FAGOCITOSIS

Los fagocitos son un tipo de leucocitos especializados en la eliminacin por

fagocitosis de los cuerpos extraos que invaden el cuerpo.
La fagocitosis est inducida por anticuerpos especficos que marcan el objeto a
fagocitar mediante un proceso denominado de opsonizacin.
Hay varios tipos de fagocitos:
1MICROBIOLOGA CLNICA
Curso 2002- 2003 (grupo 1)
1.- Leucociotos polimorfonucleares producidos en la mdula sea. Son de vida
relativamente corta y accin muy rpida. Forman las clulas del pus lo que las hace las
principales defensas frente a bacterias pigenas.
2.- Macrfagos son clulas de larga vida que viajan por la sangre en forma de
monocitos que se convierten en macrfagos cuando salen del torrente circulatorio.
Pueden ser macrfagos libres o macrfagos fijos, estos ltimos estn localizados en
los ganglios linfticos.
Los macrfagos son las clulas ms importantes del sistema de defensa conocido
como sistma retculo endotelial.
CELULAS ASESINAS (Natural Killer o NK)
Son un tipo especial de linfocitos especializados en destruir las clulas infectadas por
virus. Probablemente tambin acten como defensas inespecficas frente a protozoos y
parsitos.
SISTEMA DEL COMPLEMENTO
Es un conjunto de protenas que facilita la actuacin de determinados anticuerpos
producidos durante la respuesta especfica. Por otra parte, es el principal mediador de la
respuesta inflamatoria inespecfica.
Se activa mediante una cascada (cascada del complemento) en la que van
activndose los diferentes componentes que participan en la opsonizacin, en la
estimulacin de la respuesta inflamatoria y en actividad lticas que destruyen
microorganismos.
CITOCINAS
Son protenas solubles que comunican entre s las clulas que participan en las
respuestas inflamatoria e inmune. Sus actividades son variadas: quimioatrayentes de
macrfagos, produccin de lesiones en clulas durante el proceso inflamatorio,
colaboracin en la destruccin de clulas infectadas, etc.
Entre las citocinas se cuentan las interleucinas, las linfocinas y los interferones
INTERFERONES
Son protenas de pequeo tamao producidas por las clulas eucariticas como
respuesta a la infeccin por virus. Son secretadas por las clulas infectadas y estimulan
en otras clulas (son citocinas) la produccin de protenas con accin antiviral que
bloquean los sistemas transcripcin del ARN mensajero viral y destruyen el ARNm
viral.
Los interferones son especficos de especie. Su utilizacin como agentes antivirales
se basa en su produccin por tcnicas de ADN recombinante.
2MICROBIOLOGA CLNICA
Curso 2002- 2003 (grupo 1)
FIEBRE
Es una respuesta general a la infeccin consistente en una elevacin anormal de la
temperatura.
Se produce como una consecuencia de la alteracin de los sistemas de control de la
temperatura a nivel del hipotlamo por ciertos agentes (pirgenos) entre los que se
encuentran el lipopolisacrido y el pirgeno endgeno (interleucina 1) producido como
respuesta a la inflamacin.
13.2.4

Fagocitosis y mecanismos matadores

En el captulo 2 ya nos referimos a la fagocitosis, por lo que no volveremos a insistir aqu en ella, sino
que nos centraremos en lo que ocurre cuando el microorganismo, englobado en el fagosoma, recibe la
descarga de los grnulos (lisosomas) del fagocito. El contenido preformado de estos grnulos, junto con
sustancias producidas de novo, constituyen una batera de mecanismos encaminados a la muerte del
patgeno. Estos mecanismos se pueden clasificar en dos grandes tipos: dependientes e independientes
de oxgeno.
13.2.4.1

Mecanismos dependientes de oxgeno

Los podemos estudiar a su vez bajo dos categoras: los que se basan en intermediarios reactivos de
oxgeno, y los intermediarios reactivos de nitrgeno.
1. Intermediarios reactivos de oxgeno (ROI). La unin de partculas a los receptores de la
membrana del fagosoma del macrfago provoca el denominado estallido respiratorio (por
activacin de la ruta de la hexosa monofosfato), que produce mucho NADH.
a. Antes de que el lisosoma se fusione con el fagosoma, en ste tiene lugar una reduccin
de oxgeno molecular (O2) catalizada por la NADH-oxidasa de la membrana del fagosoma;
el anin superxido resultante (O-2) es txico por s mismo, pero a su vez da lugar a otros
radicales txicos de vida corta, como el perxido de hidrgeno (H 2O2), el radical hidroxilo
(OH) y el oxgeno singlete (O12). El macrfago se protege de los ROI que puedan salir del
fagosoma por medio de una cadena de reacciones redox en que participa glutation.
b. Una vez que el lisosoma se fusiona con el fagosoma, aqul libera la mieloperoxidasa, que
acta sobre los perxidos en presencia de haluros (I - y Cl-), para producir compuestos
halogenados (hipohaluros) muy txicos y de vida larga: cido hipocloroso (ClOH), e
hipoiodoso (IOH).
2. Intermediarios reactivos de nitrgeno (NRI)
a. La enzima NOS (xido ntrico-sintetasa) combina el oxgeno molecular con el nitrgeno
guanidino de la L-arginina, para generar xido ntrico (NO), que es txico para bacterias y
clulas tumorales.
Los macrfagos de ratn (pero no los humanos) necesitan para activar esta ruta a un
nivel ptimo dos seales: interfern gamma (IFN-g ) para activar la enzima NOS, y factor
de necrosis tumoral (TNF) (ver el apartado 13.2.5).
13.2.4.2

Mecanismos independientes de oxgeno

Estos mecanismos dependen de protenas antimicrobianas preformadas y acumuladas en los grnulos:

1. Protenas catinicas, con actividades de tipo antibitico:
a. defensinas (en macrfagos de conejo y en PMN neutrfilos humanos). Son pptidos
catinicos , de unos 30 aminocidos, ricos en cys y arg. Forman canales permeables a los
iones en las bicapas lipdicas de los microrganismos. Actan antes de que tenga lugar la
acidificacin del fagolisosoma.
b. Catepsina G
c. Azurozidina
2. Lisozima, que acta rompiendo el peptidoglucano de bacterias (sobre todo de Gram-negativas).
3. Lactoferrina (producida por neutrfilos): secuestra hierro, indispensable para las bacterias.
13.2.5

Activacin de los macrfagos

Los macrfagos en reposo pueden matar, desde luego, pero sus capacidades microbicidas pueden
mejorar por medio de su activacin. Esta activacin puede provocarse por:
1. productos microbianos que causan
a. activacin directa de monocitos y macrfagos
b. activacin indirecta: los macrfagos sin activar y las clulas NK liberan citoquinas que a
su vez activan a los macrfagos.

2. Ulterior activacin por citoquinas producidas por linfocitos TH, sobre todo por IFN-g . Provocan
atraccin quimiotctica de fagocitos y/o activacin de los mecanismos dependientes e
independientes de oxgeno.
En aos recientes se est viendo que la activacin del macrfago es algo ms complejo de lo que se
crea. La idea clave que ha surgido es que el macrfago despliega unas u otras de sus funciones
efectoras dependiendo de la combinacin particular de estmulos qumicos que reciba, a saber,
citoquinas y molculas inflamatorias.
La activacin de los macrfagos de ratn se puede lograr mediante el IFN-g secretado por el TH, o por la
endotoxina (lpido A) de las bacterias gram-negativas. Pero a su vez, los macrfagos activados secretan
TNF-a , que al actuar sobre macrfagos ya activados provocan una mayor potenciacin de sus
capacidades al activarse la ruta dependiente del xido ntrico.
En humanos, el macrfago, en presencia de IFN-gamma, activa la 1-alfa hidroxilasa, que convierte el
15-hidroxicolecalciferol circulante en 1,25-dihidroxicolecalciferol (calcitriol o vitamina D 3). A su vez, este
calcitriol activa ms al macrfago al tiempo que inhibe los linfocitos Th1. Esta respuesta en humanos
puede ser parte de la razn de que cuando falla la eliminacin del parsito haya un cambio desde T H1 a
TH2, con lo que se hace crnica la respuesta celular. La produccin de calcitriol en el caso de
tuberculosis o sarcoidiosis puede llegar a circulacin perifrica, originando una afeccin de
hipercalcemia.
Llegados a este punto, quiz sea bueno llamar la atencin sobre las diferentes fases de la respuesta
inmune en las que participan los macrfagos:
1. En la defensa inicial frente al patgeno: el macrfago sin activar tiene su capacidad fagoctica
basal. Al mismo tiempo secreta citoquinas que ayudan a otras clulas (p. ej., recordar la IL-1 que
participa en la activacin de linfocitos B).
2. En la presentacin del antgeno: acta como clula presentadora para linfocitos TH, que a su vez
se activan secretando citoquinas.
3. En la fase efectora el macrfago se activa por citoquinas (como el IFN-g secretado por linfocitos
TH), lo cual va a potenciar sus actividades antimicrobianas, antitumorales y de secrecin de
citoquinas.
Las citoquinas secretadas por macrfagos en respuesta a componentes microbianos cumplen
importantes papeles: la IL-12 y el TNF-a , en sinergia con otros mediadores, mejoran la actividad
antimicrobiana inespecfica:
el TNF-a mejora la capacidad microbicida de PMN neutrfilos y de los propios macrfagos;
el TNF-a junto con la IL-12 provocan que las clulas NK liberen IFN-g, el cual aumenta la actividad de
los macrfagos;
el TNF-a induce cambios en las superficies de clulas endoteliales y de fagocitos, que pueden
interaccionar de modo que los fagocitos se extravasan para acceder al lugar de la inflamacin,
donde se localiza el foco de infeccin.

13.3

PAPEL DE LAS CLULAS T COADYUVANTES (TH)

Las clulas TH desempean papeles esenciales en la inmunidad celular:

1. determinan la especificidad de la respuesta inmune (qu antgenos y qu epitopos son
reconocidos);
2. intervienen en la seleccin de los mecanismos efectores destinados a eliminar al patgeno;
3. ayudan a la proliferacin de las clulas efectoras adecuadas;
4. mejoran las funciones de fagocitos y otras clulas efectoras.

El primero de estos papeles citados ya ha sido abordado en otro captulo: la interaccin del conjunto de
receptores TCR-CD3-CD4 con los epitopos en el MHC-II de clulas presentadorascondiciona la
especificidad de la respuesta.
Pero el sistema inmune ha de efectuar una segunda decisin esencial: qu mecanismos efectores se
ponen en marcha, que sean los adecuados para la naturaleza de cada infeccin en particular. Dentro de
la inmunidad mediada por clulas, existen varios mecanismos:
1. citotoxicidad directa especfica, por medio de linfocitos T citotxicos CD8 + (CTL);
2. degranulacin de eosinfilos y mastocitos una vez que han contactado con la clula a eliminar a
travs de anticuerpos, que sirven de "puentes" moleculares (ADCC);
3. activacin de macrfagos y reaccin de hipersensibilidad de tipo retardado.
Entonces, cmo se determina el tipo de accin para cada tipo de situacin? La respuesta estriba en
buena parte en el patrn local de citoquinas producidas al inicio de la respuesta inmune,
desencadenado ante cada tipo de patgeno, as como en la concentracin local de metabolitos
esteroideos y de vitamina D3 en el tejido linfoide: estos factores determinan que predomine uno de dos
subtipos de clulas TH, lo que finalmente condicionar el desencadenamiento de uno u otro de los
mecanismos efectores.
As pues, los linfocitos TH presentan dos subpoblaciones, denominadas TH1 y TH2. Dichas
subpoblaciones se desarrollan a travs de una ruta que se bifurca:

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THvrgenes estimulacin

THP

estimulacin

memoria

inicial

crnica

largo plazo

TH0

TH1

THM

TH2

Cada uno de estos tipos de linfocitos TH secreta un patrn caracterstico de citoquinas:

THP

TH0

TH1

IFN-g

IFN-g

IL-2

IL-2

...

TH2

THM

...

...

...
IL-2

IL-2

...

...
IL-4

IL-4

...

...
IL-5

IL-5

..

IL-6

IL-10

IL-10

..

IL-3

IL-3

...

...
TNF-a

TNF-a

GMCSF

GMCSF

...

...

(En la tabla se han resaltado en cursiva sobre color amarillo las citoquinas caractersticas de TH1 y TH2,
que no son comunes a ambas subpoblaciones).
Veamos pues, en qu se diferencian funcionalmente los lincitos de ambas subpoblaciones:
Las clulas TH1 tienden a activar los macrfagos, y responden bien a
Las clulas TH2 tienden a incrementar la produccin de mastocitos y eosinfilos, y mejoran la
produccin de ciertos isotipos de inmunoglobulinas, incluyendo la IgE. Las clulas T H2 responden
bien a antgenos presentados por linfocitos B.
Una vez establecidos, cada uno de estos patrones de respuesta es capaz de inhibir o suprimir al otro,
debido a la accin de ciertas citoquinas de cada tipo de clula T H:
Esta diferenciacin de TH1 y TH2 se descubri en el ratn, pero existen cada vez ms pruebas de que
igualmente existe en la especie humana. A los TH1 se les suele llamar linfocitos T "inflamatorios", y a
los TH2, "coadyuvantes".
Un ejemplo clnico de este papel particular de los dos tipos de clulas T H lo tenemos en las dos clases
extremas de lepra:
en la lepra tuberculoide se inducen sobre todo linfocitos TH1, por lo que hay una buena activacin de
macrfagos, lo cual redunda en que se detectan pocas bacterias intracelulares.
En cambio, en la lepra lepromatosa se induce la subpoblacin T H2, que colabora eficazmente en la
respuesta especfica humoral; pero los anticuerpos evidentemente no pueden acceder al interior
celular, por lo que existen abundantes bacilos en el interior de los macrfagos; stos, al no poder ser
activados eficazmente, no pueden eliminar al parsito. Hay gran destruccin de tejidos.

13.4

CITOTOXICIDAD MEDIADA POR CLULAS

En este apartado vamos a tratar aquellos mecanismos efectores que dependen de la accin de clulas
del sistema inmune capaces de matar/lisar clulas enfermas (clulas diana), a las que se unen de modo
directo o indirecto:
1. Citotoxicidad directa especfica: es la llevada a cabo por los linfocitos citotxicos (T C), que estn
restringidos por el haplotipo propio MHC-I, y que poseen CD8+ como molculas correceptoras.
(aunque algunas son CD4+ y estn restringididas por MHC-II)
2. Citotoxicidad directa inespecfica: las clulas agresoras naturales (NK) reconocen determinantes
inespecficos de clulas tumorales o infectadas con ciertos virus.
3. Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos: es un mecanismo indirecto por el que clulas
matadoras como NK, eosinfilos, etc., interaccionan con el antgeno por medio de puentes de
anticuerpos previamente unidos a receptores para Fc de la clula.
13.4.1

Citotoxicidad directa especfica (mediatizada por linfocitos CTL)

El papel ms importante de este mecanismo es el de eliminar clulas propias infectadas por virus.
Como veremos, los linfocitos TC en reposo, al activarse apropiadamente, terminan diferencindose a los
llamados linfocitos T citolticos (CTL), que son los efectores de la inmunidad celular especfica.
El 90% de estos linfocitos son CD8+, y estn restringidos por el MHC-I propio. Son capaces de reconocer
a la mayora de clulas nucleadas. Pero existe un 10% de linfocitos T C que fenotpicamente son CD4+ y
estn restringidos por MHC-II.
La actuacin de estas clulas la podemos considerar en dos fases:
1. Activacin y diferenciacin de los precursores TC hasta CTL
2. Fase efectora: destruccin de la clula diana, a su vez diferenciable en:
adhesin y formacin del conjugado entre el CTL y la clula diana
golpe letal
disociacin del CTL
destruccin de la clula diana.
13.4.1.1

Activacin y diferenciacin de los linfocitos T citotxicos

Los linfocitos Tc vrgenes parece que se activan solamente en los rganos linfoides secundarios, nicos
entornos en los que reciben las seales necesarias. Requieren en realidad 3 seales:
1. La seal especfica suministrada por la interaccin entre su complejo TCR-CD3-CD8 con el
MHC-I de una clula presentadora profesional infectada (p. ej., una clula dendrtica
interdigitante)
2. La seal coestimulatoria suministrada por la misma clula (unin entre B7 y CD28).
3. La interleucina IL-2.
Parece ser que el Tc expresa tras la interaccin inicial una pequea cantidad de IL-2, pero en el caso de
estos Tc vrgenes no suele ser suficiente para activarlos. La aportacin clave de IL-2 procede de clulas
Th1 cercanas. De hecho, se piensa que tanto el Th como el Tc vrgenes se activan simultneamente al
unirse a la misma clula presentadora (no olvidemos que las APCs exhiben MHC-I y MHC-II).
En cambio, las clulas Tc de memoria tienen menos requerimientos para su activacin. De hecho,
como ya sabemos, al tener molculas de adhesin celular diferentes a los correspondientes Tc vrgenes,
pueden encontrarse el antgeno (epitopo peptdico en contexto MHC-I) en tejidos extralinfoides.
1. No requieren obligatoriamente la seal coestimulatoria.

2. No requieren obligatoriamente la ayuda de Th, ya que al unirse de modo especfico a una clula
propia infectada que le suministre el pptido adecuado, provoca que el Tc produzca no slo
receptores de IL-2, sino niveles adecuados de IL-2 capaces de auto-activarlas.
De esta manera, se provoca la proliferacin y diferenciacin del linfocito en reposo (virgen o de
memoria) hasta que se convierte en linfocito T citoltico (CTL). Este CTL se caracteriza por poseer algo
ms de citoplasma que el TC, y sobre todo por poseer grnulos densos a los electrones, rodeados de
unidad de membrana (llamados a veces granulosomas) y un aparato de Golgi.
13.4.1.2

Fase efectora: Ataque y destruccin de la clula diana

1) Formacin del conjugado

Tras el reconocimiento especfico, se produce una interaccin de gran avidez entre molculas de LFA-1
del CTL y molculas de ICAM-1 de la clula diana. Esta unin dura unos 5-10 minutos, durante los
cuales las seales de la unin intercelular se transducen al interior del CTL por medio de cascadas de
proten-quinasas y proten-fosfatasas, que conducen a la activacin de una serie de funciones del CTL.
Se dice entonces que el linfocito queda programado para la lisis.
2) Golpe letal
El citoesqueleto del CTL se reorganiza, de modo que tanto el aparato de Golgi como los granulosomas
se sitan en el polo celular que queda en contacto con la clula diana. Entonces, los grnulos se
fusionan con la membrana citoplsmica, producindose la exocitosis de su contenido al estrecho
espacio intercelular ("beso de la muerte").
3) Disociacin del CTL
Antes de que se produzca la lisis de la clula diana, el CTL se separa, probablemente ayudado por el
hecho de que la LFA-1 vuelve al estado de baja afinidad.
4) Destruccin de la clula diana
Parece ser que la destruccin de la clula diana puede ocurrir por varios mecanismos, predominando
uno u otro en funcin de la naturaleza de la superficie de la clula diana, y del grado de activacin que
haya alcanzado el linfocito CTL.
Monmeros de perforina contenida en los granulosomas llegan a la membrana de la clula diana, y
en presencia de Ca++ se polimerizan para formar cilindros huecos de poliperforina(con unas 20
unidades), que atraviesan la bicapa lipdica. De este modo se forma un canal (con un dimetro de 520 nm) que es permeable a iones, y que puede provocar la lisis osmtica de la clula diana (aunque
su papel principal es servir como canal para dejar pasar a otros componentes de los grnulos).
Pero no siempre el efecto de la poliperforina es la lisis. En otros casos parece que el papel de los
canales es el de permitir la entrada de otras sustancias del granulosoma que inducen
laapoptosis de la clula diana. De hecho se ha visto que pueden entrar fragmentinas (granzimas)
que inducen la fragmentacin de los cromosomas en mltiplos de nuclesoma.
Veamos algunas ideas actuales sobre el mecanismo de apoptosis desencadenado por los linfocitos Tc.
Antes que nada, hay que aclarar el papel de la granzima B. Como ya sabemos, se trata de una
fragmentina, que induce fragmentacin del ADN en mltiplos de nucleosomas. Ahora bien, este efecto
es indirecto: las fragmentinas no son DNAasas, sino proteasas. La Granzima B tiene una actividad
parecida a la llamada enzima convertidora de interleucina 1- (ICE).
La ICE es una proteasa endgena con un papel central en la ruta endgena de la apoptosis. Dicha ruta
se puede activar por una serie de estmulos externos (carencia de factores de crecimiento, ciertos
virus, dao al ADN), que transforman la ICE inactiva a forma activa. Una vez activada, la ICE rompe
proteolticamente un sustrato an desconocido, que induce las ADNasas, que fragmentarn el ADN.
Pues bien, se piensa que la granzima B secretada por el CTL (y que entra a la clula diana a travs de
los canales de perforina) activa a la ICE o bien la sustituye para desencadenar el mecanismo de esta
ruta apoptsica endgena.

Pero este no es el nico mecanismo inductor de apoptosis por parte de los CTLs (de hecho, algunos
clones de CTLs carecen de perforina y de granzimas, y sin embargo inducen muerte celular de la clula
diana). Podemos encontrar otro mecanismo dependiente de la interaccin entre el llamado ligando
Fas del CTL y el receptor Fas de la clula diana.
El receptor Fas (tambin llamado APO-1) es una protena de membrana que pertenece a la llamada
familia TNF de receptores de citoquinas.
Por su lado, el ligando de Fas del CTL es una protena de membrana que exhibe homologas de
secuencia con TNF, y se une al Fas.
La unin entre el ligando de Fas con el Fas de la clula infectada o enferma induce en sta una seal
que dispara la ruta endgena de apoptosis, con la consiguiente activacin de la ICE y subsiguiente
fragmentacin del ADN.
Las vesculas del CTL pueden contener TNF-a y TNF-b (=linfotoxina), que junto con el IFN-g
producido por TC o por otras clulas, desencadena efectos citotxicos que tardan ms tiempo (>3-4
horas) que los anteriores. Se desconoce el mecanismo, pero parece que igualmente inducen apoptosis.
Cmo se protege el CTL de sus propios mecanismos matadores? Por lo pronto, el condroitn sulfato
(proteoglucano) del CTL se puede unir a la perforina, inactivndola. Pero puede que haya otros
mecanismos: por ejemplo, la hiptesis de Peters dice que la perforina sale del granulosoma dentro de
pequeas vesculas igualmente membranosas; la membrana de estas sub-vesculas contendran
complejos TCR-CD3-CD8, que encaminaran a las pequeas vesculas hacia la clula diana, pero no al
CTL.
13.4.2

Citotoxicidad directa inespecfica mediada por clulas NK

Recordemos que las clulas NK son un tipo de linfocitos granulares grandes (de hecho NK es casi
sinnimo de LGL), que suponen un 5% de las clulas linfoides en sangre, y que carecen de los
marcadores de linfocitos T y B. Se consideran como linfocitos "inespecficos", pertenecientes al sistema
de inmunidad natural.
El mecanismo citotxico de las clulas NK es parecido al de los linfocitos citolticos (CTL), pero a
diferencia de ellos, carecen de especificidad y de memoria, y no estn restringidos por el MHC clsico.
Poseen un papel importante en los primeros das de una infeccin virsica, al eliminar clulas en las
que el virus se est multiplicando. Constituyen pues un mecanismo efector celular temprano, antes de
que lleguen los linfocitos TC, y especialmente preparado frente a ciertos virus que usan la estrategia de
inducir un descenso del nivel de MHC-I
Recientemente se ha propuesto un modelo de dos receptores para explicar cmo reconocen estas
clulas inespecficas a las clulas infectadas por virus o tumorales. Se piensa que las NK reciben
seales de dos receptores de modo que distinguen entre clulas sanas y enfermas.
Segn este modelo, el receptor NKR-P1 se une a oligosacridos de glucoprotenas de superficie de la
clula enferma, procedentes de glucosilaciones anmalas. En principio, esta seal le indica a la NK que
debe prepararse para matar a la clula con la que ha contactado, pero para ello debe de
ocurrir simultneamente una ausencia de seal procedente de otro receptor, el Ly-49.
El receptor Ly-49 de la clula NK se une a ciertos alelos de molculas MHC-I. Cuando una clula NK se
encuentra ante una clula normal, aunque reciba la seal de NKR-P1, no la mata, ya que la interaccin
entre Ly-49 y las MHC-I enva una seal a la NK para que detenga su mecanismo matador. En cambio,
muchas clulas enfermas (por virus o tumorales) presentan un bajo nivel de MHC-I, por lo que el
mecanismo dependiente de NKR-P1 no se ve frenado.
La actividad matadora de NK se activa por IFN-a e IFN-b (liberado por muchas clulas enfermas al inicio
de la infeccin), y por IL-12 (producido por macrfagos). A su vez, la IL-12 y el TNF-a (tambin del
macrfago) provocan que la NK secrete grandes cantidades de IFN-g , con lo que se mantienen a raya
ciertos patgenos intracelulares hasta que se activen las clulas T. Como se ve, un nuevo rasgo que
parece indicarnos de nuevo el carcter de lnea defensiva temprana que intepretan estas clulas. De
hecho, rara vez las clulas NK eliminan efectivamente el virus, pero lo mantienen a raya hasta que
llegan las clulas TC.

13.4.3

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC)

Existen varios tipos de clulas potencialmente citotxicas que poseen receptores para Fc de
anticuerpos, y que pueden por lo tanto participar en la destruccin de clulas diana (enfermas) o de
helmintos recubiertos en ambos casos por anticuerpos. Los acontecimientos suelen tener lugar en las
siguientes fases:
1. formacin de inmunocomplejos (es decir, la clula enferma o el helminto se recubre de
anticuerpos);
2. una clula agresora adecuada (p. ej., la NK) interacciona con la clula enferma o el parsito a
travs de los anticuerpos, que se engarzan con el receptor para Fc de la clula agresora;
3. finalmente, dicha clula agresora libera por exocitosis el contenido de sus grnulos, y/o secreta
productos txicos, que tienden a matar a la clula enferma o parsito.
De este modo, clulas que son propiamente del sistema inmune natural, y por lo tanto son
inespecficas, pueden llegar a destruir especficamente mediante el puente de anticuerpos. De hecho,
actan como clulas efectoras finales del sistema humoral especfico (es decir, pueden llegar a ser los
"brazos armados" o "verdugos" en una respuesta que se inici con la secrecin de anticuerpos).
Las clulas NK, monocitos y PMN neutrfilos poseen el receptor Fcg RIII (=CD16), de baja afinidad,
que reconoce las subclases IgG1 e IgG3.
Los eosinfilos posen Fce R-I y Fce R-II, estando especializados en destruir helmintos (p. ej., las
esquistosmulas, que son las larvas de Schistosoma).

13.5

RESPUESTA DE HIPERSENSIBILIDAD DE TIPO RETARDADO

La hipersensibilidad de tipo retardado (DTH) es una reaccin inflamatoria localizada que se induce por
citoquinas secretadas por ciertas subpoblaciones de linfocitos TH (concretamente, de TH1) activados
previamente por contacto con ciertos tipos de antgenos, y que se caracteriza por el reclutamiento al
foco infeccioso de grandes cantidades de clulas inflamatorias, sobre todo de macrfagos.
Se llama retardada porque, al contrario que la inmediata, tarda 2 o 3 das en manifestarse.
La palabra hipersensibilidad alude en principio a efectos negativos sobre el propio hospedador, pero en
muchos casos el efecto consiste en pequeos daos tisulares, siendo en general la respuesta
beneficiosa, puesto que va encaminada a destruir a ciertos patgenos intracelulares.
13.5.1

Fases de la hipersensibilidad de tipo retardado

En la respuesta hipersensible de tipo retardado podemos distinguir una fase inicial de sensibilizacin en
la que se produce el contacto inicial con el estmulo antignico, y que no presenta sntomas, y una fase
efectora, dependiente de un contacto secundario con el antgeno, en la que se manifiestan tales
sntomas y que es la tendente a eliminar al patgeno.
13.5.1.1

Sensibilizacin

La fase de sensibilizacin dura de una a dos semanas, tiempo durante el cual los linfocitos T H se activan
y expanden clonalmente tras el reconocimiento del antgeno presentado por clulas presentadoras
(APCs). Dichas clulas presentadoras pueden ser:
clulas de Langerhans de la piel, que transportan el antgeno desde la epidermis hasta los ganglios
linfticos regionales, donde lo muestran a los linfocitos TH;
macrfagos;
(en humanos y otras especies) clulas del endotelio vascular.

Al final de esta fase se tiene pues una poblacin expandida de linfocitos T CD4 + de memoria, que
recirculan constantemente.
13.5.1.2

Fase efectora

Esta fase ocurre en tejido extralinfoide, y es la reaccin de hipersensibilidad en sentido estricto,

detectndose sus sntomas a las 24 horas del contacto secundario con el antgeno que provoc la
sensibilizacin inicial, pero alcanza su apogeo a las 48-72 horas. En esta fase sale fibringeno al tejido,
y se convierte en fibrina, que junto con la acumulacin de linfocitos T y de macrfagos hace que el
tejido se hinche y se vuelva duro (esto es la base de los sntomas de induracin y edema) La podemos
subdividir en tres etapas: desencadenamiento, inflamacin y resolucin.

En el desencadenamiento el linfocito T activado (que ahora denominaremos como TDTH), ante el

contacto secundario con el antgeno presentado por una APC, secreta ciertas citoquinas, cuyas
acciones dan paso a la reaccin de inflamacin.

La inflamacin se produce cuando las citoquinas secretadas reclutan y activan a macrfagos y

otras clulas inflamatorias hacia el sitio de infeccin, ponindose en marcha una compleja serie de
interacciones entre clulas inespecficas del sistema inmunitario y citoquinas, con amplificacin de
la respuesta. Todo ello va encaminado a destruir al agente patgeno intracelular.

La resolucin se produce porque los macrfagos activados aumentan su capacidad de eliminacin

del patgeno. Estos macrfagos son la principal clula efectora de la hipersensibilidad retardada,
pudiendo representar el 90% de la poblacin celular infiltrada.

Como se ve, esta respuesta tiene un claro valor adaptativo en la eliminacin de ciertos parsitos
intracelulares, pero cuando el estmulo es demasiado persistente, la DTH se vuelve destructiva para el
hospedador. Este aspecto inmunopatolgico se manifiesta en la llamada reaccin granulomatosa:
los macrfagos, con los parsitos sin eliminar en su interior, se adhieren unos a otros, adquiriendo
morfologas epitelioides; posteriormente estas clulas epitelioides se pueden fusionar entre s,
generando clulas gigantes multinucleadas, que pueden llegar a desplazar al tejido normal, con lo que
se forman ndulos o tubrculos, que pueden conducir a necrosis del tejido.
13.5.2

Interaccin entre citoquinas y clulas en la DTH

En este epgrafe vamos a ampliar el aspecto molecular y celular de la respuesta de hipersensibilidad

retardada, resaltando cmo las distintas citoquinas actan sobre distintos tipos celulares, responsables
de diversos aspectos de esta respuesta.

La IL-2 del linfocito TDTH funciona de modo autocrino, permitiendo la expansin clonal, con lo que
aumenta el nmero de estas clulas, que siguen produciendo ms citoquinas. Conforme avanza la
respuesta, la IL-2 tambin ejerce un efecto paracrino, estimulando a otros clones de linfocitos T DTH.
La IL-3 y el GM-CSF inducen hematopoyesis del linaje granulocito-monoctico en la mdula sea.
Obviamente ello acarrea que mayores cantidades de PMN y macrfagos puedan pasar al foco de
infeccin.
El IFN-g el TNF-b de las clulas T, as como el TNF-a y la IL-1 de los macrfagos actan sobre las
clulas endotelilales vasculares cercanas al foco de infeccin, con los siguientes efectos:
aumento de la expresin de molculas de adhesin (ICAM, ELAM, VCAM);
cambios de forma, tendentes a que las clulas endoteliales se separen entre s, dejando paso para la
extravasacin de leucocitos;
las clulas endoteliales estimuladas secretan IL-8 y otros factores quimiotcticos que atraen a
monocitos circulantes (quimiocinas).

Las consecuencias son que los PMN neutrfilos (primeros leucocitos en llegar) y los monocitos
circulantes se adhieren a las clulas endoteliales de las vnulas postcapilares, pasan por diapdesis y
entran al tejido infectado. La entrada de los monocitos lleva consigo su diferenciacin a macrfagos.
Los macrfagos son atrados y activados en el foco de infeccin debido a la accin de IFN-g y del
factor quimiotctico y activador de los monocitos (MCAF). Otro factor secretado por T DTH, llamado
MIF (inhibidor de la migracin de macrfagos) evita que el macrfago "pase de largo" el foco
infectivo, afinando su quimiotaxis.
Por lo tanto, los macrfagos van llegando en grandes cantidades al foco infeccioso, y se van
activando (sobre todo por el interfern inmune), experimentando importantes cambios:
aumentan su tamao
aumentan sus niveles de enzimas lticos en sus grnulos
aumentan su capacidad fagoctica (por opsonizacin con IgG2a -en el ratn-)
incrementan su efectividad matadora de microorganismos intracelulares
funcionan mejor como clulas presentadoras de antgeno, debido a que es mayor el nmero de
molculas MHC de clase II en su membrana, porque secretan mayor cantidad de IL-1 y porque expresan
ms molculas de adhesin como la B7 (coestimulatoria), ICAM-1 y LFA-3.
El que los macrfagos acten mejor ahora como APC supone que activan a ms linfocitos T DTH, con lo
cual se cierra el ciclo, pero amplificado.
Este tipo de respuesta que se retroalimenta positivamente puede llegar a convertirse en un "arma de
doble filo", ya que puede degenerar en una respuesta negativa para el hospedador, una vez que se
traspasa un umbral. Sin embargo, su valor positivo se ponde de manifiesto en experimentos con
ratones transgnicos noqueados (K.O.) que tienen inactivado el gen del IFN-g : son incapaces de matar
a Mycobacterium bovis, una bacteria contra la que los ratones normales se defienden perfectamente.
13.5.3

Efectos de la hipersensibilidad retardada

El efecto positivo de la DTH es que tiende a eliminar ciertos patgenos intracelulares y antgenos de
contacto:
bacterias intracelulares como Mycobacterium tuberculosis, M. leprae, Listeria monocitogenes,
Brucella abortus.
Hongos intracelulares como Candida, Pneumocystis carinii, Histoplasma, Cryptococcus.
Protozoos como Leishmania.
Larvas de helmintos, como las de Schistosoma.
Virus.
La DTH desempea un papel importante en la defensa contra estos agentes, ya que el macrfago
activado destruye mejor al patgeno, y el contenido de sus grnulos, vertido a exterior, destruye
clulas propias infectadas (en este ltimo papel es importante la accin del TNF-b ). Obviamente, se
produce cierto dao tisular, pero ste suele estar autolimitado y puede ser reparado ulteriormente.
El papel positivo de la DTH se puede comprobar "por contraste" considerando aquellas enfermedades
en las que precisamente este mecanismo est alterado: por ejemplo, en el SIDA, en el que existen
bajos niveles de linfocitos T CD4+: ello acarrea que se pierda la facultad de montar una respuesta de
hipersensibilidad retardada, por lo que los individuos afectados estn sometidos a frecuentes y
amenazadoras infecciones por Candida, Pneumocystis, Cryptococcus, o por bacterias patgenas e
incluso oportunistas que no suelen causar tanta mortalidad en la poblacin sana. De hecho, una de las
maneras de seguir el curso del SIDA es evaluar peridicamente en laboratorio la capacidad de
respuesta DTH con clulas de los pacientes.
Sin embargo, en ciertos casos la propia respuesta defensiva degenera en patolgica: tal ocurre en la
tuberculosis, en la que se pueden llegar a formar ndulos (tubrculos) en muchos tejidos (tpicamente
en los pulmones), que pueden terminar necrosndose (cavernas caseosas en pulmn).

En una situacin de infeccin crnica por parsito intracelular (como en la tuberculosis) las citoquinas
producidas en la DTH estimulan la proliferacin de fibroblastos y la produccin de colgeno,
potencindose los efectos por la accin de PDGF (factor de crecimiento derivado de plaquetas) y de
TGF-b del macrfago activado. Posteriormente emigran y proliferan clulas endoteliales (angiognesis,
es decir, formacin de nuevos vasos sanguneos). Se produce pues la sustitucin del tejido normal por
tejido fibroso (cicatrizacin) y formacin de granuloma