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La Molina, 2014-II
I.
Objetivos
II.
Revisin de la Literatura
1) Ensayo de Molish
En la prueba de Molish, se utiliza el cidosulfrico en la
reaccin de deshidratacin (del monosacrido) y el alfanaftol en la reaccin de condensacin del furfural. Al
aplicar esta prueba cualitativa, todos los carbohidratos o
glcidos producen un complejo color morado, por eso se
dice que es una prueba que es una prueba general: por
medio de ella, puede determinarse si una sustancia es
un carbohidrato de cinco o ms carbonos. Las
reacciones que involucra esta prueba son las siguientes.
3) Hidrlisis de Almidn
Segn, Silva Quesada Mora: los polisacridos forman complejos
coloreados con el yodo, lo cual probablemente se debe a la
adsorcin del yodo en sus cadenas. Los polisacridos lineales,
como la amilosa del almidn, generan complejos de un color azul
intenso; los que tiene ramificaciones, como la amilopectina del
almidn y el glucgeno, forman complejos yodados de color menos
intenso.
4) Hidrlisis de la sacarosa
La sacarosa que es dextrgira, por la accin de los cidos se
hidroliza para dar cantidades equimoleculares de D (+) Glucosa y D
(-) Fructosa. Como la rotacin especfica de la D (-) Fructosa es
mayor que la de la D (+) Glucosa, el curso de la hidrlisis se puede
seguir, observando la inversin en el poder rotatorio de la solucin.
El cido clorhdrico permite que el enlace glucosdico entre los dos
monmeros que forman la sacarosa se hidrolicen. Al estar en forma
monomrica, las molculas sufren mutarrotacin.
En presencia de ClH (acido clorhdrico) y en caliente, la sacarosa se
hidroliza, es decir, incorpora una molcula de agua y se
descompone en los monosacridos que la forman, glucosa y
fructosa, que s son reductores. La prueba para verificar la hidrlisis
se realiza con el licor de Fehling y, si el resultado es positivo,
aparecer un precipitado rojo. Si el resultado es negativo, la
hidrlisis no se ha realizado correctamente y si en el resultado final
aparece una coloracin verde en el tubo de ensayo se debe a una
hidrlisis parcial de la sacarosa.
Es el resultado de una reaccin qumica, se produce por la
descomposicin qumica de de la sacarosa (azcar comn) e dos
sub productos, (Glucosa y fructosa). De forma natural se encuentra
en la naturaleza, por ejemplo la miel o el sirope de savia de arce
(Acer saccharum). Es el lquido o jarabe resultante del proceso de
inversin del azcar mediante la accin cida o enzimtica, o sea,
con una solucin de agua, azcar y cido ctrico se separan los dos
componentes del azcar, la fructosa y la glucosa.
III.
Resultados
1) Ensayo de Molish:
(2 gotas de -naftol)
SUSTANCIA
2ml
REACCION CON
ACIDO
SULFURICO
GLUCOSA
SI
PRESENTA
ANILLO
MUESTRA
PROBLEMA
SI
PRESENTA
ANILLO
SACAROSA
SI
PRESENTA
ANILLO
ALMIDON
SI
PRESENTA
ANILLO
2) Ensayo de Fehling
MUESTRA
S
Glucosa
Fructuosa
(1ml)
(1ml)
Sacaros
a
(1ml)
Almid
n
Muestra
problema
(1ml)
(1ml)
Color
rojizo
presencia
de
precipitad
Reactivo de o
Fehling
Se
observa
dos fases
una de
color azul
y otra de
color
rojizo con
presencia
de
precipitad
o
AyB
(1ml)
Color
azul
Color
azul
Se
observa
dos fases
una de
color azul
y la otra
de color
rojizo con
presencia
de
precipitad
o
3) Hidrlisis de almidn
Tiempo (2:50)
3:00
Ensayo con
Oscuro Oscur
3:05
3:10
3:40
4:00
--------
4) Hidrlisis de la Sacarosa.
Solvente
Despus de
b.m.
Sacarosa
Coloracin
amarillo
(2ml)
Sacarosa +
Translucida
Ensayo de Fehling
(1ml)
Forma 2 fases
(verde+ translucida)
Coloracin naranja
IV.
Discusin de Resultados
1)
Las sustancias que presentan el anillo purpura,
reaccionan de la siguiente forma
Para la sacarosa, se hidrolizara a glucosa ms fructosa,
dando siempre el color morado.
2)
La glucosa al ser un aldehdo reduce al ion Cu de +2 a +1, la
fructuosa pertenece al grupo cetona este no debera reaccionar
pero este sufre una isomera la cual hace que de fructuosa pase a
ENO-DIOL y luego da forma de aldehdo y la sacarosa es la unin
de glucosa con fructuosa, esta suma bloquea las propiedades de
los aldehdos, si se hidrogeniza la sacarosa este separara a la
glucosa y fructuosa dando positivo en el ensayo de fehling; el
almidn es el resultado de la unin de muchas glucosas, estas
uniones de las molculas de glucosa bloquean los extremos
reductores.
3)
La obtencin de una sustancia colorida al reaccionar el yodo con el
almidn se cree que se debe a la formacin de un complejo de
coordinacin entre las micelas de almidn y el yodo. Estas micelas
estn formadas cadenas polisacridos enrolladas en hlice. El yodo
se puede colocar centralmente en estas hlices. El color depende
del largo de la seccin linear de la molcula del almidn. El color
disminuye cuando la temperatura aumenta, hasta desaparecer por
completo, y se intensifica la bajar nuevamente la temperatura.
V.
Conclusiones
VI.
Cuestionario
Reaccin de Molish
La prueba de Molish es una prueba cualitativa para la
presencia de carbohidratos en una muestra de composicin
desconocida. Para determinar la cantidad y naturaleza
especfica de los carbohidratos se requieren otras pruebas.
Esta prueba sirve para detectar la presencia de grupos
reductores presentes en la muestra. Todos los glcidos por
accin del cido sulfrico concentrado se deshidratan
formando compuestos furfricos (las pentosas dan furfural y
las hexosas dan hidroximetilfurfural). Estos compuestos
furfricos reaccionan positivamente con el reactivo de Molish
(solucin alcohlica de alfa-naftol)
Reaccin de Fehling
Se utiliza como reactivo para la determinacin de azcares
reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa, as
como para detectar derivados de esta tales como la sacarosa
o la fructosa. Se fundamenta en el poder reductor del grupo
carbonilo de un aldehdo. ste se oxida a cido y reduce la sal
de cobre (II) en medio alcalino a xido de cobre (I), que forma
un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta
reaccin es que la forma aldehdo puede detectarse
fcilmente aunque exista en muy pequea cantidad. Si un
azcar reduce el licor de Fehling a xido de cobre (I) rojo, se
dice que es un azcar reductor.
Formacin de osazonas
La reaccin puede ser usada para identificar monosacridos.
Involucra dos reacciones. Primero, la glucosa con la
fenilhidrazina producen glucosafenilhidrazona por eliminacin
de una molcula de agua del grupo funcional. El siguiente
paso involucra la reaccin de un mol de glucosafenilhidrazina
con dos moldes de fenilhidrazina (exceso). Primero, la
fenilhidrazina est involucrada en la oxidacin del carbono alfa
a un grupo carbonilo, y la segunda fenilhidrazina involucra la
remocin de una molcula de agua con el grupo formilo del
carbono oxidado, y formando el enlace carbono-nitrgeno. El
carbono alfa es atacado aqu porque es ms reactivo que los
otros. Son compuestos altamente coloreados y cristalinos, y
pueden ser detectados fcilmente
b) D-manosa.
c) D-galactosa.
d) D-ribosa.
a)
COOH
COO
H
+ Fehling
+
Cu2O + H2O
b)
COO
H
+ Fehling
Cu2O + H2O
c)
COO
H
+ Fehling
Cu2O + H2O
COO
H
d)
+ Fehling
Cu2O + H2O
VII. BIBLIOGRAFIA
EVA IRMA VEJAR RIVERA; Prctica de Bioqumica
Descriptiva, Editorial Unison. Mxico
Blog Reactivo de Fehling, Jos Mara de Jaime Loren,
Universidad Cardenal Herrera, Valencia-Espaa, 2011
Manual de expertos de laboratorio para bioqumica. Silvia
Quesada Mora. Editorial Universidad Estatal a Distancia, San
Jose Costa Rica, 2007.(pagina 90)
Morrison Robert. Qumica Orgnica. 5 edicin. Addison
Wesley Iberoamericana. Estados Unidos. 1990.