Universidad Andrs Bello

Facultad de Ciencias de la Salud

Departamento de Ciencias Biolgicas
Laboratorio de Biologa Celular BIO 035

TRABAJO PRACTICO N4
COMPONENTES QUIMICOS DE LA
CELULA

Alumnos:
Luis Alarcn
Fabin Escobar
Catalina Negri
Alondra Barraza
Seccin: 3
Profesoras:
Fernanda Rodriguez
Agustina Undabarrena

2015

Introduccin
Las clulas son unidades estructurales sumamente complejas las cuales son capaces de
crecer, reproducirse, procesar informacin, responder a diversos estmulos y llevar a cabo
una gran variedad de reacciones qumicas.1 En conceptos generales, las clulas estn
compuestas por agua, iones inorgnicos y molculas orgnicas tales como hidratos de
carbono, protenas, lpidos y cidos nucleicos; cada uno de estos compuestos cumplen una
funcin de gran importancia en la clula, ya sea, como componentes estructurales o
funcionales. Para reconocer dichos compuestos en la clula de cada sustancia en estudio
se tienen diversos mtodos que nos permiten identificarlos.
Los monosacridos y algunos disacridos muestran una importante capacidad reductora que
posibilita su reconocimiento en distintos tipos de muestras, como la orina y la leche. Para
reconocer dichos azucares en cuestin se utiliza el mtodo de reaccin de Somogyi;
compuesto por sulfato de cobre e hidrxido de sodio, lo que forman hidrxido de cobre y
hace que este compuesto tome un color azulado. En este mtodo, en el momento de aplicar
calor en presencia de un hidrato de carbono reductor (glucosa), se manifiesta un precipitado
rojo ladrillo que corresponde al oxido cuproso, que servir de marcador. Para la
identificacin de polisacridos es factible utilizar la prueba de lugol, la cual consiste en una
mezcla de yoduro de potasio con yodo la cual al encontrarse con el polisacrido produce
una coloracin azul-violeta. Este color producido es debido a que el yodo queda atrapado
entre dos tipos distintos de cadenas que conforman la estructura qumica de este,
permitiendo ntegramente su identificacin.
Para la identificacin de protenas se puede utilizar el reactivo de Biuret que se describe
como una solucin alcalina de cobre el cual reacciona con los enlaces peptdico de las
protenas especficamente con los grupos aminos formando un enlace coordinado, el cual
brinda a la muestra un color azul-violeta que permite identificar la presencia de protenas.
La presencia de lpidos se puede determinar gracias a su condicin hidrofbica y la de
algn ion inorgnico mediante reacciones especficas que presenten precipitados.
Las protenas tambin tienen una accin enzimtica conocida como la enzima catalasa la
que convierte el perxido de hidrogeno en agua y oxigeno por lo que su presencia se puede
determinar permitiendo esta reaccin.2 Siendo as que surge la siguiente interrogante

Mediante estas reacciones es posible obtener no solo resultados cualitativos sino que
tambin cuantitativos aproximados?

Objetivos.

Reconocer y entender la efectividad en el uso de tinciones mediante la utilizacin de

soluciones y mtodos asociados.

Reconocer la presencia de sustancias especficas de origen tanto orgnico como

inorgnico presentes en diversas soluciones.

Materiales y Mtodos
Para la realizacin del presente laboratorio, se siguieron una serie de pasos, los cuales se
detallan a continuacin:
En primer lugar, la profesora realizo una introduccin de la clula y sus diferentes
componentes especficos, para luego dar lugar a la realizacin de 5 actividades.
La actividad numero 1 consisti en identificar monosacridos en las diferentes muestras
gracias a la reaccin con el reactivo de Somogy. Se dispuso de 8 tubos de ensayo
destinados a esta actividad los cuales fueron marcados con su respectivo nmero. Luego se
procedi a preparar cada uno de los compuestos, los cuales eran: glucosa, almidn, NaCl,
que deban estar preparados con una concentracin al 1%, agua destilada, leche, almidn
hidrolizado, y las soluciones A y B, de las cuales sus componentes eran desconocidos, ya
que fueron presentados como compuestos incgnitos, los cuales, los alumnos por su cuenta
deban descubrir. Luego se procedi a llenar cada tubo de ensayo con un 1 ml, a travs de la
utilizacin de una pipeta, para as poder llenar de manera exacta cada tubo de ensayo.
Posteriormente, se agreg de la misma manera, 1ml de Somogy a cada una de las muestras.
Este es un reactivo que necesita calor, por lo cual, los tubos de ensayo fueron puestos a
bao termorregulador a aproximadamente 90 durante 3 minutos. Terminado el tiempo, los
tubos debieron ser extrados del calor con mucho cuidado, para poder visualizar el resultado
de la reaccin.
Ms tarde, la actividad nmero 2, consisti en la deteccin de polisacridos en los
compuestos, a travs de la utilizacin del reactivo de Lugol. Para realizar esta actividad se
utilizaron las mismas muestras utilizadas en la actividad anterior (glucosa, almidn, NaCl,
agua destilada, leche, almidn, hidrolizado y las soluciones A y B) y el mismo volumen, es
decir, 1 ml de cada una, vertido debidamente con la pipeta. Luego se procedi a agregar 1
ml de reactivo de Lugol a cada una de las muestras. En este caso, no se requiere la
aplicacin de calor u otro procedimiento especfico, pero si se necesita agitar delicadamente
el tubo de ensayo para poder mezclar debidamente ambos compuestos y as poder

visualizar los resultados obtenidos al mezclar cada una de estas sustancias con el reactivo
de Lugol.
Terminado esto, se contina con la realizacin de la actividad nmero 3, la cual consisti
en la deteccin de protenas en los diferentes compuestos a travs de la utilizacin del
reactivo de Biuret. Para este experimento fueron designados 7 tubos de ensayo, en los
cuales, se coloc, 1 ml de agua, solucin glicina, clara de huevo, leche, NaCl al 1%,
solucin A y solucin B, y luego aplicamos 1 ml de Biuret, respectivamente a cada tubo de
ensayo, para finalmente agitar la mezcla y as poder observar los resultados obtenidos.
Luego la actividad nmero 4, consisti en la deteccin de lpidos, para esto se destinaron 2
tubos de ensayo. En el primero, 1 ml de aceite ms 1 ml de agua, y en el segundo 1 ml de
aceite ms 1 ml de ter. En este caso, se debi agitar el tubo de ensayo con unos pequeos
golpecitos para poder lograr la mezcla de forma adecuada.
Posteriormente, se realiz la actividad nmero 5, la cual consisti en la mezcla de 2
compuestos diferentes y ver la reaccin de ello. El desarrollo de este experimento fue de la
siguiente manera: Se designaron 6 tubos de ensayo, en los cuales, en cada uno, con la ayuda
de una pipeta, se agreg 1 ml de cada compuesto designado para la realizacin de la
mezcla, y luego fue debidamente agitado para poder observar si el resultado era un color
transparente o un blanco lechoso. Las mezclas efectuadas fueron las siguientes: CaCl2 mas
Nitrato de Plata, Cacl2 mas Oxido de Amonio, Sol A ms Nitrato de Plata, Solucin B ms
Oxido de Amonio, Sol A ms Oxalato de Amonio y Solucin B ms Nitrato de Plata.
Finalmente, se ejecut la actividad nmero 6, la cual consisti en el reconocimiento de
enzimas, especficamente, la deteccin de la enzima catalasa. Para esto, se utilizaron 2
tubos de ensayo. En el primer tubo de ensayo, se introdujo un trozo de hgado, luego fue
adicionado 1 ml de Perxido de Hidrogeno y se examinaron los resultados obtenidos. En el
segundo tubo de ensayo, tambin fueron colocados unos trozos de hgado, posteriormente,
se adiciono agua y la muestra fue puesta a hervir en el bao termo regulado durante 30
minutos. Acabado este tiempo, fue debidamente retirado, se quit el exceso de agua y se
aadi perxido de hidrogeno. Posterior a esto, se observaron los resultados obtenidos.
Finalmente, acabados los experimentos, se procedi a tabular los resultados obtenidos en
cada una de las actividades realizadas.

Resultados
N

Muestra

Color Inicial

Color Final

Reaccin

Agua Destilada

Transparente

Negativa (-)

Glucosa

Transparente

Azul
traslucido
Anaranjado
traslucido

Almidn

Transparente

Negativa (-)

Transparente

Negativa (-)

No

Cloruro de Sodio
(NaCl)
Leche

Azul
traslucido
Azul
traslucido
Azul lechoso

Precipitado
denso al fondo
de la muestra
No

Negativa (-)

No

Almidn Hidrolizado

No

Solucin A

Anaranjado
opaco
Anaranjado
claro lechoso

Positiva (+)

Transparente
opaco
Transparente

No

Solucin B

Transparente

Reacciona un
poco/ Positiva
(+)
Negativa (-)

Blanco

Positiva (+)

Azul- Violeta
traslucido
Experimento N1 Reconocimiento de Hidratos de Carbono/ Identificacin de
monosacridos mediante la reaccin de Somogyi.

Formacin de
precipitado
No

No

Experimento N2 Reconocimiento de Hidratos de Carbono / Identificacin de Polisacridos

mediante la prueba del Lugol.
N

Muestra

Color Inicial

Color Final

Reaccin

Formacin de
precipitado

Agua Destilada

Transparente

Negativa (-)

No

Glucosa

Transparente

Negativa (-)

No

Almidn

Transparente

Positiva (+)

Cloruro de Sodio
(NaCl)

Transparente

Amarillo
traslucido
Amarillo
traslucido
Amarillo
Azulado
Traslucido
Amarillo
Traslucido

Precipitado
denso al fondo
de color azul
No

Negativa (-)

Leche

Blanco

Almidn Hidrolizado

Transparente
opaco

Solucin A

Transparente

Solucin B

Transparente

Blanco lechoso
Amarillento
Amarillo
Azulado
Traslucido
Amarillo
Azulado
traslucido
Amarillo
traslucido

Negativa (-)

No

Positiva (+)

Precipitado
denso al fondo
de color azul
Precipitado
denso al fondo
de color azul
No

Positiva (+)
Negativa (-)

Experimento N3 Reconocimiento de Protenas / Reaccin de Biuret

N

Muestra

Color Inicial

Color Final

Reaccion

Agua Destilada

Transparente

Negativa (-)

Glicina

Transparente

Negativa (-)

No

Clara de Huevo

Transparente
Amarillento

Celeste
traslucido
Celeste
Traslucido
Azul intenso
Violeta

Formacin de
precipitado
No

Positiva (+)

Leche

Blanco

Positiva (+)

Transparente

Negativa (-)

No

Cloruro de Sodio
(NaCl)
Solucin A

Positiva (+)

No

Solucin B

Transparente

Violeta
lechoso
Celeste
Traslucido
Azul intensoVioleta
traslucido
Celeste-Violeta
traslucido

Precipitado
muy denso en
casi toda la
muestra
No

Positiva (+)

No

Transparente

Experimento N4 Reconocimiento de Lpidos

Muestra

Color Inicial

Observacin

Color Final

Agua + Aceite

Transparente

Los dos compuestos no se

forman una mezcla homognea,
estos no se juntan.

Agua transparente y aceite

amarillento

ter + Aceite

Transparente

Los dos compuestos forman una

mezcla homognea.

Experimento N5 Reconocimiento de Sales Minerales

Muestra
Cloruro de Calcio + Nitrato de plata

Precipitado
No

Cloruro de Calcio + Oxido Amonio

No

Solucin A + Nitrato de Plata

Se forma un precipitado en la solucin.

Solucin B + Oxido Amonio

No

Solucin A + Oxido Amonio

No

Solucin B + Nitrato de Plata

No

Experimento N6 Reconocimiento de Enzimas

Muestra

Color Inicial

Observacin luego de adicin de Perxido de

Hidrogeno

Hgado Crudo

Rojo intenso

Hgado Cocido

Caf claro

Se forma una cantidad de burbujas que sobrepasan

la capacidad del tubo, el hgado burbujea tambin
hasta quedar de un color caf muy claro.
Poca formacin de burbujas, estas se concentran
ms en la orilla del tubo

Discusin
Tras la realizacin del experimento en la actividad 1, para la identificacin de
monosacridos presentes en las respectivas soluciones acuosas (glucosa, almidn, NaCl al
1%, agua destilada, leche, almidn hidrolizado, y las soluciones A y B (compuestos
incognitos)) a travs de la reaccin de Somogyi en presencia de calor aplicado con un
bao termorregulador (90c aprox.) fue posible registrar el cambio esperado en la mayora
de las reacciones segn el respaldo bibliogrfico3 el cual determina que Cuando el reactivo
Somogyi se calienta y est en presencia de un carbohidrato reductor, se forma una
coloracin naranja u roja intensa, siendo determinantes especficamente en las muestras
que contienen Glucosa al 1% obtenindose un color marrn anaranjado y Leche la cual
tambin se torn de la misma tonalidad. En lo que respecta a las dems muestras se
obtuvieron resultados similares entre ellas con una tonalidad azul-violeta y celeste.
El objetivo de la actividad nmero 2 era la identificacin de polisacridos utilizando el
mismo mtodo y soluciones que la actividad nmero 1 pero con el reactivo Lugol, el cual
en presencia de polmeros de monosacridos reacciona cambiando tambin la tonalidad de
las soluciones. Los resultados obtenidos concuerdan con la informacin investigada4, ya
que, dependiendo de las ramificaciones que presente la molcula de polisacridos es el
contraste de colores obtenidos tiendo a la muestra violeta oscuro, lo que se produce
gracias a que el yodo del lugol queda inmovilizado dentro de las hlices que son el
resultado de la unin entre las molculas del polisacrido5. Siendo as como en las muestras
tanto de agua destilada, glucosa, nacl, leche y solucin B se obtuvo un color amarillo
claro. No as las muestras que contenan almidn al 1%, almidn hidrolizado y la
respectiva solucin A cuyo contenido era incognito, tornndose cada una de las
soluciones con un color azul violceo; siendo as an ms concluyente, la aparicin de un
precipitado en el fondo de cada una de estas soluciones que en contraste con la bibliografa
se puede predecir tentativamente que se debe a la variacin de densidades tanto del reactivo
como del reactante utilizados en el experimento.

Posteriormente mediante la reaccin de Biuret se busca identificar en soluciones de Agua

destilada, Clara de huevo, glicina, Leche, NaCl al 1%, solucin A y solucin B, la
presencia de enlaces peptdicos (grupo amino con Cu+2 del reactivo) y por consiguiente la
presencia de protenas. Tras realizado el procedimiento correspondiente se obtuvo una
coloracin azul-celestina en cada una de las mezclas siendo considerablemente ms intensa
esta tonalidad en las muestras que contenan leche , clara de huevo y la solucin incgnita
A debido, segn el respectivo respaldo bibliogrfico6, a la cantidad y capacidad proteica
presentes en dichas sustancias y la presencia efectiva de enlaces peptdicos. El aminocido
glicina presento una reaccin negativa pese a que tentativamente se podra esperar lo
contrario, ya que, como se especifico es un aminocido (estructura bsica de una protena)
pero este no genera un enlace peptdico que es necesario para concretar una reaccin
positiva debido a esto el reactivo de biuret no causo un cambio de coloracin en su
composicin.7
En lo que respecta a la actividad nmero 4 se llev a cabo la identificacin de lpidos y
principalmente la determinacin de sus propiedades fsicas, en cuanto a su capacidad
hidrfoba respecto de sus cargas. Las cuales se hicieron evidentes en el momento en que las
soluciones de Agua y Aceite hicieron contacto entre s, formndose dos capas definidas de
una sustancia y la otra. De tal forma que al agitar el tubo de ensayo la capa definida se hizo
ms difusa pero no se perdi tal capacidad hidrofbica y por consiguiente la aparicin de
burbujas aisladas de Aceite entre si tambin se hizo clara y concluyente. No as lo sucedido
con la muestra que contena las soluciones de Aceite y ter, ya que, en contraste, la
solucin formada fue totalmente homognea y ambas sustancias se mezclaron de manera
que a ojo descubierto no se era posible detectar diferencia alguna entre una y otra, sin la
aparicin de ningn tipo de capa o fenmeno fsico que permitiera detectar la presencia de
una mezcla, debido a que ambos compuestos son de carcter No polar, es decir, no
presentan densidades de cargas opuestas.8
El objetivo de la actividad numero 5 consisti en la mezcla de CaCl2 mas Nitrato de Plata,
Cacl2 mas Oxido de Amonio, Sol A ms Nitrato de Plata, Solucin B ms Oxido de
Amonio, Sol A ms Oxido de Amonio y Solucin B ms Nitrato de Plata en sus
respectivos tubos de ensayo y obtener diferentes reacciones para as la determinacin de las
sustancias presentes en las soluciones incgnitas A y B , de las cuales se puede

predecir contienen Cloruro de calcio y Cloruro respectivamente, debido a que la solucin

de Nitrato de plata con la solucin A otorgo una reaccin positiva siendo as que la
reaccin de la solucin B con oxalato de amonio (el cual reacciona con calcio) otorga una
tonalidad transparente destacndose que no hay reaccin en ausencia de calcio. Debido a la
carencia de bibliografa que respalde de manera concluyente los hechos observados no es
posible predecir de manera exacta el contenido de las soluciones A y B quedando solo
explicaciones tentativas9.
De manera ltima se realiz el experimento de la actividad nmero 6 el cual consista en la
deteccin de la enzima catalasa mediante la aplicacin de temperaturas elevadas mediante
un bao termorregulador (94C aprox.) que produce la desnaturalizacin de est,
cambiando su estructura e inhibiendo sus funciones en contraste de una muestra que fue
expuesta a temperatura ambiente, que por consiguiente mantuvo tanto su estructura como
su funcin. Esto se determin al aplicar una solucin de perxido de hidrogeno, el cual
reacciono de manera que la muestra expuesta a temperaturas elevadas no mostro una
cantidad razonable de espuma, en tanto la muestra expuesta a temperatura ambiente
demostr una cantidad de espuma que supero la capacidad del tubo de ensayo que la
contena debido a la caracterstica de descomposicin del perxido de hidrogeno en agua y
oxgeno, demostrando la presencia activa de la enzima catalasa en la muestra10.

Conclusin
Tras la realizacin del presente prctico de investigacin podemos concluir de manera
general que la utilizacin de recursos qumicos permite y facilitan la realizacin de
experimentos especficos con el fin de lograr conocimientos profundos de las caractersticas
y composiciones qumicas de la materia considerando un origen tanto orgnico como
inorgnico.
Es as como tambin podemos concluir de manera especfica que:

El reactivo de Somogyi, en presencia de calor, permite identificar la presencia de

monosacridos en soluciones acuosas.

Las soluciones tratadas con Lugol facilitan el reconocimiento de polisacridos en

muestras acuosas.
Mediante el reactivo de Biuret se puede hacer anlisis cualitativo de la presencia de
enlaces peptdicos, en consecuencia, verificar la presencia de protenas en

soluciones acuosas.
Para determinar las cualidades fsico-qumicas de los lpidos en cuanto a su
capacidad hidrfoba se debe hacer en contraste con un disolvente apolar como el

ter.
Mediante una muestra de hgado, se puede reconocer la presencia de la enzima
catalasa, en diferencia con una muestra con la enzima y la otra con ella inhibida a
travs de la desnaturalizacin por calor.

Finalmente podemos agregar que los recursos visuales como el color o fenmenos fsicos
observables entregados por las diferentes reacciones son determinantes a la hora de obtener
resultados que permitan un correcto anlisis. Siendo as que la interrogante en cuestin se
responde de manera negativa, ya que, aunque se puede determinar la presencia de
compuestos de manera cualitativa, no se puede determinar de manera cuantitativa en
ningn caso a no ser que se aplique un criterio que especifique una escala de colores con
valores referentes para cada reaccin, siendo as el caso an se requiere de estudios anexos
que sean concluyentes.

Bibliografa

Berk, Darnell, Kaiser Krieger, Lodish, Matsudaira, Zipursky, Biologa Celular y

Molecular. (Junio del 2006). Editorial Mdica Panamericana, 5a edicin, Buenos Aires
Argentina. Pp. 1.
Universidad Andrs Bello, Gua de laboratorio N4: Componentes qumicos de la
clula, curso BIO035 Biologa General, 2015
http://www.academia.edu/9876667/Determinaci%C3%B3n_de_la_concentraci
%C3%B3n_de_az
%C3%BAcares_reductores_en_Malus_domestica_Rosaceae_por_un_m
%C3%A9todo_fotom%C3%A9trico.
Fecha de ingreso: 26/05/2015

10

-Universidad Andrs Bello, Gua de laboratorio N4 :

COMPONENTES QUMICOS DE LA CLULA, curso Bio035 biologa general,
2015
Estela Sandoval Z., 2005, Tcnicas aplicadas al estudio de la anatoma vegetal,
UNAM.
http://catedras.quimica.unlp.edu.ar/qo3/Apuntes/Biuret.pdf
Fecha de ingreso: 26/05/2015

www.smbb.com.mx/revistauniversidadcentralmexico/Revista_1998_2/bitacora.pdf
Fecha de ingreso: 26/05/2015
http://www.monografias.com/trabajos16/lipidos/lipidos.shtml
Fecha de ingreso: 26/05/2015

http://m.monografias.com/trabajos73/analisis-cualitativo-cationes/analisis-cualitativocationes2.shtml
Fecha de ingreso: 26/05/2015
http://es.slideshare.net/lizbethdamazogalvez/factores-que-influyen-en-la-actividadenzimtica
Fecha de ingreso: 26/05/2015