Universidad Nacional Autnoma de

Mxico
Facultad de Estudios superiores
Iztacala
Carrera de cirujano dentista
"Uso del extracto etlico de propleo como
agente bacteriosttico para el control de la
actividad microbiana del streptococo mutans en
un estudio in vitro"
Laboratorio ll
Alumnos: Garca Martnez Vicente
Guzmn len Brisa Lizbet
Hermenegildo Barranco Luis ngel
Pimentel Lpez Edgar Enrique
Grupo: 1359
Profesores: C.D. Hilda Botello Rojo
C.D. Sonia Lpez Mndez

Introduccin
Son mltiples los microorganismos presentes en la cavidad oral, sin
embargo, en base a diversos estudios se ha constatado que el
estreptococo mutans es el que se presenta en una mayor cantidad y que
posee los estndares de capacidad acidognica y por lo tanto
cariognica presentes en la boca.1
El EEP puede llegar a actuar como un agente bacteriosttico de una
manera considerable en la zona supragingival; esto debido a que
contiene un amplio espectro, funcionando principalmente para combatir
al estreptococo mutans siendo este la principal fuente bacteriana en
dicha zona. Nuestro estudio permiti evidenciar que el propleo es ms
eficiente en el combate de microorganismos Gram positivos y no tanto
contra los Gram negativos.2
Se evalu la actividad antimicrobiana de cuatro extractos de propleos
argentinos, cinco colombianos y uno cubano frente a Estreptococos
mutans. La actividad bactericida y bacteriosttica fue medida por
concentracin mnima inhibitoria en un rango entre 0.02 y 15 mg/ml. La
totalidad de las muestras analizadas presentaron actividad contra
Estreptococos mutans a concentraciones de 15 a 3.75 mg/ml. Los
propleos que presentaron mayor efecto bactericida fueron el 2 y el 3
(muestras colombianas) luego de 48 horas de incubacin. El mejor
efecto bacteriosttico lo present la muestra 2 (propleo colombiano) a
un periodo de incubacin de 24 horas. El 70% de las muestras de
propleo incrementaron su actividad luego de un tiempo de incubacin
de 48 horas, en relacin con el efecto detectado a las 24 horas. A mayor
exposicin de las bacterias al propleo, las muestras colombianas
mostraron un efecto superior, las argentinas un efecto moderado y las

1
2

dems muestras (30%), permanecieron estables. (En un estudio

argentino)2.
Las abejas fabrican el propleo a partir de yemas de rboles,
arbustos y otros vegetales, y lo utilizan para recubrir las paredes de los
panales con objeto de mantenerlos libres de bacterias, hongos y otros
invasores.
El propleo ya era conocido por Aristteles, quien lo consideraba
un buen remedio para las infecciones de la piel, llagas y supuraciones.
Los incas lo usaban para aliviar infecciones febriles; los franceses del
siglo XVIII lo aprovechaban en la curacin de llagas, y durante la guerra
de los boers, en frica del Sur alrededor de 1900, se utiliz ampliamente
en el tratamiento de heridas infectadas y como sustancia cicatrizante.
Aunque durante siglos se pens que el objetivo del propleo era
sellar la colmena para protegerla de los elementos, durante el siglo XX
se descubri que esta suposicin no era correcta. Actualmente se cree
que el objetivo de los propleos es reforzar la estabilidad estructural de
la colmena, reducir las vibraciones, hacer la colmena ms defendible,
cerrando entradas alternativas y prevenir enfermedades y parsitos.
Se trata de una sustancia resinosa, balsmica, de color variable
entre amarillo y castao oscuro, que depende de su origen botnico.
Tiene un sabor acre, frecuentemente amargo, y un olor agradable y
dulce. Cuando se quema, exhala una fragancia de resinas aromticas.
El motivo de este trabajo es crear un enjuague con EEP (Extracto
Etlico de Propleo) para que tenga un efecto bacteriosttico en el
crecimiento de bacterias como el S. Mutans y el S. Salivarius entre otro
tipo de microorganismos; en pacientes de cualquier edad.
Dentro de la trascendencia en la odontologa es de vital importancia los
niveles de prevencin de la salud, siendo el primero de gran necesidad
para la poblacin ya que de esta forma se pueden evitar muchas

enfermedades, entre ellas la caries dental, la higiene oral lleva al

individuo a la manutencin de su propia salud bucal. Los auxiliares para
poder llevar a cabo esta serie de acciones incluyen pastas dentales,
cepillos entre otros utensilios como el hilo dental y los enjuagues
bucales. De ser posible el desarrollo de este proyecto y comprobando su
eficacia dentro de la poblacin mexicana ser posible poner disposicin
de la misma un utensilio ms, que en este caso es 100% natural; siendo
inocuo para el pblico en general.
El propsito de este proyecto es crear un enjuague bucal a base de
sustratos naturales a un bajo costo, tratando de que los individuos que
en algn momento pudieran ser usuarios de este producto mejoren su
higiene bucal con aditamentos naturales.
De ser posible una fabricacin con xito de este prototipo de
enjuague bucal podremos lograr la incursin de un nuevo aditamento de
higiene bucal dentro de la poblacin local.

Planteamiento del problema

Puede tener efecto antimicrobiano el extracto etanolico de propleo al
96% y 100% mediante un estudio in vitro en cepas de streptococos
mutans?
Hiptesis
El C.D. Frank R Mayta Tovalino demostr el efecto antibacteriano del
extracto etanlico de propleo (EEP) 96% y 100% siendo bactericida
dentro de las primeras 48 horas entonces a estas concentraciones los
sensidiscos deben tener un mayor halo de inhibicin por lo que
disminuir el S mutans in vitro dentro de las primeras 48 horas.
Objetivo
Demostrar el efecto antimicrobiano del extracto etanolico de propleo al
96% y 100% mediante un estudio in vitro en cepas de streptococos
mutans in vitro, esto en instalaciones de la Facultad de Estudios
Superiores Iztacala.

Comparar la eficacia de un antisptico (enjuague bucal) de una casa

comercial y el extracto etanolico de propoleo para poder determinar
cul de los dos brinda mejores resultados mediante un estudio in vitro.
Controlar la capacidad acido gnica provocada por el metabolismo
del streptococo mutans.

Metodologa
MATERIALES
Cajas de Petri estriles

TIPO DE
MATERIA
L
Fsico

Hisopos estriles

CANTIDA
D

MARCA

20 piezas

Senna

30 piezas

Sensidiscos

150 piezas

guantes de exploracin

40 pares

Rotavapor

1 pieza

Micropipeta

1 pieza

Estufa bacteriana

1 pieza

Vernier electrnico

1 pieza

Mortero

1 pieza

Papel filtro

2 piezas

agua destilada

Qumico

Etanol al 96%

Propleo

-----

Instrumento pres
por la FESI
Instrumento pres
por la FESI
$80.00

Instrumento pres
por la FESI
Instrumento pres
por la FESI
Instrumento pres
por la FESI
Instrumento pres
por la FESI
Instrumento pres
por la FESI

1 litro
1 litro

Lyson en aerosol
Cepa de streptococos mutans en
activo

dentlux

PRECIO

Un envase
Biolgico

20

------

-----

300 gr

-----

-----

*LOS PRECIOS SON EXPRESADOS EN PESOS MEXICANOS.

El procedimiento constara de 2 etapas.

Etapa 1 preparacin del extracto etanolico de propoleo. (para el
procedimiento de todo el proyecto se requiere la desinfeccin de todas
las rea en donde se trabajara para evitar cualquier contaminacin que
pudiera sesgar el proyecto de investigacin).
1.- Se separarn los componentes que no forman parte del propoleo
como restos pequeos de madera, de hojas y otros, que puedan alterar
su composicin.
2.- Para el procesamiento del EEP, el propleo ser extendido sobre una
mesa y se seleccionaron aquellos fragmentos que no presenten
impurezas.
3.- se realizara la pulverizacin en un mortero de porcelana.
4.- Se prepararon dos extractos alcohlicos, al 96% y al 100% por
maceracin durante 8 das a 37C en estufa bacteriolgica.
5.- Se llevara a cabo una filtracin en papel membrana o papel filtro.
6.-Se llevara a una rota vapor durante
eliminar el alcohol en su totalidad.

un espacio de 1 hora para

7.- Se llevara el extracto de propleo a dilucin en agua bidestilada

llevndolas a las siguientes porciones; una parte de extracto por 3 de
agua y se llevara a su almacenamiento a temperatura ambiente.
Etapa 2 inoculacin en cajas de petri: (para cumplir los estndares
internacionales y que el proyecto tenga validez ante la comunidad
cientfica internacional se deber de preparar la cepa a la escala
de Mc Farlac para mantener los estndares dentro den la
microbiologa).
1. Coloque sobre la mesa la caja de petri con la tapa hacia abajo cerca
del mechero bunsen. (El medio de cultivo debe quedar hacia la parte
superior).

2. Con una sola mano abra la caja de petri y mantngala cerca de la

flama del mechero (a no ms de 10cm).
3. tomar una muestra del medio de cultivo de strepotococs mutan, es
decir impregnndolo de la cepa streptococos mutans, esto en base a la
escala Mc Farlac (el hisopo solo deber de absorber lo que fsicamente le
es posible, dejando el excedente en las paredes del recipiente del medio
de cultivo).
4. En una zona de la periferia que usted elija, con el hisopo con el asa
segn sea el caso, realice una zona de descarga no abarcando la
superficie total de manera uniforme. Para que la descarga resulte ptima
debe de pasarse el hisopo repetidas veces sobre la misma zona, la
inoculacin de la muestra debe realizarse con el mayor cuidado posible
a fin de no romper la superficie del agar.
5. Incinera los hisopos que fueron utilizados por lo que tendr que
exponerlos al calor del mechero.
6. Se impregnaran los discos de papel filtro con la solucin de propleo,
esto se realizara con una micropipeta, llevando la cantidad de 1.0 ml
exactos; y se depositaran en los cultivos contaminados con la cepa de
streptocos mutans dejando una distancia uno de otro de 3 cm, se
depositaran 5 sensidiscos por cada caja de Petri..
7. Deposita las cajas de petri sobre una estufa bacteriolgica dejndola
reposar por 72 horas haciendo observaciones de la siguiente forma:
Se proceder a medir la evolucin en las cajas de petri con una regla y
se registraran los resultados haciendo un anlisis comparativo DENTRO
DE LAS PRIMERAS 6, 12, 24, 48 Y 72 HORAS.
Se medirn las dimensiones de los halos de inhibicin con un vernier
electrnico en el sistema internacional de medidas.

Se llevara un registro fotogrfico que ser adjuntado en la

investigacin como testigo de la evolucin en las cajas de Petri.

Resultados
Uso del extracto etlico de propleo como agente bacteriosttico para el control de la
actividad microbiana del streptococo mutans en un estudio in vitro
Caja de Petri 1

TIEMPO

Dimensiones

Forma

Imagen

6
12
24
48
72

Se realizara una tabla de cada caja con sus respectivos datos.

Se tabularan los datos en una grfica de polgonos los valores de tiempo
y los de dimensiones.
DISEO ESTADISTICO

CRITERIOS DE INCLUSIN: Cepa de streptococos mutans

CRITERIOS DE EXCLUSIN: Todas las bacterias que no sean

streptococos mutans

CRITERIOS DE ELIMINACIN: Si la bacteria es contaminada por un

agente extrao o ajeno a su estado aislado.

TIPO DE DISEO LONGITUDINAL DE EVOLUCIN DE GRUPO O

COHORTE

COMPARATIVO

EXPERIMENTAL

PROSPECTIVO

Referencia Bibliogrfica

CUENCA SALA, EMILI; BACA GARCIA, PILAR; ODONTOLOGIA

PREVENTIVA Y COMUNITARIA PRINCIPIOS METODOS Y APLICACIONES,
3ra edicin, Ed Masson, Mexico DF, 2005, pp 486, pag 60.

efecto antimicrobiano in vitro de propleos argentinos, colombianos y

cubano sobre streptococcus mutans ATCC 25175, 70-75
3

Martinez Telmo, et. al, Actividad antimicrobiana de muestras de

propoleo colombiano, pag 12.
4

Mayta Tovalino Frank R, Evaluacin in vitro del efecto antibacteriano

del extracto etanlico de propleo de Oxapampa - Per sobre cultivos de
Streptococcus mutans (ATCC 25175) y Staphylococcus aureus (ATCC
25923), pag 1.