DIAGNOSTIC SEROLOGIC

IN INFECTIA HIV/SIDA

1. DIAGNOSTIC SEROLOGIC
TESTE DE TRIAJ- sensibilitate inalta
ELISA
TESTE RAPIDE

TESTE DE CONFIRMARE- specificitate inalta

WESTERN BLOT
RADIOIMUNOPRECIPITAREA (RIPA)
IMUNOFLUORESCENTA INDIRECTA

2. DETECTIA DIRECTA A VIRUSULUI

SAU A PRODUSELOR VIRALE
IZOLARE VIRALA
DETECTIA ANTIGENEMIEI p24 ELISA de detectie a Ag virale
DETECTIA ACIDULUI NUCLEIC VIRAL (ARN HIV PLASMATIC)

TESTE DE TRIAJ

ELISA de detectie a Ac antivirali

ELISA de detectie a anticorpilor antivirali

TEHNICA INDIRECTA

ETAPE
1. Incubare ser pacient 1h la 37C
2. Spalare
3. Incubare conjugat (Ac anti IgG uman x enzima)- 1h la 37C
4. Spalare

5. Incubare substrat 20 30 min la temp camerei

6. Citire la spectrofotometru DO probe, martori, cut off, zona gri

Distribuirea probelor cu
pipeta automata

Spalator
automat

Spectrofotometru

TESTE DE CONFIRMARE
WESTERN BLOT

Tehnica
WESTERN BLOT
1. SDS-PAGE
2. BLOT (transfer)
3. DETECTIA
ANTICORPILOR

WESTERN BLOT detectia Ac serici

Substrate

Antiviral antibody

Stop

color

gp160
gp120

p66

p55
p51

gp41

p31
p24

p17
p10/11
p7/9

Western blot
in infectia HIV
Criteriul minim de
pozitivitate
2 env
+
1 gag

DIAGNOSTIC SEROLOGIC HIV

ELISA
NEGATIV=

POZITIV IN DUPLICAT

ABSENTA
INFECTIEI HIV

WESTERN BLOT
NEGATIV

POZITIV=
INFECTIE HIV

! Ferestra
serologica

INDETERMINAT

risc rezidual al
transfuziei = 2/1 milion

repeta la 6-8 saptamini

alt test de confirmare

Ag p24- 1.48/1 milion

ADN proviral1.48/1 milion
ARN HIV 1.01/1 milion