Vous êtes sur la page 1sur 5

Tugas Aplikasi

UV-VIS

Nama : Irma Rahmawati


NIM : 1302495
Email : irzfile@yahoo.co.id
Kimia Analitik Instrumen
SPS UPI Pendidikan Kimia B
APLIKASI UV-VIS DALAM ANALISIS KUANTITATIF
ASAM 2-TIOBARBITURAT
A. Latar Belakang
Asam 2-tiobarbiturat dan derivatnya memiliki banyak aplikasi dari segi analitis
dan farmakologis. Seperti yang sedang dikembangkan dewasa ini, yaitu sebagai anti
kanker dan anti virus. Tiobarbiturat lipofilik misalnya, sedang dikembangkan untuk
aplikasi pengobatan kejang dan anestosiologi. Berbagai turunan asam tiobarbiturat telah
teruji dapat menghambat aktivitas enzim polimerase pada virus Hepatitis C (HCV)
NS5B. Asam tiobarbiturat terbukti dapat menghambat tirosinase secara non-kompetitif
dan reversibel. Selain itu, asam 2-tiobarbiturat digunakan sebagai reagen untuk pengujian
malondialdehid yang diperoleh dari peroksidasi lipid. Malondialdehid merupakan produk
dekomposisi peroksidasi dari lipid primer dan sekunder tertentu yang sangat penting
dalam penanganan stress oksidatif pada perawatan kritis.
Oleh karena itu, diperlukan adanya upaya pengembangan metodologi pengujian
asam 2-tiobarbiturat dan derivat tiobarbiturat dalam aplikasinya terhadap bidang klinis,
farmakologi, industri, dan bio-analitis. Pengujian dilakukan dengan menggunakan
spektrometer UV-VIS tingkat lanjut karena keefektifan dan keakuratan metode uji ini.
Keuntungan lainnya adalah murah, operasi yang sederhana, dan non-destruktif dari
analit, misalnya asam 2-tiobarbiturat dapat diambil dari sistem pelarut). Maka, aplikasi
UV-VIS dalam pengujian asam 2-tiobarbiturat merupakan salah satu analisis yang harus
dikembangkan.
B. Alat dan Bahan
1. Reagen
Reagen yang digunakan sebagai pelarut dengan grade analitis dan diperoleh dari
Sigma-Aldrich (USA). Pelarut digunakan selama proyek adalah 95% etanol dan 5% air.
Asam 2-tiobarbiturat (2-thioxodihy-dropyrimidine-4,6(1H,5H)-dione) yang digunakan
dalam penelitian ini berupa bubuk yang stabil, berwarna kuning, dan hanya memiliki
sedikit kelarutan di dalam air, diperoleh dari Eastman Kimia Organik (USA). Struktur
molekul, nama umum, notasi SMILES, dan rumus molekul asam 2-tiobarbiturat di
tunjukkan pada Gambar 1.

Gambar 1. Struktur molekul asam 2-tiobarbiturat sebagai obat penenang dan hipotetik.
1

Sifat dari molekul asam 2-thiobarbituric seperti berat molekul, oktanol/ koefisien
partisi air Log P, luas permukaan polar, dan aturan 5 dimana dinyatakan ditentukan
dengan memanfaatkan informatika kimia sistem Molinspiration.
2. Instrumen
Absorbansi dan persen pembacaan transmitansi diperoleh dari Spektronik 21D
Spektrofotometer UV-Visible Milton Roy dengan presisi stabil pada 10nm bandwith/
spektral celah-lebar ber-resolusi tinggi serta rentang panjang gelombang kontinyu
(A.L.T., 12 Colton RoadEast Lyme, CT 06333). Kuvet dengan lebar ukuran 1 cm selalu
digunakan selama uji ini.
C. Metode
1. Analisis Spektrofotometri UV-VIS
Sebagai tahap persiapan, semua sampel analitis dan campuran pelarut harus
disimpan dalam wadah kaca dan ditutup erat (kedap udara) sampai akan digunakan.
Pertama-tama, absorbansi dari 95% etanol dan 5% air diukur untuk mendapatkan nilai
absorbansi awal atau absorbansi background. Kemudian, sampel asam 2-tiobarbiturat
dilarutkan kedalam 95% etanol dan 5% air, lalu diuji dengan menggunakan
spektrofotometer dalam kuvet kaca. Untuk mendapatkan spektrum absorbansi sebesar
0,02728 gram, asam 2-thiobarbiturat dilarutkan dalam 100mL etanol 95% dan 5% air
pada pemindaian panjang gelombang dari 320 nm ke 600 nm.
2. Analisis Numerik
Metode analisis numerik yang digunakan yaitu Korelasi Kendall, uji KruskalWallis, 95% elips, dan Kolmogorov-Smirnov (dua sampel) yang dilakukan oleh PAST
versi 2.06. Ringkasan dari analisis statistik juga dilakukan oleh Microsoft EXCEL. Uji t
satu sampel dilakukan oleh GraphPadInStat versi 3.00 untuk Windows 95 (California
USA).
D. Hasil dan Pembahasan
Absorbansi spektrum lengkap dari asam 2-tiobarbiturat pada 95% etanol dan 5%
air ditunjukkan pada Gambar 2, di mana ditemukan puncak absorbansi terkuat pada panjang
gelombang 320nm. Hal ini dilakukan dengan membuat campuran 0.001892 molar asam 2thiobarbituric pada 95% etanol dan 5% dan mengukur nilai absorbansi pada panjang
gelombang pengaturan yang ditentukan.
Setelah analisis lengkap, nilai akhir absorptivitas molar () dihitung menjadi
414,9 Liter / (cm)(mol). Setelah identifikasi puncak absorbansi yang kuat dalam kisaran
yang akurat dari puncak single-balok Spectronic 21D, maka dapat ditentukan bahwa pada
320nm digunakan untuk penentuan obat. Penggunaan etanol 95% dengan 5% air terbukti
menjadi fleksibel dan mudah melarutkan semua sampel uji (obat), sehingga pendinginan
sampel uji tidak diperlukan. Selain itu, sistem pelarut ini memungkinkan seri pengenceran
yang lancar dan akurat dari solusi obat untuk membawa single-balok dalam skala
absorbansi instrumen.

Gambar 2 Absorbansi spektrum asam 2-tiobarbiturat yang diperoleh dari 320nm sampai
600nm dalam kuvet kaca dan 95% etanol dengan 5% air.
Pengukuran selanjutnya campuran disiapkan untuk pembuatan kurva standar
yang dicapai dengan hasil yang memiliki hubungan yang sangat sangat linier. Hubungan
linear dihitung menjadi: y = 414.92x + 4.00E-05. Korelasi Pearson r, koefisien korelasi r =
1.000 dan dengan koefisien determinasi R2 menjadi 1.000, menunjukkan bahwa model
linier menjelaskan 100% dari varians yang terkandung dalam model. Nilai R2 dekat dengan
1.000 menunjukkan bahwa garis regresi cocok dengan data yang sangat baik.
Komponen kurva standar yang ditemukan sangat linear dengan sampel uji dan
ditemukan pada skala. Analisis statistik menegaskan sesuai yang sangat baik dari nilai
molaritas diperoleh dengan perhitungan menggunakan kurva standar (menerapkan nilainilai absorbansi yang sesuai untuk masing-masing sampel uji) dengan molaritas sebenarnya
dari sampel uji. Dua-sampel Kolmogorov-Smirnov (KS) test (non-parametrik uji memiliki
hipotesis nol bahwa kedua kelompok sampel dari populasi dengan distribusi identik). Tes
dua sampel untuk setiap pelanggaran itu hipotesis nol untuk memasukkan median yang
berbeda, variasi yang berbeda, atau distribusi yang berbeda

Gambar 3 Kurva standar, digunakan dalam penelitian ini berkisar antara 0.00006267 molar
ke 0.004201 molar (a 67x berbagai nilai konsentrasi molar).
3

Perbandingan molaritas yang sebenarnya sampel uji dengan menghitung molaritas


memanfaatkan kurva standar linear dibuat menggunakan sampel representatif untuk
penentuan recovery persen analit (lihat hasil disajikan pada Tabel 1). Setelah melalui dengan
analisis statistik menegaskan penentuan uji yang sangat konsisten dan akurat. Perhitungan uji
t sampel untuk molaritas aktual dan dihitung menghasilkan P dua sisi = 0,4081 (P> 0,05)
menunjukkan bahwa sarana populasi molaritas aktual dan dihitung tidak berbeda. Untuk
pertimbangan korelasi sebenarnya untuk molaritas menghitung Speaman ini Kendall Rs =
0,9706 maka menunjukkan korelasi positif yang sangat tinggi. The Kendall tau = 0,9493
menunjukkan sangat sangat diperintahkan oleh peringkat. Dua sampel uji KolmogorovSmirnov adalah uji nonparametrik yang membandingkan distribusi kumulatif dari dua set
data. Hasil untuk tes KS tersedia P = 0,9998 (jadi P> 0,05) dan menunjukkan nilai-nilai
dihitung dan aktual molaritas berasal dari distribusi yang identik.

Hasil recovery persen, ditunjukkan pada Tabel 1, sangat tinggi memiliki rata-rata
99,99%, amedian pada 100%, dan modus sebesar 100%. Rentang untuk recovery persen
memiliki minimal di 99.93% dan maksimum pada 100% .The standar deviasi untuk
pemulihan persen adalah 0.016%. Penentuan asam 2-thiobarbituric ditemukan konsisten dan
dengan kesepakatan yang kuat antara penentuan molaritas aktual dan molaritas dihitung
4

berdasarkan model linier konstituen kurva standar. Aplikasi lanjutan dari thiobarbiturates
untuk pengobatan klinis dari penyakit dan aplikasi dalam tes bio-analitis mendorong
pengembangan metode analisis tambahan untuk memantau senyawa ini.
E. Kesimpulan
Keakuraant uji spektrofotometri UV-Vis dapat dicapai menggunakan pelarut yang
terdiri dari 95% etanol dengan 5% air. Spektrum absorbansi asam 2-thiobarbituric dalam
pelarut yang identik, digunakan dalam pengujian untuk menunjukkan puncak yang sangat
kuat di 320nm. Kurva standar yang dihasilkan dan digunakan dalam penelitian ini berkisar
antara 0.00006267 molar ke 0.004201 molar. Konsentrasi terendah diuji dalam penelitian ini
adalah 0,01313 gram per liter (ini adalah 1.313E-05 gram per mililiter atau 13.13 mikrogram
per mililiter) dengan konsentrasi tertinggi digunakan pada 0,6056 gram per liter (6.056E-04
gram per mililiter atau 605,6 mikrogram per mililiter). Kurva standar yang dijelaskan
hubungan yang sangat sangat linier dengan garis dihitung menjadi: y = 414.92x + 4.00E-05.
The Pearson hasil korelasi r adalah r = 1.000 dan koefisien determinasi untuk menjadi R2 =
1.000. Pemulihan persen adalah sangat tinggi dengan minimum pada 99.93% menjadi
maksimum pada 100% (standar deviasi sebesar 0.016%). Oleh karena itu metodologi yang
sangat akurat dan lancar dari uji asam 2-tiobarbiturat, yaitu menggunakan pelarut alkohol-air
yang mudah larut, karena merupakan anggota yang sangat lipofilik dari kelompok asam
thiobarbiturat obat penenang / hipnotik.

Sumber : Bartzatt, R., Bartlett, Maggie., dan Handler, N. (2013). Detection and Quantitative
Analysis for 2-Thiobarbituric Acid Utilizing Uv-Visible Spectrophotometer.
American Journal of Pharmacological Science. 1 (1) 10-14.

Vous aimerez peut-être aussi