Determinacin de Nitrgeno amnico: Mtodo de Sorensen

Aplicacin: Sirve para determinar N amnico en muestras lquidas o extractos. La finalidad es poder determinar la
concentracin de amonaco o grupos amino libres de aminocidos, pptidos y protenas. Es til para dosar
aminocidos libres en jugos de fruta, el grado de hidrlisis de una protena, o amonio despus de la destruccin
de materia orgnica en el mtodo de Kjeldahl, etc.
Determinacin: Neutralizar 10 ml de muestra con NaOH 0,1 N usando fenolftalena como indicador. Es importante
no excederse en el agregado de NaOH, detenerse en el punto en que aparece una dbil coloracin rosada que
persiste por 30 seg. Otra posibilidad es utilizar un pHmetro y llegar a pH 8.
Agregar 10 ml de formol neutralizado recientemente con fenolftalena y titular de inmediato la acidez
liberada con NaOH 0,1 N hasta ver el punto final. Tomar este ltimo valor para el clculo de N amnico y el
primero para el clculo de la acidez.
Clculo:

g %N = VNaOH NNaOH 0,014 x 100/peso de muestra

DETERMINACION DEL CONTENIDO EN PROTEINAS (Mtodo Sorensen-Walker)

Fundamento
Est tcnica determina el contenido en protenas de la leche mediante una valoracin cido-base,
ya que tras la adicin de formol a la muestra, el formaldehido se une a los grupos amino de los
aminocidos de las protenas dejando los grupos carboxilos libres. Este hecho produce cambios en
la acidez titulable de la leche siendo valorada con hidrxido sdico. La cantidad de hidrxido sdico
utilizado en la neutralizacin es utilizado para calcular la cantidad de protenas presente en la
muestra.
Material
Bureta graduada en 0.1 mL.
Matraz erlenmeyer de 100 mL.
Pipetas de 10 mL y 5 mL.
Reactivos
Solucin de hidrxido sdico (0.1N).
Solucin comercial de formol (40%).
Indicador: solucin de fenoltalena al 1 %
Procedimiento
Tomar 10 mL de leche problema en un matraz erlenmeyer.
Aadir 20 mL de agua destilada y adicionar unas gotas de fenoltalena.
Neutralizar la cidez titulable natural de la leche con la solucin de hidrxido sdico
hasta la aparicin de un color rosa.
Aadir posteriormente a la leche neutralizada 2 o 3 mL de formol para dejar libres los
grupos carboxilos de los aminocidos. Tras la adicin del formol la muestra se vuelve
a acidificar y se muestra nuevamente de color blanco.
Aadir unas gotas de fenoltalena y valorar la acidez con hidxido sdico, hasta la
aparicin nuevamente del color rosa.