilfosfina en medio neutro, obtenindose la lactona con rendimientos variables
dependiendo del disolvente empleado y, principalmente, del tamao del anillo
requerido.5 La reaccin puede explicarse admitiendo un intermedio dipolar, un
carboxilato alcoxi-fosfonio, segn se observa en el esquema, que favorecera el
acercamiento y ciclacin.

Las lactonas sesquiterpnicas pueden separarse y

analizarse

bien

sea

por

cromatografa en columna o cromatografa en capa fina, utilizado Silicagel y

eluyentes como: CHCl3:MeOH(9:1), : CHCl3: MeOH(19:1), CHCl3: Et2O (4:1),
CHCl3: Et2O (5:1), Bz: Me2CO (4:1), Bz:EtOAc (5:5).Como agentes
para los anlisis por cromatografa en capa fina, pueden

utilizarse:

reveladores
cido

sulfrico concentrado y calentamiento, vapores de yodo, luz ultravioleta 254

o permanganato de potasio al 1%. Se han reportado un revelador
sesquiterpnicas (p dimetilamino benzaldehdo).

para

nm

lactonas

III.

RESULTADOS

Con la ayuda de una bagueta se extrae una pequea porcin del extracto seco de las
Hojas de Manzanilla y se prepara una solucin sobresaturada con el etanol.

Disolver el extracto de
manzanilla en 0.5 ml
de etanol

Preparar los
capilares para
el sembrado

Para obtener una

buena muestra, el
extracto tiene que
estar muy
concentrado.

Extracto de
hojas de
manzanilla

M.P:
Mua

Hacer 15 veces el sembrado

de las hojas de la manzanilla
(+ a Lactonas: prctica
anterior) y 15 veces de la
M.P: Mua

En la cuba cromatografica con la fase mvil se espera que se realice el recorrido

dejando un espacio de 1cm en la parte superior de la placa. Poner en la estufa
para el secado y poder realizar el revelado.

Preparar en la cuba
cromatografica con
cloroformo y acetona (9:1)

Despus del secado de la placa ponemos

a la luz UV encontramos manchas
fosforescente que no podemos reconocer
que molcula puede ser, as como
tambin observamos manchas oscuras
que pueden ser flavonoide en la mua

Observamos el recorrido de
la placa en forma regular

Luego volvemos a poner a la UV,

pasamos con vapores de
amoniaco lo utilizamos para
confirmar si hay presencia de
flavonoides

Debido a que la MP no dio (+) en la prctica anterior en alcaloides, todo se hace

revelar con H2SO4 al 50 % (debido a que concentrado no asperja, por eso se
baja) para ayudar a encontrar molculas esteroidales.

Luego preparamos el
revelador de H2SO4 10ml
y agua homogenizamos

Llevamos de nuevo a la luz UV y observamos

que aparece otra mancha fosforescente
arriba, posiblemente sean molculas
esteroidales.

Revelamos toda la placa con el

revelador de H2SO4 para
ayudar a confirmar si hay
presencia de esteroides

Llevamos a secar la placa a

la estufa para volver a
poner en la luz UV

Flavonoides :
2 manchas
marrones
oscuras.

Posiblemente sean
molculas
esteroidales

Manchita roja
fosforescente:
clorofila o
lactona

Hojas de
manzanilla

M.P: Mua

RESULTADO FINAL:
Se observ por medio de la cromatografa en capa fina las manchas caractersticas de las
lactonas en la hoja de manzanilla y tambin 2 manchas que posiblemente sean molculas
esteroidales. Asimismo la presencia de 2 flavonoides en la mua cuando se revel con
H2SO4 al 50%.

IV.

DISCUSIONES

Una lactona es un compuesto orgnico del tipo ster cclico. Se forma como
producto de la condensacin de un grupo alcohol con un grupo cido carboxlico.
Las estructuras ms estables de las lactonas son los miembros con 5 anillos
(gama-lactonas) y los de 6 anillos (los delta-lactonas). Las gama-lactonas son tan
estables que en la presencia de cidos diluidos a temperatura ambiente stos de
inmediato sufren esterificacin espontnea y ciclizacin sobre la lactona

Las lactonas sesquiterpenicas, como su nombre lo indica, son terpenos, que

tienen adems en su estructura una lactona. Para identificar estos compuestos se
realizo la CCF) eludas con una fase mvil compuesta por cloroformo y acetona.

Mediante la CCF realizada se observa 01 pequea fluorescencia roja, en la parte

central de la placa la cual coincide tambin con lactonas, sin embargo al tratarse
de hojas de manzanilla y debido a que contienen clorofila, esto puede causar
confusin ya que de no estar bien separada la muestra y observarse claramente la
mancha, se puede reportar un falso positivo para sesquiterpenlactonas, ya que la
clorofila es un interferente en esta prueba.

En cuanto a la pruebas para esteroides con el revelador de H2SO4 se evidencia la

presencia de esteroides por cromatografa, los cuales no fueron del todo
especficos ya que las manchas solo nos indica presencia o no de estas molculas
pero no de qu tipo de esteroide es.

No se llego a realizar el Rf debido a que no se tena una muestra patrn, pero si se

puede apreciar que entre la Manzanilla y la Mua; la muestra que recorri mas ha
sido el de las Hojas de Manzanilla que puede ser debido a que el solvente es
semipolar.

El contenido de flavonoides en el extracto hidroalcohlico de flor de manzanilla es

el factor de calidad, y la apigenina es un constituyente mayoritario de este
extracto; adems en las preparaciones comerciales de flor de manzanilla se
encuentra un espectro heterogneo de contenido de este tipo de flavonoide.
Considerando lo anterior, es necesario buscar mtodos analticos simples, rpidos
y sensibles para cuantificar los flavonoides en la flor de manzanilla que validen su
calidad.

Los flavonoides por lo que hemos podido buscar informacin se encuentran en la

mayor parte en la flor de la manzanilla y nuestra muestra trabajada fue en las
hojas de dicha planta.

Entre los principios activos de la manzanilla: ms importantes encontramos : aceite

esencial (0,2-1,8%): camazuleno, alfa-bisabolol,. Flavonoides: luteolol, apigenol,
quercetol. Cumarinas: umbeliferona, herniarina. Muclagos urnicos (10%).
Lactonas

sesquiterpnicas

(principios

amargos):

matricina,

matricarina,

precursoras del camazuleno. Sales minerales (8 al 10%).

V.

CONCLUSIONES

Al trmino de la prctica realizada con las hojas de manzanilla (Matricaria

chamomilla L.) en la CCF, pudimos encontrar la presencia de lactonas o
clorofila (por las manchas rojo fosforescente) y posiblemente la presencia de
molculas esteroidales (2 manchas amarillo fosforescentes); asimismo tambin
la presencia de 2 flavonoides (manchas marrones oscuras) en la CCF de la
Mua.

Se concluye que en la prctica realizada, cuando se revela con acido sulfrico

se observa la presencia de molculas esteroidales y flavonoides, en las hojas
de manzanilla y en la M.P. de la Mua, respectivamente

VI.

CUESTIONARIO

6.1.

INDIQUE OTROS AGENTES CROMOGNICOS PARA LA IDENTIFICACIN

DE LACTONAS.
Uno de los principales agentes cromognicos es la luz ultravioleta utilizada
generalmente para este tipo de pruebas, dentro de otros agentes encontramos
los siguientes:
Solucin de cloruro de cobalto al 2%en una solucin acuosa de cido
sulfrico al 19%.
Vapores de yodo.

VII.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Consulta Lactonas http://quimicaorganica.webcindario.com/lactonas.htm.

Alejandro

Martnez

Martnez

SESQUITERPENLACTONAS

Facultad

de

Qumica Farmacutica Medelln, Agosto de 2001.

Jos C. MenesesReyes, Ramn M. SotoHernndez, Teodoro

Espinosa

Solares y Martha E. RamrezGuzmn, Optimizacin del proceso de extraccin

de flavonoides de flor de manzanilla, disponible en la siguiente

pgina:

http://www.scielo.org.mx/scielo.php?pid=S140531952008000400005&script=sc
i_arttext.

Bela, Alberto J. Dudik , Nestor H., Control de calidad de materias primas

vegetales para fines farmacuticos Carrera de Farmacia -

Argentina

disponible en:

http://www.unne.edu.ar/unnevieja/Web/cyt/cyt/2002/08-

Exactas/E-

023.pdf.

Vernica Geovana, Montesdeoca Rodriguez, Tesis de Grado Elaboracion y

control de calidad de comprimidos fitofarmaceuticos, Facultad de Farmacia y
Bioqumica, Escuela Superior Biotecnica

Ecuador 2010.