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ELECTROFORESI

EQUIPOS ELECTROFORETICOS
INTEGRANTES
Paola Pichardo
Zaira Ramrez
Juan Carlos
Garca
Ricardo Ortiz
Francisco
Huazano

El equipo bsico consta de una fuente de


podery de una unidad electrofortica. Las
unidades electroforticas pueden ser
horizontales
o
verticales,
y
las
separaciones pueden hacerse en medios
lquidos o slidos (geles)

Electroforesis de
Geles de PLACA

Componentes:
1. Tampn
2. Gel (almidn, agarosa, poliacrilamida y mezcla de
poliacrilamida y agarosa)
3. Marco de plstico
4. Cubeta para el nodo

E. CONTINUA
Denominamos
electroforesis continua a
aquella en las que las
condiciones o el tipo de
gel no cambia.
Se
basa
en
el
desplazamiento continuo
de la muestra en una
direccin a causa del flujo
del
disolvente
y
en
direccin perpendicular
simultneamente por el
efecto
separador
del
campo elctrico.

COMPONENTES
Electrodos
Tampn
Papel
Cubierta

Electroforesis
discontinua

Preparacin del gel

un tampn de pH (comnmente Tris-HCl)


acrilamida y bisacrilamida
un agente iniciador de la polimerizacin, como
el persulfato amnico (genera radicales libres)
un agente catalizador de la polimerizacin,
como el TEMED (N,N,N,Ntetrametiletilenodiamina)
SDS

Se utiliza para mejorar la resolucin obteniendo


bandas mas compactas

En la parte superior, un gel acumulador o


concentrador (stacking gel), que tiene como
efecto concentrar la muestra en una banda
estrecha.
Ocupando la mayor parte de la placa, un gel
separador (resolving gel) en el que tiene lugar
la separacin de los componentes

Electroforesis de bajo
voltaje

Componentes

Electrodos
Tampn
Papel
Cubierta

Procedimiento

Se sumerge la tira de papel en la disolucin


tampn
Se coloca en la cubeta
Se encierra el papel con la cubierta para evitar la
evaporizacin.
Se aplica el voltaje deseado (20 V/cm)
Se saca el papel y la muestra puede ser tratada
por color, fluorescencia o distintos tipos de tincin.
Si el anlisis es cuantitativo se hace elucin del
colorante y determinarlo por espectrometra

Electroforesis de
alto voltaje.

Equipo.

Utiliza un gradiente de potencial de 200 V/cm.


Requiere un sistema de refrigeracin debido a
que la alta intensidad calienta el papel.

El sistema de refrigeracin puede ser:


Sumergir el papel en una gran cantidad de liquido
inmiscible y no conductor.
Aprisionando el papel entre papel o vidrio
enfriados.

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