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MULTIPLICATION DES VIRUS

Les tapes de la multiplication virale:


1. Le virus fixe sur la membrane cellulaire
(attachement).
2. Le virus pntre dans la cellule: pntration.
3. Le virus libre son acide nuclique
(dcapsidation).
4. Le virus doit traduire et rpliquer son information
gntique (rplication).
5. Le virus doit assembler les diffrents constituants
nosynthtiss (assemblage) pour aboutir la
libration des particules virales noformes.
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Bien que les virus diffrent entre eux par leur


structure et par lorganisation de leur information
gntique, leur cycle de multiplication possde
un mme schma de base.
-Attachement: Lattachement du virus la cellule
est un phnomne spcifique mais qui ne
require pas dnergie.
-Pntration: en gnral, les virus pntrent
dans la cellule par endocytose. Les virus
envelopps peuvent pntrer par fusion entre
les membranes virales et les membranes
cellulaires.
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-Dcapsidation: la dcapsidation aboutit la


libraton du gnome dans le cytoplasme ou dans
le noyau.
- Transcription prcoce, rplication du gnome,
transcription et traduction tardives: cette
transcription se fait partir du gnome infectant et
aboutit la synthse de:
-Enzymes ncessaires la rplication du
gnome viral (rplicases).
- Enzymes ncessaires la transcription
tardive (ex. RNA polymrases).
-Protines de contrle qui bloquent la synthse
des acides nucliques de la cellule hte.
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-Assemblage, maturation , libration:


-Virus sans enveloppe: assemblage
indpendant de la libration : gnralement la
libration survient quand la cellule est dtruite
par leffet de linfection.
-Virus enveloppe: assemblage et libration
sont lis dans le processus de
bourgeonnement .

Le mode de rplication est fonction de la


nature du gnome viral: les virus ADN
ou les virus ARN.
I- Rplication des virus ARN: se fait selon
deux grandes stratgies.
virus ARN positif (+);
virus ARN ngatif (-);
les virus dont lARN doit, pour se rpliquer,
tre transcrit en une copie dADN proviral
double brin.
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1)- Virus ARN positif (+): fig. 3.3, les virus


correspondants possdent un ARN gnomique
directement messager qui, ds sa libration
dans la cellule, sert la synthse protique.
par example le virus de la poliomylite. Cest
un petit virus ARN (picornavirus;
picornaviridae). LARN gnomique est protg
par une capside icosadrique sans
enveloppe.
La rplication peut se dcomposer en 5
tapes:
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Premire tape: le virus se fixe sur un rcepteur


cellulaire. Il pntre dans la cellule lintrieur dune
vacuole de pinocytose; la dcapsidation, non
spcifique, se fait par des enzymes cellulaires; lARN
viral est libr.
Seconde tape: lARN viral (+) sert directement
dARNm. Un grand polypeptide N00 est synthtis qui
sera ensuite cliv en N1 , Nx et N2 ; N1 est cliv en
VP0 , VP1 et VP3 (VP, viral protin) participeront
llaboration de la capside; parmi les autres
protines, on distingue une protase et une ARN
polymrase ARN-dpendante.
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Troisime tape: pour assurer la


duplicaiton de lARN (+), un intermdiaire
(-) est ncessaire; ce brin (-) apparat sur
la matrice (+) grce lARN polymrase
ARN-dpendante nosynthtise qui
porte le nom de rplicase.

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Cette tape est dpendante dune enzyme


cellulaire, la terminale uridyl-transfrase,
qui synthtise une squence poly (U) face
au poly (A) de lextrmit 3de lARN (+)
viral, et aboutit une structure en pingle
cheveux, et ensuite la rplication
commence.
Donc il apparat des ARN bicatnaires.

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Quatrime tape: A partir de lARN (-), il y a


synthse dARN (+), une molcule dARN (-)
gnrant plusieurs ARN (+); les ARN (+)
synthtiss seront les ARN gnomiques
viraux; ils peuvent galement participer
lamplification de la synthse protique.
Cinquime tape: les particules virales vont
tre assembles: des polymres de VP0, VP1 et
VP3 sassocient pour former une procapside
dans laquelle pntre un ARN gnomique (+).
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Le clivage de VP0 en VP2 et VP4 assurent


la fermeture de la procapside en capside
dont les protines capsidales sont
formes des peptides VP1, VP2 , VP3 et
VP4.
Les nuclocapsides virales saccumulent
dans le cytoplasme de la cellule, ralisant
parfois des amas pseudocristallins. La
cellule finit par clater et les virions
passent dans les espaces intercellulaires.
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Cette multiplication entraine une anomalie


cellulaire dcelable en microscopie photonique
et utilisable au laboratoire pour le diagnostic
virologique: leffet cytopathogne ou ECP.
Dans le cas du virus de la poliomylite,
lisolement chez le malade se fait partir des
selles; celles-ci sont mises en culture au
laboratoire sur un systme cellulaire adapt.

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La multiplication virale entrane en 24 heures un


arrondissement des cellules (ECP ltat

frais); on distingue une volumineuse


inclusion osinophile intracytoplasmique
correspondant laccumulation des
nuclocapsides et qui repousse le noyau
en priphrie (fig. 3.4).

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2)-Virus ARN ngatif (-): le gnome viral nest


pas directement messager; une transcription de lARN
(-) en ARN (+) est ncessaire; ceci se fait grce une
enzyme constitutive du virus, une ARN polymrase
ARN-dpendante, qui portera dans ce cas le nom de
transcriptase. LARN (+) synthtis servira dARNm
pour la traduction protique.
par example le virus de la grippe,
orthomyxoviridae, capside tubulaire symtrie
hlicoidale, virus envelopp (fig.3.6); fig. 3.7.
LARN gnomique est un ARN monocatnaire (-)
en 8 segments. Voir la rplication fig 3.8.
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Premire tape: le virus se fixe grce son


HA sur un rcepteur cellulaire . Il y a fusion
entre lenveloppe virale et la membrane
cytoplasmique de la cellule. La nuclocapside
est libre dans le cytoplasme, la
dcapsidation est ralise de faon non
spcifique par des enzymes cellulaires et
lensemble ARN viral transcriptase migre dans
le noyau.
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Deuxime tape: il est ncessaire de


rappeler que les ARNm cellulaires
possdent une coiffe (CAP, 7mthylguanosine) .
Le CAP sert au positionnement des ribosomes
sur lARNm.
LARN gnomique viral tant (-), il doit tre
transcrit en ARN (+) par la transcriptase virale.
En effet, un ARNm cellulaire vient saccrocher
lARN viral (-), et sert damorce la
transcriptase qui synthtise un ARN (+).
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Troisime tape: lARN (+) pourvu dun ARNm et


en particulier du CAP passe dans le cytoplasme et
joue le rle dARNm pour les protines virales.
Quatrime tape: lARN (+) peut servir de matrice
pour la synthse dARN (-) gnomique.
Cinquime tape: lARN (-) associe la

transcriptase est encapsid; la nuclocapside


migre vers la priphrie cellulaire o la
membrane cytoplasmique est hrisse des
spicules.
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Sixime tape: le bourgeonnement se fait sous


le contrle de la protine M; le virion se
dgage dfinitivement de la cellule infecte
sous laction de la neuraminidase.
Au total, 2 lments caractrisent la
rplication du virus grippal: la participation
du noyau cellulaire et la ncessit dune
fonction celulaire (transcription pour
fournir une amorce la transcriptase virale).
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3)-les virus dont lARN doit, pour se


rpliquer, tre transcrit en une copie dADN
proviral double brin: example les rtrovirus.
Les rtrovirus sont des virus ARN possdant
une enzyme capable deffectuer la
transcription de lARN gnomique viral en
ADN. Cette enzyme est nomme
transcriptase inverse (TI) ou
rtrotranscriptase (RT). fig. 7

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Cet ADN va sintgrer au gnome cellulaire et la

rplication du virus commence.


Les rtrovirus comprennent, outre des gnes
de rgulation, 3 gnes de structure (gag, pol,
env) qui sont traduits en polyprotines.
Le gne pol va donner, aprs clivage par la
protase virionique, les enzymes cls de la
rplication du virus: protase, transcriptase
inverse et intgrase.

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La copie de lARN gnomique en une


molcule dADN double brin par la
transcriptase inverse relve dun
mcanisme complexe (fig. 8).
L enzyme transcriptase inverse possde
une triple activit : ADN polymrase-ARN
dpendante, ADN polymrase-ADN
dpendante et RNAseH.

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La synthse du premier brin dADN


dbute lextrmit 5de la matrice dARN
grce un ARN de transfert cellulaire qui sert
damorce.
Un court fragment dADN est synthtis
(activit ADN polymrase-ARN dpendante)
et une translocation va positionner ce fragment
sur lextrmit 3de lARN.

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Aprs longation de la chane dADN et


limination de la matrice dARN (activit
RNAseH), le deuxime brin dADN peut
tre synthtis (activit ADN polymraseADN dpendante).

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II- Rplication des virus ADN: En rgle gnrale


la rplication est intra-nuclaire: aprs la
dcapsidation, l'ADN viral migre dans le noyau
o la rplication se droule en trois phases
(fig. 2):
Phase prcoce: une petite partie du gnome
viral est transcrit par une ARN polymrase ADN
dpendante en ARN messagers ( ARNm ) dits
prcoces qui migrent dans le cytoplasme o ils
sont traduits en protines. Ces protines
prcoces sont des protines rgulatrices et des
enzymes impliques dans la synthse de l' ADN
viral, mais elles ne sont pas incorpores dans la
particule virale ( protines non structurales ).
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Rplication de l' ADN: l' ADN viral est


dupliqu en un grand nombre de copies
par l' ADN polymrase, selon un mode
semi-conservatif .
Phase tardive: ces ADN noforms vont
servir de matrice pour une deuxime
transcription aboutissant la synthse
d' ARNm tardifs traduits en protines de
structure qui seront incorpores dans le
virion lors de l' assemblage ( protines
virioniques ).
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On distingue 3 types de virus ADN:


les virus ADN double brin, example adnovirus,
herpesvirus, poxvirus.
les virus ADN simple brin, sont reprsents par
les parvoviridae. Ce sont des virus de petite taille,
aux capacits limites ( 3 protines ). Certains sont
des virus dfectifs ncessitant la prsence d' un
virus helper
( adnovirus, herps virus ) pour
leur multiplication.
les virus ADN double brin partiellement simple
brin, example Hepadnavirus.

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Adnovirus: virus ADN linaire


bicatnaire li de faon covalente une
protine ; une capside possde une symtrie
icosadrique de 252 capsomres (12 pentons,
240 hexons) sans enveloppe; chacun des 12
pentons est porteur dun spicule activit
hmagglutinante.

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Le cycle lytique (fig. 4.1) aboutit la


destruction de la cellule cible en 24 72
heures.
Regardons la rplication des Adnovirus: Le
virus se fixe sur la cellule entre un site
spcifique et un spicule puis pntre dans la
cellule par pinocytose.
La dcapsidation a lieu de faon non
spcifique dans le cytoplasme; le nuclode
(nuclocapside) migre vers le noyau dans
lequel il pntre (1).
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La phase prcoce (2) va dbuter par la


transcription dARNm prcoces viraux (par une
ARN polymrase ADN-dpendante cellulaire);
les ARNm correspondants sont maturs comme
les messagers cellulaires.
Les ARNm viraux passent dans le cytoplasme
pour tre traduits par les ribosomes cellulaires
en une quinzaine de protines.

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LADN viral entre dans sa phase de duplication


(3) grce lintervention dune ADN polymrase
cellulaire .
La phase tardive de transcription (4) va gnrer des
ARNm qui sont traduits en protines de structure,
dans le cytoplasme.
Lassemblage viral a lieu dans le noyau (5).

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Les virions accumuls seront librs par la


lyse de la cellule.
Voyons lECP des Adnovirus ltat frais: on
voit lapparition de mailles dans le tapis
cellulaire infect; aprs coloration
lhmalun-osine, on distingue des noyaux
dont la chromatine est rtracte au centre et
relie la priphrie par des cloisons de refend
sparant des inclusions basophiles (fig 4.2).

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Regardons la rplication des Herpesvirus:


virus ADN bicatnaire linaire sous
forme de cercle entourant un axe
protique central (lensemble est appel
nuclode), une capside possde une
symtrie icosadrique de162 capsomres;
cette capside est spare de lenveloppe
priphrique par une structure fibrillaire (le
tgument); lenveloppe porte des spicules
courts qui nont pas dactivit
hmagglutinante; la particule virale a une
taille de 150 200 nm (fig. 4.3).
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Voir fig.4.4: le virus se fixe sur la cellule


cible; il y a fusion de lenveloppe virale et
de la membrane cytoplasmique,
dcapsidation et migration du nuclode
vers le noyau (1).
Une transcription trs prcoce et prcoce
(2) va gnrer des protines et
correspondant des enzymes dont une ADN
polymrase et une thymidine kinase .
La duplication de lADN a lieu (3).
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La phase tardive de transcription (4) va


gnrer des protines qui sont des
protines de structure capsidales.
La nuclocapside est assemble dans le noyau
(5) puis va senvelopper aux dpens de la
membrane interne de lenveloppe nuclaire (6)
avant de cheminer vers la priphrie cellulaire
dans les canaux du rticulum endoplasmique
(7).

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Regardons lECP des HSV, fig 4.5: on voit


un arrondissement des cellules infectes;
aprs coloration, on observe un
clatement de la chromatine; cette
chromatine va marginer en priphrie du
noyau sous la pression dinclusions
osinophiles intranuclaire qui
correspondent aux nuclocapsides
icosadriques virales.

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Regardons la rplication des Poxvirus, fig. 4.6:


les virus possdent un ADN gnomique
linaire de 160 x 106 Da, dans une capside en
forme dhaltre, lensemble tant dans une
enveloppe rectangulaire de grande dimension;
entre la nuclocapside et lenveloppe, on note
la prsence de 2 corps latraux.
Da, dalton= unit de masse molculaire, soit
1.66x10-24 gramme

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Voir fig. 4.6: deux particularits sont souligner:


la rplication a lieu dans le cytoplasme de la cellule
et le virus doit possder des enzymes de rplication
(ADN polymrase.......).
Aprs adsorption et pntration par pinocytose, une
tape de transcription de lADN viral est ralise par
une ARN polymrase ADN-dpendante constitutive
virale lintrieur de la nuclocapside et aboutit la
synthse dune dcapsidase qui digre la
nuclocapside et libre lADN viral.
Contrairement ce que nous avons vu
prcdemment pour les autres virus, la dcapsidation
est spcifique.
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Regardons la rplication des


Hepadnavirus, fig 4 . 7 : eg. Virus de
lhpatite B (VHB ou HBV).
Le gnome viral est constitu dun ADN
circulaire dont le brin interne est
incomplet. La particule virale possde,
associe ADN, une ADN polymrase qui
va complter le brin interne de lADN
gnomique et gnrer un ADN bicatnaire
superenroul, fig 4 . 7a .
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LADN ainsi constitu va tre transcrit en


ARNm subgnomiques pour la synthse
protique et en un ARN (+) gnomique.
Cet ARN (+) sert de matrice une RT virale
qui synthtise un brin dADN (-); ce brin
dADN (-) circularis servira de matrice
lADN polymrase qui synthtise le brin
complmentaire (+) sur les du cercle (fig.
4.7b). On obtient ainsi lADN gnomique du
VHB.
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III- LES INTERACTIONS VIRUS-CELLULE


L'interaction la plus courante entre un virus et
une cellule est l'infection lytique productive: la
multiplication virale entrane la lyse ou la mort
de la cellule infecte qui libre ainsi les virus
noforms. En culture de cellules, l'infection se
traduit par l'apparition d'altration
morphologiques des cellules observables en
microscopie optique: c'est l'effet cytopathique
(ECP) . Cet ECP est assez caractristique du
virus (ou de la famille du virus) infectant pour
tre un lment du diagnostic virologique de
routine.
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Il existe cependant d'autre types d'interactions


entre un virus et une cellule:
- Au cours de l'infection abortive le virus
pntre dans la cellule mais sa multiplication
s'arrte prmaturment et n'aboutit pas la
production de virus.
- Lors de l'infection persistante, la cellule
infecte continue de vivre en hbergeant
un virus dont le niveau d'expression est
variable, allant de la latence (pas de
production virale) l'infection chronique
productive .
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- L'infection transformante rsulte le


plus souvent de l'intgration de la totalit ou
d'une partie du gnome viral dans le
gnome cellulaire. La cellule transforme
acquiert de nouvelles caractristiques
morphologiques et biologiques:
augmentation de la vitesse de croissance,
perte de l'inhibition de contact,
immortalisation. L'infection transformante
est la base du processus d'oncognse
virale.
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Le type d'interaction virus-cellule n'est pas


univoque: un mme virus peut selon la
nature de la cellule infecte donner lieu
une infection lytique, abortive, latente ou
transformante. In vivo, la rponse
immunitaire de l'hte peut galement
moduler le type d'infection.

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