UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO

UNIDADE ACADMICA DE SERRA TALHADA

LICENCIATURA EM QUMICA

EXTRAO E ANLISE DE PIGMENTOS DE PIMENTES POR

CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

Serra Talhada, 03 de julho de 2015.

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO

UNIDADE ACADMICA DE SERRA TALHADA
LICENCIATURA EM QUMICA

Autor:
Jos Cleuton da Silva Belarmino

EXTRAO E ANLISE DE PIGMENTOS DE PIMENTES POR

CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

Serra Talhada, 03 de julho de 2015.

Sumrio

Introduo
Procedimento experimental
Resultados e discurso
Concluso
Referncias Bibliogrficas........................................................................................

kkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkkk
kkkkkkkkkkkkkkk

Introduo
A cromatografia um mtodo fsico-qumico de separao. Ela est fundamentada
na migrao diferencial dos componentes de uma mistura, que ocorre devido a diferentes
interaes, entre duas fases imiscveis, a fase mvel e a fase estacionria. A grande variedade
de combinaes entre fases mveis e estacionrias a torna uma tcnica extremamente verstil
e de grande aplicao. (DEGANI, A. L., 1998)
O termo cromatografia foi primeiramente empregado em 1906 e sua utilizao
atribuda a um botnico russo ao descrever suas experincias na separao dos componentes
de extratos de folhas. Nesse estudo, a passagem de ter de petrleo (fase mvel) atravs de
uma coluna de vidro preenchida com carbonato de clcio (fase estacionria), qual se
adicionou o extrato, levou separao dos componentes em faixas coloridas. Este
provavelmente o motivo pelo qual a tcnica conhecida como cromatografia (chrom = cor e
graphie = escrita), podendo levar errnea ideia de que o processo seja dependente da cor.
(COLLINS, C.H.; BRAGA, G.L. e BONATO, 1993)
Apesar deste estudo e de outros anteriores, que tambm poderiam ser
considerados precursores do uso dessa tcnica, a cromatografia foi praticamente ignorada at
a dcada de 30, quando foi redescoberta. A partir da, diversos trabalhos na rea
possibilitaram seu aperfeioamento e, em conjunto com os avanos tecnolgicos, levaram-na
a um elevado grau de sofisticao, o qual resultou no seu grande potencial de aplicao em
muitas reas. (LOUGH, W.J. e WAINER, I.W., 1995)
A cromatografia envolve uma srie de processos de separao de misturas,
acontece pela passagem de uma mistura atravs de duas fases: uma estacionria (fixa) e uma
mvel. A interao dos componentes da mistura com estas duas fases influenciada por
diferentes foras intermoleculares, incluindo inica, bipolar, apolar, e especficos efeitos de
afinidade e solubilidade. (CHAVES, M.H., 1997)
A cromatografia pode ser utilizada para a identificao de compostos, por
comparao com padres previamente existentes, para a purificao de compostos,
separando-se as substncias indesejveis e para a separao dos componentes de uma mistura.
As diferentes formas de cromatografia podem ser classificadas considerando-se diversos
critrios: (ANDRADE, J.B.; PINHEIRO, H.L.C.; LOPES, W.A.; MARTINS, S.; AMORIM,
A.M.M. e BRANDO, A.M., 1995)
1. Classificao pela forma fsica do sistema cromatogrfico;
2. Classificao pela fase mvel empregada;
3. Classificao pela fase estacionria utilizada;
4. Classificao pelo modo de separao;
1. Classificao pela forma fsica do sistema cromatogrfico
Em relao forma fsica do sistema, a cromatografia pode ser subdividida em:
cromatografia em coluna (cromatografia lquida, gasosa e supercrtica) e cromatografia
planar (Centrfuga, em papel e camada delgada:

A cromatografia em papel (CP) uma tcnica de partio lquido

lquido. Baseia-se na diferena de solubilidade das substncias em questo entre duas
fases imiscveis, sendo geralmente a gua um dos lquidos. Este mtodo muito til
para a separao de compostos polares, sendo largamente usado em bioqumica.
A cromatografia em camada delgada (CCD) uma tcnica de adsoro
lquido slido. Nesse caso, a separao se d pela diferena de afinidade dos
componentes de uma mistura pela fase estacionria.
A cromatografia lquida clssica muito utilizada para isolamento de
produtos naturais e purificao de produtos de reaes qumicas. As fases
estacionrias mais utilizadas so slica e alumina, entretanto estes adsorventes podem
servir simplesmente como suporte para uma fase estacionria lquida. Fases
estacionrias slidas levam separao por adsoro e fases estacionrias lquidas por
partio.
A Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (CLAE) uma tcnica
analtica usada para separar e quantificar componentes numa mistura lquida. A
utilizao de suportes com partculas diminutas so os responsveis pela alta
eficincia desse mtodo de cromatografia. A fase mvel (lquida) movimenta-se
continuamente atravs da coluna contendo a FASE ESTACIONRIA (slido). O
soluto interage com as fases estacionria e mvel por adsoro, partio, excluso
molecular, troca inica. As separaes em CLAE podem se dar por adsoro
(separao slido-lquido), partio (separao lquido-lquido) ou ambos. O detector
mais utilizado para separaes por CLAE o detector de ultravioleta
(Absoro da luz na faixa UV visvel), sendo tambm empregados
detectores de fluorescncia, de ndice de refrao, e eletroqumicos, entre outros.
A Cromatografia gasosa uma tcnica de separao e anlise
de misturas por interao dos seus componentes entre uma fase estacionria e
uma fase mvel. O principal mecanismo de separao da cromatografia gasosa est
baseado na partio dos componentes de uma amostra entre a fase mvel gasosa e a
fase estacionria lquida. A utilizao de fases estacionrias slidas, as quais
levariam separao por adsoro, apresenta
poucas aplicaes.
A
cromatografia gasosa uma das tcnicas analticas mais utilizadas. Alm de
possuir um alto poder de resoluo, muito atrativa devido possibilidade de
deteco em escala de nano a picogramas. A diferena entre CG e CGAR est
na coluna (tubos longos de metais como ao ou cobre, vidro ou teflon). Colunas de
CGAR so maiores em comprimento, menores em dimetro, possuem a fase lquida
como um filme aplicado diretamente s paredes do tubo da coluna e so mais
eficientes.

2. Classificao pela fase mvel empregada

So de 3 tipos: a cromatografia gasosa, a cromatografia lquida e a

cromatografia supercrtica (CSC). A cromatografia lquida apresenta uma importante
subdiviso: a cromatografia lquida clssica (CLC) e a cromatografia lquida de alta
eficincia (CLAE). No caso de fases mveis gasosas, separaes podem ser obtidas
por cromatografia gasosa (CG) e por cromatografia gasosa de alta resoluo (CGAR).

3. Classificao pela fase estacionria utilizada

Quanto fase estacionria, distingue- se entre fases estacionrias slidas,
lquidas e quimicamente ligadas. No caso da fase estacionria ser constituda por um
lquido, este pode estar simplesmente adsorvido sobre um suporte slido ou
imobilizado sobre ele. Suportes modificados so considerados separadamente, como
fases quimicamente ligadas, por normalmente diferirem dos outros dois em seus
mecanismos de separao.

4. Classificao pelo modo de separao

Separaes cromatogrficas se devem adsoro, partio, troca inica, excluso ou
misturas desses mecanismos.

Objetivo
Extrair os componentes dos pigmentos de pimentes, e separar por ccd esses
componentes.

Procedimento experimental
Materiais e reagentes:
01 Pimento amarelo;
01 vidro relgio;
01 almofariz;
01 pistilo;
01 funil;
01 bquer
01 papel de filtro;
01 Suporte universal;
Etanol;
Ciclohexano;
Balana analtica;
02 pipetas graduadas;
01 pera de suco;

Mtodo:
Inicialmente, pesou-se 22,461 g do pimento picado em um vidro relgio, depois
colocou-se o pimento picado e 5 ml de etanol com auxilio de uma pipeta graduada em
um almofariz, feito isso macerou-se com auxilio de um pistilo. Depois de feita essa
etapa colocou-se 25 ml de ciclohexano sobre esse pimento e etanol macerado.
Depois de feito isso, esperou-se cerca de 30 minutos, e essa soluo foi filtrada com
auxilio de um papel de filtro e um funil no suporte universal, despejando essa soluo
filtrada sobre um bquer.

Resultados e discusso
A prtica no demonstrou resultados significativos visto que no houve tempo, e nem
disponibilizao do laboratrio, para ser feita cromatografia em camada delgada. O que
se pode falar que a extrao dos componentes do pimento foi realizada com sucesso,
obtendo uma cor amarelada. Esperava-se que a extrao dos pimentes com
ciclohexano/etanol fornece extratos contendo os principais pigmentos dos pimentes:
carotenos, criptoxantinas, capsantinas e capsorubina, algo que no pode ser confirmado.

Concluso

Diante deste experimento, pde-se concluir como pode ser extrado um pigmento de
cor do pimento, e como pode ser feita a analise desses pigmentos por cromatogrfica
em camada delgada.

Referncias

DEGANI, A. L. Um Breve Ensaio Sobre Cromatografia. SP, Qumica Nova na

Escola, numero 17. 1998.
COLLINS, C.H.; BRAGA, G.L. e BONATO, P.S. Introduo a mtodos
cromatogrficos. 5 ed. Campinas: Editora da Unicamp, 1993.
LOUGH, W.J. e WAINER, I.W. High Performance liquid chromatography:
fundamental principles and practice. Blackie Academic and Professional, 1995.
CHAVES, M.H.; Anlise de extratos de plantas por CCD: uma metodologia
aplicada disciplina Qumica Orgnica. Qumica Nova, v. 20, n. 5, p. 560-562,
1997.
ANDRADE, J.B.; PINHEIRO, H.L.C.; LOPES, W.A.; MARTINS, S.; AMORIM,
A.M.M. e BRANDO, A.M. Determinao de cafena em bebidas atravs de
cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE). Qumica Nova, v. 18, n. 4, p. 379381, 1995.
NETO, F.R.A.; CGAR em anlise de resduos. Qumica Nova, v. 18, n. 1, p.65-67,
1995