EXTRACCIN DE ADN DE CLULAS DE LA MUCOSA BUCAL PRESENTES

EN LA SALIVA
OBJETIVO
Extraer el ADN de las clulas de la mucosa bucal y observar su estructura fibrilar y el
alto grado de empaquetamiento que ste tiene dentro del ncleo celular.
FUNDAMENTO
El ADN se encuentra en el interior del ncleo celular, disperso y muy replegado, unido a
protenas para formar la cromatina. Para poder extraerlo es necesario romper las clulas
y separar el ncleo para despus romper ste y liberar el ADN. Una vez liberado se debe
separar de las protenas y precipitarlo para su extraccin.
MATERIAL
- Alcohol de 96.
- Un tubo de ensayo.
- Varilla de vidrio.
- Vaso de precipitados de 50 ml
- Solucin de detergente al 25%
- Solucin de NaCl al 6%
PROCEDIMIENTO
1. Preparar un tubo de ensayo con alcohol etlico de 96.
2. Poner un poco de agua en un vaso y enjuagarse la boca enrgicamente durante al
menos medio minuto para arrastrar el mayor nmero posible de clulas de
descamacin de la mucosa bucal (antes de hacerlo conviene haber tragado saliva
para eliminar la accin de los enzimas contenidos en ella)
3. En el mismo vaso aadir 20 ml de agua y 1 gramo de NaCl junto a un par de
gotas de detergente de lavavajillas removiendo suavemente sin que se forme
espuma.
4. Expulsar el agua de enjuague en el vaso de precipitados sobre la solucin
anterior y remover con la cucharilla suavemente durante varios minutos sin que
se forme espuma.
5. Aadir la solucin suavemente al tubo de ensaye que contiene el alcohol
dejndola resbalar por la pared del tubo inclinado. El filtrado, ms denso que el
alcohol y algo turbio se deposita en el fondo del tubo. Dejar reposar durante 2
3 minutos sin moverlo en absoluto. El alcohol formar un sobrenadante por
encima de la fase acuosa en la que se encuentra el ADN en disolucin
provocando que ste precipite.
6. Esperar unos minutos mientras el ADN precipita en la interfase alcohol-agua
formando una masa blanquecina que asciende lentamente formando un frumo de
aspecto algodonoso.