Instituto de Ciencias Bsicas e Ingeniera UAEH

Licenciatura en Qumica de Alimentos

QUMICA ANALTICA II

Prctica n 3

Fecha de la prctica: 11/Febrero/15

Ttulo: Identificacin de aminocidos por cromatografa de capa fina.

Alumnos

1. Objetivo del trabajo

Al finalizar la prctica el alumno aprender a realizar separaciones mediante
cromatografa en capa fina as como su aplicacin en la identificacin de
aminocidos.

2. Clculos para preparacin de soluciones

FMA n-butanol/ CH3COOH/Agua 4/1/1
10ml n-butanol 6
10ml CH3COOH 6
X ml n-butanol -- 4
X ml CH3COOH- 1
6.66ml n-butanol
1.66 ml CH3COOH
FMB n-propanol / Agua
7/3
7ml n-propanol
3ml Agua

Cuestionario previo
1. Mencione las principales ventajas y desventajas de la cromatografa en capa
fina con respecto a la cromatografa en columna.
Tipo
de Objetivo de esta
Ventajas
Desventajas
cromatografa
CROMATOGRAFIA La CCF es una Se desarrolla ms Al ser observadas
EN CAPA FINA
tcnica analtica y rpidamente,
las
placas
las
tiene como objetivo proporciona
manchas
no
el anlisis de una mejores
pueden estar bien
mezcla
de separaciones y se marcadas
y
componentes.
puede elegir entre llevaran a un error.
diferentes
adsorbentes.
Por su simplicidad
y velocidad, la CCF
se utiliza a menudo
para
monitorizar
las
reacciones
qumicas y tambin

CROMATOGRAFIA
EN COLUMNA

Es una tcnica de
purificacin, puesto
que permite aislar
los
compuestos
deseados de una
mezcla.

para el anlisis
cualitativo de los
productos de una
reaccin.
Las separaciones
mejoran
en
resolucin y se
pueda disminuir el
tiempo de elucin,
por
lo
cual
constituye
un
mtodo
de
eleccin.

A
menudo
los
compuestos
que
deben ser aislados
suelen
ser
incoloros. En este
caso, se recogen
pequeas
fracciones
de
eluatos en tubos
rotulados
y
la
composicin
de
cada fraccin se
analiza
por
cromatografa en
capa fina.

2. Mencione las principales aplicaciones de la cromatografa plana a anlisis de

Alimentos.
Desde el punto de vista de la caracterizacin de los alimentos, conocer la
composicin de los mismos es imprescindible puesto que las propiedades de
los alimentos dependen fundamentalmente, por un lado, de los componentes
que lo forman y, por otro, de la proporcin existente entre ellos.
Otra de las aplicaciones importantes en cromatografa es realizar el
seguimiento de una sntesis que podra ir asociada a la preparacin de un
material o alimento.
3. Qu importancia tiene calcular adecuadamente el RF?
La constante RF (Ratio of Front) es simplemente una manera de expresar la
posicin de un compuesto sobre una placa como una fraccin decimal, mide
la
retencin
de
un
componente.
Se
define
como:

Al calcular correctamente el RF podemos apreciar exatamente los contenidos

de sustancias puestas.
4. Cual es la importancia de no moverla camara cromatografica una vez
iniciada la elucion?
Al mover las camaras podemos llevar a un error ya que las placas podrian
mostrar un salto en la coloracion marcada.

3. Resultados (observaciones y clculos)

1. Calcule el RF de los aminocidos ensayados.

Fase Mvil A
Analito
Muestra
Problema
Alanina
Fenilalanina
Valina

Distancia de
migracin del
Aminocido (mm)
2
1.5
2.3
2

Distancia de
migracin del
Solvente (mm)
4
3.8
3.8
3.8

RF
0.50
0.39
0.61
0.53

Fase Mvil B
Analito
Muestra
Problema
Alanina
Fenilalanina
Valina

Distancia del
Aminocido (mm)
1.8
2
2.4
2.3

Distancia del
Solvente (mm)
3.5
3.5
3.5
3.5

RF
0.51
0.57
0.69
0.66

2. Reporte el contenido de la muestra problema y discuta como logro identificarla.

La cromatografa de capa fina, es una tcnica ms cualitativa que cuantitativa,
donde al observar las placas, se puede identificar cual era la muestra problema.
Al realizar la prctica, se pudo observar las coloraciones diferentes que tomaban los
aminocidos; as como la distancia de las manchas. La alanina (anaranjado con
guinda), la fenilalanina (anaranjado muy tenue) y valina (Guinda con anaranjado).
Teniendo las coloraciones correspondientes, se dedujo que la muestra contena
alanina y valina, debido a las coloraciones y al arrastre de la mancha.
3. Mencione la importancia de seleccionar adecuadamente la fase mvil y el tipo de
soporte de la placa.
Es importante seleccionar adecuadamente la fase mvil ya que el orden de elucin
de un compuesto se incrementar al aumentar la polaridad de la fase mvil, de igual
manera deber tener bajos puntos de ebullicin y viscosidad para permitir que se
muevan rpidamente el compuesto.
As mismo seleccionar adecuadamente el soporte de la placa nos permitir retener
con ms fuerza los compuestos evitando que reaccione con los mismos o acte
como catalizador.
4. Reporte con cul de las fases mviles ensayadas se logr una mejor identificacin
de los aminocidos, discuta el resultado.

Al hacer un anlisis de los resultados, llegamos a la conclusin que la fase mvil que
nos dio una mejor apreciacin fue la fase A, ya que a los tres equipos nos dio
claramente la imagen de la muestra problema.
5. A partir del punto anterior, proponga alternativas para utilizar otro tipo de
disolventes de acuerdo a la polaridad de los mismos.
Acetato de etilo-metanol-agua (100:16,5:13,5)
Isopropanol-cido actico-agua (70:15:15)

Cloroformo-metanol (9:1).
6. Investigue las propiedades fsica y qumicas de los aminocidos utilizados, as
como su importancia en alimentos.
Alanina: Es el segundo aminocido ms pequeo. Es uno de los 20 aminocidos
que participan en la sntesis de protenas y participa en el metabolismo de la glucosa
para la produccin de energa. Es un aminocido no esencial. La molcula de la
Alanina est formada por un tomo de carbono central al que se unen un radical
carboxilo (COOH) y un radical amino (NH2).
Propiedades:
Frmula global: C3H7NO2
Peso molecular: 89.09 g/mol
Temperatura de fusin: 296.85 C
Densidad: 1.4 g/cm3
Punto isoelctrico (pH): 6.11
Como parte de la alimentacin en protenas, el hombre ingiere alrededor de 2 g de
glicina diariamente, con fines mdicos se administran dosis entre 2 y 60 g diarios.
Se utiliza como nutriente por su carcter antioxidante, as como para prevenir o
tratar un conjunto de etiologas en las que se ha demostrado ser eficaz tales como
esquizofrenia, artrosis, osteoporosis o algunos procesos hepticos entre otras.
Fenilalanina: Es un aminocido esencial, que el organismo obtiene nica y
exclusivamente a partir de la dieta, ya que no es capaz de sintetizarlo.
Es un aminocido importante, ya que nuestro cerebro lo utiliza para producir
noradrenalina (adems de otras sustancias qumicas, como la dopamina y
epinefrina). En el caso de la noradrenalina, es una sustancia que transmite seales
entre las clulas nerviosas, para promover el estado de alerta.
Por tanto, es un aminocido que ayuda a mantener activo el cerebro, promoviendo el
estado de alerta, el aprendizaje y la memoria. Adems, es til a la hora de reducir los
sntomas tanto de la depresin como del alzheimer.
A continuacin se indican los alimentos ricos en Fenilalanina:
Alimentos de origen animal: leche y derivados lcteos, huevos, carne y pescado.
Alimentos de origen vegetal: verduras y hortalizas, legumbres y cereales.

Valina: Aminocido esencial, estimula el crecimiento y reparacin de los tejidos, el

mantenimiento de diversos sistemas y el balance de nitrgeno. La molcula de
valina consta de una cadena lineal de 4 tomos de carbono, posee una ramificacin
en el carbono contiguo al que se une el grupo amino representada por un radical
metil.
Propiedades
Frmula global: C5H11NO2
Peso molecular: 117.15 g/mol
Temperatura de fusin: 24.85 C
Densidad: 1.32 g/cm3
Participa en el crecimiento y reparacin de los tejidos, el mantenimiento de varios
sistemas y el balance de nitrgeno. Promueve el vigor mental y favorece la
recuperacin de la artrofia muscular. Participa en la cicatrizacin sea y muscular en
fracturas y lesiones.
Previene el dao heptico y mantiene en equilibrio los niveles de azcar por lo que
es til en la recuperacin de la diabetes mellitus.
La valina, al igual que otros aminocidos se encuentra en alimentos ricos en
protenas como carne roja, pollo, pescado, huevo, granos y nueces.

4. Discusin y conclusiones
Al terminar la prctica fuimos capaces de realizar separaciones mediante
cromatografa por capa fina en la identificacin de aminocidos. Al comparar los
resultados obtenidos con los dems equipos llegamos a conclusiones semejantes;
en la fase mvil A se logr una mejor identificacin de los aminocidos, fue posible
apreciar los diferentes colores de compuestos presentes en la muestra problema y
as reconocer los aminocidos presentes en la misma. Suponemos que esta fase
mvil fue la ms adecuada ya que el orden de elucin de un compuesto se incrementa al
aumentar la polaridad de la fase mvil o eluyente, el cual puede ser un disolvente nico o
dos miscibles de distinta polaridad. Como sabemos, en esta fase se emple n-butanol, Acido
Acetico, agua, a diferencia de la fase mvil B, en la que se emple n-propanol y agua.

5. Bibliografa
http://www.relaq.mx/RLQ/tutoriales/cromatografia/Thin.htm#historia
http://www.ecured.cu/index.php/Alanina
http://www.natursan.net/fenilalanina-aminoacido-esencial/
http://www.ecured.cu/index.php/Valina