INTRODUCCIN

El cido rico es un compuesto orgnico de carbono, nitrgeno, oxgeno e hidrgeno. Su

frmula qumica es C5H4N4O3.
Es un producto de desecho del metabolismo de nitrgeno en el cuerpo humano (el producto de
desecho principal es la urea), y se encuentra en la orina en pequeas cantidades. En algunos
animales, como aves, reptiles y muchos artrpodos, es el principal producto de desecho, y se
expulsa con las heces; los animales que excretan mayoritariamente cido rico se denominan
uricotlicos. El alto contenido de nitrgeno del cido rico es la razn por la que el guano es
tan valioso como fertilizante en la agricultura.
En la sangre humana, la concentracin de cido rico comprendida entre 2,5 a 6 para la mujer
y hasta 7,2 para el hombre mg/dl es considerada normal por la Asociacin Mdica Americana,
aunque se pueden encontrar niveles ms bajos en los vegetarianos.
La gota en el ser humano est asociada con niveles anormales de cido rico en el sistema.
La saturacin de cido rico en la sangre humana puede dar lugar a un tipo de clculos renales
(nefrolitiasis) cuando el cido cristaliza en el rin. Un porcentaje considerable de enfermos de
gota llegan a tener clculos renales de tipo rico.
El aumento de los niveles de cido rico en la sangre no slo puede estar relacionado con la
gota, sino que puede ser simplemente una hiperuricemia, que presenta algunos de los
sntomas anteriores o puede ser asintomtica. Sin embargo cuanto mayor es el aumento de
cido rico en sangre mayores son las posibilidades de padecer afecciones renales, artrticas,

etc.

OBJETIVOS:

Determinar la concentracin de cido rico en humanos.

Conocer el manejo del espectrofotmetro y del analizador semi- automatizado de bioqumica.
Conocer tcnicas de enzimologa.
DETERMINACIN DE CIDO RICO

FUNDAMENTO TERICO:
El cido rico es un metabolito de las purinas, cidos nucleicos y nucleoprotenas. Habitualmente la
concentracin de cido rico en suero vara de un individuo a otro de acuerdo a diversos factores tales
como: sexo, dieta, origen tnico, constitucin gentica, embarazo.
Niveles anormales de cido rico en suero son ndice de desorden en el metabolismo de las sustancias
que lo originan o de inadecuada eliminacin.
MATERIALES y EQUIPOS:

Tubo de ensayo
Guantes Quirrgicos
Tips
Micro pipetas
Gradillas
Marcadores de cera
Cubeta de cuarzo
Eppendorf
Espectrofotmetro
Reactivo Stndar
Bao Mara
Agua Bidestilada
Cronmetro
Centrfuga

FUNDAMENTOS DEL METODO

El esquema reaccional es el siguiente:
cido rico + 2H O + O

alantona + H O + CO

2H O + 4 AF + 3,5 DHS quinonimina roja

La cantidad de cido rico se determina midiendo la absorbancia de este pigmento.

UOD: uricasa
POD: peroxidasa
4-AF: 4-aminofenazona
3,5-DHS: sal sdica de 3,5-diclorohidroxibenceno sulfnico
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: solucin conteniendo buffer Good pH 7,8 y la sal sdica de 3,5
diclorohidroxibencenosulfnico (DHS).
B. Reactivo B: solucin conteniendo buffer Good pH 7,8, 4-aminofenazona (4-AF), uricasa (UOD),
peroxidasa (POD), y ferrocianuro de potasio.
S. Stndar: solucin de cido rico 10mg/dl.
Concentraciones finales
Buufer Good................................................................ 50 mmol/l
UOD............................................................................ 200 U/l
POD.............................................................................1000 U/l
4-AF............................................................................0,10mmol/l
Ferrocianuro de potasio............................................... 6 mmol/l
DHS............................................................................. 2,0mmol/l
REACTIVOS NO PROVISTOS:

Calibrador A plus por Wiener lab. Cuando se emplea la tcnica automtica.

INSTRUCCIONES PARA SU USO:
Standard: listo para usar.
Reactivos A y B: listos para usar. Estos pueden usarse separadoso como Reactivonico mezclando 4
partes deReactivo A + 1 parte de Reactivo B (ej. 4 ml Reactivo A + 1 mlReactivo B).
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro".
No ingerir. Evitar el contacto con la piel y los ojos. En caso dederrame o salpicaduras, lavar con
abundante agua la zonaafectada.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habitualesde trabajo en el laboratorio de anlisis
clnicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse deacuerdo a la normativa local vigente.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10C) hasta la fecha de vencimiento indicada en la
caja. Una vezabiertos, no deben permanecer destapados y fuera del refrigeradordurante lapsos
prolongados. Evitar contaminaciones.
Reactivo nico (premezclado): en refrigerador (2-10C) esestable 1 mes a partir de la fecha de su
preparacin.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOSREACTIVOS
La dificultad en obtener los valores de los controles dentro delrango asignado (ej. Standatrol S-E 2
niveles) es indicio deterioro de los Reactivos. En tal caso, desechar.
La turbidez es indicio de deterioro de los Reactivos.
Desechar cuando las lecturas del Blanco sean > 0,200 D.O.o las lecturas del Standard sean
anormalmente bajas.
MUESTRA:
Suero, plasma u orina
a) Recoleccin: se debe obtener suero o plasma de la manerausual. Separar el cogulo lo antes posible,
dentro delas dos horas posteriores a la recoleccin. Si la muestra esorina, utilizar preferentemente fresca.
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma,se recomienda nicamente el uso de
heparina como anticoagulantepara su obtencin.
c) Sustancias interferentes conocidas:
- Medicamentos: las sustancias fuertemente reductoras, talescomo el cido ascrbico (vitamina C), la
Buscapina (butilbromuro de hioscina), etc. en dosis elevadas interfieren. Portal razn debe suspenderse la
medicacin, siempre que seaposible, 24 horas antes de la toma de muestra.
- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 10 mg/dl(100 mg/l), triglicridos hasta 490 mg/dl (4,9
g/l), hemoglobinahasta 180 mg/dl y heparina hasta 100 U/ml.
Referirse a la bibliografa de Young para los efectos de lasdrogas en el presente mtodo.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
Las muestras deben ser preferentemente frescas. En caso deno procesarlas en el momento, las muestras
de suero oplasma, pueden conservarse 3 das a 20-25C, 7 das a 2-10C o 6 meses a -20C sin
agregado de conservantes.
Las muestras de orina pueden conservarse 4 das a 20-25C a pH > 8. No refrigerar ni congelar.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotmetro o fotocolormetro.
- Material volumtrico adecuado.
- Tubos o cubetas espectrofotomtricas de caras paralelas.
- Bao de agua a 37C.
- Reloj.
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotmetro o en fotocolormetrocon filtro verde (490-530 nm).
- Temperatura de reaccin: 37C o 18-25C
- Tiempo de reaccin: 5 minutos a 37C o 20 minutos a 18-25C
- Volumen de muestra: 20 ul
- Volumen final de la reaccin: 1,02 ml

Los volmenes de Muestra y de Reactivo pueden disminuirseo aumentarse proporcionalmente (Ej: 50 ul

de Muestra + 2,5 ml de Reactivo nico o 10 ul + 500 ul).
PROCEDIMIENTO
B
BLANCO
2,5ml
-------------------------------------------

REACTIVO
MUESTRA
STNDAR

S
STNDAR
2,5ml
---------------------50 l

D
DESCONOCIDO
2,5ml
50l
----------------------

Incubar 5 minutos en bao de agua a 37 C. Leer en espectrofotmetro a 505nm.

ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
El color de reaccin final es estable dos horas, por lo que laabsorbancia debe ser leda dentro de este
lapso.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
CALCULO DE RESULTADOS

La concentracin de protenas se medir mediante:

[ ]

Absorbencia del estndar = 0.228

Factor =

10 mg/dl
10mg/dl
=
= 43.8596mg/dl
Abs Standard
0.228

Absorbencia del desconocido = 0.105

Factor = 43.8596mg/dl

Finalmente:

[ ]

= 43.8596 x 0.105 = .

OBSERVACIN:

Observamos que luego de realizar todos los procesos anteriores la coloracin en los tubos de
ensayo Blanco, Desconocido y Stndar son transparente, rosa baja y rosa, respectivamente.

CONCLUSIN:
Se concluye que la persona tiene 4,61 mg/dl de cido rico en su interior.

WEBGRAFIA

http://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_%C3%BArico
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003476.htm
http://geosalud.com/Nutricion/dietaacidourico.htm
http://www.directoalpaladar.com/salud/acido-urico-que-es-y-como-prevenir-su-exceso-con-lascomidas
http://misremedios.com/dolencias/acido-urico/